實驗動物與動物實驗的生物安全

實驗動物與動物實驗的生物安全第

一

節(jié)

生

物

安

全

概

述一

、生物技術(shù)、生物危害和生物安全生物技術(shù)：

一切利用有機(jī)體的操作技術(shù)都可稱為生物技術(shù)，其中，現(xiàn)代生物技術(shù)是以基因工程為核心，綜合利用現(xiàn)代生物學(xué)、化學(xué)和工程學(xué)的手段，直

接或間接地利用生物體、生命體系和生命活動過程生產(chǎn)有用物質(zhì)的一門高級應(yīng)

用技術(shù)科學(xué)。轉(zhuǎn)基因?qū)嶒瀯游锏挠墒乾F(xiàn)代生物技術(shù)在實驗動物領(lǐng)域的成功運

用。生物危害：是指包括病毒、細(xì)菌、真菌、原蟲、昆蟲和其他有害動植物等在內(nèi)的生物因素對人類及其生存環(huán)境的危害。生物因素廣泛存在于環(huán)境和各種生物體內(nèi)，具有

強(qiáng)大的變異能力以適應(yīng)環(huán)境，例如產(chǎn)生抗藥性的細(xì)菌、昆蟲和鼠類等。人類有意識地使

用現(xiàn)代生物技術(shù)進(jìn)行科研和生產(chǎn)時，也可能產(chǎn)生以目前的科技知識水平無法預(yù)見的后果，

從而危害人類健康、破壞生態(tài)平衡、污染自然環(huán)境等。生物安全：狹義的生物安全是指防范由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用(主要是轉(zhuǎn)基因技術(shù))所產(chǎn)生的負(fù)面影響，即對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人體健康可能構(gòu)成

的危險或潛在風(fēng)險。廣義的生物安全包括更廣泛的內(nèi)容，大致分為3方面：①人類的健康安全；②人類賴以生存的農(nóng)業(yè)生物的安全；③與人類生活息息相關(guān)的生物多樣性即環(huán)境生物安全。生物安全技術(shù)涉及生物資源保護(hù)、勞動保護(hù)、環(huán)境保護(hù)和醫(yī)藥食品等方面，主要解決生物技術(shù)從研究、開發(fā)、生產(chǎn)到實際應(yīng)用整個過程中的安全性問題，使危害性降低到可以接受的程度，以保障人類的健康和環(huán)境的安全。二、

生物安全的基本內(nèi)容(一)生物安全原理生物安全的原理包括生物安全分級和生物安全屏障兩方面。生物安全分級是對生物危害進(jìn)行正確評估的依據(jù)，生物安全屏障則是對生物危害進(jìn)行有效遏制的方法。生物安全的最終目的，就是通過

正確的評估和適當(dāng)?shù)姆婪?，在保障人類健康和環(huán)境安全的同時，推

動生物技術(shù)的發(fā)展，使之為人類創(chuàng)造最大利益。(二)病原微生物危害性的分級在應(yīng)用實驗動物開展生物醫(yī)學(xué)研究時，工作人員面對的主要生物危害是來自動物或?qū)嶒炇业母黝惒≡⑸铩０凑詹≡⑸飳θ嘶?/p>

動物致病性的強(qiáng)度進(jìn)行分類，既是生物安全評估的依據(jù)，也是制定生

物危害防制對策的根據(jù)。世界衛(wèi)生組織(WHO)對感染性微生物的危害程度分級對個人和社會無危害性或危害性很低、不太可能對人或動物致病的微生物。對個人有中度危害性，對社會危害性低，其病原體可使人或動物致病，但對實驗室工作者、社會、家畜或環(huán)境不太會造成嚴(yán)重危害。在實驗室內(nèi)接觸雖有發(fā)生嚴(yán)重感

染的可能，但有有效的治療和預(yù)防措施，而且傳播的可能性有限。對個人有高度危害性，對社會有低度危害性，其病原體通常使人或動物罹患嚴(yán)重疾病，但一般不致傳染，有有效的治療和預(yù)防措施。對個人和社會均有高度危害性，其病原體通常引起人或動物的嚴(yán)重疾病，且易于直接或間接傳播給其他個體，通常無有效的治療和預(yù)防措施。第

1級第

2級第3級第4級表10

-

1

不同危害程度感染性微生物的分級危害性級別危害程度實驗室感染機(jī)會多，感染后發(fā)病的可能性大，癥狀重并可危及生命，缺乏有效的預(yù)防措施，以及傳染性強(qiáng)、對人群危害大的烈性傳染病，包括國內(nèi)未發(fā)現(xiàn)的或

雖已發(fā)現(xiàn)但無有效防治的傳染病病原體。實驗室感染機(jī)會多，感染后癥狀較重可危及生命，發(fā)病后不易治療，對人群危害較大的傳染病的病原體。僅具一般危害性，能引起實驗室感染機(jī)會較少，在一般微生物學(xué)實驗室中采用一般措施能控制感染和傳播，或有對之有效的免疫預(yù)防的病原體?？捎糜谥圃焐镏破返母鞣N減毒、弱毒及不屬于上述第1、第2、第3類的各種低致病性微生物。第2類病原體第3類病原體第4類病原體表10-2

我國對各類病原體的危害性分級注：“

√

”表示必須排除的人獸共患傳染病。第1類病原體危害性級別危害程度(三)生物安全等級BSL-1

:非已知會導(dǎo)致疾病的物質(zhì)。BSL-2

:

與人類疾病相關(guān)的物質(zhì)。BSL-3

:

與人類疾病相關(guān)并且與氣溶膠傳播潛力有關(guān)的本地的外來的物質(zhì)。BSL-4:危險的/外來的具有生命威脅特征的物質(zhì)。(四)生物安全實驗室的分級一級：對人體和環(huán)境危害較低，不會引發(fā)健康成人疾病。二級：對人體和環(huán)境有中等危害或具有潛在危險的致病因子。三級：主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級：對人體有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明的微生物。尚無預(yù)防治療措施。(五)為何要講生物安全防護(hù)不注意安全和容易導(dǎo)致意外事故針刺傷(穿刺)碎玻璃刺傷(不穿鞋，刺傷手)載玻片割傷(顯微鏡下計數(shù)細(xì)胞)濺入口腔，濺入眼睛(分裝/凍存樣品)離心管破裂，滑倒跌傷，酒精燈損壞負(fù)壓泵接管損傷，過濾分裝毒種過程(六)生物安全實驗室的安全防護(hù)：1、

對實驗者2、

對他人3、

對周圍環(huán)境4、

對樣品(七)發(fā)生事故后可以造成嚴(yán)重危害1、

安全事故→受傷者感染→發(fā)病→死亡2、受傷人員的生活及工作環(huán)境壓力3、工作隊伍的穩(wěn)定性降低三、在實驗動物和動物實驗研究中引入生物安全的必要性1、動物實驗動物是醫(yī)學(xué)生物學(xué)實驗研究的第1要素。使用微生物學(xué)質(zhì)量不合格的動物，常常會引入各類人獸共患病和動物烈性傳染病的病原體，從

而在繁育和實驗中通過各種途徑感染工作人員和其他動物。在使用野生動物的研究中，

一些野生動物攜帶對其自身不致病，但對人卻有致命危

害的病原微生物，如來源于靈長類和嚙齒類野生動物的埃博拉(Ebola)病

毒，由于人類對這些微生物所知甚少，故而缺乏有效的防范手段，容易

導(dǎo)致嚴(yán)重的感染事故。2、

設(shè)施設(shè)備設(shè)施和設(shè)備是醫(yī)學(xué)生物學(xué)實驗研究的第2要素。沒有與實驗動物生產(chǎn)和實驗研究的要求相適應(yīng)的設(shè)施，污染就會擴(kuò)散。對設(shè)施設(shè)備的使用不當(dāng)、維護(hù)和檢查不力等也是導(dǎo)致生物危害因素泄漏的重要原因。3、

操作由不當(dāng)操作引發(fā)的生物危害具有一定隱蔽性，其后果可能在相當(dāng)長一段時間后才顯露出來，故此難以追查當(dāng)時究竟是誰、什么樣的操作引發(fā)了事故。

在實際工作中，由于危害因素的蓄積和表達(dá)需要一定時間，因此與短期實驗

研究(幾天或幾周)相比，長期的實驗(數(shù)月以上)或連續(xù)的動物繁殖生產(chǎn)過程中這類問題較多發(fā)生。4、

基因安全隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，在基因水平開展對實驗動物及動物實驗的研究方興未艾，轉(zhuǎn)基因和克隆動物的相繼問世使“基因安全”隨之成為新

的生物安全問題，由于人類對基因工程技術(shù)的使用與控制尚不成熟，對基

因工程產(chǎn)物的認(rèn)識受到現(xiàn)有科學(xué)技術(shù)水平的限制，這些新技術(shù)、新物種的

潛在危害，陛仍需經(jīng)過一定的時間才能被人們意識到。如若對這些新技術(shù)、

新物種控制不當(dāng)，極可能造成對現(xiàn)有生態(tài)和遺傳平衡的破壞，進(jìn)而給人類

的生存帶來無法估計的嚴(yán)重影響。所以，在進(jìn)行實驗動物及動物實驗研究，尤其是運用各項新技術(shù)、新方法時，必須充分認(rèn)識其中可能存在的危害性，牢固樹立生物安全的概念，

采取切實有效的措施進(jìn)行防范，從而確保研究的順利開展和保護(hù)人類、物

種及環(huán)境的安全。第二節(jié)

實驗動物和動物實驗研究中的生物危害一、對實驗動物工作者個人的危害實驗動物和動物實驗研究中對個人的生物危害主要表現(xiàn)為各種人獸共患病及實驗性病原體的感染和傳播。由于飼喂、換籠及各類實驗操作

需要與動物密切接觸，從事動物實驗和動物飼育的人員成為這類危害的

首要受害者，其中，動物實驗人員因為有更多機(jī)會接觸實驗狀態(tài)下的非

健康動物，受到感染的概率高于動物飼育人員，感染的嚴(yán)重程度則受到

病原體的量、對人體的致病性和感染途徑三個方面因素的影響。(一)人獸共患病(二)實驗性病原體(三)引起感染的途徑1、

經(jīng)呼吸道感染2、

經(jīng)口感染3、

創(chuàng)傷及黏膜接觸感染4、

昆蟲媒介二、對實驗動物的危害實驗動物感染人獸共患病或動物傳染病后，可引起非特異性死亡，或干擾實驗結(jié)果，動物烈性傳染病還會導(dǎo)致大批動物死亡，造成嚴(yán)重后果。實驗動物繁育

及動物實驗設(shè)施設(shè)備的不適當(dāng)和管理不善、防范不力，常導(dǎo)致實驗動物受到外界

環(huán)境中病原體的污染，如開放系統(tǒng)中飼養(yǎng)的動物常常因諸如野貓、野鼠及昆蟲等

的進(jìn)入而遭外來病原感染或發(fā)生交叉感染，引起疾病和死亡。這樣的情況在管理

不善的屏障系統(tǒng)中同樣會發(fā)生。對不同實驗的動物管理混亂，隔離不當(dāng)，或感染

動物逃逸等也會導(dǎo)致動物間的交叉感染。在諸多因素中，人是實驗室污染的最大來源，人的皮膚、黏膜等處經(jīng)常存在很多微生物。此外，患皮膚病或呼吸道疾病的工作人員在操作時，也會將病原體

傳染給實驗動物。其他因素如飼育密度過高、環(huán)境控制不達(dá)標(biāo)、實驗操作等也會

直接或間接引發(fā)生物危害。三、對實驗動物設(shè)施周邊環(huán)境的危害實驗動物設(shè)施內(nèi)的危害因素向外擴(kuò)散，就會引起設(shè)施周邊環(huán)境的污染，甚至導(dǎo)致這些區(qū)域的生物災(zāi)害，引發(fā)社會安全問題。對環(huán)境的危害多來自動物飼育和實驗中的“三廢”,即污染的空氣、動物尸體、污染墊料、注射器、手套、污水等。除了對“三廢”的處理不

當(dāng)外，有些擴(kuò)散是人為的，如將混有動物排泄物的墊料作為肥料用于生產(chǎn)農(nóng)作物，或用動物尸體飼喂寵物。此外，管理疏漏導(dǎo)致實驗動物的逃逸，或?qū)嶒瀯游镂唇?jīng)完全處死即棄置，待其蘇醒后逃逸，亦可將實驗室內(nèi)的病原或有害物質(zhì)散布到外界。四、克隆及轉(zhuǎn)基因動物的潛在生物危害克隆動物和轉(zhuǎn)基因動物在生物醫(yī)學(xué)研究方面具有廣闊的應(yīng)用前景，但同時也存在許多安全性問題。例如轉(zhuǎn)基因動物的器官移植可能增加人獸共患病的傳播機(jī)會，具有某些優(yōu)勢性狀的轉(zhuǎn)基因動物釋放到自然界，會對生態(tài)平衡及物種多樣性造成壓力等。轉(zhuǎn)基因動物在生理、行為、代謝以及對理化和生物因子的耐受力等方面的新特性，以及轉(zhuǎn)基因動物所應(yīng)用的基因重組技術(shù)，都可能產(chǎn)生一些超過人類防范能力的危害因素，對這些因素的增殖一旦失控，就可能帶來嚴(yán)重后果。第三節(jié)

實驗動物與動物實驗中生物危害的防制一

、防制的一般原則生物危害的防制，須依據(jù)研究工作所涉及生物安全的等級，設(shè)定不同的生物安全水平，某一生物安全水平由生物技術(shù)機(jī)構(gòu)的實踐和技術(shù)、安全設(shè)備

以及所擁有的設(shè)施幾方面的要求共同組成，以適應(yīng)對特定生物進(jìn)行安全操作和處理。世界衛(wèi)生組織(WHO)對實驗室的生物安全等級劃分以及不同級別實驗室的一般要求如表10-4所示。危害級別生物安全級別實驗室類型(舉例)實驗室操作安全設(shè)備第

1級第

2

級第

3

級第

4

級一

般

—

—

生

物

安

全

1級一

般

—

—

生

物

安

全

2級防播散——生物安全3

級最高級防播散——生物

安

全

4

級一

般

教

學(xué)

用

實

驗室初級衛(wèi)生服務(wù)、

初

級醫(yī)院水平，診斷、教學(xué)及公共衛(wèi)

生實驗室特殊診斷實驗室有危害性病原體的實驗室GMT*G

M

T

,

保

護(hù)

性

衣

著，生物危害

標(biāo)志同第2級，另加特殊衣著，控

制進(jìn)入，定向

氣流同第3級，另加入口氣鎖，淋

浴后退出，污

物特殊處理無特殊要求，開放式工

作臺開放式工作臺，另加生

物安全柜(BSC**)以防止氣溶膠所有工作均在生物安

全柜和(或)其他主

要

防播散

設(shè)

備

內(nèi)

進(jìn)行Ⅲ級生物安全柜或正壓服，雙門高壓滅菌

器，空氣過濾注：*:微生物學(xué)操作規(guī)程(good

microbiological

technique);**:生物安全柜(biologicalsafetycabinet)。表

1

0

-

4

生

物

危

害

級

別

與

安

全

級

別

、

實

驗

室

要

求

和

設(shè)

備

的

關(guān)

系二、加強(qiáng)對人的生物安全教育作為科學(xué)研究活動的主體，從業(yè)人員的生物安全意識直接影響生物安全管理目標(biāo)的實現(xiàn)，表現(xiàn)在對各項操作及管理規(guī)程的遵守、對動物及各類設(shè)施設(shè)備

的正確選擇和使用、對各類隱患的防范等方面其中，過分信任并單純依賴安全

設(shè)施往往會淡化人的安全意識，使操作人員忽視安全操作規(guī)范，也是導(dǎo)致意外

傷害事故的一大原因。三、使用標(biāo)準(zhǔn)化合格的實驗動物在實驗動物飼育及實驗的過程中，動物本身所攜帶的人獸共患病及動物傳染病的病原體可通過各種途徑在動物飼養(yǎng)室內(nèi)播散，危害操作人員和動物的安

全。因此，推廣實驗動物的標(biāo)準(zhǔn)化，杜絕帶有各類生物安全問題的“非標(biāo)”動

物進(jìn)入實驗室，是對生物危害源頭的遏制。四、

與研究工作相適宜的動物設(shè)施和管理(一)實驗動物繁育生產(chǎn)及動物實驗環(huán)境根據(jù)環(huán)境條件的不同，可將實驗動物繁育生產(chǎn)和動物實驗設(shè)施劃分為三大類：普通環(huán)境、屏障環(huán)境和隔離環(huán)境。1.普通環(huán)境

符合動物居住的基本要求，不能完全控制傳染因子，適用于飼育教學(xué)等用途的普通級實驗動物。2.屏障環(huán)境

適用于飼育清潔級實驗動物及無特定病原體(SPP)實驗動物，該環(huán)境嚴(yán)格控制人員、物品和環(huán)境空氣的進(jìn)出。3.

隔離環(huán)境

采用無菌隔離裝置以保存無菌或無外來污染動物。隔離裝置內(nèi)的空氣、飼料、水、墊料和設(shè)備均為無菌，動物和物料的動態(tài)傳遞須經(jīng)特殊的傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)既能保證與環(huán)境的絕對隔離，又能滿足轉(zhuǎn)運動物時保持內(nèi)

環(huán)境一致。該設(shè)施適用于飼育無特定病原體(specific

pathogen

free,SPF)、悉生(gnotobiotic,GN)

及無菌(germ

free,GF)

實驗動物。(二)不同生物安全等級的動物實驗室設(shè)置及管理根據(jù)研究涉及的病原微生物的分類等級，將動物實驗室劃分為與之對應(yīng)的4等，即P1

、P2

、P3

、P4實驗室，分別對應(yīng)我國病原微生物危險度第4、3、2、1級。項

目

具體要求管理規(guī)程

1.在本設(shè)施的入口處或其他適當(dāng)?shù)胤綉?yīng)張貼國際通用的生物危害示警標(biāo)記(見圖10-1)。2.只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可入內(nèi)。3.除供實驗用的動物外，禁止其他動物進(jìn)入。4.在實驗室內(nèi)發(fā)生任何創(chuàng)傷(包括微小傷口在內(nèi))都應(yīng)及時報告和記錄。5.如發(fā)生感染性物品的明顯濺潑或外溢事故時，應(yīng)立即向?qū)嶒炇抑魅螆蟾?，以便及時采取適當(dāng)措施并記錄在案。6.工作人員必須戴工作帽、口罩和手套。7.其他同安全度1。安全設(shè)備

1.動物的飼養(yǎng)籠可加用空氣過濾罩(filtercap)。2.對在接種或解剖等工作中可能產(chǎn)生氣溶膠者應(yīng)采用I級或Ⅱ級生物安全柜(BSC)或在負(fù)壓隔離器內(nèi)進(jìn)行。3.必須在本設(shè)施內(nèi)或鄰近設(shè)施設(shè)有高壓蒸氣滅菌裝置。動物飼養(yǎng)室結(jié)構(gòu)1.如采用機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，則必須保持室內(nèi)負(fù)壓，并采用全新風(fēng)。2.其他同安全度1。表10-6安全度2的動物實驗設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范及設(shè)施設(shè)備要求項

目具

體

要

求管理規(guī)程1.進(jìn)入的人員必須嚴(yán)格控制。2.設(shè)施內(nèi)應(yīng)穿一次性防護(hù)工作服，離開時脫下，在廢棄前應(yīng)進(jìn)行高壓蒸氣滅菌。3.動物飼養(yǎng)工作原則上由實驗人員承擔(dān)，4.盡量選用無塵墊料。5.應(yīng)考慮到對工作人員采取有關(guān)的免疫預(yù)防措施。6

.

其他同安全度2。安全設(shè)備1.感染的動物應(yīng)飼養(yǎng)在負(fù)壓隔離器內(nèi)的籠中，或于室內(nèi)在其籠架后方設(shè)有通風(fēng)系統(tǒng)的抽氣口。2.動物實驗可在I級或Ⅱ級生物安全柜(BSC)或隔離器內(nèi)進(jìn)行。3

.

其他同安全度2。動物飼養(yǎng)

室結(jié)構(gòu)1.感染實驗區(qū)的入口應(yīng)設(shè)有兩扇門的緩沖間，使之成為一個氣閥(airlock),緩沖間內(nèi)應(yīng)配備洗手和淋浴的設(shè)備。2.應(yīng)有機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，以保持室內(nèi)負(fù)壓、全新風(fēng)并有一定的空氣流向(自危險性較低的區(qū)域向潛在有高危險性區(qū)域流動),排出的氣體必須經(jīng)高效空氣過濾(HEPA),在設(shè)計通風(fēng)系統(tǒng)時應(yīng)考慮如何防止室內(nèi)發(fā)生正壓的意外事故，并準(zhǔn)備好發(fā)生突然停電時的對策。3

.

其他同安全度2。表10-7

安全度3的動物實驗設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范及設(shè)施設(shè)備要求管理規(guī)程1.進(jìn)人的人員必須嚴(yán)格控制，只有經(jīng)本部門負(fù)責(zé)人指定的人員方準(zhǔn)予進(jìn)入。

2.在本設(shè)施內(nèi)不可單獨一人進(jìn)行工作，必須執(zhí)行兩人一起工作的規(guī)定。3.工作人員應(yīng)受過微生物學(xué)家最高水平的訓(xùn)練，并熟知所從事工作的危險性及其預(yù)防措施。4.工作人員進(jìn)入本設(shè)施時應(yīng)脫下自己所穿的衣服，穿上特制的一次性防護(hù)工作服。工作完畢后，應(yīng)將防護(hù)工作服脫下，放入一專門容器以便進(jìn)行高壓蒸氣滅菌，然后廢棄。

人員必須經(jīng)淋浴后方可離開。5

其他同安全度3安全設(shè)備1.必須配備雙扉高壓蒸氣滅菌器，其清潔端應(yīng)在控制區(qū)之外。2.凡不能用高壓蒸汽滅菌的物品，須經(jīng)滅菌液浸泡槽或蒸熏滅菌傳遞柜進(jìn)行滅菌。

3.所有動物必須飼養(yǎng)在負(fù)壓隔離器內(nèi)。4.對動物的所有操作必須在Ⅲ級生物安全柜(BSC)內(nèi)進(jìn)行。5.必須經(jīng)常了解工作人員的健康狀況，并采取適當(dāng)免疫措施。6.其他同安全度3。動物飼養(yǎng)室結(jié)構(gòu)1.如果本設(shè)施不是屬于最高級防播散-生物安全水平4級(maximumcontainment-biosafe-tylevel4)的實驗室的一部分，則必須是隔離的獨立建筑。2.其他同安全度3。表10-8

安全度4的動物實驗設(shè)施標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范及設(shè)施設(shè)備要求具

體

要

求項

目五、具備規(guī)范、嫻熟的操作技術(shù)(一)與動物接觸的有關(guān)技術(shù)1、避免操作中氣溶膠的產(chǎn)生

氣溶膠是以膠體狀態(tài)懸浮在大氣中的液體或固體微粒，其直徑一般為1-5pm,

是最適宜引起感染的尺寸。因此在飼育、給藥等工作中，必須注意輕柔地抓取、固定動物，保持室內(nèi)安靜，避免突發(fā)的聲響和動作驚擾動物，禁止在飼養(yǎng)室內(nèi)清

理更換下的籠具和墊料等。2、

避免損傷不適當(dāng)?shù)牟蹲綐O易導(dǎo)致被動物咬傷、抓傷，動物實驗特別是手術(shù)過程中，操作人員可能因動物的掙扎、操作技術(shù)不熟練、畏懼等因素被針尖、刀、剪

等器械所傷，外傷往往成為進(jìn)一步感染的原因。因此操作人員必須熟練掌握

實驗動物的捕捉固定方法和各類常用的實驗技術(shù)，使用袖套、手套等個人防護(hù)用品，并借助合適的捕捉及固定設(shè)備和其他手段以防范此類危害的發(fā)生。3、動物剖檢中的注意事項剖檢動物時，即便不是感染性的實驗，也無確定動物血液、體液、臟器中有無繁殖的病原體，因此嚴(yán)禁在動物飼養(yǎng)室內(nèi)無任何防止擴(kuò)散措施的情形下進(jìn)行剖檢，而應(yīng)到專門的實驗室或在專門的設(shè)施內(nèi)進(jìn)行。剖檢時，應(yīng)將動物固定板放在盤子中，盡量減少對工作面和作業(yè)空間的污染機(jī)會。剖檢前可將動物放人消毒液中浸泡一下或用乙醇擦拭動物體表，以防止動物體毛飛揚，同時可作為無菌取材前的消毒。剖檢后應(yīng)及時清理并消毒操作區(qū)域，各種器械、材料和廢棄物按規(guī)定處理或經(jīng)無害化后棄置。(二)其他技術(shù)與規(guī)范1、

對動物的管理熟知動物的正常外觀及行為，對動物出現(xiàn)的異常體征能及時發(fā)現(xiàn)并采取措施，從而爭取控制危害的時機(jī)；經(jīng)常檢查關(guān)養(yǎng)動物的籠器具及設(shè)施，防止動物逃逸或設(shè)施對動物造成傷害；對出逃在外的動物，即使能夠確認(rèn)其來源，

一般也不應(yīng)再放回原處，而應(yīng)視實際晴況作隔離觀察或處死丟棄等，尤其嚴(yán)禁任意放人外觀相同的動物中繼

續(xù)飼養(yǎng)和實驗；實驗中須避免搞錯動物的分組，因此要養(yǎng)成做各類標(biāo)志的良好科研習(xí)慣；防止將外觀相似的不同品系動物混淆等。2.

遵循《微生物學(xué)實驗技術(shù)規(guī)范》

(GMT)該規(guī)范包括在實踐中證明行之有效的生物安全技術(shù)，涉及實驗室標(biāo)本安全處置技術(shù)、防止感染性材料擴(kuò)散技術(shù)等多方面。進(jìn)行實驗研

究前應(yīng)接受有關(guān)的技術(shù)培訓(xùn)以熟練掌握這些技術(shù)。六、

良好的衛(wèi)生習(xí)慣及正確的個人防護(hù)工作人員每次接觸動物或生物組織等以及結(jié)束飼養(yǎng)觀察離開前，必須徹底洗手。工作中必須正確穿戴規(guī)定的服裝，戴好口罩、手套、帽子等，諸如戴

口罩只掩住嘴，而把鼻子露在外的錯誤穿著方法必須糾正。不用手觸摸面部、

眼、口、鼻等部位，禁止在工作區(qū)進(jìn)食、飲水、吸煙或存放食物。離開工作區(qū)

域應(yīng)脫下防護(hù)服，工作服應(yīng)定期清洗消毒，

一次性防護(hù)用品不得重復(fù)使用。七、正確處理生物危害“三廢”1、

廢氣

動物飼養(yǎng)室、實驗室排風(fēng)等。2、

廢液

動物糞尿、籠具洗滌污水、傳染性材料廢水，重組DNA實驗室廢棄的含有生物危害的廢水等。3、

固體物料

各種實驗操作器材以及動物及其局部組織、污染墊料等。處理的方法有運用化學(xué)藥劑的化學(xué)處理、使用過濾、高溫滅菌焚燒等手段的物理處理以及生物處理。八、實驗室安全防護(hù)措施：◆1級屏障：個人防護(hù)，室內(nèi)防護(hù)裝置▲2級屏障：建筑▲嚴(yán)格的實驗室管理制度▲標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)一、個人防護(hù)安全意識，個人保?。喝菀资韬?，嫌麻煩等了解工作性質(zhì)及病原特點：不同病原體熟悉實驗室及儀器設(shè)備：嚴(yán)格執(zhí)行SOP防護(hù)用品：防護(hù)服、手套、口罩、防護(hù)鏡、洗眼器等良好的操作習(xí)慣：嚴(yán)格執(zhí)行各項制度：避免形式主義1、生物安全柜主要用于保護(hù)實驗工作人員，避免吸入工作中可能產(chǎn)生的浮塵。原則是空氣被抽離工作區(qū)，然后通過一臺高效顆?？諝?HEPA)濾器排入大氣。CO?

培養(yǎng)箱使用注意事項(1)組織培養(yǎng)皿需放在塑料盤內(nèi)進(jìn)行孵育。(2)培養(yǎng)瓶和碟不能疊放。(3)定期清潔和消毒。(4)防止漏氣

(CO2)。(5)專人管理，每天檢查CO2,

管道，溫度等。(6)避免在儀器上堆積物品。離心機(jī)：最易導(dǎo)致污染的設(shè)備!(1)在離心感染性材料時要把其放在密封的離心桶內(nèi)。(2)離心桶只能在EPC內(nèi)打開。(3)離心桶在使用后要消毒其表面。(4)若離心桶需要平衡，應(yīng)在EPC中進(jìn)行。(5)如果懷疑離心機(jī)內(nèi)有破損情況發(fā)生，需要等轉(zhuǎn)頭停止30分鐘后再進(jìn)行消毒。(6)避免使用質(zhì)量差的離心管。(7)專人定期維修、保養(yǎng)、檢定。(8)儀器放置位置要平，可承重，儀器上避免放置物品。液氮罐(1)要小心避免直接接觸液氮，當(dāng)把樣品管移出液氮罐時要小心其會爆裂。(2)選用優(yōu)質(zhì)凍存管。禁止用玻璃管保存樣品。(3)存取樣品時需注意防護(hù)。應(yīng)戴防護(hù)鏡，手套，口罩，穿防護(hù)服。高壓滅菌器(1)定期檢查排水桶。(2)注意防護(hù)，防止?fàn)C傷，待溫度降下后再開蓋。(3)一次高壓物不宜過多。(4)禁止器皿蓋蓋高壓。顯微鏡(1)注意安全使用載玻片(2)按正確方向緩慢調(diào)解鏡頭(3)一次觀察樣品不宜過多(4)注意勞逸結(jié)合冰箱(1)安全存放樣品(2)專人管理制度(3)定期檢查(4)相對分區(qū)生物安全手冊1、

生物安全委員會名單、職責(zé)、人員分工及工作機(jī)制2、

微生物危害評估：針對研究的病原體的危害3、

實驗室管理制度4、

毒種及樣品管理制度二、實驗室管理程序及制度1、

生物安全實驗室管理程序成立生物安全委員會編寫各種標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(S2、

實驗室管理制度編寫生物安全手冊O(shè)

P)

人員培訓(xùn)5、實驗室使用和操作規(guī)程6、實驗微生物操作規(guī)程7、實驗室事故處理及報告規(guī)程8、工作人員(含本人簽字)實驗室準(zhǔn)入登記表9、實驗室使用登記表10、

實驗室內(nèi)儀器設(shè)備清單及設(shè)備安全注意事項11、

儀器設(shè)備使用登記表