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④.37①.與單鏈結(jié)合,保持單鏈穩(wěn)定、介導(dǎo)單鏈入侵(2分)②.磷酸二酯(4)①.5%CO2和95%空氣②.抗原-抗體雜交③.能增殖,較長(zhǎng)時(shí)間刺激免疫系統(tǒng)【解析】【分析】過程①為攜帶有CP530R和F317L基因的質(zhì)粒經(jīng)PCR獲得帶有重組酶識(shí)別序列的目的基因,②為同源重組后形成病毒載體2,病毒載體2上的基因位點(diǎn)保留有CmR,但沒有AmpR、CcdB?!拘?詳解】引物F除需與CMV啟動(dòng)子序列3′端部分配對(duì)外,還需在其5′端加上的TK1序列以便后面的同源重組。PCR最后72℃3min的目的是使子鏈充分延伸,補(bǔ)完合成不完全的片段,保證產(chǎn)物的完整性。【小問2詳解】因大腸桿菌中的pSC101是一種溫度敏感質(zhì)粒(在30°C下能復(fù)制、在37C下不能復(fù)制),其上的recET基因和ccdA基因的啟動(dòng)子分別受鼠李糖和阿拉伯糖誘導(dǎo),故大腸桿菌先接種在含鼠李糖和阿拉伯糖的培養(yǎng)基中,在30°C下培養(yǎng)一段時(shí)間,加入目的基因并電激;同源重組后的質(zhì)粒上還保留有CmR,但沒有AmpR、CcdB了,故一段時(shí)間后將大腸桿菌接種在含氯霉素的培養(yǎng)基中,在37℃下培養(yǎng)以清除pSC101質(zhì)粒,獲得含病毒載體2的大腸桿菌?!拘?詳解】據(jù)圖可知,重組蛋白R(shí)ecT的功能有與單鏈結(jié)合,保持單鏈穩(wěn)定、介導(dǎo)單鏈入侵,重組過程涉及磷酸二酯鍵的水解和形成?!拘?詳解】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在含5%CO2和95%空氣的氣體條件的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。收獲細(xì)胞及上清液,利用抗原-抗體雜交技術(shù)可鑒定重組病毒表面的蛋白質(zhì)。重組病
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