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文檔簡介

④.37①.與單鏈結(jié)合，保持單鏈穩(wěn)定、介導(dǎo)單鏈入侵(2分)②.磷酸二酯(4)①.5%CO2和95%空氣②.抗原-抗體雜交③.能增殖，較長時(shí)間刺激免疫系統(tǒng)【解析】【分析】過程①為攜帶有CP530R和F317L基因的質(zhì)粒經(jīng)PCR獲得帶有重組酶識別序列的目的基因，②為同源重組后形成病毒載體2，病毒載體2上的基因位點(diǎn)保留有CmR，但沒有AmpR、CcdB。【小問1詳解】引物F除需與CMV啟動(dòng)子序列3′端部分配對外，還需在其5′端加上的TK1序列以便后面的同源重組。PCR最后72℃3min的目的是使子鏈充分延伸，補(bǔ)完合成不完全的片段，保證產(chǎn)物的完整性?！拘?詳解】因大腸桿菌中的pSC101是一種溫度敏感質(zhì)粒(在30°C下能復(fù)制、在37C下不能復(fù)制)，其上的recET基因和ccdA基因的啟動(dòng)子分別受鼠李糖和阿拉伯糖誘導(dǎo)，故大腸桿菌先接種在含鼠李糖和阿拉伯糖的培養(yǎng)基中，在30°C下培養(yǎng)一段時(shí)間，加入目的基因并電激；同源重組后的質(zhì)粒上還保留有CmR，但沒有AmpR、CcdB了，故一段時(shí)間后將大腸桿菌接種在含氯霉素的培養(yǎng)基中，在37℃下培養(yǎng)以清除pSC101質(zhì)粒，獲得含病毒載體2的大腸桿菌?！拘?詳解】據(jù)圖可知，重組蛋白RecT的功能有與單鏈結(jié)合，保持單鏈穩(wěn)定、介導(dǎo)單鏈入侵，重組過程涉及磷酸二酯鍵的水解和形成。【小問4詳解】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在含5%CO2和95%空氣的氣體條件的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。收獲細(xì)胞及上清液，利用抗原-抗體雜交技術(shù)可鑒定重組病毒表面的蛋白質(zhì)。重組病

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