江蘇省揚(yáng)州市廣陵區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考試生物試題（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省揚(yáng)州市廣陵區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期4月期中考試試題試卷滿分:100分，考試時(shí)間:75分鐘注意事項(xiàng):1.作答第1卷前，請(qǐng)考生務(wù)必將自己的姓名、考試證號(hào)等寫(xiě)在答題卡上并貼上條形碼。2.將選擇題〖答案〗填寫(xiě)在答題卡的指定位置上(使用機(jī)讀卡的用2B鉛筆在機(jī)讀卡上填涂)，非選擇題一律在答題卡上作答，在試卷上答題無(wú)效。3.考試結(jié)束后，請(qǐng)將機(jī)讀卡和答題卡交監(jiān)考人員。第Ⅰ卷（選擇題共40分）一、單項(xiàng)選擇題:本大題共14小題，每小題2分，共28分。在每題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題意的。(請(qǐng)將所有選擇題〖答案〗填到答題卡的指定位置中。)1.從傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)到發(fā)酵工程，經(jīng)歷了漫長(zhǎng)的歷史過(guò)程。下列關(guān)于兩者的比較，正確的是（）A.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)大多為混合菌種，發(fā)酵工程大多為單一菌種B.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)不需要控制發(fā)酵條件，發(fā)酵工程需嚴(yán)格控制發(fā)酵條件C.兩者都需要對(duì)發(fā)酵原料和發(fā)酵裝置進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，以防止雜菌污染D.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程都不需要對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離和提純處理〖答案〗A〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代化工程技術(shù)手段，利用微生物的某些功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)；傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是指直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來(lái)的發(fā)酵物中的微生物進(jìn)行發(fā)酵、制作食品的技術(shù)?！驹斘觥緼、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)常用來(lái)自自然界中的混合菌種發(fā)酵，發(fā)酵工程通常接種經(jīng)人工選育的較為單一的菌種，A正確;B、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程為了保證產(chǎn)品的品質(zhì)，均需嚴(yán)格控制發(fā)酵條件，防止雜菌污染等，B錯(cuò)誤；C、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)通常僅做簡(jiǎn)單消毒處理，未嚴(yán)格滅菌，發(fā)酵工程則需嚴(yán)格滅菌，C錯(cuò)誤；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)獲得的發(fā)酵產(chǎn)物通常不需要處理，而發(fā)酵工程獲得的產(chǎn)品通常需要經(jīng)過(guò)一定的方法進(jìn)行分離、提純，D錯(cuò)誤。故選A。2.下列有關(guān)傳統(tǒng)果酒、果醋發(fā)酵和腐乳制作的比較，不正確的是（）A.果酒、腐乳發(fā)酵的主要微生物屬于真核生物，果醋發(fā)酵菌種屬于原核生物B.三種發(fā)酵過(guò)程中都可以通過(guò)控制發(fā)酵溫度實(shí)現(xiàn)對(duì)微生物類型的控制C.果酒發(fā)酵在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行，果醋和腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行D.果酒、果醋和腐乳制作過(guò)程利用的都是微生物胞內(nèi)酶〖答案〗D【詳析】A.參與果酒制作的酵母菌和參與腐乳制作的毛霉都屬于真核生物，而參與果醋制作的醋酸菌屬于原核生物，A正確；B.制作果酒時(shí)需要缺氧的環(huán)境，其適宜溫度是18～25℃，而制作果醋時(shí)需要不斷通入氧氣，其適宜溫度是30～35℃，腐乳發(fā)酵的溫度是15～18℃，B正確；C.果酒發(fā)酵在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行，果醋和腐乳發(fā)酵在有氧條件下進(jìn)行，C正確；D.腐乳制作過(guò)程利用的是毛霉的胞外酶，D錯(cuò)誤；因此，本題〖答案〗選D?？键c(diǎn)：本題考查發(fā)酵的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力。3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.同一種物質(zhì)可既作為碳源又作為氮源，所有碳源都能提供能量B.培養(yǎng)基中加入伊紅—亞甲藍(lán)試劑，長(zhǎng)出的菌落為大腸桿菌菌落C.配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH后滅菌D.要從多種細(xì)菌中分離出某種細(xì)菌，培養(yǎng)基要用液體培養(yǎng)基〖答案〗C〖祥解〗制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，其基本過(guò)程為計(jì)算、稱量、溶解、調(diào)pH、滅菌、倒平板六個(gè)步驟；選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)；鑒別培養(yǎng)基：加入一些化學(xué)物質(zhì)，微生物的代謝產(chǎn)物等可以和這種物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的變化，以便鑒別和篩選某種微生物?！驹斘觥緼、同一種物質(zhì)如牛肉膏可以既作碳源又作氮源，自養(yǎng)微生物利用的無(wú)機(jī)物碳源不提供能量，A錯(cuò)誤；B、伊紅-亞甲藍(lán)是專一鑒定大腸桿菌指示劑，利用伊紅-亞甲藍(lán)固體培養(yǎng)基可以鑒定大腸桿菌是否存在，但不能起篩選作用，B錯(cuò)誤；C、為了防止雜菌污染，配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先調(diào)pH后滅菌，C正確；D、要從多種細(xì)菌中分離出某種細(xì)菌，培養(yǎng)基要用固體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基主要用于菌體的擴(kuò)大，D錯(cuò)誤。故選C。4.科研人員已經(jīng)研發(fā)出了一種誘導(dǎo)入類多能干細(xì)胞（或稱iPS細(xì)胞）的新方法，在這些細(xì)胞中不含外來(lái)且可能有害的DNA。如圖為該技術(shù)在人體細(xì)胞中應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)示意圖，圖中①?⑦為不同階段的細(xì)胞，a?f表示細(xì)胞所進(jìn)行的生理過(guò)程。下列敘述正確的是A.過(guò)程d、e、f體現(xiàn)了iPS細(xì)胞的全能性B.圖中所示過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)染色體組最多可達(dá)到4個(gè)C.從遺傳物質(zhì)的角度分析，細(xì)胞分化是細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化D.若⑤⑥⑦均未失去分裂能力，則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)镈NA→RNA→蛋白質(zhì)〖答案〗B〖祥解〗分析題圖可知，a是細(xì)胞生長(zhǎng)，b是細(xì)胞分化，c是細(xì)胞脫分化，d、e、f是細(xì)胞再分化過(guò)程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是不同細(xì)胞的基因的執(zhí)行情況不同，即遺傳信息的選擇性表達(dá)，從而形成了形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化。細(xì)胞的全能性是高度分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。具有分裂能力的細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，存在DNA分子的復(fù)制過(guò)程，因此遺傳信息的流動(dòng)方向是：?！驹斘觥縟、e、f是細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞的過(guò)程，不能體現(xiàn)細(xì)胞全能性，A錯(cuò)誤；人類是二倍體,含有兩個(gè)染色體組，有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂，染色體數(shù)暫時(shí)加倍，染色體組變成4個(gè),B正確；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是不同細(xì)胞中基因的執(zhí)行情況不同，遺傳物質(zhì)沒(méi)有變化，C錯(cuò)誤；若⑤⑥⑦細(xì)胞均未失去分裂能力,則其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的流動(dòng)方向均為：，D錯(cuò)誤。5.2023年2月，用于治療HER2（人表皮生長(zhǎng)因子受體2，該蛋白增多可促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和擴(kuò)散）陽(yáng)性晚期乳腺癌的抗體偶聯(lián)藥物—“優(yōu)赫得”獲國(guó)家藥監(jiān)局批準(zhǔn)上市。“優(yōu)赫得”通常由抗HER2單克隆抗體、接頭和化療藥物構(gòu)成。下列有關(guān)的敘述錯(cuò)誤的是（）A.可通過(guò)體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞來(lái)獲得抗HER2單克隆抗體B.抗HER2單克隆抗體能特異性識(shí)別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白C.抗HER2單克隆抗體能將連接化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中D.“優(yōu)赫得”具有靶點(diǎn)清楚、毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)〖答案〗A〖祥解〗細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的基本方法：用外界抗原刺激動(dòng)物（如小鼠、兔子等），使其發(fā)生免疫反應(yīng)，使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體；利用仙臺(tái)病毒或聚乙二醇等融合因子進(jìn)行誘導(dǎo)，使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與可以無(wú)限傳代的骨髓瘤細(xì)胞融合；經(jīng)過(guò)篩選，獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞；通過(guò)對(duì)雜交瘤細(xì)胞的克隆培養(yǎng)，獲得單克隆抗體?！驹斘觥緼、單個(gè)B淋巴細(xì)胞無(wú)法無(wú)限增殖分泌大量的抗體，因此不可以通過(guò)體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞來(lái)獲得抗HER2單克隆抗體，A錯(cuò)誤；B、抗體具有特異性，因此抗HER2單克隆抗體能特異性識(shí)別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白（抗原），B正確；C、由于抗HER2單克隆抗體能特異性識(shí)別乳腺癌細(xì)胞表面的HER2蛋白，因此抗HER2單克隆抗體能將連接的化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中，C正確；D、“優(yōu)赫得”通常由抗HER2單克隆抗體、接頭和化療藥物構(gòu)成，會(huì)特異性將化療藥物輸送到乳腺癌細(xì)胞中，因此其具有靶點(diǎn)清楚、毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，D正確。故選A。6.轉(zhuǎn)基因成果令人嘆為觀止，下列成果屬于基因工程技術(shù)的是（）。A.番茄－馬鈴薯新物種 B.高產(chǎn)的青霉素菌株C.將玉米細(xì)胞內(nèi)的葉綠體移入菟絲子細(xì)胞內(nèi) D.能進(jìn)行生物固氮的酵母菌品種〖答案〗D〖祥解〗1、植物基因工程：抗蟲(chóng)、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2、動(dòng)物基因工程：提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。3、基因治療：把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用?！驹斘觥緼BC、番茄一馬鈴薯新物種、將玉米細(xì)胞內(nèi)的葉綠體移入菟絲子細(xì)胞內(nèi)都屬于細(xì)胞工程技術(shù)的成果，高產(chǎn)的青霉素菌株是通過(guò)誘變育種培育的，ABC不符合題意；D、能進(jìn)行生物固氮的酵母菌品種是通過(guò)基因工程技術(shù)將固氮菌的固氨基因轉(zhuǎn)移到酵母菌細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)的，D符合題意。故選D。7.某研究性學(xué)習(xí)小組擬培育一種名貴花卉的脫毒苗，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→生芽、生根→移栽”。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近B.外植體接種前需進(jìn)行流水沖洗、酒精消毒、次氯酸鈉處理等消毒措施C.為充分利用培養(yǎng)條件，每個(gè)錐形瓶可以接種6—8個(gè)外植體D.將組培苗移栽后，需進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)來(lái)篩選出脫毒苗〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株，該過(guò)程受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控?！驹斘觥緼、制備脫毒苗一般選取莖尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞，因?yàn)樵摬课患?xì)胞含病毒少，甚至不含病毒，因而可獲得無(wú)毒苗，A正確；B、消毒的原則是既要?dú)⑺啦牧媳砻娴奈⑸?，又要減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害，通常外植體接種前常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等消毒措施，B正確；C、為充分利用培養(yǎng)條件，每個(gè)錐形瓶可接種6～8個(gè)外植體，從而保證成功獲得培養(yǎng)對(duì)象，C正確；D、將組培苗移栽后，不需要進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)來(lái)篩選出脫毒苗，因?yàn)榕囵B(yǎng)的不是抗毒苗，D錯(cuò)誤。故選D。8.馬鈴薯四倍體栽培種沒(méi)有青枯病的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯二倍體野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了下圖的植物體細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)。下列分析正確的是（）A.用纖維素酶和果膠酶在低滲溶液中處理A和B，可獲得兩種原生質(zhì)體B.過(guò)程②形成的愈傷組織D的細(xì)胞中含6個(gè)染色體組C.過(guò)程②③中所用培養(yǎng)基生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同D.過(guò)程③可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定胚狀體細(xì)胞中抗青枯病基因的表達(dá)產(chǎn)物〖答案〗C〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動(dòng)、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本范圍，培育作物新品種。【詳析】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生質(zhì)體會(huì)吸水漲破，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織D是二倍體野生種和四倍體馬鈴薯通過(guò)體細(xì)胞雜交而得，可能有多種融合細(xì)胞和未融合細(xì)胞，故融合細(xì)胞含有2+2=4、2+4=6或者4+4=8個(gè)染色體組，B錯(cuò)誤；C、②是脫分化過(guò)程，③是再分化過(guò)程，過(guò)程②③中所用培養(yǎng)基生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的含量和比例不同，C正確；D、過(guò)程③表示再分化，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗青枯病基因，但表達(dá)產(chǎn)物通常需要用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行鑒定，D錯(cuò)誤。故選C。9.病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，在生物學(xué)中應(yīng)用廣泛。下列有關(guān)病毒在生物學(xué)中的應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.病毒經(jīng)滅活處理后，常用于介導(dǎo)植物細(xì)胞的融合B.某些病毒的DNA經(jīng)改造后，可用作基因工程的運(yùn)載體C.病毒經(jīng)滅活處理后，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗D.某些病毒的核酸制成探針可用于檢測(cè)機(jī)體是否感染該種病毒〖答案〗A〖祥解〗1、病毒是非細(xì)胞生物，只能寄生在活細(xì)胞中進(jìn)行生命活動(dòng)。病毒依據(jù)宿主細(xì)胞的種類可分為植物病毒、動(dòng)物病毒和噬菌體；根據(jù)遺傳物質(zhì)來(lái)分，分為DNA病毒和RNA病毒；病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成。2、疫苗是將病原微生物（如細(xì)菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過(guò)人工減毒、滅活或利用轉(zhuǎn)基因等方法制成的用于預(yù)防傳染病的自動(dòng)免疫制劑。應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)的疫苗，主要成分是病毒的表面抗原蛋白，接種后能刺激機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生抵抗病毒的抗體?！驹斘觥緼、病毒經(jīng)滅活處理后，常用于介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合，A錯(cuò)誤；B、某些病毒的DNA經(jīng)改造后，可用作基因工程的運(yùn)載體，如動(dòng)植物病毒等，B正確；C、經(jīng)過(guò)滅活或減毒處理的病毒可，其表面的抗原蛋白可以制成疫苗，可以激發(fā)機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)，用于免疫預(yù)防，C正確；D、某些病毒的核酸制成探針，利用分子雜交技術(shù)，可用于檢測(cè)機(jī)體是否感染該種病毒，D正確。故選A。10.研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤(pán)等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES細(xì)胞能夠誘導(dǎo)分化形成所有的細(xì)胞類型，但很難分化形成胎盤(pán)。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織。下列敘述正確的是（）A.將2細(xì)胞期胚胎用滅活病毒誘導(dǎo)法使2細(xì)胞融合，可得到一個(gè)含四個(gè)染色體組的細(xì)胞B.嵌合體中的ES具有自我更新能力并只能分化為胎盤(pán)等胚外組織C.嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)需移植入小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育D.嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型不同〖答案〗A〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。嵌合體-遺傳學(xué)上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現(xiàn)的個(gè)體?！驹斘觥緼、正常小鼠是二倍體，所以兩個(gè)處于2細(xì)胞期胚胎的細(xì)胞用滅活病毒誘導(dǎo)法融合后，可得到一個(gè)含四個(gè)染色體組的細(xì)胞，A正確；B、嵌合體中的ES具有自我更新能力，但很難分化形成胎盤(pán)，B錯(cuò)誤；C、嵌合體胚胎發(fā)育至桑葚胚或囊胚期再移植入小鼠子宮內(nèi)才可以進(jìn)一步發(fā)育，C錯(cuò)誤；D、四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，得到的ES小鼠中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細(xì)胞的基因型相同，D錯(cuò)誤。故選A。11.線粒體置換技術(shù)是將媽媽攜帶突變線粒體的卵子細(xì)胞核移植到去核的健康線粒體捐贈(zèng)者卵胞漿中獲得的重構(gòu)卵母細(xì)胞，與攜帶者丈夫精子進(jìn)行受精，從而獲得重構(gòu)胚胎也就是通常說(shuō)的“三親胚胎”，也被稱為“第四代試管嬰兒”。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.重構(gòu)卵母細(xì)胞需培養(yǎng)成熟才可以與獲能精子受精B.第四代試管嬰兒的DNA來(lái)自攜帶者與其丈夫C.第四代試管嬰兒可避免線粒體疾病D.第四代試管嬰兒的培育還需要經(jīng)歷早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)〖答案〗B〖祥解〗試管嬰兒是指人的卵細(xì)胞和精子在體外完成受精作用，發(fā)育到早期胚胎的一定階段，再移入到母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育到足月誕生的嬰兒，由于受精過(guò)程和早期胚胎發(fā)育通常在試管中完成，所以叫試管嬰兒?！驹斘觥緼、體外受精時(shí)，卵母細(xì)胞需培養(yǎng)成熟至MⅡ期具備受精能力，才可以和獲能精子進(jìn)行體外受精，A正確；B、細(xì)胞中的DNA包括核DNA和質(zhì)DNA，第四代試管嬰兒的核DNA來(lái)自攜帶者及其丈夫，質(zhì)DNA來(lái)自捐贈(zèng)者線粒體DNA，B錯(cuò)誤；C、第四代試管嬰兒是由攜帶者突變線粒體的卵子提供細(xì)胞核，捐贈(zèng)者提供去核的細(xì)胞質(zhì)，可避免攜帶者的線粒體疾病通過(guò)母系遺傳傳遞給下一代，C正確；D、第四代試管嬰兒的培育還需要經(jīng)歷早期胚胎培養(yǎng)到適宜時(shí)期，再經(jīng)歷胚胎移植等技術(shù)移植到母體子宮孕育成熟，D正確。故選B。12.將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中，培育耐鹽堿海水稻新品種。下圖PCR擴(kuò)增OsMYB56時(shí)需要添加引物，應(yīng)選用的引物組合為（）A.5'—CTTGGATGAT一3和5'一TCTGTTGAAT一3'B.5'一CTTGGATGAT一3和5'一TAAGTTGTCT一3'C.5'一ATTCAACAGA一3'和5'一ATCATCCAAG一3'D.5'一ATTCAACAGA一3'和5—GAACCTACTA—3'〖答案〗A〖祥解〗PCR技術(shù)可特異性的擴(kuò)增DNA片段，關(guān)鍵在于引物可以和特定DNA片段的3'端特異性結(jié)合，使Taq酶沿引物的3'端延伸子鏈?！驹斘觥卡D端為DNA鏈的5'端，―OH端為DNA鏈的3'端。進(jìn)行PCR時(shí)，引物與模板鏈的3'端結(jié)合，因此在擴(kuò)增OsMYB56時(shí)需要添加的引物是5'-CTTGCATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3'，A項(xiàng)符合題意，BCD不符合題意。故選A。13.人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。乙型肝炎疫苗的研制先后經(jīng)歷了血源性疫苗和基因工程疫苗階段。下圖為乙肝病毒基因工程疫苗的生產(chǎn)和使用過(guò)程，質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無(wú)該基因，菌落則成白色。下列相關(guān)說(shuō)法不正確的是（）A.過(guò)程①最好的限制酶選擇方案是BamHⅠ和EcoRⅠB.為了使重組質(zhì)粒中目的基因正常表達(dá)，還需要插入啟動(dòng)子和終止子C.過(guò)程②需要在培養(yǎng)基中加青霉素和X-gal篩選白色的大腸桿菌菌落D.基因工程疫苗比血源性疫苗更安全，但仍可能出現(xiàn)病毒增殖和感染〖答案〗D〖祥解〗1、題圖過(guò)程①表示獲取目的基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒，②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞并篩選，③表示轉(zhuǎn)基因大腸桿菌表達(dá)乙肝病毒外殼，④表示將乙肝病毒外殼作為疫苗接種，⑤表示疫苗受試者體內(nèi)出現(xiàn)抗體的過(guò)程。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、過(guò)程①表示獲取目的基因，構(gòu)建重組質(zhì)粒，需要限制酶，BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位點(diǎn)在目的基因兩側(cè)，可以獲得完整的目的基因，且質(zhì)粒上也存在這兩種酶的識(shí)別位點(diǎn)，A正確；B、為了使重組質(zhì)粒中目的基因正常表達(dá)，需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，除了目的基因、標(biāo)記基因外，還需要插入啟動(dòng)子和終止子，B正確；C、過(guò)程②表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，培養(yǎng)基中加青霉素和X-gal可以用于篩選含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌，限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ由于破壞了質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因，卻保留了青霉素抗性基因，故白色的大腸桿菌菌落即為所需菌落，C正確；D、基因工程疫苗由于只利用了乙肝病毒的外殼，不含其遺傳物質(zhì)，所有不能完成病毒的增殖和感染，D錯(cuò)誤。故選D。14.胰蛋白酶極易自溶，人們運(yùn)用蛋白質(zhì)工程手段對(duì)某個(gè)氨基酸進(jìn)行了缺失突變，最終得到了穩(wěn)定性明顯提高的突變株。下圖為技術(shù)流程，相關(guān)敘述正確的是（）A.a、b分別是逆轉(zhuǎn)錄、翻譯過(guò)程B.圖中分子設(shè)計(jì)的實(shí)質(zhì)是改造基因的結(jié)構(gòu)C.據(jù)圖中氨基酸序列便可確定唯一對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列D.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異〖答案〗B〖祥解〗蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）【詳析】A、a是以DNA為模板合成mRNA的過(guò)程，表示轉(zhuǎn)錄，b過(guò)程是以mRNA為模板合成多肽鏈的過(guò)程，表示翻譯，A錯(cuò)誤；B、a蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是對(duì)基因進(jìn)行操作，操作簡(jiǎn)單，且能遺傳給后代，即圖中分子設(shè)計(jì)的實(shí)質(zhì)是基因的結(jié)構(gòu)，B正確；C、由于密碼子的簡(jiǎn)并性，根據(jù)推測(cè)的氨基酸序列，不能確定唯一對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)工程和基因工程的操作對(duì)象都是基因，D錯(cuò)誤。故選B。二、多項(xiàng)選擇題：本部分包括4小題，每小題3分，共12分。每題不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得3分，選對(duì)但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15.如圖表示植株A（雜合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的過(guò)程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.培育植株①的過(guò)程為單倍體育種，獲得的植株為純合子B.選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，未體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C.需要通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的植株只有①③④D.植株①②④⑤與植株A基因型相同的概率分別是0、0、1、0（不考慮基因突變）〖答案〗ABC〖祥解〗分析題圖可知：對(duì)植株A的花粉經(jīng)過(guò)離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株，而后對(duì)該單倍體幼苗經(jīng)秋水仙素處理得到的植物②是純合二倍體，該過(guò)程屬于單倍體育種。植株③的獲得采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該植株的獲得利用了誘變育種方法。植株④采用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種；植株⑤的培育采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)?！驹斘觥緼、對(duì)植株A（雜合子Aa）的花粉（A或a）經(jīng)過(guò)離體培養(yǎng)得到的植株①單倍體植株（A或a），秋水仙素處理單倍體植株①，獲得的植株②（AA或aa）為純合子，A錯(cuò)誤；B、選擇植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得植株③，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性，B錯(cuò)誤；C、圖中需要通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的植株是①③④⑤，該過(guò)程中利用了細(xì)胞的全能性，植株②是秋水仙素處理植株①的幼苗得到，沒(méi)有用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C錯(cuò)誤；D、植株①是通過(guò)花藥離體培養(yǎng)獲得的單倍體植株（A或a），秋水仙素處理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得的，其基因型為Aa；植株⑤是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交的方法獲得的，其遺傳物質(zhì)是由植株A和植株B組成的，與植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤與植株A基因型相同的概率分別是0、0、1、0，D正確。故選ABC。16.若某種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列是CCTAGG，它在C和C之間切斷線性DNA。下圖表示用該酶處理某基因后產(chǎn)生的片段。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.該正常基因中有3個(gè)CCTAGG序列B.產(chǎn)生的DNA片段可用DNA聚合酶連接起來(lái)C.用該酶處理得到圖示基因片段要水解3個(gè)磷酸二酯鍵D.若該基因某處有一個(gè)CCTACG突變?yōu)镃CTAGG，用該酶處理后將產(chǎn)生5個(gè)片段〖答案〗AD〖祥解〗限制酶：（1）來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端?！驹斘觥緼、分析題意，某種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列是CCTAGG，該正常基因被切為4個(gè)片段，有3個(gè)切點(diǎn)，應(yīng)有3個(gè)CCTAGG序列，A正確；B、產(chǎn)生的DNA可用DNA連接酶連接，B錯(cuò)誤；C、DNA分子是兩條鏈，用該酶處理得到圖示基因片段要水解6個(gè)磷酸二酯鍵，C錯(cuò)誤；D、該限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列是CCTAGG，若該基因某處有一個(gè)CCTACG突變?yōu)镃CTAGG，則有4個(gè)切點(diǎn)，用該酶處理后將產(chǎn)生5個(gè)片段，D正確。故選AD。17.下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.用核移植生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行100%的復(fù)制B.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將Ti質(zhì)粒上的全部基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體上C.胚胎移植技術(shù)中需要同時(shí)對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情和超數(shù)排卵處理D.利用“生物導(dǎo)彈”殺死癌細(xì)胞借助了單克隆抗體的導(dǎo)向作用〖答案〗ABC〖祥解〗單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，“生物導(dǎo)彈”是單克隆抗體和特定藥物的結(jié)合，可定向消滅靶細(xì)胞?！驹斘觥緼、用核移植生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，其細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行100%的復(fù)制，A錯(cuò)誤；B、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法能將Ti質(zhì)粒上T-DNA區(qū)段的基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體上，B錯(cuò)誤；C、胚胎移植技術(shù)中不需要對(duì)受體母牛進(jìn)行超數(shù)排卵處理，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體可特異性的結(jié)合癌細(xì)胞，利用“生物導(dǎo)彈”殺死癌細(xì)胞借助了單克隆抗體的導(dǎo)向作用，D正確。故選ABC。18.目的基因和載體如果用同一種限制酶處理，連接時(shí)會(huì)出現(xiàn)正反接的情況，為鑒定篩選出的表達(dá)載體中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR后，結(jié)合電泳技術(shù)鑒定，圖示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，其中目的基因?yàn)殚L(zhǎng)度300bp的片斷。下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是（）A.PCR退火溫度不宜太低，避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈B.電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)C.選取引物甲丙，擴(kuò)增出450bp長(zhǎng)度片斷時(shí)，可以說(shuō)明目的基因正接D.選取引物甲乙，擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片斷時(shí)，可以說(shuō)明目的基因反接〖答案〗C〖祥解〗PCR是利用 DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按 堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào) 溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶 沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。【詳析】A、退火是在高溫解旋后降低溫度讓引物與模板鏈結(jié)合，退火溫度不宜太低，避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈，A正確；B、電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)，如電泳一段時(shí)間后，較大的DNA分子遷移距離小，離加樣孔近，而較小的DNA分子遷移距離大，離加樣孔遠(yuǎn)，B正確；C、由于使用的引物是甲和丙，沒(méi)有與基因相應(yīng)位置配對(duì)，因此不管基因正接還是反接，均為450bp，C錯(cuò)誤；D、選取引物甲乙，擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片斷時(shí)，可以說(shuō)明目的基因反接，若正接的話，擴(kuò)增出來(lái)的長(zhǎng)度應(yīng)該是100bp，D正確。故選C。第II卷（非選擇題共60分）三、非選擇題：本部分包括5題，共60分。19.蘋(píng)果樹(shù)腐爛病由真菌感染引起，為了開(kāi)發(fā)生物防治該病的途徑，研究者擬從土壤中分離篩選出能抑制蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌生長(zhǎng)的芽孢桿菌，實(shí)驗(yàn)流程如下圖。（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，培養(yǎng)基的滅菌應(yīng)該在倒平板_______（填“之前”或“之后”），培養(yǎng)基滅菌的常用方法是______，為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的____做標(biāo)記，培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)該將培養(yǎng)皿____。（2）圖中①過(guò)程取5g土壤加入_____mL無(wú)菌水中充分震蕩得到10-1的土壤懸液。用_______法進(jìn)行接種，該過(guò)程中需要使用________（接種工具），每個(gè)濃度重復(fù)3次。37℃條件下，在_________（設(shè)備）中培養(yǎng)24小時(shí)，根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。（3）目的菌篩選時(shí)，應(yīng)取直徑為5mm的____________菌落移置于A處，B處接種__________菌。培養(yǎng)3～5天，篩選出抑菌率最高的菌株。（4）探究不同稀釋倍數(shù)的芽孢桿菌發(fā)酵原液對(duì)感染了蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌枝條的抑菌率的影響，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：①將發(fā)酵原液稀釋0、5、20、50、100倍，選取健康果樹(shù)枝條進(jìn)行消毒和打孔。②實(shí)驗(yàn)組枝條上分別涂抹等量的_______，對(duì)照組枝條上涂抹等量的______。③在所有枝條的打孔處接種等量的蘋(píng)果腐爛病菌，7天后測(cè)量并計(jì)算抑菌率?！即鸢浮剑?）①.之前②.高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌）③.皿底④.倒置（2）①.45②.稀釋涂布平板法③.涂布器④.恒溫培養(yǎng)箱（3）①.蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌②.芽孢桿（4）①.不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液②.無(wú)菌水〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。（1）微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，倒平板之前應(yīng)先將培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；培養(yǎng)基的滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法，是濕熱滅菌的一種；為避免混淆應(yīng)在培養(yǎng)皿的皿底做標(biāo)記，并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，倒置的目的是防止水分落入培養(yǎng)基造成污染。（2）要獲得稀釋了10倍的土壤懸液，應(yīng)該將5g土壤加入45mL無(wú)菌水中充分振蕩；由圖可知在不同的稀釋度下取0.1ml接種到三個(gè)平板上，這種接種方法是稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法所用的接種工具是涂布器；37℃條件下，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)，根據(jù)菌落特征鑒別出芽孢桿菌并進(jìn)一步純化。（3）由圖分析可知，目的菌篩選時(shí)，應(yīng)取直徑為5mm的蘋(píng)果腐爛病菌的菌落移置于A處，B處接種從土壤中分離篩選出能抑制蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌生長(zhǎng)的芽孢桿菌，培養(yǎng)3~5天，測(cè)量并計(jì)算抑菌率，篩選出抑菌率最高的菌株。（4）本實(shí)驗(yàn)的目的是探究不同稀釋倍數(shù)的芽孢桿菌發(fā)酵原液對(duì)感染了蘋(píng)果樹(shù)腐爛病菌枝條的抑菌率的影響，選材結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)組枝條上應(yīng)分別涂抹等量的不同稀釋倍數(shù)芽孢桿菌發(fā)酵液，對(duì)照組枝條上涂抹等量的無(wú)菌水。20.早期，科學(xué)工作者從被HIV感染后自愈者的體內(nèi)獲取相應(yīng)免疫細(xì)胞，使之與骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合，生產(chǎn)HIV的抗體，具體過(guò)程見(jiàn)下圖1：（1）上述過(guò)程①的生物技術(shù)稱為_(kāi)______________；要獲得單克隆抗體，上圖1過(guò)程最關(guān)鍵的操作要點(diǎn)是：首先篩選出_________________；再進(jìn)一步篩選出____________________。（2）隨后，圖2所示的技術(shù)被運(yùn)用到了HIV疫苗的研制工作中，科學(xué)家用該方法產(chǎn)生的疫苗進(jìn)行預(yù)防接種，該技術(shù)的核心步驟為[]______（[]中填圖2中序號(hào)，__上填步驟名稱），圖中①過(guò)程需要_________酶的參與，②過(guò)程需要的工具酶為_(kāi)_______，該過(guò)程提取疫苗的化學(xué)本質(zhì)為_(kāi)___。與上述圖1方法相比，其關(guān)鍵的優(yōu)勢(shì)是_____________________。（3）為獲取圖2中的DNA片段（目的基因），科學(xué)家需要根據(jù)_______________設(shè)計(jì)引物，若有a條起始的RNA片段，經(jīng)過(guò)圖2的①過(guò)程，再進(jìn)行PCR循環(huán)30次，理論上需要引物___________個(gè)。（4）HIV能通過(guò)細(xì)胞表面的CD4（一種受體蛋白）識(shí)別T細(xì)胞，如果給AIDS患者大量注射用CD4修飾過(guò)的紅細(xì)胞，紅細(xì)胞也會(huì)被HIV識(shí)別、入侵?？茖W(xué)家認(rèn)為紅細(xì)胞會(huì)成為HIV的“陷阱細(xì)胞”，可以為治療AIDS提供新的思路，這種認(rèn)知的理由是哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞的特點(diǎn)是_________________，這種特點(diǎn)使得入侵的HIV__________?！即鸢浮剑?）①.動(dòng)物細(xì)胞融合②.雜交瘤細(xì)胞③.能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高抗體的雜交瘤細(xì)胞（2）①.②構(gòu)建基因表達(dá)載體②.逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶③.限制酶、DNA連接酶④.蛋白質(zhì)⑤.血液中抗體含量因代謝會(huì)逐漸降低，而注射疫苗可激發(fā)B細(xì)胞產(chǎn)生記憶細(xì)胞，較長(zhǎng)時(shí)間維持較高抗體濃度（3）①.目的基因DNA片段上游和下游的部分核苷酸序列②.a×（231-2）（4）①.不具備細(xì)胞核和核糖體等結(jié)構(gòu)②.無(wú)法完成復(fù)制和增殖〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：①目的基因的獲??；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定。（1）圖1中①為HIV自愈者免疫細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的過(guò)程，該過(guò)程需要采用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，要獲得單克隆抗體，最關(guān)鍵的操作是：首先在選擇培養(yǎng)基上篩選出雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗體的雜交瘤細(xì)胞。（2）圖2為利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)HIV疫苗的過(guò)程，基因工程的核心技術(shù)為構(gòu)建基因表達(dá)載體，即圖2中②過(guò)程，圖中①過(guò)程為由RNA通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到DNA的過(guò)程，該過(guò)程提取疫苗的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。與單克隆抗體獲得的方法相比，其關(guān)鍵的優(yōu)勢(shì)是血液中抗體含量因代謝會(huì)逐漸降低，而注射疫苗可激發(fā)B細(xì)胞產(chǎn)生記憶細(xì)胞，較長(zhǎng)時(shí)間維持較高抗體濃度。（3）為獲取圖2中的DNA片段(目的基因)，科學(xué)家需要根據(jù)目的基因DNA片段上游和下游的部分核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR技術(shù)獲得目的基因，如果一個(gè)DNA分子通過(guò)PCR經(jīng)歷30次循環(huán)，則形成子代DNA片段為230個(gè)，有DNA鏈數(shù)為231條，其中不含引物的鏈只有2條，因此共需要引物數(shù)量為231-2，若有a條起始的RNA片段，經(jīng)過(guò)圖2的①過(guò)程，再進(jìn)行PCR循環(huán)30次，理論上獲得的目的基因片段數(shù)為a×（231-2）。（4）HIV能通過(guò)細(xì)胞表面的CD4(一種受體蛋白)識(shí)別T細(xì)胞，如果給AIDS患者大量注射用CD4修飾過(guò)的紅細(xì)胞，紅細(xì)胞也會(huì)被HIV識(shí)別、入侵?？茖W(xué)家認(rèn)為紅細(xì)胞會(huì)成為HIV的“陷阱細(xì)胞”，可以為治療AIDS提供新的思路，這種認(rèn)知的理由是哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞的特點(diǎn)是不具備細(xì)胞核和核糖體及多種細(xì)胞器等結(jié)構(gòu)，這種特點(diǎn)使得入侵的HIV無(wú)法完成遺傳物質(zhì)的復(fù)制及有關(guān)蛋白質(zhì)的合成，進(jìn)而使HIV無(wú)法進(jìn)行增殖。21.7歲的哈?；加薪唤缧痛蟀捫员砥に山獍Y(JEB)，該病的病因是編碼層黏連蛋白332的基因之一LAMB3發(fā)生了突變，導(dǎo)致表皮和真皮很容易脫離，進(jìn)而產(chǎn)生水皰和糜爛，并伴有多種炎癥威脅其生命?？茖W(xué)家實(shí)施了表皮干細(xì)胞基因療法拯救了哈桑，治療過(guò)程如下圖：（1）用改造過(guò)的病毒作運(yùn)載體，有利于提高基因治療成功率，下列可能的原因有_____(填字母)。a.感染率高b.對(duì)宿主細(xì)胞沒(méi)有毒性c.更易于感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞（2）改造病毒在宿主細(xì)胞中能夠合成某種“整合酶”，它能切開(kāi)DNA雙鏈的特定區(qū)域，便于目的基因與宿主DNA整合，由此可推測(cè)整合酶的作用類似于基因工程工具中的________。感染過(guò)的細(xì)胞的后代就有了正確的LAMB3基因，經(jīng)過(guò)___________過(guò)程可以制造正常的層黏連蛋白332。（3）圖中過(guò)程③所涉及的技術(shù)屬于生物工程中的____________。過(guò)程③需要在_____（設(shè)備）中進(jìn)行。三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞，因?yàn)榧?xì)胞分裂生長(zhǎng)具有______________的特點(diǎn)。（4）干細(xì)胞移植和基因治療最大的風(fēng)險(xiǎn)就在于導(dǎo)致癌癥。原因是載體病毒會(huì)把基因______插入基因組里，如果破壞了一些____________________，那么就有可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變。（5）當(dāng)患者全身的皮膚細(xì)胞大概更新過(guò)4輪時(shí)，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，絕大部分移植的細(xì)胞存活了，卻沒(méi)有復(fù)制留下自己的后代。由此可推測(cè)，人體皮膚是________________(選填“所有細(xì)胞”或“少數(shù)皮膚干細(xì)胞”)負(fù)責(zé)復(fù)制、分化、更新所有的皮膚。〖答案〗（1）abc（2）①.限制酶②.轉(zhuǎn)錄、翻譯（3）①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)②.CO2培養(yǎng)箱③.貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制（4）①.隨機(jī)②.抑癌基因或原癌基因（5）少數(shù)皮膚干細(xì)胞〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境；（2）營(yíng)養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素之外還通常需加入血清等天然成分；（3）適宜的溫度和pH：溫度為36.5℃±0.5℃，pH為7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：CO2和O2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。（1）由于改造過(guò)的病毒具有免疫原性低、感染效率高、整合性強(qiáng)、外源基因表達(dá)效率高，并且病毒本身具有一定的靶向性，更易于感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞，對(duì)宿主細(xì)胞沒(méi)有毒性等優(yōu)點(diǎn)，所以用改造過(guò)的病毒作運(yùn)載體，有利于提高基因治療成功率，故選abc；（2）根據(jù)整合酶能“切開(kāi)DNA雙鏈的特定區(qū)域”，推測(cè)整合酶的作用類似于基因工程工具中的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；感染過(guò)的細(xì)胞的后代有了目的基因LAMB3基因后，還需要經(jīng)過(guò)基因表達(dá)過(guò)程才可以制造正常的層黏連蛋白332；（3）圖中③是將上皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，所涉及的技術(shù)屬于生物工程中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，除了營(yíng)養(yǎng)及氣體條件外，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需考慮的環(huán)境條件還包括無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境、適宜的溫度和pH。三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞，因?yàn)橘N壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到接觸抑制的特點(diǎn)，即細(xì)胞相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖；（4）細(xì)胞癌變的原因是原癌基因和抑癌基因突變，故載體病毒若把基因隨機(jī)插入原癌基因或抑制基因中，破壞了原癌基因和抑癌基因，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞癌變；（5）根據(jù)題干信息“絕大部分移植的細(xì)胞存活了，卻沒(méi)有復(fù)制留下自己的后代”，由此推斷是少數(shù)皮膚干細(xì)胞負(fù)責(zé)復(fù)制、分化和更新所有的皮膚，而不是所有的細(xì)胞負(fù)責(zé)該功能。22.煙草易受煙草花葉病毒（TMV）感染而大幅度減產(chǎn)。絞股藍(lán)（一種植物）細(xì)胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV煙草。（1）下表是相關(guān)研究中的一些步驟，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)基因工程知識(shí)完成以下表格。實(shí)驗(yàn)步驟方法要點(diǎn)篩選合適的目的基因從絞股藍(lán)細(xì)胞中提取總RNA，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程獲得DNA；再通過(guò)①_____________技術(shù)擴(kuò)增出大量目的基因片段②________將目的基因插入Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細(xì)胞常用③__________方法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)受體細(xì)胞獲得再生植株運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植株分析從分子水平與④____________水平上，對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測(cè)與鑒定部分載體結(jié)構(gòu)：LEA基因序列：（2）為研究干旱脅迫基因LEA和VOC對(duì)絞股藍(lán)油脂的積累機(jī)制，科研人員構(gòu)建了兩個(gè)基因表達(dá)載體。其中基因LEA與熒光素酶基因（Luc）構(gòu)建成基因表達(dá)載體甲，基因VOC和標(biāo)記基因構(gòu)建成基因表達(dá)載體乙，相關(guān)序列及酶切位點(diǎn)如圖所示。箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向。①利用PCR擴(kuò)增LEA基因時(shí)，需要在引物的__________（填“3’端”或“5’端”）添加限制酶識(shí)別序列，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶切位點(diǎn)，添加序列對(duì)應(yīng)的限制酶是______。②為了構(gòu)建基因表達(dá)載體甲，依據(jù)圖中已知堿基序列，在PCR擴(kuò)增儀中加入的引物的堿基序列為_(kāi)_____________________。③乙?！狢oA羧化酶基因（AC）是油脂合成過(guò)程的關(guān)鍵酶基因，甘油三酯酯酶基因（ATGL）是油脂分解過(guò)程的關(guān)鍵酶基因。將基因表達(dá)載體甲、乙分別導(dǎo)入植物細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植物A、B，在干旱脅迫的環(huán)境下培養(yǎng)兩種轉(zhuǎn)基因植物和正常植物，分別檢測(cè)植物體內(nèi)AC和ATGL基因的表達(dá)水平，結(jié)果如下圖。在分子水平上，用__________方法檢測(cè)AC酶和ATGL酶的含量可得到如下結(jié)果。

正常植株轉(zhuǎn)基因A植株轉(zhuǎn)基因B植株AC酶ATGL酶④基于以上研究，干旱脅迫基因LEA和VOC在絞股藍(lán)油脂積累中的機(jī)制是：在干旱脅迫的環(huán)境下，_______、_________?！即鸢浮剑?）①PCR②.基因表達(dá)構(gòu)建/構(gòu)建重組質(zhì)粒③.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化④.個(gè)體（生物學(xué)）（2）①.5’端②.EcoRV和XBal③.5’-GATATCATGGGC-3’和5’-TCTAGACTAGTG-3’④.抗原—抗體雜交⑤.LEA通過(guò)促進(jìn)AC的表達(dá)使植物油脂增加⑥.VOE通過(guò)抑制ATGL的表達(dá)減弱油脂的降低〖祥解〗基因工程的操作步驟：(1)目的基因的獲??；方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mR