影響分光光度計(jì)測(cè)量誤差的緊要原因及操作規(guī)程

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分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸取進(jìn)行物質(zhì)的定性或定量分析的儀器，在各行各業(yè)得到了廣泛應(yīng)用，緊要用于物質(zhì)純度檢查、定量分析、物質(zhì)結(jié)構(gòu)辨別等。可測(cè)量結(jié)果總會(huì)顯現(xiàn)可接受或不可接受的誤差，誤差來(lái)源于測(cè)量過(guò)程的各個(gè)方面，我認(rèn)為緊要來(lái)源于儀器本身性能和測(cè)量條件的選擇兩個(gè)方面。

一、儀器本身性能帶來(lái)的誤差

1.雜散光的影響

雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的其他波長(zhǎng)組分，它是光譜測(cè)量中誤差的緊要來(lái)源。產(chǎn)生原因有:分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波優(yōu)點(diǎn)，由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測(cè)量誤差，實(shí)際工作中，在定量分析時(shí)，一般在吸取峰或其相近處測(cè)量樣品吸光度，假如在分析波優(yōu)點(diǎn)含有雜散光，這時(shí)樣品的透光率較小，而雜散光大部分透過(guò)，使測(cè)量吸光度低于真實(shí)吸光度。

2.儀器噪聲對(duì)測(cè)量的影響

儀器噪聲也是儀器的一個(gè)緊要指標(biāo)，它表征儀器做稀溶液的本領(lǐng)。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào)，掃描100%T和0%T線，可察看到分光光度計(jì)的確定噪聲水平，假如儀器噪聲較大，會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào)，一般用噪音的二倍來(lái)表示儀器的靈敏度。

3.波長(zhǎng)和吸光度精準(zhǔn)度

樣品的每一個(gè)值都是在確定的波長(zhǎng)下測(cè)得的，假如波長(zhǎng)誤差很大，測(cè)出的值確定不準(zhǔn)。吸光度精準(zhǔn)度也是用戶對(duì)儀器的直接要求，更應(yīng)引起充分的重視。國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)透射比精準(zhǔn)度為A級(jí)士0.6%,B級(jí)土1.0%。

二、測(cè)量條件的選擇

1.吸光度范圍的選擇

試樣在不同吸光度時(shí)，濃度的相對(duì)誤差不同，一般選擇A二0.2一0.8之間，濃度相對(duì)誤差較小，可以通過(guò)更改吸取池厚度、檢測(cè)波長(zhǎng)或待測(cè)溶液濃度，使吸光度讀數(shù)在適合范圍內(nèi)。

2.狹縫寬度的選擇

狹縫寬度不僅影響光譜的純度，也影響吸光度值，在定量分析時(shí)，為了得到充分的測(cè)量信號(hào)，應(yīng)接受較大狹縫。在定性分析時(shí)，為了提高辨別率，應(yīng)接受較小狹縫，以獲得精細(xì)的光譜結(jié)構(gòu)。

3.吸取池的選擇和使用

吸取池的規(guī)格應(yīng)依據(jù)被測(cè)溶液顏色深淺來(lái)確定，一般是被測(cè)溶液顏色深時(shí)選光程短的，顏色淺時(shí)選光程長(zhǎng)的，同一試驗(yàn)使用同一規(guī)格同一套吸取池。在定量測(cè)量之前需要對(duì)吸取池作校正和配對(duì)工作，吸取池不匹配時(shí)，對(duì)測(cè)量產(chǎn)生誤差，吸取池方向不同，透光率亦有差異，使用時(shí)應(yīng)注意方向。比色皿毛玻璃一面的上端有一個(gè)箭頭，應(yīng)與光路保持一致。另外，使用時(shí)，不要把溶液注得太滿，以防在推動(dòng)比色皿架時(shí)溶液溢出皿外。如透光壁外有溶液存在，要擦干再測(cè)，否則將產(chǎn)生誤差。

分光光度計(jì)的正確使用和保養(yǎng)也很緊要，我們應(yīng)當(dāng)做到以下幾點(diǎn):堅(jiān)持標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)用現(xiàn)配，不使用過(guò)期溶液，比色皿應(yīng)保持清潔、干燥，禁止用硬物碰擦透亮表面；防止儀器振動(dòng)，影響測(cè)量穩(wěn)定性；在開(kāi)機(jī)狀態(tài)，不測(cè)量時(shí)，應(yīng)打開(kāi)樣品池門，延長(zhǎng)光電傳感器壽命；樣品集中測(cè)量，避開(kāi)開(kāi)機(jī)次數(shù)，延長(zhǎng)光源壽命；一旦停機(jī)，則應(yīng)待燈冷卻后再重新啟動(dòng)，并預(yù)熱15min左右