分光光度計(jì)測(cè)量誤差有哪些及工作原理

第第頁(yè)分光光度計(jì)測(cè)量誤差有哪些及工作原理分光光度計(jì)測(cè)量誤差有哪些分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸取進(jìn)行物質(zhì)的定性或定量分析的儀器，在各行各業(yè)得到了廣泛應(yīng)用，緊要用于物質(zhì)純度檢查、定量分析、物質(zhì)結(jié)構(gòu)辨別等?？蓽y(cè)量結(jié)果總會(huì)顯現(xiàn)可接受或不可接受的誤差，誤差來(lái)源于測(cè)量過(guò)程的各個(gè)方面，緊要來(lái)源于儀器本身性能和測(cè)量條件的選擇兩個(gè)方面。

一、儀器本身性能帶來(lái)的誤差

1.1復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離

比耳定律成立的前提條件是人射光是單色光，但是精度再高的儀器，即使是雙單色器的分光光度計(jì)，也只能獲得近乎單色的光，無(wú)法獲得純單色光，它仍舊含有狹窄光通帶，具有復(fù)色光的性質(zhì)。而復(fù)色光會(huì)導(dǎo)致比耳定律的正或負(fù)偏離。固定狹縫的紫外分光光度計(jì)光譜帶寬一般為1nm或2nm，可調(diào)狹縫的可以做到0.Inm；可見(jiàn)分光光度計(jì)帶寬6nm、snm，甚至十幾納米。光譜帶寬應(yīng)當(dāng)是越小越好，但是隨著光譜辨別率的提高，儀器的靈敏度降低，所以選擇儀器時(shí)要綜合考慮各種條件的影響。當(dāng)溶液濃度較小且單色光較純時(shí)，可貌似認(rèn)為符合比耳定律。

1.2雜散光的影響

雜散光是指進(jìn)人檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的其他波長(zhǎng)組分，它是光譜測(cè)量中誤差的緊要來(lái)源。產(chǎn)生原因有:分光光度計(jì)的色散元件、反射鏡、透鏡及單色器內(nèi)壁灰塵等。在分光光度計(jì)工作波段邊緣波優(yōu)點(diǎn)，由于單色器透光率、光源輻射強(qiáng)度、檢測(cè)器靈敏度都較低，雜散光的影響更為顯著。雜散光限制儀器的分析上限可引起嚴(yán)重的測(cè)量誤差，實(shí)際工作中，在定量分析時(shí)，一般在吸取峰或其相近處測(cè)量樣品吸光度，假如在分析波優(yōu)點(diǎn)含有雜散光，這時(shí)樣品的透光率較小，而雜散光大部分透過(guò)，使測(cè)量吸光度低于真實(shí)吸光度。

1.3儀器噪聲對(duì)測(cè)t的影響

儀器噪聲也是儀器的一個(gè)緊要指標(biāo)，它表征儀器做稀溶液的本領(lǐng)。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào)，掃描100%T和0%T線，可察看到分光光度計(jì)的確定噪聲水平，假如儀器噪聲較大，會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào)，一般用噪音的二倍來(lái)表示儀器的靈敏度。

1.4波長(zhǎng)和吸光度精準(zhǔn)度

樣品的每一個(gè)值都是在確定的波長(zhǎng)下測(cè)得的，假如波長(zhǎng)誤差很大，測(cè)出的值確定不準(zhǔn)。吸光度精準(zhǔn)度也是用戶(hù)對(duì)儀器的直接要求，更應(yīng)引起充分的重視。國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)透射比精準(zhǔn)度為A級(jí)士0.6%，B級(jí)土1.0%。

二、測(cè)量條件的選擇

2.1參比溶液和溶荊的選擇

分光光度計(jì)的測(cè)量實(shí)際上是以通過(guò)參比池的光強(qiáng)度作為人射光強(qiáng)度來(lái)測(cè)定試樣的吸光度，先調(diào)整儀器使透過(guò)參比池溶液的吸光度為零，然后讓同一束光通過(guò)樣品，使得吸光度比較真實(shí)地反映待測(cè)物質(zhì)的濃度，所以參比溶液的選擇特別緊要。假如僅有待測(cè)物質(zhì)與顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物有吸取，可用純?nèi)軇┗蛘麴s水作參比溶液。假如顯色劑有顏色，并在測(cè)定波長(zhǎng)下有吸取，則用顯色劑溶液作參比溶液，所加人顯色劑及其它試劑的量，與試樣中的加入量應(yīng)一致。假如樣品中其它組分本身的顏色對(duì)測(cè)定有干擾，而所用顯色劑沒(méi)顏色，則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。

正確選擇合適的溶劑，對(duì)提高分析的精準(zhǔn)度起緊要作用。為減小溶劑中雜質(zhì)的影響，應(yīng)選擇高純度的溶劑；溶劑應(yīng)不與待測(cè)物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；待測(cè)物在溶劑中要有確定的溶解度；在測(cè)定的波長(zhǎng)范圍內(nèi)，溶劑本身沒(méi)有吸取，注意常用溶劑的最短可用波長(zhǎng)；當(dāng)用揮發(fā)性大的溶劑時(shí)，測(cè)量過(guò)程中吸取池應(yīng)加蓋。

2.2測(cè)試波長(zhǎng)的選擇

當(dāng)用分光光度計(jì)對(duì)溶液進(jìn)行測(cè)定時(shí)，首先需要選擇合適的測(cè)量波長(zhǎng)。選擇的依據(jù)是該被測(cè)溶液的吸取曲線。在一般情況下，我們總是選擇最大吸取波長(zhǎng)作為測(cè)量波長(zhǎng)，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下最大吸取峰很尖銳、吸取過(guò)大或相近有干擾存在，就不能選最大吸