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文檔簡介
病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事,只想現(xiàn)在的事?,F(xiàn)在有成就,以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰(zhàn)的人,心里必須充滿光明。19、學(xué)習(xí)的關(guān)鍵--重復(fù)。20、懦弱的人只會(huì)裹足不前,莽撞的人只能引為燒身,只有真正勇敢的人才能所向披靡。病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷16、自己選擇的路、跪著也要把它走完。17、一般情況下)不想三年以后的事,只想現(xiàn)在的事?,F(xiàn)在有成就,以后才能更輝煌。18、敢于向黑暗宣戰(zhàn)的人,心里必須充滿光明。19、學(xué)習(xí)的關(guān)鍵--重復(fù)。20、懦弱的人只會(huì)裹足不前,莽撞的人只能引為燒身,只有真正勇敢的人才能所向披靡。病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷王躍
臨床微免教研室什么是病毒?病毒(virus)是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性的非細(xì)胞型微生物。班主任工作是學(xué)校工作的關(guān)鍵,一個(gè)好的班主任就是一個(gè)優(yōu)秀的班集體,記得有一位班主任曾這樣說過,“有班主任在,學(xué)生能做好,這個(gè)班主任基本合格;班主任不在,學(xué)生能做好,這個(gè)班主任很優(yōu)秀;可是,如果班主任在,學(xué)生仍不能做好,那么這個(gè)班主任無疑是失敗的?!笔堑?,在農(nóng)村小學(xué)班級管理中更是如此。我國義務(wù)教育的重點(diǎn)在農(nóng)村,占有舉足輕重的地位,而農(nóng)村小學(xué)教學(xué)又是整個(gè)教育的關(guān)鍵和難點(diǎn),要搞好農(nóng)村小學(xué)教育必須注重班級管理。班級是學(xué)校的基本單位,而班主任是全班學(xué)生的組織者、領(lǐng)導(dǎo)者和教育者,是學(xué)生健康成長的引路人,是聯(lián)系班級與科任教師、溝通學(xué)校與學(xué)生家庭以及社會(huì)教育力量的橋梁。要管理好農(nóng)村小學(xué)的班級,必須得分析農(nóng)村小學(xué)班級的現(xiàn)狀,根據(jù)實(shí)際采取相關(guān)措施,農(nóng)村小學(xué)教育教學(xué)才能與時(shí)俱進(jìn),走上正規(guī)化、系統(tǒng)化的道路。在多年的工作中,我認(rèn)真探索班主任工作經(jīng)驗(yàn),總結(jié)得失。在這里我談?wù)勛约喝伟嘀魅我詠淼囊稽c(diǎn)膚淺的看法:一、現(xiàn)狀分析農(nóng)村小學(xué)雖在農(nóng)村,但管理越來越完善,大部分學(xué)生能遵守學(xué)校的規(guī)章制度,能完成學(xué)習(xí)上的任務(wù),但是少部分學(xué)生如果管理不好,將會(huì)對社會(huì)造成負(fù)面影響,農(nóng)村小學(xué)條件差,隨著學(xué)生人數(shù)的減少,使得一些教學(xué)點(diǎn)撤銷與合并,學(xué)生集中到相對路遠(yuǎn)的中心小學(xué),而現(xiàn)在的農(nóng)村小學(xué)生嬌慣脆弱,受不得點(diǎn)滴委屈,很多家長外出打工,孩子一般由目不識丁的爺爺奶奶看管,由于嬌慣,疏于管教,養(yǎng)成了一些壞習(xí)氣,生活不能自理,缺乏自覺性,學(xué)習(xí)馬虎、紀(jì)律松散,這就要求班主任必須從各方面,用多種方法盡早了解學(xué)生情況。從實(shí)際情況出發(fā),把特殊兒童引到正確的道路上來。因此,作為班主任,僅僅抓好學(xué)習(xí)成績做嚴(yán)師是不夠的,還要抓好生活做慈母。二、要尊重學(xué)生,關(guān)愛學(xué)生“沒有愛就沒有教育”,教書育人是教師的天職,而育人應(yīng)該是班主任的首要天職,如何育人?我認(rèn)為,愛學(xué)生是根本,農(nóng)村小學(xué)尤為重要,一些同學(xué)的父母或外出打工或忙于生意或整天種地,對孩子缺乏關(guān)愛,孩子屬于完全的“自由成長”,但作為老師我們不能失職,因?yàn)檫@是我們的工作。愛學(xué)生,就需要我們尊重學(xué)生的人格、興趣、愛好,了解學(xué)生習(xí)慣以及為人處世的態(tài)度、方式等,然后對癥下藥,幫助學(xué)生樹立健全、完善的人格。人格尊嚴(yán)是平等的。作為班主任,要努力做到能像一個(gè)真正的朋友一樣,欣賞學(xué)生,學(xué)會(huì)傾聽學(xué)生意見,接納他們的感受,包容他們的缺點(diǎn),分享他們的喜悅。被尊重是學(xué)生內(nèi)心的需要,是學(xué)生進(jìn)步的內(nèi)在動(dòng)力?!袄斫馐墙逃那疤?,尊重是教育成功的基礎(chǔ)。作過多年的班主任,我深刻的認(rèn)識到,當(dāng)一個(gè)學(xué)生在被你認(rèn)同、尊重后,他會(huì)給你意想不到的驚喜,包含在著驚喜當(dāng)中的是他們巨大的進(jìn)步。三、不要忌諱學(xué)生犯錯(cuò)作為教師,我們希望所有的學(xué)生是完美的,但這只是美好的愿望及我們的努力方向而已,沒有不犯錯(cuò)誤的學(xué)生,但我們在教書育人時(shí)應(yīng)該用發(fā)展的眼光去看待每位學(xué)生,應(yīng)該樹立允許學(xué)生犯錯(cuò)誤的教育觀念。但是寬容并不是縱容放任的自流,并不是缺乏必要的批評和指導(dǎo)。錯(cuò)應(yīng)該分大小,當(dāng)學(xué)生犯了小錯(cuò)誤時(shí),我們一定要冷靜處理,或嚴(yán)厲的批評或循循善誘的指導(dǎo),對于大錯(cuò),我們一定要以學(xué)校的規(guī)章制度為依據(jù),先與家長取得聯(lián)系,爭取家長的配合,從而達(dá)到學(xué)校、家庭齊抓共管的目的?,F(xiàn)在的學(xué)生很多都是獨(dú)生子女,他們的獨(dú)立意識非常強(qiáng),容易陷入迷茫,對外界事物很敏感,很容易走向極端。作為老師我們要?jiǎng)又郧?,曉之以理,如果我們老師不能寬容,過分苛求,我想我們的孩子也許就被我們不經(jīng)意的一句話或一個(gè)動(dòng)作給毀了,所以切記不要以愛的名義讓孩子的身心受傷。四、要嚴(yán)愛相濟(jì)嚴(yán)師出高徒,愛心固然是偉大的,但是絕對不是萬能的。不妨想想:孩子與父母間的與生俱來的血緣聯(lián)系是什么都沒有辦法阻礙的,我們能說他們的父母不愛他們嗎?可是為什么孩子有時(shí)還常常出現(xiàn)逆反心理與父母慪氣、鬧情緒呢?所以,對學(xué)生付出的愛是門藝術(shù),何時(shí)付出,怎樣付出,付出后怎樣讓學(xué)生明白自己的用心等等,這些都需要我們班主任用心去考慮去設(shè)計(jì)。如果僅有愛心,沒有嚴(yán)格要求也不行?,F(xiàn)在的孩子大都是不缺少愛的,或者說他們擁有的愛太多了,以至于在我們對他們付出愛時(shí),他們以為是理所當(dāng)然。所以,我想:很多時(shí)候,我們的教育離不開嚴(yán)格要求。當(dāng)然,嚴(yán)格要求之中,一定要包括愛的感情。我現(xiàn)在帶的班級我已連續(xù)任了四年的班主任,每一位同學(xué)深深的感受到我是多么嚴(yán)格,但沒有一個(gè)人責(zé)怪我,因?yàn)樗麄兏惺艿搅诉@種嚴(yán)愛相濟(jì)的好處,有著良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣,連年被評為模范班集體。五、多開展有意義的活動(dòng),創(chuàng)設(shè)情境,增強(qiáng)集體榮譽(yù)感農(nóng)村由于地理?xiàng)l件的限制,資源的短缺,開展的集體活動(dòng)相對較少,但近年來學(xué)校越來越重視各項(xiàng)活動(dòng)的開展,這就要求我們教師創(chuàng)造性地創(chuàng)設(shè)情境,開展豐富多彩的班集體活動(dòng)。我們確實(shí)借助學(xué)校團(tuán)委、少先隊(duì)開展了豐富多彩的活動(dòng),如:書畫競賽、作文大賽、猜謎大賽、拔河比賽、文藝匯演等,使學(xué)生在活動(dòng)中發(fā)展,懂得合作、幫助等優(yōu)秀品質(zhì),增強(qiáng)集體觀念和凝聚力。六、與家長密切配合隨著通訊技術(shù)的不斷發(fā)展,家訪已不是做好家校配合工作的唯一途徑。無論家長是否在家,都能做到及時(shí)的聯(lián)系,讓學(xué)校、家長、學(xué)生這條聯(lián)系的紐帶絲毫不脫節(jié),但由于農(nóng)家庭文化層次的特殊化,在家長會(huì)時(shí)應(yīng)給家長灌輸一些現(xiàn)代教育觀念,讓家長知道從哪些方面去教育孩子,怎樣教育孩子,并隨時(shí)與老師配合、了解學(xué)生在家里的生活、學(xué)習(xí)行為。這就要求定召開家長會(huì),開會(huì)時(shí),家長和教師用談話的方式互相回答老師或回答家長提出的問題,取得良好的效應(yīng),交流溝通多了,就能了解學(xué)生的思想動(dòng)態(tài)和行為表現(xiàn),及時(shí)解決他們的思想困惑,糾正其不良行為,讓不健康的思想或錯(cuò)誤的行為消滅在萌芽狀態(tài)??傊鳛橐幻W(xué)班主任,應(yīng)該認(rèn)真抓好班級管理工作,充分發(fā)揚(yáng)民主,讓全體學(xué)生積極參與管理,千方百計(jì)調(diào)動(dòng)他們的積極性和創(chuàng)造性,培養(yǎng)他們獨(dú)立自主的精神和自我管理的能力,逐步完成由教師管理向?qū)W生管理的過渡,真正扮演好引路人和協(xié)調(diào)者的角色。以適合時(shí)代的需求,適應(yīng)素質(zhì)教育的需要,創(chuàng)造出一種適合自己的新途徑。傳統(tǒng)的音樂課堂往往借助鋼琴等大器樂來組織教學(xué),很多時(shí)候都是教師的“表演秀”,忽視了農(nóng)村初中學(xué)生的音樂基礎(chǔ),脫離了農(nóng)村初中學(xué)生的音樂需求,久而久之學(xué)生對于音樂的學(xué)習(xí)自然會(huì)變得索然無味。而在農(nóng)村初中音樂課堂上引入小器樂,可以改善學(xué)生的音樂學(xué)習(xí),促使音樂課堂走向高效。那么,農(nóng)村初中小器樂進(jìn)音樂課堂究竟有哪些優(yōu)勢呢?一、激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣,提升音樂課堂實(shí)效傳統(tǒng)的音樂課堂教學(xué)往往忽視學(xué)生的主體地位,往往采用教師傳授的教學(xué)形式,很多時(shí)候就是單純地進(jìn)行歌唱教學(xué),學(xué)生成為被動(dòng)接受知識的容器,缺乏參與教學(xué)的主動(dòng)性,只能“知其然”而“不知其所以然”。從而日漸削弱學(xué)生對音樂知識的渴求,減少對音樂學(xué)習(xí)的興趣。而在音樂課堂教學(xué)中引入小器樂,可以極大地吸引學(xué)生的眼球,激發(fā)他們學(xué)習(xí)音樂的熱忱,再通過教師循循善誘地引導(dǎo),學(xué)生的音樂感知能力必然會(huì)有進(jìn)步,對音樂的節(jié)奏、音色等的感知與把握必然更為精準(zhǔn),對不同器樂所達(dá)到的藝術(shù)效果的理解必然會(huì)更為透徹,使得音樂課堂的實(shí)效性不斷得到加強(qiáng)。例如,把口琴這種價(jià)廉易學(xué)的小器樂引入農(nóng)村初中音樂課堂,能夠極大的愉悅學(xué)生,由于好奇他們定然想擺弄口琴,甚至希望通過自己的吹奏能夠形成優(yōu)美的旋律。源于這種心理,學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣定然高漲,學(xué)習(xí)積極性不言而喻。但是也容易出現(xiàn)因?yàn)閷W(xué)生好奇而演變成學(xué)生自主地胡亂吹奏,因此,運(yùn)用恰當(dāng)時(shí)機(jī)借助口琴展開音樂教學(xué)顯得非常關(guān)鍵。譬如,教師在上課之前可以暫且不將口琴發(fā)給學(xué)生,以免造成課堂混亂影響教學(xué),先可以通過教師對口琴的演奏激發(fā)出學(xué)生對于音樂的熱愛,讓優(yōu)美的旋律帶動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)情緒,然后再通過多媒體教學(xué)工具為學(xué)生展示一段口琴比賽錄像,這樣就更深一步地讓學(xué)生陷入到對口琴學(xué)習(xí)的欲望之中,在此基礎(chǔ)之上,教師再開始對口琴的有關(guān)知識及吹奏方式等向?qū)W生娓娓道來,讓學(xué)生了解一些基本的口琴知識和操作技巧。接著還可以利用口琴進(jìn)行一系列與之相關(guān)的有趣游戲,來增強(qiáng)音樂學(xué)習(xí)的樂趣。這樣,學(xué)生在口琴學(xué)習(xí)過程中不斷加深對音樂的理解,同時(shí),也更好地激發(fā)了他們音樂學(xué)習(xí)的興趣,促使音樂課堂變得更加有效。二、靈活運(yùn)用教學(xué)方法,豐富音樂教學(xué)形式傳統(tǒng)的音樂教學(xué),普遍都是進(jìn)行跟唱教學(xué),教師借助音樂教材中的歌曲對學(xué)生進(jìn)行演唱教學(xué),讓學(xué)生單純地唱出歌曲以達(dá)到完成教學(xué)任務(wù)的目的。教師示范、學(xué)生跟唱這種單一的教學(xué)方式使得學(xué)生在學(xué)習(xí)過程中不斷地抹殺音樂學(xué)習(xí)的興趣,在學(xué)習(xí)過程中學(xué)生也很難一下子就熟練掌握要領(lǐng)。而小器樂進(jìn)入音樂課堂以后打破了傳統(tǒng)的教學(xué)模式,課堂可以變得生動(dòng)活潑,有時(shí)候可以讓已經(jīng)熟練掌握部分小器樂的學(xué)生針對教學(xué)中的某個(gè)片段進(jìn)行全班演示,有時(shí)候可以分小組一起探究部分小器樂對音樂的作用,有時(shí)候可以現(xiàn)場讓學(xué)生比對不同的小器樂發(fā)聲的區(qū)別,甚至可以通過小器樂演奏讓學(xué)生直接找到音準(zhǔn),等等。因?yàn)橛行迈r事物的引入,加之這些器樂都是攜帶簡便且易購買的,學(xué)生的參與自然會(huì)熱情高漲,甚至可以帶動(dòng)學(xué)生課外對音樂知識的學(xué)習(xí)。例如,把口琴引入農(nóng)村初中音樂課堂,能夠大大改善傳統(tǒng)的單一教學(xué)模式。課上,老師不僅能夠唱給學(xué)生聽,還能夠進(jìn)行口琴演奏,這在一定程度上可以大大提高學(xué)生對于音樂學(xué)習(xí)的興趣,可以活躍課堂氣氛,改變了以往呆板的教學(xué)形式??谇俚难葑喾绞接挚梢远喾N多樣,學(xué)生可以自由組合,選擇自己喜歡的一種演奏形式進(jìn)行學(xué)習(xí),這樣充分?jǐn)U展了個(gè)別學(xué)生的表演空間,使得學(xué)生在充分自由的音樂課堂中真正學(xué)到音樂知識,這樣的教學(xué)形式更具有靈活性。三、引入不同器樂資源,豐富音樂教學(xué)內(nèi)容傳統(tǒng)的音樂教學(xué)純粹以跟唱教學(xué)為主,以讓學(xué)生會(huì)唱歌曲為教學(xué)目的,教學(xué)形式的單一導(dǎo)致了教學(xué)內(nèi)容的單一。而課堂上通過引入合適的小器樂,可以讓課堂的教學(xué)形式變得豐富多彩,同時(shí)也迎合了學(xué)生對于音樂的模仿等特點(diǎn),在更加真實(shí)的實(shí)踐教學(xué)中,學(xué)生可以更加深刻地領(lǐng)悟音樂,甚至能夠全身心地投入到音樂的感受中去。這種教學(xué)形式不僅培養(yǎng)了學(xué)生對于音樂的學(xué)習(xí)興趣,也?學(xué)生了解和掌握了一門小器樂演奏,還擴(kuò)大了學(xué)生的音樂視野,提升了其對音樂中相關(guān)知識的理解能力,豐富了音樂教學(xué)內(nèi)容。當(dāng)然,在實(shí)際選擇中,音樂教師必須依據(jù)教學(xué)內(nèi)容來確立使用何種小器樂,這樣可以更好地讓學(xué)生感受歌曲所要表現(xiàn)的主題,也能夠讓學(xué)生認(rèn)知到更多的小器樂品種,拓寬音樂學(xué)習(xí)視野,豐富音樂學(xué)習(xí)內(nèi)容。例如,把口琴引入農(nóng)村初中音樂課堂,學(xué)生在進(jìn)行口琴學(xué)習(xí)的過程中,也能夠?qū)σ魳返囊恍┲R進(jìn)行簡要了解,這種音樂學(xué)習(xí)方式更勝于傳統(tǒng)的跟唱模式,在學(xué)習(xí)和吹奏口琴的過程中能夠有效增強(qiáng)學(xué)生的節(jié)奏感,激發(fā)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的積極性,使得教學(xué)效果達(dá)到事半功倍的成效。將口琴引入到農(nóng)村初中音樂課堂中,轉(zhuǎn)變了傳統(tǒng)單一的教學(xué)形式,豐富了教學(xué)內(nèi)容,學(xué)生在這種輕松愉悅的課堂中進(jìn)行音樂學(xué)習(xí),有利于促進(jìn)其音樂才能的施展和音樂知識的掌握。四、不受任何時(shí)空限制,鞏固音樂知識學(xué)習(xí)課堂的學(xué)習(xí)時(shí)間總是有限的,教師無法保證每位學(xué)生通過音樂課學(xué)習(xí)就能完全理解音樂知識和牢固掌握音樂技能。再縱觀以往,由于農(nóng)村這一區(qū)域條件限制和一些家庭觀念所致,很多學(xué)生根本無法通過鋼琴等器樂進(jìn)行音樂知識再學(xué)習(xí),因而導(dǎo)致學(xué)生的音樂水平整體低下。而小器樂卻是可以彌補(bǔ)這樣的不足,攜帶方便,價(jià)格低廉,成為它的一大優(yōu)勢。學(xué)生也不必拘泥于時(shí)間和空間的限制,在任何時(shí)候、任何地點(diǎn)都可以吹奏小器樂,進(jìn)而提高自己的音樂素養(yǎng)。我們教師應(yīng)該鼓勵(lì)學(xué)生在課前或課后去熟悉某種小器樂,或者去甄別不同小器樂的發(fā)聲,或者通過學(xué)生參與社團(tuán)活動(dòng)等機(jī)會(huì)去認(rèn)知小器樂,還可以通過開展課題研究活動(dòng)去認(rèn)知,甚至是熟悉課本中所涉及的一些小器樂,對這些器樂有了一定的認(rèn)識和操作基礎(chǔ)之后,就可以有效鞏固課堂音樂學(xué)習(xí)。例如,教學(xué)中難免會(huì)有一些意外,造成教學(xué)時(shí)間分配不當(dāng),結(jié)果導(dǎo)致音樂知識遠(yuǎn)沒有達(dá)到預(yù)想的掌握程度。這個(gè)時(shí)候就需要學(xué)生自己在課外借助小器樂去消化課堂音樂知識或者技巧。譬如,借助口琴去演奏曲目,在不斷地演奏中理解課堂上提及的音樂要點(diǎn),領(lǐng)悟歌曲的內(nèi)涵。長期以來,農(nóng)村初中音樂課堂一直遵循著單一的教學(xué)模式,導(dǎo)致學(xué)生的音樂素養(yǎng)始終徘徊不前,但是小器樂的引入打破了這一傳統(tǒng)形式,大大激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,豐富了教學(xué)形式和內(nèi)容,拓寬了學(xué)習(xí)時(shí)間和空間,讓學(xué)生在興趣中自主進(jìn)行音樂知識的學(xué)習(xí),使得音樂學(xué)習(xí)更富實(shí)效性,其優(yōu)勢可謂不言而喻。【病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷王躍
臨床微免教研室什么是病毒?病毒(virus)是一類體積微小、結(jié)構(gòu)簡單、有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性的非細(xì)胞型微生物。
特點(diǎn):體積微小,只能在電鏡下觀察,能通過濾菌器無完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu):蛋白質(zhì)衣殼+核酸核心只有一種類型核酸:RNA或DNA有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生性,只能在活細(xì)胞內(nèi)生長以核酸復(fù)制的方式增殖,不能進(jìn)行二分裂繁殖抵抗力特殊:耐冷不耐熱,對化學(xué)因素的抵抗力較一般比細(xì)菌強(qiáng),耐甘油,對抗生素及磺胺類藥物不敏感,干擾素可抑制病毒復(fù)制。病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷方法病原學(xué)診斷
病毒分離培養(yǎng)顯微鏡檢查抗原檢測核酸檢測血清學(xué)診斷
抗體檢測IgM、IgG一、標(biāo)本采集、運(yùn)送和處理(一)標(biāo)本采集采集時(shí)間:盡早采集(越早越好)標(biāo)本種類:根據(jù)感染的部位、可能感染的病毒類型選擇標(biāo)本種類無菌采集標(biāo)本:必要時(shí)用抗生素或抗真菌藥處理抑制細(xì)菌生長
100U/ml青霉素+100μg/ml鏈霉素抑制真菌生長
2.5μg/ml二性霉素B或40μg/ml制霉菌素血清學(xué)檢查標(biāo)本:雙份血清(二)標(biāo)本的運(yùn)送與保存1.低溫送檢
4℃可保存數(shù)小時(shí),-70℃可長期保存
-10~-20℃下病毒易滅活,不可用于保存病毒標(biāo)本對冷凍標(biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融2.保濕送檢50%甘油鹽水保存送檢病毒轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基(virustransportmedium,VTM)含0.5%明膠或牛血清白蛋白的Hank’s液3.無菌送檢抑制細(xì)菌生長100U/ml青霉素+100μg/ml鏈霉素抑制真菌生長2.5μg/ml二性霉素B或40μg/ml制霉菌素二、病毒的形態(tài)學(xué)檢查1.光學(xué)顯微鏡檢查
主要觀察病變組織中的包涵體,某些大病毒也通過光學(xué)顯微鏡觀察。簡便、快速,但敏感性低,有些病毒感染細(xì)胞后不形成包涵體
狂犬病毒胞漿內(nèi)包涵體(內(nèi)基小體)巨細(xì)胞病毒胞核內(nèi)包涵體(貓頭鷹眼)2.電鏡及免疫電鏡檢查直接檢查標(biāo)本中的病毒顆粒,快速,可確診。但敏感性低(>106/ml)免疫電鏡敏感性高,但只能用于已知病毒的檢測)乙型肝炎病毒電鏡圖輪狀病毒電鏡圖三、病毒的分離與鑒定動(dòng)物接種組織培養(yǎng)標(biāo)本采集標(biāo)本處理后接種雞胚接種卵黃囊膜尿囊液羊膜腔液絨毛尿囊膜觀察囊膜病變血凝試驗(yàn)血凝抑制試驗(yàn)CPEEM包涵體空斑試驗(yàn)紅細(xì)胞吸附中和試驗(yàn)觀察發(fā)病抗原檢測抗體檢測病理檢查(一)病毒的分離組織培養(yǎng)雞胚培養(yǎng)動(dòng)物接種1.組織培養(yǎng)將人或動(dòng)物離體的活組織或分散的活細(xì)胞在體外人工控制的條件下使其生長繁殖的一種技術(shù)。組織培養(yǎng)的類型:(1)組織塊培養(yǎng)(2)器官培養(yǎng)人胚氣管-呼吸道病毒;人胚腸-腸道病毒(3)細(xì)胞培養(yǎng)最常用原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物新鮮組織(人胚腎等)→胰酶消化→營養(yǎng)液培養(yǎng)→單層細(xì)胞(原代細(xì)胞)原代細(xì)胞→胰酶消化→轉(zhuǎn)種培養(yǎng)(次代培養(yǎng)細(xì)胞)對病毒敏感,但制備費(fèi)時(shí)費(fèi)力,只能傳2~3代。原代和次代培養(yǎng)細(xì)胞二倍體細(xì)胞株原代細(xì)胞反復(fù)傳代(50~70代)仍保持二倍體染色體特性。病毒分離和疫苗制備的首選細(xì)胞株。傳代細(xì)胞株
來源于腫瘤細(xì)胞或突變的二倍體細(xì)胞,能在體外無限增殖。增殖快,不易衰老,易于傳代保存。常用于病毒的分離鑒定,但不能用于制備疫苗。優(yōu)點(diǎn)細(xì)胞來源廣、敏感細(xì)胞株多不受機(jī)體免疫因素的影響,個(gè)體差異小病變結(jié)果易于觀察可用于病毒的分離鑒定和制備疫苗及抗原缺點(diǎn)條件要求相對較高,有細(xì)胞培養(yǎng)條件的實(shí)驗(yàn)室才能做2.雞胚培養(yǎng)新鮮受精卵接種病毒38~39℃7~13d卵黃囊接種(流行性腦炎病毒)羊膜腔接種(流感病毒)尿囊腔接種(傳代培養(yǎng))絨毛尿囊膜接種(痘類病毒)絨毛尿囊膜表現(xiàn)有痘病毒的特異性損傷優(yōu)點(diǎn)雞胚來源充足,操作簡便,有多種接種途徑病毒增殖快,可收獲大量病毒雞胚本身是無菌的,對接種的病毒不產(chǎn)生抗體缺點(diǎn)易感病毒少,目前主要用于流感病毒、腮腺炎病毒、皰疹病毒和痘類病毒的分離培養(yǎng)。某些病毒在雞胚內(nèi)傳代后,其毒力下降3.動(dòng)物接種常用動(dòng)物小鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猴等。不同病毒對動(dòng)物的敏感性不同,根據(jù)病毒種類加以選擇。接種途徑按病毒侵襲部位選擇相應(yīng)的接種途徑:乙型腦炎病毒及狂犬病毒小鼠腦內(nèi)接種柯薩奇病毒乳鼠腹腔接種乙肝病毒黑猩猩靜脈注射流感病毒鼻腔滴種用途分離鑒定病毒,制備疫苗,制備抗血清優(yōu)點(diǎn)方法簡單、結(jié)果易于觀察選擇適當(dāng)?shù)慕臃N途徑,可出現(xiàn)類似人類的感染癥狀,有利于發(fā)病機(jī)制的研究缺點(diǎn)可自然帶毒或隱性感染,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果有個(gè)體差異很多病毒無敏感動(dòng)物,或感染后不出現(xiàn)明顯癥狀(二)病毒的鑒定病毒的初步鑒定動(dòng)物感染:敏感動(dòng)物范圍、潛伏期及發(fā)病情況雞胚接種:病毒對雞胚的敏感性、特殊病灶(如痘皰等)細(xì)胞培養(yǎng):病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中的表現(xiàn)理化性質(zhì)的測定:主要用于新病毒的鑒定病毒的最后鑒定血清學(xué)鑒定:中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)等。分離的新病毒,必須進(jìn)行系統(tǒng)的全面鑒定病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中的表現(xiàn)1.細(xì)胞代謝作用改變(培養(yǎng)液顏色變化)正常細(xì)胞代謝:培養(yǎng)液由紅變黃病毒增殖,抑制細(xì)胞代謝:培養(yǎng)液顏色不變或更紅
病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖后,使宿主細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生不同程度改變,稱為細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)。2.細(xì)胞形態(tài)改變細(xì)胞變圓、融合、腫脹、細(xì)胞空泡、核濃縮、形成嗜酸性或嗜堿性包涵體等。
某些病毒感染細(xì)胞后不出現(xiàn)CPE3.干擾現(xiàn)象(interference)當(dāng)兩種不同的病毒同時(shí)或先后感染同一細(xì)胞時(shí),其中一種病毒可抑制另一種病毒的增殖,稱為病毒的干擾現(xiàn)象。干擾現(xiàn)象也可被相應(yīng)特異性抗體抑制,稱為干擾抑制現(xiàn)象鼻V.無CPE鼻V.+Poli.V無CPEPoli.V有CPE4.紅細(xì)胞吸附及吸附抑制試驗(yàn)受感染的宿主細(xì)胞膜含病毒抗原(血凝素),可吸附雞、豚鼠或猴紅細(xì)胞。如果在培養(yǎng)瓶中加入相應(yīng)的血凝素抗血清,則不出現(xiàn)紅細(xì)胞吸附現(xiàn)象,即紅細(xì)胞吸附抑制試驗(yàn)陽性病毒的理化性質(zhì)測定主要用于新病毒的鑒定1.病毒的大小及形態(tài):電鏡直接觀察及測量2.核酸類型:用RNA酶或DNA酶處理病毒。3.乙醚敏感試驗(yàn):
有包膜病毒對乙醚敏感,經(jīng)乙醚作用后,失去感染性4.耐酸試驗(yàn)
腸道病毒耐酸,在pH3的環(huán)境下穩(wěn)定,鼻病毒不耐酸,在pH3的環(huán)境下被滅活病毒的血清學(xué)鑒定對初步鑒定為陽性的標(biāo)本均需要用血清學(xué)方法做最后鑒定。方法:血凝抑制試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)、ELISA等。四、病毒的血清學(xué)診斷
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