雞球蟲(chóng)種類ITS1-PCR鑒定技術(shù)

2雞球蟲(chóng)種類ITS1-PCR鑒定技術(shù)GB/T6682-2008,分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法.PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymeraseITS：內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（InternalTranscribedSpacer）DNA：脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicaciTAE：三羥甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸（Tbp：堿基對(duì)（Basepair）PCR儀、4℃高速低溫離心機(jī)、電泳槽，微量移液器、凝膠成像系統(tǒng)異硫氰酸胍、苯酚、氯仿、異戊醇、無(wú)水乙醇、70%酒精DNAMarkerDL-2000、2×TaqDNA聚合酶Mix、瓊脂糖、飽和食鹽水（1000m取2000個(gè)左右待檢雞球蟲(chóng)孢子化卵囊置于2mL離心管中，加入直徑為1mm的3），倒混勻，12000g離心10min，棄上清；向沉淀加入70%酒上清；室溫干燥后，加入50μL雙蒸水溶雞球蟲(chóng)的陽(yáng)性對(duì)照樣品和陰性對(duì)照樣品與待檢樣品同步、相同方法處理，進(jìn)行DNA抽提。另外，），凝膠電泳，電泳程序?yàn)楹銐?20V，時(shí)間30min，電泳結(jié)束后將凝膠置于凝膠成像系統(tǒng)下成像，觀7.2在實(shí)驗(yàn)成立的前提下，被檢樣品出現(xiàn)××種球蟲(chóng)的目的條帶，判為雞球蟲(chóng)××種7.3在實(shí)驗(yàn)成立的前提下，被檢樣品未出現(xiàn)××種球蟲(chóng)的目的條帶，判為雞球蟲(chóng)××種陰4EimeriaacervulinaEimeriabrunettiEimeriamaximaEimeriamitis上游bcEimerianecatrixEimeriapraecoxAATAAATAGCGCAAAATTAAGEimeriatenella5[1]GB/T1.1-2020,標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文[2]GB/T6682-2008,分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法.[3]SN/T4881—2017,雞球蟲(chóng)病檢疫技術(shù)規(guī)范.[4]LewAE,AndersonGR,Minchinternaltranscribedspacer1(ITS-1)sequencesofAustralianisolatesofEimeriaspeciesfromchickens[J].[5]HaugA,TheboP,MattssonJG.AsimplifiedprotocolformolecularidentificationofEimeriasp