10年高考生物真題專(zhuān)題分類(lèi)21細(xì)胞工程練習(xí)含答案

專(zhuān)題21細(xì)胞工程考點(diǎn)1植物細(xì)胞工程1.(2023山東,14,2分)利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖,可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說(shuō)法正確的是()A.利用該技術(shù)可獲得某些無(wú)法通過(guò)化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物B.植物細(xì)胞體積小,故不能通過(guò)該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)C.次生代謝物是植物所必需的,但含量少,應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)D.該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量答案A某些次生代謝物合成過(guò)程很復(fù)雜,難以通過(guò)化學(xué)合成途徑得到,而利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可獲得,A正確;可以利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大規(guī)模培養(yǎng)植物細(xì)胞,來(lái)大量獲取次生代謝物,B錯(cuò)誤;次生代謝物不是植物生長(zhǎng)所必需的,含量很低,C錯(cuò)誤;該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞增殖增加細(xì)胞數(shù)量,來(lái)提高次生代謝物的產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。2.(2023廣東,12,2分)人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進(jìn)行細(xì)胞融合,以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B.高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合C.融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D.雜交細(xì)胞可能具有生長(zhǎng)快速的優(yōu)勢(shì)答案C植物細(xì)胞的細(xì)胞壁會(huì)阻礙細(xì)胞的融合,故植物細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁,A正確;誘導(dǎo)植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法有物理法、化學(xué)法,化學(xué)法包括PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等,B正確;細(xì)胞融合時(shí)既有同種細(xì)胞的融合,也有不同種細(xì)胞的融合,后者才是所需要的雜交細(xì)胞,C錯(cuò)誤;雜交細(xì)胞具有雙方的遺傳物質(zhì),可能具有胡蘿卜細(xì)胞生長(zhǎng)快速的優(yōu)勢(shì),D正確。3.(2023河北,13,2分)植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是將單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行液體培養(yǎng)增殖的技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)基須經(jīng)無(wú)菌處理B.經(jīng)纖維素酶和果膠酶充分處理后,植物細(xì)胞團(tuán)分散為單個(gè)完整的懸浮細(xì)胞C.為使懸浮細(xì)胞正常生長(zhǎng),培養(yǎng)基須保持適當(dāng)?shù)臏囟取H和滲透壓D.利用懸浮培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)次生代謝物,可減少植物資源的消耗答案B為防止雜菌污染,植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中的外植體需要消毒,培養(yǎng)基及培養(yǎng)器具需要滅菌處理,A正確;纖維素酶和果膠酶處理后,植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體,B錯(cuò)誤;由于植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低,從植物組織中提取會(huì)大量破壞植物資源,利用植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)次生代謝物,可減少對(duì)植物資源的消耗,D正確。4.(2023江蘇,13,2分)研究者通過(guò)體細(xì)胞雜交技術(shù),探索利用條斑紫菜和擬線(xiàn)紫菜培育雜種紫菜。下列相關(guān)敘述正確的是()A.從食用紫菜的動(dòng)物消化道內(nèi)提取蛋白酶,用于去除細(xì)胞壁B.原生質(zhì)體需在低滲溶液中長(zhǎng)期保存,以防止過(guò)度失水而死亡C.檢測(cè)原生質(zhì)體活力時(shí)可用苯酚品紅或甲紫溶液處理,活的原生質(zhì)體被染色D.聚乙二醇促進(jìn)原生質(zhì)體融合后,以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志可識(shí)別雜種細(xì)胞答案D紫菜細(xì)胞壁的主要成分為多糖(纖維素、果膠),蛋白酶不能用于去除細(xì)胞壁,A錯(cuò)誤;原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁,獲得的原生質(zhì)體若處在低滲溶液中,會(huì)吸水漲破,B錯(cuò)誤;苯酚品紅或甲紫溶液主要用于染色體的染色,檢測(cè)原生質(zhì)體活力時(shí)常用臺(tái)盼藍(lán)染色,活的原生質(zhì)體不能被染色,C錯(cuò)誤;兩種紫菜細(xì)胞的葉綠體顏色不同,聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑可促進(jìn)原生質(zhì)體融合,對(duì)于雜種細(xì)胞可以葉綠體顏色等差異為標(biāo)志來(lái)進(jìn)行識(shí)別,D正確。易混易錯(cuò)題中所述兩種紫菜的葉綠體因色素的含量不同而呈現(xiàn)不同的顏色,故可在顯微鏡下觀(guān)察葉綠體的顏色來(lái)識(shí)別雜種細(xì)胞。5.(2022浙江1月選考,7,2分)農(nóng)作物秸稈的回收利用方式很多,其中之一是將秸稈碎化后作為食用菌的栽培基質(zhì)。碎化秸稈中纖維所起的作用,相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的()A.瓊脂+蔗糖B.蔗糖+激素C.激素+無(wú)機(jī)鹽D.無(wú)機(jī)鹽+瓊脂答案A碎化秸稈作為食用菌栽培基質(zhì)時(shí),其富含的纖維一方面可用于維持基質(zhì)的基本形態(tài),另一方面在食用菌菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中被大量降解并提供碳源,故其作用相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中固體培養(yǎng)基的瓊脂和蔗糖,故選A。6.(2022遼寧,14,2分)藍(lán)莓細(xì)胞富含花青素等多酚類(lèi)化合物。在藍(lán)莓組織培養(yǎng)過(guò)程中,外植體切口處細(xì)胞被破壞,多酚類(lèi)化合物被氧化成褐色醌類(lèi)化合物,這一過(guò)程稱(chēng)為褐變。褐變會(huì)引起細(xì)胞生長(zhǎng)停滯甚至死亡,導(dǎo)致藍(lán)莓組織培養(yǎng)失敗。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.花青素通常存在于藍(lán)莓細(xì)胞的液泡中B.適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率以減少褐變C.在培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑以減少褐變D.宜選用藍(lán)莓成熟葉片為材料制備外植體答案D花青素等多酚類(lèi)化合物通常存在于植物細(xì)胞的液泡中,在不同pH條件下使花和果實(shí)呈現(xiàn)不同的顏色,A正確;在組織培養(yǎng)過(guò)程中,適當(dāng)增加培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基的頻率,可以剔除易褐變的細(xì)胞,減輕多酚類(lèi)物質(zhì)對(duì)培養(yǎng)物的毒害作用,B正確;培養(yǎng)基中添加合適的抗氧化劑可以抑制多酚類(lèi)化合物被氧化成褐色醌類(lèi)化合物,從而減少褐變,C正確;藍(lán)莓成熟葉片中央液泡中富含多酚類(lèi)化合物,易發(fā)生褐變,D錯(cuò)誤。7.(2022浙江6月選考,23,2分)下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.用自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行組培(組織培養(yǎng))須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒B.培養(yǎng)瓶用專(zhuān)用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶?jī)?nèi)外的氣體交換C.組培苗鍛煉時(shí)采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是蛭石帶菌量低且營(yíng)養(yǎng)豐富D.不帶葉片的菊花幼莖切段可以通過(guò)器官發(fā)生的途徑形成完整的菊花植株答案D植物組織培養(yǎng)中對(duì)自然生長(zhǎng)的莖進(jìn)行消毒的步驟為“洗滌靈稀釋液浸泡2min→流水沖凈→75%酒精消毒30s→流水沖洗→10%次氯酸鈉溶液消毒10min或0.1%氯化汞溶液消毒5~7min→無(wú)菌水多次沖洗”,A錯(cuò)誤;用專(zhuān)用封口膜封口的目的是防止外界雜菌侵入,且保證瓶?jī)?nèi)外的氣體交換,B錯(cuò)誤;組培苗鍛煉時(shí)采用蛭石作為栽培基質(zhì)的原因是其具有透氣性和保水性,C錯(cuò)誤。易錯(cuò)辨析器官發(fā)生途徑和體細(xì)胞胚發(fā)生途徑器官發(fā)生途徑為外植體→愈傷組織→激素誘導(dǎo)出組織器官(可以先誘導(dǎo)出芽,再誘導(dǎo)出根)→完整植株;體細(xì)胞胚發(fā)生途徑為外植體→愈傷組織→激素誘導(dǎo)出胚狀體→完整植株。8.(2021北京,7,2分)研究者擬通過(guò)有性雜交的方法將簇毛麥(2n=14)的優(yōu)良性狀導(dǎo)入普通小麥(2n=42)中。用簇毛麥花粉給數(shù)以千計(jì)的小麥小花授粉,10天后只發(fā)現(xiàn)兩個(gè)雜種幼胚,將其離體培養(yǎng),產(chǎn)生愈傷組織,進(jìn)而獲得含28條染色體的大量雜種植株。以下表述錯(cuò)誤的是()A.簇毛麥與小麥之間存在生殖隔離B.培養(yǎng)過(guò)程中幼胚細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化和再分化C.雜種植株減數(shù)分裂時(shí)染色體能正常聯(lián)會(huì)D.雜種植株的染色體加倍后能產(chǎn)生可育植株答案C簇毛麥與普通小麥?zhǔn)莾蓚€(gè)物種,存在生殖隔離,A正確;在將雜種幼胚離體培養(yǎng)時(shí),幼胚先脫分化形成愈傷組織,繼而再分化出根、莖和葉,長(zhǎng)成新植株,B正確;形成的新植株含28條染色體,其中有7條染色體來(lái)自簇毛麥,有21條染色體來(lái)自普通小麥,在減數(shù)分裂過(guò)程中,染色體不能正常聯(lián)會(huì),C錯(cuò)誤;雜種植株的染色體加倍后,每一條染色體都有與其相同的染色體,在減數(shù)分裂過(guò)程中,染色體可以正常聯(lián)會(huì),進(jìn)而產(chǎn)生可育后代,D正確。9.(2020山東,13,2分)兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂,形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出,未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理,將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種,過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B.過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C.過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D.耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段答案C分析題圖可知,①過(guò)程是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,該過(guò)程需要使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞,A正確;結(jié)合題干信息分析,過(guò)程②的目的是使中間偃麥草原生質(zhì)體中的染色體發(fā)生斷裂,斷裂后的染色體片段可能能保留在雜種植株中,從而可能培養(yǎng)出耐鹽小麥,B正確;過(guò)程③是原生質(zhì)體融合的過(guò)程,該過(guò)程必須借助一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工誘導(dǎo),而人工誘導(dǎo)的方法有物理法和化學(xué)法,滅活的病毒用于動(dòng)物細(xì)胞融合,C錯(cuò)誤;結(jié)合題干信息和題圖中②的處理,可推斷耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段,D正確。10.(2019北京理綜,4,6分)甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀(guān)賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株,再將二者雜交后得到F1,結(jié)合單倍體育種技術(shù),培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種。以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述,錯(cuò)誤的是()A.將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞B.通過(guò)接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定C.調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株D.經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體答案D本題借助育種相關(guān)知識(shí),考查考生運(yùn)用所學(xué)知識(shí),分析某些生物學(xué)問(wèn)題、作出合理判斷的能力;試題通過(guò)抗甲、乙病害的植物新品種的培育,體現(xiàn)了科學(xué)思維素養(yǎng)中的演繹與推理要素?；蚬こ讨行鑼⒑心康幕蚝蜆?biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,A正確;通過(guò)接種病原體,可在個(gè)體生物學(xué)水平上對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定,B正確;在花粉離體培養(yǎng)過(guò)程中,生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例影響脫分化與再分化過(guò)程,調(diào)整培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例有利于獲得F1花粉再生植株,C正確;經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為單倍體,D錯(cuò)誤。11.(2018天津理綜,2,6分)蘆筍是雌雄異株植物,雄株性染色體為XY,雌株為XX;其幼莖可食用,雄株產(chǎn)量高。以下為兩種培育雄株的技術(shù)路線(xiàn)。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.形成愈傷組織可通過(guò)添加植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行誘導(dǎo)B.幼苗乙和丙的形成均經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程C.雄株丁的親本的性染色體組成分別為XY、XXD.與雄株甲不同,雄株丁培育過(guò)程中發(fā)生了基因重組答案C本題以考查育種的相關(guān)知識(shí)為背景,考查學(xué)生獲得信息、解決問(wèn)題的能力,體現(xiàn)了對(duì)科學(xué)思維素養(yǎng)中歸納與概括、模型與建模等方法解決生命現(xiàn)象及規(guī)律的考查。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,可利用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)愈傷組織的形成與分化,A正確;由花粉形成單倍體幼苗乙、丙的過(guò)程包括脫分化、再分化兩個(gè)階段,B正確;雄株丁的親本乙、丙由雄株的花粉經(jīng)單倍體育種培育而來(lái),只有植物乙、丙的性染色體組成為XX、YY時(shí),雄株丁的性染色體組成才為XY,C錯(cuò)誤;雄株丁的培育過(guò)程中經(jīng)歷了減數(shù)分裂產(chǎn)生花粉的過(guò)程,該過(guò)程中發(fā)生了基因重組,D正確。知識(shí)拓展植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的分化方向。生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量比值高時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的形成。12.(2018江蘇單科,8,2分)花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。如圖是某二倍體植物花藥育種過(guò)程的示意圖,下列敘述正確的是()A.為了防止微生物污染,過(guò)程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30minB.過(guò)程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化C.過(guò)程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體D.過(guò)程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上答案C本題主要考查花藥離體培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)。為了防止微生物污染,過(guò)程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡約30s,A錯(cuò)誤;過(guò)程②的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值適中,且生長(zhǎng)素含量高于細(xì)胞分裂素時(shí),有利于根的分化,B錯(cuò)誤;進(jìn)行過(guò)程③的愈傷組織經(jīng)過(guò)了秋水仙素的處理,故其分化后的植株中可篩選獲得純合的二倍體,C正確;經(jīng)煉苗后的幼苗是能進(jìn)行光合作用且能獨(dú)立進(jìn)行代謝的植株,故幼苗的生長(zhǎng)基質(zhì)中不用添加蔗糖和多種植物激素,D錯(cuò)誤。13.(2013江蘇單科,11,2分)某種極具觀(guān)賞價(jià)值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植,可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗,下列技術(shù)中不能選用的是()A.利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B.采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C.采集幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上D.采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)答案B本題考查對(duì)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗的多種技術(shù)手段的分析。為了使優(yōu)質(zhì)苗的生物性狀不發(fā)生性狀分離,可采用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗,也可采用將幼芽嫁接到合適的其他種類(lèi)植物體上的方法或用莖尖或幼葉等部位的組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)苗;花粉粒是減數(shù)分裂的產(chǎn)物,利用花粉粒離體培養(yǎng)得到的是單倍體苗,其高度不育,且會(huì)發(fā)生性狀分離,因此B項(xiàng)方案不能選用。14.(2023浙江1月選考,24,15分)甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng),乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究,基本過(guò)程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定,最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)根據(jù)研究目標(biāo),在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前,應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備的能力。為了便于觀(guān)察細(xì)胞融合的狀況,通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合,若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體,則乙植物可用幼苗的為外植體。

(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為和果膠,在獲取原生質(zhì)體時(shí),常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁處理。在原生質(zhì)體融合前,需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理,分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的失活。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用計(jì)數(shù),確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1∶1混合后,通過(guò)添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合;一定時(shí)間后,加入過(guò)量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋,稀釋的目的是。

(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合,在凝固前倒入培養(yǎng)皿,融合原生質(zhì)體分散固定在平板中,并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于。下列各項(xiàng)中能說(shuō)明這些愈傷組織只能來(lái)自雜種細(xì)胞的理由是哪幾項(xiàng)?(A.甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活,無(wú)法正常生長(zhǎng)、分裂B.同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂C.培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì),只有雜種細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、分裂D.雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂)

(4)愈傷組織經(jīng)可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出,直接發(fā)育形成再生植株。

(5)用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DNA序列a,乙植物細(xì)胞質(zhì)具有特異性DNA序列b;M1、M2為序列a的特異性引物,N1、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)驗(yàn)思路:Ⅰ.提取純化再生植株的總DNA,作為PCR擴(kuò)增的。

Ⅱ.將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系,為特異性引物,擴(kuò)增序列a;用同樣的方法擴(kuò)增序列b。

Ⅲ.得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)后,若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的個(gè)條帶,則可初步確定再生植株來(lái)自雜種細(xì)胞。

答案(1)再生植株葉片(2)纖維素細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核血細(xì)胞計(jì)數(shù)板終止原生質(zhì)體融合(3)一個(gè)融合原生質(zhì)體ABD(4)再分化根和芽(5)模板M1、M2電泳1解析(1)根據(jù)研究目標(biāo)需要得到再生植株,故進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交操作前,應(yīng)先檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備再生植株的能力。為了便于觀(guān)察細(xì)胞融合的狀況,通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合,若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體,則乙植物可采用綠色幼苗的葉片為外植體。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠。為使獲得的雜種細(xì)胞具有耐鹽堿效應(yīng)(甲植物的細(xì)胞核基因)和高產(chǎn)效應(yīng)(乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因),在原生質(zhì)體融合前要分別使甲原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)和乙原生質(zhì)體的細(xì)胞核失活。融合后的原生質(zhì)體密度可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法測(cè)定。用適宜濃度的PEG促進(jìn)融合后,需加入過(guò)量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋,通過(guò)降低PEG濃度,終止原生質(zhì)體融合。(3)由于甲、乙原生質(zhì)體分別破壞了細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核,未融合的原生質(zhì)體和同種融合的原生質(zhì)體都不能正常生長(zhǎng)、分裂,只有雜種細(xì)胞具有完整的核質(zhì)結(jié)構(gòu),可以正常生長(zhǎng)、分裂,因此這些愈傷組織只能來(lái)自雜種細(xì)胞。(4)愈傷組織經(jīng)再分化可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出根和芽,直接發(fā)育形成再生植株。(5)PCR技術(shù)鑒定再生植株時(shí),再生植株的總DNA作為PCR擴(kuò)增的模板,使用特異性引物M1和M2獲得擴(kuò)增序列a,使用特異性引物N1和N2獲得擴(kuò)增序列b,若兩個(gè)擴(kuò)增序列在凝膠中均只有一個(gè)條帶,則可初步確定再生植株只含甲的細(xì)胞核基因和乙的細(xì)胞質(zhì)基因,即來(lái)自雜種細(xì)胞。15.(2023新課標(biāo),35,12分)根瘤菌與豆科植物之間是互利共生關(guān)系,根瘤菌侵入豆科植物根內(nèi)可引起根瘤的形成,根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。為了尋找抗逆性強(qiáng)的根瘤菌,某研究小組做了如下實(shí)驗(yàn):從鹽堿地生長(zhǎng)的野生草本豆科植物中分離根瘤菌;選取該植物的莖尖為材料,通過(guò)組織培養(yǎng)獲得試管苗(生根試管苗);在實(shí)驗(yàn)室中探究試管苗根瘤中所含根瘤菌的固氮能力。回答下列問(wèn)題。(1)從豆科植物的根瘤中分離根瘤菌進(jìn)行培養(yǎng),可以獲得純培養(yǎng)物,此實(shí)驗(yàn)中的純培養(yǎng)物是。

(2)取豆科植物的莖尖作為外植體,通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以獲得豆科植物的試管苗。外植體經(jīng)誘導(dǎo)形成試管苗的流程是:外植體愈傷組織試管苗。其中①表示的過(guò)程是,②表示的過(guò)程是。由外植體最終獲得完整的植株,這一過(guò)程說(shuō)明植物細(xì)胞具有全能性。細(xì)胞的全能性是指。

(3)研究小組用上述獲得的純培養(yǎng)物和試管苗為材料,研究接種到試管苗上的根瘤菌是否具有固氮能力,其做法是將生長(zhǎng)在培養(yǎng)液中的試管苗分成甲、乙兩組,甲組中滴加根瘤菌菌液,讓試管苗長(zhǎng)出根瘤。然后將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入的培養(yǎng)液中培養(yǎng),觀(guān)察兩組試管苗的生長(zhǎng)狀況,若甲組的生長(zhǎng)狀況好于乙組,則說(shuō)明。

(4)若實(shí)驗(yàn)獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌,可通過(guò)發(fā)酵工程獲得大量根瘤菌,用于生產(chǎn)根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用微生物肥料的作用是(答出2點(diǎn)即可)。

答案(1)根瘤菌(2)脫分化再分化細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能(3)不含氮根瘤菌具有固氮能力(4)增進(jìn)土壤肥力,改良土壤結(jié)構(gòu),促進(jìn)植物生長(zhǎng)解析(1)根據(jù)題干信息“分離根瘤菌進(jìn)行培養(yǎng),可以獲得純培養(yǎng)物”可知,純培養(yǎng)物是根瘤菌。(2)已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過(guò)脫分化,即失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能,轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞,進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊,即愈傷組織。愈傷組織經(jīng)再分化形成芽、根等器官,發(fā)育成試管苗。細(xì)胞全能性的概念見(jiàn)答案。(3)具有固氮能力的固氮菌可以固定空氣中的氮?dú)?為植物的生長(zhǎng)提供氮元素,故應(yīng)將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入不含氮的培養(yǎng)液中培養(yǎng),若甲組生長(zhǎng)狀況更好,則說(shuō)明甲組中滴加的根瘤菌具有固氮能力。(4)見(jiàn)答案。16.[2022浙江6月選考,29(二),8分]回答與植物轉(zhuǎn)基因和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題:(1)在用農(nóng)桿菌侵染的方法進(jìn)行植物轉(zhuǎn)基因過(guò)程中,通常要使用抗生素,其目的一是抑制生長(zhǎng),二是篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞。當(dāng)選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度時(shí),通常會(huì)出現(xiàn)較多假陽(yáng)性植株,因此在轉(zhuǎn)基因前需要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的檢測(cè)。

(2)為提高培育轉(zhuǎn)基因植株的成功率,植物轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的能力和遺傳穩(wěn)定性。對(duì)培養(yǎng)的受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的早期檢測(cè),可通過(guò)觀(guān)察細(xì)胞內(nèi)形態(tài)是否改變進(jìn)行判斷,也可通過(guò)觀(guān)察分裂期染色體的,分析染色體組型是否改變進(jìn)行判斷。

(3)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性表達(dá)程度的高低主要與受體的基因型、培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)和長(zhǎng)短等有關(guān)。同時(shí)也與受體的取材有關(guān),其中受體為時(shí)全能性表達(dá)能力最高。

答案(每空1分)(1)農(nóng)桿菌過(guò)低敏感性(2)再生細(xì)胞核形態(tài)特征和數(shù)量(3)培養(yǎng)時(shí)間受精卵解析(1)農(nóng)桿菌一般不攜帶抗生素抗性基因,基因工程操作中,常將目的基因插入Ti質(zhì)粒(經(jīng)人工改造,含抗生素抗性基因)的T-DNA中,再將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中,這樣使用含相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)可以抑制不含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌的生長(zhǎng),從而篩選出攜帶重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。當(dāng)選擇培養(yǎng)基中抗生素濃度過(guò)低時(shí),會(huì)導(dǎo)致抗生素不足以抑制不含抗性基因的細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖,從而出現(xiàn)較多的假陽(yáng)性植株,因此在轉(zhuǎn)基因前需要對(duì)受體進(jìn)行抗生素的敏感性檢測(cè)。(2)植物轉(zhuǎn)基因受體獲得目的基因后需培養(yǎng)成完整植株并可使目的基因穩(wěn)定存在并遺傳給下一代等,因此轉(zhuǎn)基因受體需具有較強(qiáng)的再生能力和遺傳穩(wěn)定性。受體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)主要分布在細(xì)胞核中,通過(guò)觀(guān)察細(xì)胞核的形態(tài)是否改變,可對(duì)受體細(xì)胞的遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行早期檢測(cè);染色體是遺傳物質(zhì)的主要載體,通過(guò)觀(guān)察分裂期染色體的形態(tài)特征和數(shù)量,分析染色體組型是否改變也可對(duì)受體細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性進(jìn)行早期檢測(cè)。(3)植物轉(zhuǎn)基因受體全能性的表達(dá)程度受多種因素的影響,如培養(yǎng)環(huán)境、繼代次數(shù)、培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)短、受體的取材部位和基因型等。一般來(lái)說(shuō),選取的受體分化程度越低,全能性表達(dá)能力越高,選擇受精卵作為受體時(shí)全能性表達(dá)能力最高。17.[2021浙江1月選考,29(二),8分]三葉青為蔓生的藤本植物,以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非?？量?以及生態(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖,目前我國(guó)野生三葉青已十分珍稀。(1)為保護(hù)三葉青的多樣性和保證藥材的品質(zhì),科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理,利用技術(shù),實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。

(2)依據(jù)基因工程原理,利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片,葉片產(chǎn)生酚類(lèi)化合物,誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成和限制性核酸內(nèi)切酶等,進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段(T-DNA)。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上,T-DNA上rol系列基因表達(dá),產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素,促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成,再分化形成毛狀根。

(3)剪取毛狀根,轉(zhuǎn)入含頭孢類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次培養(yǎng),培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng),通過(guò)控制搖床的和溫度,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的,獲得大量毛狀根,用于提取藥用成分。

答案(1)遺傳間種(2)DNA聚合酶愈傷組織(3)繼代殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)速營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度解析(1)三葉青具有遺傳多樣性。在林下種植三葉青,利用了間種技術(shù)。(2)利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片,葉片產(chǎn)生的酚類(lèi)化合物可誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因的表達(dá),進(jìn)而能從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段(T-DNA片段),因此推測(cè)vir系列基因表達(dá)形成了DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶等。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上后,其上的rol系列基因表達(dá)產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素,促使葉片細(xì)胞先脫分化形成愈傷組織,然后再分化形成毛狀根。(3)將剪取的毛狀根轉(zhuǎn)入含頭孢類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次繼代培養(yǎng),培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌。將毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng),通過(guò)控制搖床的轉(zhuǎn)速和溫度,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的營(yíng)養(yǎng)元素和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度,可獲得大量毛狀根,用于提取藥用成分。18.(2020天津,15,10分)某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),參照品種B的最佳激素配比(見(jiàn)下表)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。品種B組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度(μmol/L)生長(zhǎng)素濃度(μmol/L)Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ誘導(dǎo)生根m3n3據(jù)表回答:(1)Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體,原因是。

(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是階段。

(3)為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度,參照品種B的激素配比(m1>2.0),以0.5μmol/L為梯度,設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn),細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為μmol/L。

(4)Ⅲ階段時(shí),科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果,原因是處理幼芽時(shí),選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為,選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為。

(5)在階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理,最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。

答案(1)細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(3)m1+1.0(4)浸泡法(長(zhǎng)時(shí)間處理)沾蘸法(短時(shí)間處理)(5)Ⅰ解析(1)在植物組織培養(yǎng)時(shí),一般選莖尖、幼葉等作為外植體的原因是這些部位的細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)其脫分化形成愈傷組織。(2)細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),在形成愈傷組織、幼芽、根的過(guò)程中都有細(xì)胞分化,所以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段都發(fā)生了基因的選擇性表達(dá)。(3)為了確定品種A的Ⅰ階段細(xì)胞分裂素的最適濃度,以品種B的激素配比為參照,m1>2.0,以0.5μmol/L為梯度設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平實(shí)驗(yàn),即m1-1.0、m1-0.5、m1、m1+0.5、m1+1.0,所以最高濃度為m1+1.0。(4)生長(zhǎng)素處理幼芽生根的方法有很多,比較簡(jiǎn)單的兩類(lèi)方法是浸泡法和沾蘸法,前者是把幼芽浸泡在配好的生長(zhǎng)素溶液中,要求生長(zhǎng)素溶液的濃度較低;后者是要求幼芽在濃度較高的生長(zhǎng)素溶液中蘸一下,處理時(shí)間較短。(5)秋水仙素誘導(dǎo)多倍體的原理主要是抑制紡錘體的形成,導(dǎo)致染色體不能移向兩極,從而引起染色體數(shù)目加倍,形成多倍體。Ⅰ階段形成愈傷組織的過(guò)程中細(xì)胞發(fā)生了脫分化,分裂能力較強(qiáng),所以更易獲得多倍體。19.[2020浙江7月選考,29(二),9分]回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題:(1)天然農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上存在著一段DNA片段(T-DNA),該片段可轉(zhuǎn)移并整合到植物細(xì)胞染色體上。為便于轉(zhuǎn)基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選,設(shè)計(jì)重組Ti質(zhì)粒時(shí),應(yīng)考慮T-DNA中要有可表達(dá)的目的基因,還需要有可表達(dá)的。

(2)結(jié)合植物克隆技術(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn),為獲得轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性、及易被農(nóng)桿菌侵染等特點(diǎn)的植物材料。若植物材料對(duì)農(nóng)桿菌不敏感,則可用的轉(zhuǎn)基因方法。

(3)利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過(guò)程與利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織再獲得叢狀苗的過(guò)程相比,前者總培養(yǎng)時(shí)間,且不經(jīng)歷過(guò)程,因而其遺傳性狀穩(wěn)定,是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。

(4)與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,配制轉(zhuǎn)基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時(shí),可根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)添加,促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成,最終形成根。還可通過(guò)改變MS培養(yǎng)基促進(jìn)生根,如(A.提高蔗糖濃度B.降低培養(yǎng)基濃度C.提高大量元素濃度D.不添加瓊脂)。

答案(1)抗性基因(2)全能性表達(dá)充分顯微注射(3)短脫分化(4)生長(zhǎng)素根的分生組織B解析(1)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因植物時(shí),為便于檢測(cè)Ti質(zhì)粒中的T-DNA片段是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞,T-DNA中既要有可表達(dá)的目的基因,也要有可表達(dá)的抗性基因。(2)為獲得轉(zhuǎn)基因植株,農(nóng)桿菌侵染的宿主一般要選用易被農(nóng)桿菌侵染,同時(shí)性狀優(yōu)良、具有較高的遺傳穩(wěn)定性和全能性表達(dá)充分的植物材料。轉(zhuǎn)基因植株培育中,還可采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因。(3)利用帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗的過(guò)程不經(jīng)歷愈傷組織階段,因此不經(jīng)歷脫分化的過(guò)程,其總培養(yǎng)時(shí)間較短。(4)與發(fā)芽培養(yǎng)基相比,生根培養(yǎng)基中可適當(dāng)添加生長(zhǎng)素,從而促進(jìn)叢狀苗基部細(xì)胞分裂形成愈傷組織并進(jìn)一步分化形成根的分生組織,最終形成根。還可通過(guò)降低MS培養(yǎng)基的濃度促進(jìn)生根,植物通過(guò)根的生長(zhǎng)從外界獲取更多養(yǎng)分。20.(2019課標(biāo)全國(guó)Ⅲ,38,15分)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過(guò)程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有。

(2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是。

(3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的培養(yǎng)基,其原因是。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過(guò)細(xì)胞的過(guò)程,最終可形成試管苗。

(4)步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng),其作用是。

(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的,這種繁殖方式屬于繁殖。

答案(1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因)(2)形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織(3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同分化(或答:再分化)(4)誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用(5)遺傳特性無(wú)性解析本題借助胡蘿卜根組織塊的組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),考查考生理論聯(lián)系實(shí)際、綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決生物學(xué)問(wèn)題的能力;試題通過(guò)對(duì)組織培養(yǎng)流程的分析考查了科學(xué)思維素養(yǎng)。(1)植物細(xì)胞具有全能性,利用已分化的植物細(xì)胞通過(guò)植物組織培養(yǎng)可以培養(yǎng)成完整植株。(2)形成層細(xì)胞分化程度低,全能性較高,更容易誘導(dǎo)形成愈傷組織,進(jìn)而獲得完整植株。(3)愈傷組織的形成和試管苗的分化需要不同的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例,因此誘導(dǎo)愈傷組織的形成階段到分化階段需要不同的培養(yǎng)基。愈傷組織通過(guò)再分化過(guò)程,最終可形成試管苗。(4)葉綠素的形成需要光,試管苗的發(fā)育也需要光,因此試管苗的誘導(dǎo)階段需要光照。(5)通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得植株的方式是無(wú)性繁殖的一種,可以保持原品種的遺傳特性。知識(shí)拓展組織培養(yǎng)得到植株的兩種常見(jiàn)途徑(1)愈傷組織形成后經(jīng)誘導(dǎo)發(fā)芽形成叢狀苗,再生根形成植株;(2)愈傷組織形成后經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)得到單個(gè)細(xì)胞,誘導(dǎo)形成胚狀體再形成植株。21.(2017海南單科,31,15分)甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng),均能獲得試管苗,其原理是。

(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。

(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)形成的。

(4)若該種植物是一種雜合體的名貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,可用組織培養(yǎng)方法繁殖,在培養(yǎng)時(shí),(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體,原因是。

答案(1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性,在一定條件下能發(fā)育成完整的植株(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核(3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素脫分化(4)不能對(duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō),其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株解析(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。若用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗,細(xì)胞必須具有完整的細(xì)胞核,才具有發(fā)育為完整個(gè)體的一整套遺傳信息。(3)影響植物組織培養(yǎng)的兩種主要激素是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)脫分化形成的。(4)對(duì)雜合體而言,花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同,故組織培養(yǎng)得到的植株基因型不同于原植株,不能保留親本性狀。22.(2015天津理綜,7,15分)DHA對(duì)腦神經(jīng)發(fā)育至關(guān)重要。以A、B兩種單細(xì)胞真核藻為親本,利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻。兩種藻特性如下表。親本藻優(yōu)勢(shì)代謝類(lèi)型生長(zhǎng)速率[g/(L·天)]固體培養(yǎng)基上藻落直徑DHA含量(‰)A藻自養(yǎng)0.06小0.7B藻異養(yǎng)0.14大無(wú)據(jù)表回答:(1)選育的融合藻應(yīng)具有A藻與B藻的優(yōu)點(diǎn)。

(2)誘導(dǎo)融合前需用纖維素酶處理兩種藻,其目的是獲得。

(3)通過(guò)以下三步篩選融合藻,步驟可淘汰B藻,步驟可淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落,再通過(guò)步驟獲取生產(chǎn)所需的融合藻。

步驟a:觀(guān)察藻落的大小步驟b:用不含有機(jī)碳源(碳源——生物生長(zhǎng)的碳素來(lái)源)的培養(yǎng)基進(jìn)行光照培養(yǎng)步驟c:測(cè)定DHA含量(4)以獲得的融合藻為材料進(jìn)行甲、乙、丙三組試驗(yàn),結(jié)果如圖。①甲組條件下,融合藻產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器是;丙組條件下產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是。

②與甲、丙兩組相比,乙組融合藻生長(zhǎng)速率較快,原因是在該培養(yǎng)條件下。

甲、乙兩組DHA產(chǎn)量均較高,但實(shí)際生產(chǎn)中往往采用甲組的培養(yǎng)條件,其原因是。

答案(1)產(chǎn)生DHA、自養(yǎng)特性快速生長(zhǎng)(2)原生質(zhì)體(3)bac(4)①線(xiàn)粒體、葉綠體線(xiàn)粒體②融合藻既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)融合藻利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物即能生長(zhǎng),不需添加葡萄糖,可降低成本,也可防止雜菌生長(zhǎng)解析(1)根據(jù)題干信息“利用細(xì)胞融合技術(shù)選育高產(chǎn)DHA融合藻”及表中信息可推斷,融合藻應(yīng)既具有A藻的“自養(yǎng)”和“產(chǎn)DHA”的特點(diǎn),又具有B藻“快速生長(zhǎng)”的優(yōu)點(diǎn)。(2)誘導(dǎo)融合前需利用纖維素酶去掉兩種藻的細(xì)胞壁,從而獲得原生質(zhì)體。(3)由于B藻是異養(yǎng)生物,只能利用有機(jī)碳源,故通過(guò)步驟b可以淘汰B藻。由于A藻生長(zhǎng)慢、藻落小而B(niǎo)藻生長(zhǎng)快、藻落大,可以通過(guò)步驟a觀(guān)察藻落大小淘汰生長(zhǎng)速率較慢的藻落。最后通過(guò)步驟c測(cè)定DHA含量較高的藻落即為生產(chǎn)所需的融合藻。(4)①分析坐標(biāo)圖可知,甲組的融合藻既能進(jìn)行光合作用又能進(jìn)行呼吸作用,因此,產(chǎn)生[H]的細(xì)胞器有葉綠體和線(xiàn)粒體。丙組融合藻在黑暗中產(chǎn)生ATP的細(xì)胞器是線(xiàn)粒體。②乙組融合藻既能利用光能又能利用葡萄糖,屬于既能光能自養(yǎng)又能異養(yǎng)的生物,因此乙組培養(yǎng)條件下融合藻較甲、丙兩組生長(zhǎng)快。實(shí)際生產(chǎn)中采用甲組的培養(yǎng)條件而不采用乙組培養(yǎng)條件的原因是:甲組融合藻在不添加葡萄糖的情況下就能利用光能和簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物生長(zhǎng),因此降低了成本,也可防止雜菌生長(zhǎng)。23.(2014江蘇單科,29,9分)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)外植體經(jīng)誘導(dǎo)后形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)為。

(2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如圖所示。細(xì)胞干重在12d后下降的原因有;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是、。

(3)多倍體愈傷組織細(xì)胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細(xì)胞經(jīng)處理,會(huì)產(chǎn)生染色體加倍的細(xì)胞。為檢測(cè)愈傷組織細(xì)胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和酶解離愈傷組織。若愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)誘導(dǎo)處理后,觀(guān)察到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,合理的解釋是、。

(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細(xì)胞的固定化技術(shù),其原理與酵母細(xì)胞固定化類(lèi)似。下列說(shuō)法正確的有(填序號(hào))。

①選取旺盛生長(zhǎng)的愈傷組織細(xì)胞包埋②必須在光照條件下培養(yǎng)③培養(yǎng)過(guò)程中需通空氣④固定化后植物細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變慢答案(9分)(1)脫分化(2)蔗糖濃度下降,pH降低提供能源調(diào)節(jié)滲透壓(3)秋水仙素(低溫)果膠經(jīng)加倍到4n的細(xì)胞處于有絲分裂后期經(jīng)加倍到8n的細(xì)胞處于有絲分裂中期(4)①③④解析(1)外植體經(jīng)脫分化可形成愈傷組織。(2)分析坐標(biāo)曲線(xiàn)圖,可見(jiàn)12d后培養(yǎng)液中的蔗糖濃度已降至較低,pH也有所下降,因此使得細(xì)胞生命活動(dòng)受阻,細(xì)胞干重減小。培養(yǎng)液中的蔗糖可為培養(yǎng)的細(xì)胞提供能源,又可調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的滲透壓。(3)二倍體愈傷組織經(jīng)秋水仙素、低溫等人工誘導(dǎo)處理,可產(chǎn)生染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞。植物細(xì)胞之間除纖維素外,還存在果膠層,因此可利用纖維素酶和果膠酶解離愈傷組織。愈傷組織細(xì)胞(2n)經(jīng)人工誘導(dǎo)后,細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍成4n,染色體數(shù)為4n的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,處于有絲分裂后期的細(xì)胞中染色體數(shù)為8n;若加倍到4n的細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后繼續(xù)加倍形成染色體數(shù)為8n的細(xì)胞,這樣的細(xì)胞再進(jìn)行有絲分裂,在中期時(shí)會(huì)看到染色體數(shù)為8n的細(xì)胞。(4)通過(guò)愈傷組織獲得次生代謝產(chǎn)物時(shí),需選擇生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞,由于植物細(xì)胞進(jìn)行需氧呼吸,培養(yǎng)過(guò)程需通入空氣。愈傷組織細(xì)胞沒(méi)有葉綠體,不進(jìn)行光合作用,不需光照。植物細(xì)胞固定化后,與外界環(huán)境的物質(zhì)交換能力降低,生長(zhǎng)變慢。24.(2013天津理綜,9,15分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線(xiàn)處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程①所需的酶是。

(2)過(guò)程②后,在顯微鏡下觀(guān)察融合的活細(xì)胞中有供體的存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。

(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。

(4)若分析再生植株的染色體變異類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖,通過(guò)、、染色和制片等過(guò)程制成裝片,然后在顯微鏡下觀(guān)察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。

(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1~4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株1~4中一定是雜種植株的有。

(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。

答案(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌解析(1)去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體需要用纖維素酶和果膠酶處理。(2)根細(xì)胞不含葉綠體,葉肉細(xì)胞含有葉綠體,因此通過(guò)PEG誘導(dǎo)融合的雜種細(xì)胞應(yīng)含有葉綠體,以此作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)作用,因此原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇,使原生質(zhì)體處于等滲溶液中,以維持原生質(zhì)體正常形態(tài)。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)要判斷染色體變異的類(lèi)型,應(yīng)剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的根尖,通過(guò)解離、漂洗、染色、制片等過(guò)程制成裝片,然后進(jìn)行顯微觀(guān)察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)根據(jù)兩親本的差異性條帶,可知再生植株1、2和4既有花椰菜的條帶,又有黑芥的條帶,因此再生植株1、2和4一定為雜種植株。(6)要篩選出高抗性的雜種植株,應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的病原體接種實(shí)驗(yàn),即接種黑腐病菌。25.(2013課標(biāo)全國(guó)Ⅱ,40,15分)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用酶和酶去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的,

再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成組織,然后經(jīng)過(guò)形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱(chēng)為。

(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指。假設(shè)甲與乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是。

(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。

答案(15分)(1)纖維素(1分)果膠(1分)原生質(zhì)體(2分)愈傷(2分)再分化(或分化)(2分)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1分)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(2分,其他合理答案也給分)在減數(shù)分裂過(guò)程中,前者染色體聯(lián)會(huì)異常,而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(3分,其他合理答案也給分)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(1分,答對(duì)其中一個(gè)即給分)解析本題主要考查植物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。(1)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的流程是先用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞最外層的細(xì)胞壁去除,獲得具有活力的原生質(zhì)體,然后將甲、乙植物的原生質(zhì)體用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合,形成融合細(xì)胞,再將融合細(xì)胞誘導(dǎo)脫分化,進(jìn)一步培養(yǎng)形成愈傷組織,最后經(jīng)過(guò)再分化形成完整的雜種植株。(2)在植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,甲、乙兩種植物的二倍體體細(xì)胞融合為四倍體細(xì)胞,四倍體細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成四倍體植株,此植物體細(xì)胞由于含有三個(gè)或三個(gè)以上的染色體組,因此屬于多倍體。此四倍體由于含有2個(gè)甲植物的染色體組和2個(gè)乙植物的染色體組,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)正常,可育。而甲、乙有性雜交的后代細(xì)胞中含1個(gè)甲植物的染色體組和1個(gè)乙植物的染色體組,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂,不可育。(3)可將經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等材料用人工薄膜包裝后制成人工種子,這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖。考點(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞工程1.(2023海南,7,3分)某團(tuán)隊(duì)通過(guò)多代細(xì)胞培養(yǎng),將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)一系列處理,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過(guò)程發(fā)生了染色體數(shù)目變異C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過(guò)程發(fā)生了細(xì)胞分化D.若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育答案A傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞增殖到貼滿(mǎn)瓶壁時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制,A錯(cuò)誤;據(jù)題干“將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞”可知,該過(guò)程中發(fā)生了染色體數(shù)目變異,B正確;XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞過(guò)程中,細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能發(fā)生了變化,即發(fā)生了細(xì)胞分化,C正確;若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可以通過(guò)去除胚胎干細(xì)胞的Y染色體等一系列處理獲得有功能的卵母細(xì)胞,用于繁殖后代,D正確。2.(2023廣東,3,2分)科學(xué)家采用體外受精技術(shù)獲得紫羚羊胚胎,并將其移植到長(zhǎng)角羚羊體內(nèi),使后者成功妊娠并產(chǎn)仔,該工作有助于恢復(fù)瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過(guò)程不涉及的操作是()A.超數(shù)排卵B.精子獲能處理C.細(xì)胞核移植D.胚胎培養(yǎng)答案C根據(jù)題干信息,題述過(guò)程主要涉及體外受精和胚胎移植技術(shù),體外受精需要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理,同時(shí)需要對(duì)雌性個(gè)體使用外源促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵處理,A、B均有涉及;在進(jìn)行胚胎移植前需要對(duì)早期胚胎進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)至桑葚胚或者囊胚階段進(jìn)行胚胎移植,D有涉及;細(xì)胞核移植技術(shù)一般用于克隆動(dòng)物,題述過(guò)程沒(méi)有涉及,故選C。3.(2023北京,12,2分)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類(lèi)多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,有關(guān)制備過(guò)程的敘述不正確的是()A.需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞答案D制備單克隆抗體時(shí),需利用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞,篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體,制備過(guò)程中,需要對(duì)雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞等動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),A正確;單克隆抗體制備過(guò)程中,給小鼠注射特定抗原(PTH),使其發(fā)生免疫反應(yīng),從而獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,B正確;單克隆抗體制備過(guò)程中,利用抗原—抗體結(jié)合的原理進(jìn)行第二次篩選,可獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞,C正確;篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞具有特異性,通常只能分泌一種抗體,D錯(cuò)誤。4.(2023遼寧,7,2分)大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞,可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B.用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C.當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D.培養(yǎng)基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量答案D流感病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),需用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞具有接觸抑制的特點(diǎn),懸浮培養(yǎng)可有效避免接觸抑制現(xiàn)象的發(fā)生,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中需加血清,以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的天然營(yíng)養(yǎng)成分,B正確;流感病毒為胞內(nèi)寄生,當(dāng)細(xì)胞內(nèi)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí),會(huì)對(duì)細(xì)胞的增殖和代謝產(chǎn)生嚴(yán)重影響,甚至?xí)?dǎo)致細(xì)胞裂解,C正確;病毒的增殖依賴(lài)宿主細(xì)胞,而培養(yǎng)基的pH會(huì)影響宿主細(xì)胞生長(zhǎng),故培養(yǎng)基pH會(huì)通過(guò)影響單克隆細(xì)胞的生長(zhǎng)影響病毒產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。5.（2021山東，15，2分）一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱(chēng)為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是（）注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況答案.D單抗制備過(guò)程中有多次的篩選和鑒定，注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗的純度影響很小，注入小鼠體內(nèi)的抗原純度越高，說(shuō)明抗原的種類(lèi)越少，多抗的純度就會(huì)越高，A錯(cuò)誤；單抗制備過(guò)程中并不是分離出漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的，而是融合以后進(jìn)行篩選，B錯(cuò)誤；題干信息“也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗”可說(shuō)明，非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72的表面有多種抗原決定簇，每種抗原決定簇都能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以利用該小鼠能制備出多種抗p72的單抗，C錯(cuò)誤；非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72是一種抗原，其表面有多種抗原決定簇，每種抗原決定簇都能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以p72部分結(jié)構(gòu)改變，會(huì)導(dǎo)致改變部位刺激產(chǎn)生的單抗失效，但未改變部位刺激產(chǎn)生的抗體仍然能起作用，所以多抗仍有效，D正確。6.(2022湖北,7,2分)某興趣小組開(kāi)展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,其原因不可能的是()A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性答案A來(lái)自小鼠胚胎的腦組織神經(jīng)元細(xì)胞分化程度低,生長(zhǎng)較快;將培養(yǎng)瓶密封會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞缺氧而生長(zhǎng)緩慢;高溫會(huì)使血清含有的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)失活,而使神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;人的細(xì)胞外液pH近中性,弱酸性的環(huán)境會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,故A項(xiàng)不是導(dǎo)致培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢的原因。7.(2022湖北,15,2分)納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對(duì)貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞活性的影響,研究者在培養(yǎng)基中添加一定量的納米氧化亞銅,8小時(shí)后觀(guān)察到細(xì)胞萎縮,體積變小,細(xì)胞核變大,細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象,培養(yǎng)瓶中大量貼壁細(xì)胞脫落,出現(xiàn)細(xì)胞懸浮。根據(jù)該實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象,能得出的正確結(jié)論是()A.納米氧化亞銅改變了細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)習(xí)性B.納米氧化亞銅對(duì)該細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用C.納米氧化亞銅能通過(guò)自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞D.納米氧化亞銅不影響細(xì)胞的新陳代謝答案A細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)會(huì)使細(xì)胞由于不斷增殖產(chǎn)生接觸抑制,而納米氧化亞銅會(huì)使貼壁細(xì)胞脫落,出現(xiàn)細(xì)胞懸浮,因此納米氧化亞銅改變了細(xì)胞的貼壁生長(zhǎng)習(xí)性,A正確;根據(jù)題意可知納米氧化亞銅促進(jìn)了細(xì)胞的衰老,B錯(cuò)誤;由此題干信息“細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象”,說(shuō)明納米氧化亞銅能進(jìn)入細(xì)胞,但不能由此推斷是通過(guò)自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞的,C錯(cuò)誤;納米氧化亞銅會(huì)促進(jìn)細(xì)胞衰老,即影響了細(xì)胞的新陳代謝,D錯(cuò)誤。8.(2022江蘇,14,2分)航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過(guò)有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)答案B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中的某些成分(如血清中的蛋白質(zhì))不耐高溫,A錯(cuò)誤;O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2可維持培養(yǎng)液的pH,培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的氣體環(huán)境為95%空氣和5%CO2,B正確;心肌細(xì)胞高度分化,高度分化的細(xì)胞一般不具有分裂能力,C錯(cuò)誤;心肌細(xì)胞節(jié)律性收縮,受內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)神經(jīng)控制,是不隨意的,在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的作用下跳動(dòng),D錯(cuò)誤。9.(2022江蘇,19,3分)(多選)如圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程,在人—鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失,通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位。現(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性,只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有()A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人—人、人—鼠、鼠—鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色體上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上答案ACD誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有滅活病毒誘導(dǎo)法,故加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合,A正確;題述三種融合細(xì)胞為雜種細(xì)胞,都保留了人的部分染色體,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ細(xì)胞均為人—鼠融合細(xì)胞,B錯(cuò)誤;根據(jù)題干和題圖可知,只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性,只有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性,由三種融合細(xì)胞所保留的人類(lèi)染色體可知,Ⅱ中特有的染色體為2號(hào)染色體,Ⅲ中特有的染色體為17號(hào)染色體,Ⅰ、Ⅲ中共有而Ⅱ中沒(méi)有的染色體為X染色體,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中共有的染色體為11號(hào)染色體,因此芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色體上,C、D正確。10.(2022北京,11,2分)將黑色小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部分細(xì)胞注射到白色小鼠囊胚腔中,接受注射的囊胚發(fā)育為黑白相間的小鼠(Mc)。據(jù)此分析,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.獲得Mc的生物技術(shù)屬于核移植B.Mc表皮中有兩種基因型的細(xì)胞C.注射入的細(xì)胞會(huì)分化成Mc的多種組織D.將接受注射的囊胚均分為二,可發(fā)育成兩只幼鼠答案A核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。故題干所述將黑色小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部分細(xì)胞注射到白色小鼠囊胚腔中,使之發(fā)育成嵌合鼠不屬于核移植,A錯(cuò)誤。Mc為黑白相間的小鼠,其表皮中具有黑色和白色兩種基因型的細(xì)胞,B正確。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞將發(fā)育成胎兒的各種組織,C正確;利用胚胎分割技術(shù)將接受注射的囊胚均分為二,可發(fā)育成兩只幼鼠,D正確。11.(2020天津,1,4分)在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中,通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的()A.卵原細(xì)胞B.初級(jí)卵母細(xì)胞C.次級(jí)卵母細(xì)胞D.卵細(xì)胞答案CMⅡ時(shí)期的次級(jí)卵母細(xì)胞里含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì),故克隆哺乳動(dòng)物時(shí)常選用去核的MⅡ時(shí)期的次級(jí)卵母細(xì)胞作為核移植的受體細(xì)胞,C正確。12.(2020江蘇單科,23,3分)小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞,制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(多選)()A.為獲得更多的囊胚,采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同,所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)答案ABC哺乳動(dòng)物雄性精液中精子數(shù)量很多,不需要額外注射激素促進(jìn)精子的產(chǎn)生,為獲得更多的囊胚,應(yīng)采用激素注射促進(jìn)雌鼠產(chǎn)生更多的卵細(xì)胞,A錯(cuò)誤。細(xì)胞a、b都是由同一個(gè)受精卵經(jīng)有絲分裂而來(lái)的,遺傳物質(zhì)相同,兩者全能性高低不同并不是由遺傳物質(zhì)不同導(dǎo)致的;細(xì)胞a為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞,分化程度較低,細(xì)胞全能性較高,將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織,細(xì)胞b為滋養(yǎng)層細(xì)胞,分化程度較高,細(xì)胞全能性較低,將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán),B錯(cuò)誤。胰蛋白酶可以催化細(xì)胞之間的蛋白質(zhì)分解,進(jìn)而可獲得分散的胚胎干細(xì)胞,C錯(cuò)誤。胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞需置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,D正確。13.(2020浙江7月選考,15,2分)下列關(guān)于病毒的敘述,錯(cuò)誤的是()A.有的病毒經(jīng)滅活處理后,可用于細(xì)胞工程中介導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞的融合B.適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量與活性,可提高對(duì)新型冠狀病毒的抵御能力C.在某人的分泌物中檢測(cè)到新型冠狀病毒,推測(cè)該病毒的增殖不依賴(lài)于宿主細(xì)胞D.用高溫高壓處理病毒使其失去感染能力,原因之一是病毒的蛋白質(zhì)發(fā)生了熱變性答案C動(dòng)物細(xì)胞工程中,可利用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合,A正確;新型冠狀病毒作為病原體,可激發(fā)機(jī)體特異性免疫,適當(dāng)增加機(jī)體內(nèi)參與免疫的細(xì)胞數(shù)量和活性,例如注射免疫活性物質(zhì),刺激機(jī)體免疫細(xì)胞活化,可提高機(jī)體清除病原體的能力,B正確;病毒為專(zhuān)一性活細(xì)胞內(nèi)寄生生物,只能在宿主細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行增殖,C錯(cuò)誤;高溫高壓滅菌的原理之一是蛋白質(zhì)在高溫條件下變性,其空間結(jié)構(gòu)被破壞,活性徹底喪失,使得病原體失去侵染、繁殖和致病的能力,D正確。14.(2018江蘇單科,22,3分)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是(多選)()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因答案BC植物細(xì)胞壁會(huì)阻礙細(xì)胞融合,故植物細(xì)胞融合前需先用酶解法除去細(xì)胞壁,A錯(cuò)誤;細(xì)胞間的融合需在相應(yīng)的誘導(dǎo)處理下才能完成(如電激、聚乙二醇等,動(dòng)物細(xì)胞還可用滅活病毒誘導(dǎo)融合),B正確;細(xì)胞融合過(guò)程出現(xiàn)了膜的變形,故細(xì)胞融合過(guò)程與細(xì)胞膜流動(dòng)性有關(guān),C正確;c細(xì)胞中具有a、b細(xì)胞的全部基因,但這些基因不一定能全部表達(dá),D錯(cuò)誤。15.(2017江蘇單科,11,2分)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是()A.H-Y單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別C.鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植D.用H-Y抗原免疫母?？色@得相應(yīng)抗體答案D本題考查免疫調(diào)節(jié)、基因工程及胚胎工程的相關(guān)內(nèi)容。單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌,A錯(cuò)誤;應(yīng)選用囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞做性別鑒定,B錯(cuò)誤;因要利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥,因此用于胚胎移植的應(yīng)是鑒定后的雌性胚胎,C錯(cuò)誤;用特定的抗原免疫母?？色@得相應(yīng)的抗體,D正確。知識(shí)拓展正確理解生物反應(yīng)器生物反應(yīng)器指用于合成藥物的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物器官。生物反應(yīng)器有乳腺生物反應(yīng)器、膀胱生物反應(yīng)器等。乳腺生物反應(yīng)器要求轉(zhuǎn)基因動(dòng)物一定為雌性,膀胱生物反應(yīng)器則對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的性別無(wú)要求。16.(2016江蘇單科,9,2分)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞破裂C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動(dòng)物,其線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體答案D植物細(xì)胞融合前需先用酶解法去掉細(xì)胞壁,形成原生質(zhì)體,再用PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合,A錯(cuò)誤;人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子,不用原生質(zhì)體為材料,B錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞需與經(jīng)免疫處理過(guò)的B淋巴細(xì)胞融合,再經(jīng)篩選培養(yǎng)才能獲得單克隆抗體,C錯(cuò)誤;動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核取出,移入已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,核移植克隆動(dòng)物的線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體。解題關(guān)鍵仔細(xì)審讀抓“關(guān)鍵詞”及相關(guān)知識(shí)的掌握是解題的關(guān)鍵。如A項(xiàng)植物細(xì)胞需要去細(xì)胞壁,不能“直接”融合;B項(xiàng)“人工種子”是用組織培養(yǎng)得到的胚狀體來(lái)制備的;C項(xiàng)“免疫處理”處理的不是骨髓瘤細(xì)胞。17.(2014浙江理綜,3,6分)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆D.未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀答案B連續(xù)細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系,大多數(shù)具有異倍體核型,A錯(cuò)誤;癌細(xì)胞在合適條件下可以發(fā)生不定向的基因突變而逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞,B正確;由一個(gè)單細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆,C錯(cuò)誤;未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系具有異質(zhì)性,D錯(cuò)誤。17.(2013重慶理綜,2,6分)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述,正確的是()A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B.②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群答案D本題主要考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)。①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的漿細(xì)胞;②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等,有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;③同時(shí)具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性;④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。故D項(xiàng)正確。18.(2023湖北,22,16分)某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國(guó)學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來(lái)制備單克隆抗體,以期快速檢測(cè)該病毒,其主要技術(shù)路線(xiàn)如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前,已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)(填“需要”或“不需要”)通過(guò)原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量;添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合,該過(guò)程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是

。

(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過(guò)程中,常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基),該培養(yǎng)基對(duì)和生長(zhǎng)具有抑制作用。

(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,其目的是。

(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是。

答案(1)不需要改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),使兩個(gè)細(xì)胞接觸處細(xì)胞膜的脂類(lèi)分子發(fā)生疏散和重組,從而導(dǎo)致細(xì)胞膜相互親和,促進(jìn)融合(2)未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞(3)篩選能分泌抗病毒外殼蛋白A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)④解析(1)已免疫脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)不需要通過(guò)原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量;PEG可以改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),使兩個(gè)細(xì)胞接觸處細(xì)胞膜的脂類(lèi)分子發(fā)生疏散和重組,從而導(dǎo)致細(xì)胞膜相互親和,促進(jìn)融合。(2)誘導(dǎo)細(xì)胞融合后,會(huì)出現(xiàn)雜交瘤細(xì)胞、未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞,后兩種細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),雜交瘤細(xì)胞可以生長(zhǎng)。(3)雜交瘤細(xì)胞有多種,需用抗體陽(yáng)性檢測(cè)篩選出能分泌抗病毒外殼蛋白A單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成,可催化一個(gè)DNA片段3'端的羥基與另一個(gè)DNA片段5'端的磷酸基團(tuán)連接起來(lái)。19.[2022福建,21（二）]美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明,美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制,科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體,具體方法如下。回答下列問(wèn)題:(二)抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示:(1)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射和。

(2)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是。

(3)吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中,根據(jù)抗原—抗體雜交原理,需加入進(jìn)行專(zhuān)一抗體檢測(cè),檢測(cè)過(guò)程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體,原因是。

(4)步驟⑥從中提取到大量的抗CD14抗體,用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞。

答案(二)(1)CD14蛋白/CD14抗原分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞(2)能在體外無(wú)限增殖(3)CD14蛋白參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類(lèi)多,有的不能分泌抗CD14抗體(4)小鼠腹水解析(二)(1)步驟①要注射CD14蛋白(CD14抗原)可產(chǎn)生能分泌抗CD14抗體的已免疫的B細(xì)胞;步驟⑤向小鼠注射能分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞。(2)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,其特點(diǎn)是能在體外無(wú)限增殖。(3)專(zhuān)一抗體檢測(cè)是檢測(cè)其中是否含有抗CD14蛋白的抗體,因此用CD14蛋白檢測(cè)。由于形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類(lèi)多,因此,有些雜交瘤細(xì)胞并不能分泌抗CD14抗體。(4)步驟⑥需從小鼠的腹水中提取抗CD14抗體。20.(2022海南,20,13分)以我國(guó)科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將OSNL(即4個(gè)基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的縮寫(xiě))導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的后代,實(shí)驗(yàn)流程如圖?；卮鹣铝袉?wèn)題。(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細(xì)胞懸液,雞胚組織剪碎后需用處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加等天然成分,以滿(mǎn)足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。

(2)體外獲取OSNL的方法有(答出1種即可)。若要在CEFs中表達(dá)外源基因的蛋白,需構(gòu)建基因表達(dá)載體,載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外,還須有啟動(dòng)子和等。啟動(dòng)子是識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)。(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是。

(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是

。(5)該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有(答出2點(diǎn)即可)。

答案(1)胰蛋白酶、膠原蛋白酶血清(2)基因文庫(kù)法、PCR技術(shù)、人工合成法(任答1種)終止子RNA聚合酶目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)(3)基因的選擇性表達(dá)(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù);體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)(5)基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)解析(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),動(dòng)物組織剪碎后需要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理一段時(shí)間,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。使用合成培養(yǎng)基培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),通常需要添加血清等天然成分,以滿(mǎn)足細(xì)胞對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。(2)體外獲取目的基因的方法有多種,如基因文庫(kù)法、PCR技術(shù)、人工合成法?；虮磉_(dá)載體的組成包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等結(jié)構(gòu),啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了啟動(dòng)子才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)。(3)iPGCs細(xì)胞是由iPS細(xì)胞增殖、分化而來(lái)的,兩者在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能方面不同的根本原因是基因的選擇性表達(dá)。(4)誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)存在明顯的區(qū)別,主要表現(xiàn)在誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的技術(shù)是將已分化的細(xì)胞誘導(dǎo)為類(lèi)似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞(iPGCs)的技術(shù);而體細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中,使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。(5)分析題意可知,該實(shí)驗(yàn)流程中用到的生物技術(shù)有基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。21.(2022遼寧,24,10分)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過(guò)程中,需要表達(dá)N蛋白胞外段,制備相應(yīng)的單克隆抗體,增加其對(duì)N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備,流程如圖1圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時(shí),選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因,目的是。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞,質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。

(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由組成的慢病毒,用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。

Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備,流程如圖2圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后,取小鼠脾組織用酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于含有混合氣體的中培養(yǎng),離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。

(4)用選擇性培養(yǎng)基對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,將其接種到96孔板,進(jìn)行培養(yǎng)。用技術(shù)檢測(cè)每孔中的