甘肅省蘭州市蘭州第一中學(xué)2025屆高考仿真模擬生物試卷含解析

甘肅省蘭州市蘭州第一中學(xué)2025屆高考仿真模擬生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列用洋蔥作為實(shí)驗(yàn)材料的相關(guān)實(shí)驗(yàn)中，敘述正確的是（）A．制作有絲分裂裝片漂洗的目的是洗去解離液B．正在發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞吸水能力逐漸下降C．用紫色鱗片葉的外表皮可提取葉綠體中的色素D．將根尖制成裝片再進(jìn)行低溫處理可使染色體數(shù)目加倍2．如圖為人體囊性纖維病的產(chǎn)生機(jī)理示意圖。據(jù)圖分析，以下說法不正確的是（）A．圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體，過程①和②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯B．圖中異常蛋白質(zhì)是鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C．核糖體沿著mRNA向左移動并合成同種肽鏈D．該圖體現(xiàn)了基因通過控制蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，直接控制生物的性狀3．冠狀病毒是一類致病性很強(qiáng)的RNA病毒，這類病毒（）A．能夠利用自身的核糖體合成蛋白質(zhì)B．核酸組成中特有的堿基為胸腺嘧啶C．可用含有碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基培養(yǎng)D．利用宿主細(xì)胞的核糖核苷酸及氨基酸等物質(zhì)增殖4．下列關(guān)于酶和ATP的敘述，不正確的是（）A．酶和ATP參與基因表達(dá)B．ATP參與酶的合成C．酶參與ATP的合成D．酶發(fā)揮作用的最適條件和儲存的最適條件相同5．某實(shí)驗(yàn)小組探究一定濃度的萘乙酸（NAA）溶液和激動素（KT）溶液對棉花主根長度及單株側(cè)根數(shù)的影響，結(jié)果如下圖所示。據(jù)此分析，下列敘述正確的是（）A．NAA和KT都是植物自身產(chǎn)生的具有調(diào)節(jié)作用的微量有機(jī)物B．乙、丙分別與甲組比較，說明NAA抑制主根生長和側(cè)根發(fā)生，KT則相反C．丙、丁組與甲組比較，可以說明KT對側(cè)根的發(fā)生具有兩重性D．甲、乙、丁組比較，說明KT能增強(qiáng)NAA對側(cè)根生長的促進(jìn)作用6．下列關(guān)于細(xì)胞生命歷程的敘述，錯誤的是（）A．受精卵、早期胚胎細(xì)胞和動物細(xì)胞的細(xì)胞核等具有全能性B．主流細(xì)胞衰老理論認(rèn)為細(xì)胞衰老主要是因?yàn)樯顒赢a(chǎn)生自由基攻擊生物膜、DNA和蛋白質(zhì)等，以及染色體兩端的端粒隨細(xì)胞分裂不斷縮短，使DNA序列受損而導(dǎo)致細(xì)胞衰老C．不當(dāng)飲食和吸煙是致癌的主要因素，癌癥的發(fā)生還與心理狀態(tài)有關(guān)，維生素A、維生素C、胡蘿卜素和纖維素等具有抑制癌變的作用D．被病原體感染細(xì)胞的清除和細(xì)胞代謝受損或中斷引起的細(xì)胞死亡屬于細(xì)胞凋亡7．生物燃料是指以纖維素材料為原料生產(chǎn)的燃料乙醇和生物柴油，篩選出能高效分解纖維素的纖維素分解菌是制造生物燃料的重要前提。下列說法正確的是（）A．能夠分解纖維素的酶是一種復(fù)合酶，其中葡萄糖苷酶能把纖維素分解為纖維二糖B．在篩選纖維素分解菌的過程中，剛果紅染色法能通過顏色反應(yīng)直接篩選微生物C．倒平板時加入剛果紅染色，優(yōu)點(diǎn)是顯示的顏色反應(yīng)基本上就是纖維素分解菌的作用D．用平板劃線法對纖維素分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時，應(yīng)選菌落數(shù)在30-300之間的平板計(jì)數(shù)8．（10分）2019年初，中科院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所陳劍鋒研究組的最新研究成果對發(fā)燒在機(jī)體清除病原體感染中的主要作用及其機(jī)制做出了全新闡述。研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)機(jī)體溫度達(dá)到高熱（1.5℃）及以上水平時，熱刺激會促使免疫細(xì)胞中的熱休克蛋白90表達(dá)并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上，該蛋白質(zhì)與alpha4整合素結(jié)合后會加速免疫細(xì)胞“運(yùn)動”到感染部位發(fā)揮作用。該發(fā)現(xiàn)讓人們對發(fā)熱的作用及退熱藥的使用有了新的認(rèn)識。下列說法錯誤的是A．熱休克蛋白90與alpha4整合素結(jié)合并使免疫細(xì)胞做出應(yīng)答，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的信息交流功能B．退熱藥可能是作用于下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，從而發(fā)揮作用C．該研究提示我們，在病人身體條件許可的情況下，可以讓病人體溫維持在1．5℃以上一段時間，然后再吃退燒藥D．機(jī)體清除外來病原體體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能二、非選擇題9．（10分）透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過程，NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶。請分析回答下列問題：（1）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，其作用是__________________；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的_________________，對所連接的DNA兩端堿基序列_______（有/沒有）專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，最可能的原因是________________。（2）透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為____________________。（3）人體細(xì)胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖（如透明質(zhì)酸）、蛋白多糖等成分。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶。試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過程中的作用是_________________，其意義可能是_____________________。10．（14分）2019年底爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）是由SARS-CoV-2病毒引起的，能否快速、準(zhǔn)確地檢測出病原體成為疾病防控的關(guān)鍵。請回答：（1）下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程?？茖W(xué)家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。（2）進(jìn)行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強(qiáng)度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與_____________互補(bǔ)的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個熒光基團(tuán)R和一個淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴(kuò)增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強(qiáng)弱的監(jiān)測就可實(shí)現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明含有病毒的概率越____________。（4）一次核酸檢測歷時需16小時，為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術(shù)，這一技術(shù)的關(guān)鍵是要生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體.請寫出生產(chǎn)這種抗體的思路：__________________。11．（14分）以下是果蠅復(fù)眼細(xì)胞中產(chǎn)生眼色素B和眼色素D的反應(yīng)：野生型果蠅有色素B和色素D，眼睛為紅褐色，缺乏色素B為褐色眼，缺乏色素D為鮮紅眼，兩種色素都無為白色眼?；卮鹣铝羞z傳學(xué)問題：（1）—只白色眼果蠅與野生型果蠅交配，F(xiàn)1體內(nèi)可具有上述中的_____酶。（2）若有關(guān)基因均在常染色體上，兩者獨(dú)立遺傳，一只褐色眼果蠅與一只鮮紅眼果蠅交配，F(xiàn)1的眼色最多_____種表型。（3）利用野生型和褐色眼兩種類型的果蠅通過一次雜交實(shí)驗(yàn)以確定控制酶R的基因是否為伴X染色體遺傳。設(shè)計(jì)思路:選用_____果蠅進(jìn)行雜交，觀察F1的表現(xiàn)型。結(jié)果分析：若F1表現(xiàn)型為_________或_____，說明該基因?yàn)榘閄染色體遺傳。12．生態(tài)果園是當(dāng)下悄然興起的一種養(yǎng)殖模式，通過植物、動物和微生物種群結(jié)構(gòu)的科學(xué)配置，以及光、熱、水、土、養(yǎng)分等的合理利用而建立的一種以果樹產(chǎn)業(yè)為主導(dǎo)的可持續(xù)發(fā)展的果園生產(chǎn)體系。下圖是某生態(tài)果園模式圖，請據(jù)圖回答下列問題。（1）該果園中分解者分解有機(jī)物釋放的能量供_____________利用，產(chǎn)生的物質(zhì)供____________利用。（2）與普通果園相比，該果園提高了能量利用效率，原因是_________________________。（3）該果園從未使用農(nóng)藥，但害蟲數(shù)量一直較少，沒有泛濫成災(zāi)，原因是__________________。（4）該果園中果農(nóng)在果樹開花時期，放置一電子儀器，產(chǎn)生與蜜蜂跳舞相同頻率的振動或聲音，吸引蜜蜂前來采蜜傳粉，提高產(chǎn)量。該實(shí)例主要應(yīng)用了生態(tài)系統(tǒng)的___________________功能。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

植物細(xì)胞的吸水能力與細(xì)胞液的濃度呈正相關(guān)，細(xì)胞液的濃度增大，細(xì)胞的吸水能力增強(qiáng)。葉綠體分布在能進(jìn)行光合作用的植物細(xì)胞中，如葉肉細(xì)胞，葉綠體的類囊體薄膜上分布有光合色素。表皮細(xì)胞不含葉綠體，沒有光合色素?！驹斀狻緼、制作有絲分裂裝片時漂洗的目的是洗去解離液，防止解離過度，A正確；B、正在發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞，由于失水導(dǎo)致細(xì)胞液濃度增大，細(xì)胞吸水能力逐漸增大，B錯誤；C、紫色洋蔥鱗片葉的外表皮不含葉綠體，不能用于提取葉綠體中的色素，C錯誤；D、低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實(shí)驗(yàn)時，應(yīng)先在低溫條件下培養(yǎng)根尖，再制片觀察，D錯誤。故選A。2、B【解析】

1、過程①表示轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄過程以四種核糖核苷酸為原料，以DNA分子的一條鏈為模板，在DNA解旋酶、RNA聚合酶的作用下消耗能量，合成RNA。2、過程翻譯②表示翻譯，翻譯過程以氨基酸為原料，以轉(zhuǎn)錄過程產(chǎn)生的mRNA為模板，在酶的作用下，消耗能量產(chǎn)生多肽鏈．多肽鏈經(jīng)過折疊加工后形成具有特定功能的蛋白質(zhì)。3、圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體?！驹斀狻緼、圖中a表示DNA、b表示mRNA、c表示核糖體，過程①和②分別表示轉(zhuǎn)錄和翻譯，A正確；B、圖中異常蛋白質(zhì)是CFTR蛋白，是氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，B錯誤；C、由圖可知，左邊合成的肽鏈長，所以翻譯過程中，核糖體沿著mRNA由右向左移動，且合成同種肽鏈，C正確；D、該圖體現(xiàn)了基因通過控制蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀，D正確。故選B。3、D【解析】

病毒是一類沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的特殊生物，只有蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)構(gòu)成，不能獨(dú)立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活細(xì)胞內(nèi)才能生活和繁殖，一旦離開了活細(xì)胞，病毒就無法進(jìn)行生命活動?！驹斀狻緼、病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無核糖體，A錯誤；B、冠狀病毒為RNA病毒，不含DNA，無胸腺嘧啶，B錯誤；C、病毒不能用培養(yǎng)基培養(yǎng)，必須寄生到活細(xì)胞中，C錯誤；D、病毒能利用宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和原料，在宿主細(xì)胞中增殖，D正確。故選D。4、D【解析】

1、酶的本質(zhì)是有機(jī)物，大多數(shù)酶是蛋白質(zhì)，還有少量的RNA。特性：高效性、專一性、需要溫和的條件。高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿會使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而使酶失去活性。2、ATP中文名叫三磷酸腺苷，結(jié)構(gòu)式簡寫A-P~P~P，其中A表示腺嘌呤核苷，T表示三個，P表示磷酸基團(tuán)。幾乎所有生命活動的能量直接來自ATP的水解，由ADP合成，ATP所需能量，動物來自呼吸作用，植物來自光合作用和呼吸作用，ATP可在細(xì)胞器線粒體或葉綠體中和在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成?！驹斀狻緼、基因的表達(dá)需要酶和ATP參與，A正確；B、酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA，其合成過程需要消耗能量，B正確；C、ATP的合成需要ATP合成酶的催化，C正確；D、酶發(fā)揮作用的最適條件一般較溫和，酶一般在低溫下儲存，D錯誤；故選D?！军c(diǎn)睛】聯(lián)系A(chǔ)TP和酶的功能是解題的關(guān)鍵。5、D【解析】

分析柱形圖：該實(shí)驗(yàn)的自變量是施加試劑的種類，因變量是主根長度和側(cè)根數(shù)，甲乙組對比來看，NAA能抑制主根生長，甲丙組對比來看，KT能促進(jìn)主根生長；乙、丁組對比可知，一定濃度的KT對NAA促進(jìn)側(cè)根生長的效應(yīng)具有增強(qiáng)作用。【詳解】A、激動素是一種內(nèi)源的細(xì)胞分裂素，NAA是生長素類似物，是人工合成的，A錯誤；B、乙、丙分別于甲組比較，說明NAA抑制主根生長和促進(jìn)側(cè)根發(fā)生，KT則相反，B錯誤；C、丙組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與甲組比較，可以說明KT對側(cè)根的發(fā)生具有抑制作用，而丁組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與甲組比較，可以說明NAA和KT共同對側(cè)根的發(fā)生具有促進(jìn)作用，C錯誤；D、甲、乙、丁組實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較，說明KT能增強(qiáng)NAA對側(cè)根生長的促進(jìn)作用，D正確。故選D。6、D【解析】

1、細(xì)胞全能性是指已經(jīng)分化的細(xì)胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能。細(xì)胞具有全能性的原因是其具有發(fā)育成完整個體所需的全部遺傳物質(zhì)。2、細(xì)胞癌變的根本原因是原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變，其中原癌基因負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長和分裂的過程，抑癌基因主要是阻止細(xì)胞不正常的增殖。3、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞編程序死亡的過程。細(xì)胞凋亡是生物體正常的生命歷程，對生物體是有利的，而且細(xì)胞凋亡貫穿于整個生命歷程。在成熟的生物體內(nèi)，細(xì)胞的自然更新、被病原體感染的細(xì)胞的清除，是通過細(xì)胞凋亡完成的。4、細(xì)胞壞死是由外界環(huán)境因素引起的，屬于不正常的細(xì)胞死亡?！驹斀狻緼、受精卵、早期胚胎細(xì)胞和動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有發(fā)育成完整個體所需的全部遺傳物質(zhì)，因此均具有全能性，A正確；B、我們通常把異?；顫姷膸щ姺肿踊蚧鶊F(tuán)稱為自由基。自由基攻擊生物膜的組成成分磷脂分子，還會攻擊DNA引起基因突變，攻擊蛋白質(zhì)，使蛋白質(zhì)活性下降，致使細(xì)胞衰老，B正確；C、易誘發(fā)生物發(fā)生基因突變并提高突變頻率的因素可分為三大類：物理因素、化學(xué)因素和生物因素。不當(dāng)飲食和吸煙是致癌的主要因素，癌癥的發(fā)生還與心理狀態(tài)有關(guān)，維生素A、維生素C、胡蘿卜素和纖維素等具有抑制癌變的作用，C正確；D、細(xì)胞代謝受損或中斷引起的細(xì)胞死亡屬于細(xì)胞壞死，D錯誤。故選D。7、B【解析】

1.纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖；2.常用的剛果紅染色法有兩種：方法一在長出茵落的培養(yǎng)基上，覆蓋質(zhì)量濃度為1mg／mI。的CR溶液，10～15min后，倒去CR溶液，加入物質(zhì)的量濃度為lmol／I。的NaCI溶液，15min后倒掉NaCl溶液，此時，產(chǎn)生纖維素酶的茵落周圍將會出現(xiàn)透明圈。

方法二配制質(zhì)量濃度為10mg／mI。的CR溶液，滅菌后，按照每200mI。培養(yǎng)基加入1mI。的比例加入CR溶液，混勻后倒平板。等培養(yǎng)基上長出茵落后，產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍將會出現(xiàn)明顯的透明圈。

3.兩種剛果紅染色法的比較：方法一的缺點(diǎn)是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用；方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點(diǎn)是由于在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分?！驹斀狻緼、由分析可知，纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少含有三種組分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，其中C1酶、Cx酶能把纖維素分解為纖維二糖，A錯誤；B、在篩選纖維素分解菌的過程中，發(fā)明了剛果紅染色法，剛果紅染色法能通過顏色反應(yīng)直接篩選微生物，B正確；C、由分析可知，倒平板時加入剛果紅染色是第二種方法，其優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題，而顯示的顏色反應(yīng)基本上就是纖維素分解菌的作用是方法一的典型優(yōu)點(diǎn)，C錯誤；D、用稀釋涂布平板法對纖維素分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時，應(yīng)選菌落數(shù)在30-300之間的平板計(jì)數(shù)，D錯誤。故選B。8、D【解析】

細(xì)胞間信息交流方式一般分為三種：細(xì)胞間直接接觸（如精卵結(jié)合）、化學(xué)物質(zhì)的傳遞（如激素的調(diào)節(jié)）和高等植物細(xì)胞的胞間連絲。人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)各部分的作用：①大腦皮層：調(diào)節(jié)機(jī)體活動的最高級中樞；②小腦：維持身體平衡的中樞；③下丘腦：調(diào)節(jié)體溫、水分和血糖平衡等；④腦干：維持呼吸等；⑤脊髓：調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動的低級中樞。人體的免疫系統(tǒng)的功能主要有防衛(wèi)、監(jiān)控和清除等。防衛(wèi)是指機(jī)體抵抗病原微生物感染的能力。監(jiān)控和清除是指機(jī)體清除體內(nèi)衰老、死亡或損傷的自身癌變細(xì)胞的能力。【詳解】A、熱刺激會促使免疫細(xì)胞中的熱休克蛋白90表達(dá)并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上，該蛋白質(zhì)與alpha4整合素結(jié)合后會加速免疫細(xì)胞“運(yùn)動”到感染部位發(fā)揮作用。熱休克蛋白90與alpha4整合素結(jié)合并使免疫細(xì)胞做出應(yīng)答，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的信息交流功能，A正確。B、下丘腦調(diào)節(jié)體溫、水分和血糖平衡等，因此退熱藥可能是作用于下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞，從而發(fā)揮作用，B正確。C、由題干信息可知，在病人身體條件許可的情況下，可以讓病人體溫維持在1.5℃以上一段時間，然后再吃退燒，C正確。D、免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除是指機(jī)體清除體內(nèi)衰老、死亡或損傷的自身癌變細(xì)胞的能力，D錯誤?！军c(diǎn)睛】本題考查免疫系統(tǒng)功能的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生的識記能力和判斷能力，分析題干提煉有效信息是解題關(guān)鍵。二、非選擇題9、供重組DNA的鑒定和選擇（或鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來）磷酸二酯鍵沒有（毛霉、酵母菌）是真核細(xì)胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，能夠?qū)δ康幕虻谋磉_(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工-CTCGAG-或-GAGCTC-分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的主要成分（或分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸）破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵（或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì)）【解析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。分析圖解可知，圖中目的基因的中間存在NcoⅠ限制酶的切割位點(diǎn)，因此進(jìn)行重疊延伸PCR是為了防止限制酶NcoI破壞目的基因?！驹斀狻浚?）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達(dá)載體時，使用的載體往往有特殊的標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對所連接的DNA兩端堿基序列沒有專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細(xì)胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，因?yàn)槊购徒湍妇鸀檎婧松?，有對目的基因表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶是具有生物活性的。（2）XhoI限制酶識別的序列及位點(diǎn)是5，-CTCGAG-3，中的C、T位點(diǎn)，透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進(jìn)行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為-CTCGAG-或-GAGCTC-。（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)時先取出動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），再剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時間使其分散成單個細(xì)胞。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生多種酶，如透明質(zhì)酸酶等，能分解宿主細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，從而破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵(或?yàn)榧?xì)菌提供能源物質(zhì))【點(diǎn)睛】本題考查了基因工程的有關(guān)知識，要求學(xué)生能夠掌握基因工程的工具以及工具酶的作用部位，掌握基因工程的原理和操作步驟等，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題。10、逆轉(zhuǎn)錄（或：反轉(zhuǎn)錄）逆轉(zhuǎn)錄酶Taq酶（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物目的基因大①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒）：②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】

1.將標(biāo)記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復(fù)性、適溫延伸的熱循環(huán)，并遵守聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)規(guī)律，與模板DNA互補(bǔ)配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離于反應(yīng)體系中，在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，被擴(kuò)增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長，通過實(shí)時檢測與之對應(yīng)的隨擴(kuò)增而變化熒光信號強(qiáng)度，求得Ct值，同時利用數(shù)個已知模板濃度的標(biāo)準(zhǔn)品作對照，即可得出待測標(biāo)本目的基因的拷貝數(shù)。2.單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術(shù)來制備，單克隆抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體?！驹斀狻浚?）以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄或反轉(zhuǎn)錄，故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉(zhuǎn)錄，再對cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，這項(xiàng)技術(shù)稱為RT-PCR。（2）RT-PCR是擴(kuò)增DNA的過程，因?yàn)榧尤氲哪０迨荝NA，故需要加入的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴(kuò)增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關(guān)鍵在于要加入（ORF1ab和核殼蛋自基因N）的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構(gòu)成反應(yīng)體系，從而實(shí)現(xiàn)了相關(guān)基因的擴(kuò)增。（3）RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強(qiáng)度來檢測產(chǎn)物濃度，原理如下：Taqman熒光探針為一段與目的基因互補(bǔ)的核苷酸單鏈，兩端分別連接一個熒光基團(tuán)R和一個淬滅基團(tuán)Q。探針結(jié)構(gòu)完整時，R發(fā)射的熒光被Q吸收；而PCR擴(kuò)增時結(jié)合在模板鏈上的探針被切斷，使R和Q分離，R基團(tuán)發(fā)射的熒光不被淬滅，這樣通過對熒光信號強(qiáng)弱的監(jiān)測就可實(shí)現(xiàn)對產(chǎn)物的檢測。若熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時，經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越少，說明擴(kuò)增次數(shù)少，說明更多的熒光探針與目的基因進(jìn)行了堿基互補(bǔ)配對，可推測獲得的核酸產(chǎn)物中含有病毒的概率越大。（4）若采用抗原-抗體雜交技術(shù)進(jìn)行病毒檢測，需要制備能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高且能夠大量制備的優(yōu)勢，故設(shè)計(jì)的思路是設(shè)法獲得能產(chǎn)生該特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，步驟如下：①向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒的抗原蛋白（或滅活的新冠病毒），目的是要獲得能能產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞；②提取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；③將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)、或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從培養(yǎng)液或小鼠腹水中可以提取大量的單克隆抗體?！军c(diǎn)睛】熟知逆轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增和單克隆抗體的相關(guān)知識是解答本題的關(guān)鍵！能夠理解題目中關(guān)于熒光檢測的關(guān)鍵信息是解答本題的難點(diǎn)，獲取信息能力是本題考查的重要能力。11、R酶和H四野生型雄果蠅與褐色眼雌雄性均為褐色眼，雌性均為野生型雄性為褐色眼和白色眼，雌性為野生型和鮮紅眼【解析】

設(shè)控制酶R的基因?yàn)锳，控制酶H的基因?yàn)锽，根據(jù)題中信息可知，紅褐色的基因型為A_B-，褐色的基因型為aaB_，鮮紅眼的基因型為A_bb，白色眼的基因型為aabb，野生型的基因型為A-B-，產(chǎn)生的配子中含有AB、Ab、aB，因此白色（aabb）和野生型雜交，子代的基因型中有AaBb、Aabb、aaBb，所以子一代中可具有酶R和酶H；可以利用純合隱雌和顯雄雜交，觀察子代表現(xiàn)型，判斷基因是否位于X染色體上?！驹斀狻浚?）根據(jù)上述分析可知，—只白色眼果蠅（aabb）與野生型果蠅（A-B-）交配，F(xiàn)1體內(nèi)可具有上述中的酶R和酶H。（2）若有關(guān)基因均在常染色體上，兩者獨(dú)立遺傳，褐色的基因型為aaB_，鮮紅眼的基因型為A_bb，當(dāng)雙親的基因型為aaBb和Aabb時，二者雜交后代眼色的基因型最多有AaBb、aaBb、Aabb、aabb共4種。

（3）若控制酶R的基因位于X染色體上，則利用純合隱雌和顯雄雜交的后代會表現(xiàn)出與性別有關(guān)，若控制酶R的基因位于常染色體上，則后代表現(xiàn)與性別無關(guān)，所以若利用野生型和褐色眼兩種類型的果蠅通