2025屆山東省青島市即墨區(qū)重點(diǎn)高中高考生物倒計時模擬卷含解析

2025屆山東省青島市即墨區(qū)重點(diǎn)高中高考生物倒計時模擬卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1．某線性DNA分子含有5000個堿基對（bP），先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。在該DNA分子中，酶與b酶的識別序列分別有（）a酶切割產(chǎn)物（bp）b酶再次切割產(chǎn)物（bp）2100；1400；1000；5001900；200；800；600；1000；500A．3個和2個 B．2個和2個C．3個和3個 D．2個和3個2．蠶豆根尖細(xì)胞在含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸培養(yǎng)基中完成一個細(xì)胞周期，然后在不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基中繼續(xù)分裂至中期，其染色體的放射性標(biāo)記分布情況是（）A．每條染色體的兩條單體都被標(biāo)記B．每條染色體中都只有一條單體被標(biāo)記C．只有半數(shù)的染色體中一條單體被標(biāo)記D．每條染色體的兩條單體都不被標(biāo)記3．某實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)行“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”實(shí)驗(yàn)時，同樣實(shí)驗(yàn)條件下分別在4個試管中進(jìn)行培養(yǎng)(如表)，均獲得了“S”型增長曲線。在這個實(shí)驗(yàn)過程中，下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的說法錯誤的是（）分組項(xiàng)目Ⅰ號試管Ⅱ號試管Ⅲ號試管Ⅳ號試管起始酵母菌數(shù)(個)10×1035×1035×10310×103培養(yǎng)液體積(mL)105105A．4個試管內(nèi)種群的增長速率都是先增大、后減小到零B．Ⅰ號試管內(nèi)的環(huán)境阻力最大，因此最先達(dá)到K值C．試管內(nèi)的種群數(shù)量，Ⅲ號試管晚于其他三支試管開始下降D．營養(yǎng)條件并非是影響酵母菌種群數(shù)量動態(tài)變化的唯一因素4．下列有關(guān)植物激素或植物生長調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)應(yīng)用的敘述，不正確的是A．使用一定濃度的生長素處理扦插枝條，能提高插條的成活率B．使用一定濃度的赤霉素處理生長期的蘆葦，可提高蘆葦?shù)漠a(chǎn)量C．使用一定濃度的脫落酸處理浸泡過的小麥種子，能提高種子的萌發(fā)率D．使用一定濃度的乙烯利處理風(fēng)梨，能讓鳳梨提前上市5．如圖①②分別表示不同的細(xì)胞，A表示相應(yīng)物質(zhì)。不符合該模型的是A．①效應(yīng)T細(xì)胞②靶細(xì)胞，A抗體B．①傳出神經(jīng)元②肌肉細(xì)胞，A神經(jīng)遞質(zhì)C．①胰島B細(xì)胞②肝細(xì)胞，A胰島素D．①甲狀腺細(xì)胞②垂體細(xì)胞，A甲狀腺激素6．下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是()A．構(gòu)建表達(dá)載體時需要在目的基因前加上起始密碼子B．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可以將目的基因隨機(jī)插入受體細(xì)胞的染色體DNA上C．標(biāo)記基因中不能有限制酶的識別位點(diǎn)以防止其被破壞而失去作用D．導(dǎo)入人胰島素基因的大腸桿菌可直接生產(chǎn)出有活性的人胰島素二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）蘭花螳螂雌性雄性的性染色體組成分別為XXXO，為探究溫度對其個體發(fā)育的影響，研究小組選取純合的長翅蘭花螳螂與殘翅蘭花螳螂正、反交，孵化6天后將F1幼蟲隨機(jī)分為A、B兩組，A組在正常溫度（25℃）條件下培養(yǎng)均為長翅；B組在36℃條件處理12小時后置于25℃下培養(yǎng)，得到15%的殘翅。（1）根據(jù)A組實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷，蘭花螳螂長翅的遺傳方式是__________________。（2）研究小組對B組實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，認(rèn)為B組F1中殘翅的出現(xiàn)不是基因突變引起的，判斷依據(jù)是_______________________。（3）研究小組推測B組殘翅的變異屬于不可遺傳的變異，是溫度通過影響了__________________進(jìn)而影響了生物的性狀。請從上述材料中選擇適當(dāng)個體，設(shè)計實(shí)驗(yàn)對上述推測進(jìn)行演繹推理________________。（要求：寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果，結(jié)論）（4）綜合以上分析，說明基因、環(huán)境和性狀之間的關(guān)系是____________________________。8．（10分）測定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測定大腸桿菌的數(shù)目。濾膜法的大致流程：用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到含有伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目，流程示意圖如下圖所示。其中，指示劑伊紅美藍(lán)可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)紫黑色。請據(jù)圖回答問題：（1）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進(jìn)行滅菌處理的是_______________，與過濾有關(guān)的操作都要在______________旁進(jìn)行。（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，這屬于微生物培養(yǎng)中的________操作。從物理狀態(tài)角度分析，EMB培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，從功能上分屬于_______培養(yǎng)基。（3）某生物興趣小組的同學(xué)嘗試按照上述方法進(jìn)行測定，無菌操作下將10mL待測水樣加入到90mL無菌水中，稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為124，紫黑色菌落數(shù)平均為31，則推測1L待測水樣中的大腸桿菌數(shù)目為________。（4）大腸桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)時，用搖床振蕩培養(yǎng)的目的是__________________________。（5）不同微生物培養(yǎng)的溫度和時間往往不同，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時，細(xì)菌培養(yǎng)溫度________（填“高于”“低于”或“等于”）霉菌培養(yǎng)溫度，培養(yǎng)時間則_________（填“長于”或“短于”）霉菌培養(yǎng)時間。9．（10分）為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進(jìn)行了如圖A所示的實(shí)驗(yàn)。（1）步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中_______。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于______________培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的滅菌時間應(yīng)該從____________________開始計時。（2）同學(xué)甲進(jìn)行步驟④的操作，其中．個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學(xué)的接種方法是__________________，出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的失誤操作是_____________。（3）同學(xué)乙采用平板劃線法純化菌株，培養(yǎng)后的菌落分布如圖C，平板中部分菌落越來越稀少，因?yàn)槭莀_________________________。（4）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是_______________________________。10．（10分）回答下列（一）、（二）小題：（一）開發(fā)山楂果醋恰好讓山楂中的有機(jī)酸豐富了果醋的酸味，同時也彌補(bǔ)生食山楂酸味大的缺陷，具體釀制山楂果醋分為以下三個階段，請將具體過程補(bǔ)充完整。（1）制備山楂果原汁：選成熟的山楂果，在清水沖洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。將山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵：由于山楂果原汁_______，故發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以獲得酒精含量較高的果酒。果汁中加入活化的________后，在適宜環(huán)境下發(fā)酵一段時間，當(dāng)發(fā)酵液中停止_______，發(fā)酵完畢待過濾，或發(fā)酵至_______，上清液即為果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸發(fā)酵：將醋化醋桿菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)后，經(jīng)檢查菌體生長正常并無雜菌污染后接種于山楂酒-水中進(jìn)行發(fā)酵，整個發(fā)酵過程需要通入_______。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，其目的是調(diào)味和_______，以防止果醋被發(fā)酵分解。（二）下圖為轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞。回答下列相關(guān)問題：（1）在①過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點(diǎn)是目的基因和質(zhì)粒________（答出2點(diǎn)即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點(diǎn)和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外，還有_______（答出2點(diǎn)即可）。（2）在②過程中，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時可用______處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。操作之后，需要特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進(jìn)行篩選，其原因是_______，最終篩選到的對象在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是________。（3）在③過程常通過調(diào)節(jié)_______的適當(dāng)配比，從愈傷組織誘導(dǎo)出芽和根的_____，并由此再生出新植株。獲得轉(zhuǎn)基因煙草后，再通過[④]_______過程實(shí)現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)。11．（15分）科研人員對獼猴(2n=42)的酒精代謝過程進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)乙醇進(jìn)入機(jī)體內(nèi)的代謝途徑如下圖所示。乙醇積累使得獼猴喝酒易醉，乙醛積累則刺激血管引起獼猴臉紅，兩種物質(zhì)都不積累的獼猴喝酒不臉紅也不醉。請回答問題：（1）一個獼猴種群中的個體多數(shù)是喝酒不醉的，種群中偶爾出現(xiàn)喝酒易醉或喝酒臉紅的個體，可能的原因是_______________，種群中某一代突然出現(xiàn)了多只喝酒易醉或喝酒臉紅的個體，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的條件是_________________。（2）然而此種群或其它種群中從未出現(xiàn)過既喝酒易醉又喝酒臉紅的個體，請解釋可能的原因_______________。（3）一只易醉獼猴與野生型獼猴雜交，子一代都是野生型，子一代互交，子二代出現(xiàn)三種表現(xiàn)型，其比例是9:3:4，這三種表現(xiàn)型分別是________________，易醉獼猴親本的基因型是___________（酶1相關(guān)基因用A/a表示，酶2相關(guān)基因用B/b表示）。（4）為了進(jìn)一步研究乙醇積累對代謝的影響，研究人員在野生型獼猴中轉(zhuǎn)入了D基因，并篩選獲得了純合體，將此純合轉(zhuǎn)基因獼猴與一只非轉(zhuǎn)基因的純合易醉獼猴雜交，子一代互交后，子二代易醉與非易醉個體的比例為13:3，請據(jù)此推測D基因的作用是____________。（5）在日常生活中，有的人平常不喝酒，但酒量較大，有的人本來酒量很小，但經(jīng)常喝酒之后酒量變大，這說明_____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項(xiàng)符合題目要求）1、A【解析】

可以畫兩條線代表5000個堿基對的DNA分子，a酶切割后出現(xiàn)4段，肯定是有3個識別位點(diǎn)，b酶可以把a(bǔ)酶切割的前兩段又切成四段，說明b酶有2個切割位點(diǎn)。【詳解】表格中看出a酶可以把原有DNA切成4段，說明有該DNA分子上有3個切口，即a酶的識別序列有3個；b酶把大小是2100的DNA切成大小分別為1900和200兩個片段，再把大小是1400的DNA切成大小分別為800和600兩個片段，說明b酶在該DNA分子上有2個切口，即b酶的識別序列有2個，A正確。故選A。2、B【解析】

DNA分子復(fù)制方式是半保留復(fù)制，即DNA復(fù)制成的新DNA分子的兩條鏈中，有一條鏈?zhǔn)悄告?，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻淖渔湣Ｓ薪z分裂間期，進(jìn)行染色體的復(fù)制（DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成），出現(xiàn)染色單體，到有絲分裂中期，每條染色體含有兩條染色單體，且每條單體含有一個DNA分子?！驹斀狻啃Q豆根尖細(xì)胞染色體DNA原來不含3H，含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸作為合成DNA原料，由于DNA為半保留復(fù)制，完成一個細(xì)胞周期后，細(xì)胞每條染色體的每個DNA都含3H（一條鏈含3H，另一條鏈沒有）。然后在不含放射性標(biāo)記的培養(yǎng)基中繼續(xù)分裂至中期，每條染色體含有兩條單體，1條單體的DNA一條鏈含3H，另一條鏈沒有，即該單體含3H；另一條單體的DNA兩條鏈都不含3H，即該單體不含3H。綜上所述，B正確，ACD錯誤。故選B?！军c(diǎn)睛】本題考查有絲分裂過程及其變化規(guī)律、DNA復(fù)制等知識，首先要求考生掌握DNA分子復(fù)制的特點(diǎn)和有絲分裂不同時期的特點(diǎn)；其次要求考生能將DNA分子復(fù)制和有絲分裂過程結(jié)合，判斷有絲分裂中期染色體的放射性情況。3、B【解析】

邏輯斯蒂增長是指在資源有限、空間有限和受到其他生物制約條件下的種群增長方式，其增長曲線很像字母S，又稱S形增長曲線。種群的邏輯斯蒂增長總是受到環(huán)境容納量（K）的限制，環(huán)境容納量是指在長時間內(nèi)環(huán)境所能維持的種群最大數(shù)量。酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況?！驹斀狻緼、4個試管均獲得了“S”型增長曲線，因此種群的增長速率都是先增大、后減小到零，A正確；B、IV號試管內(nèi)培養(yǎng)液體積最少，起始菌數(shù)量最多，因此環(huán)境阻力最大，最先達(dá)到K值，B錯誤；C、III號試管內(nèi)培養(yǎng)液體積最多，起始菌數(shù)量最少，晚于其他三支試管開始下降，C正確；D、酵母菌種群數(shù)量動態(tài)變化受營養(yǎng)條件、氧氣濃度、溫度、接種量等影響，D正確。故選B。4、C【解析】

生長素的作用是促進(jìn)細(xì)胞生長，促進(jìn)扦插枝條生根，促進(jìn)果實(shí)發(fā)育等。赤霉素的作用是促進(jìn)生長，解除休眠。脫落酸的作用是抑制細(xì)胞分裂，促進(jìn)葉和果實(shí)的衰老和脫落。細(xì)胞分裂素的作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂和組織分化。乙烯可以促進(jìn)果實(shí)成熟。【詳解】適宜濃度的生長素可促進(jìn)扦插枝條生根，提高插條的成活率，A正確；赤霉素能促進(jìn)細(xì)胞伸長，從而引起植株增高，B正確；脫落酸抑制細(xì)胞分裂和種子萌發(fā)，C錯誤；乙烯的主要作用是促進(jìn)果實(shí)成熟，D正確，因此，本題答案選C?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是：明確植物激素或植物生長調(diào)節(jié)劑的功能及應(yīng)用，脫落酸屬于抑制性植物激素，再根據(jù)題意作答。5、A【解析】抗體不是由效應(yīng)T細(xì)胞分泌的，且效應(yīng)T細(xì)胞直接與靶細(xì)胞結(jié)合，A錯誤；在反射弧中，傳出神經(jīng)元分泌神經(jīng)遞質(zhì)，作用于效應(yīng)器（肌細(xì)胞），B正確；胰島B細(xì)胞分泌的胰島素可以作用于肝細(xì)胞，促進(jìn)肝細(xì)胞中物質(zhì)的氧化分解和肝糖原的形成，C正確；甲狀腺細(xì)胞分泌的甲狀腺激素過多時，可以作用于垂體細(xì)胞，抑制其分泌活動，D正確。6、B【解析】

據(jù)題文和選項(xiàng)的描述可知：本題考查學(xué)生對基因工程的基本操作程序的相關(guān)知識的識記和理解能力?！驹斀狻繕?gòu)建基因表達(dá)載體時需要在目的基因前加上啟動子，A錯誤；農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，依據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，可以將目的基因隨機(jī)插入受體細(xì)胞的染色體DNA上，B正確；標(biāo)記基因中可以有限制酶的識別位點(diǎn)，為了防止標(biāo)記基因被破壞而失去作用，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，使用的限制酶應(yīng)該不具有識別標(biāo)記基因中的限制酶的識別位點(diǎn)的能力，C錯誤；導(dǎo)入人胰島素基因的大腸桿菌，因沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對胰島素進(jìn)行加工，所以不能直接生產(chǎn)出有活性的人胰島素，D錯誤。二、綜合題：本大題共4小題7、常染色體顯性遺傳基因突變有低頻性，而B組F1中15%頻率較高溫度影響酶的活性從而影響基因表達(dá)導(dǎo)致生物變異選取B組中殘翅個體自由交配，在25℃下培育子代，若子代恢復(fù)長翅或子代中長翅∶殘翅=3∶1，則推測合理，若子代仍為殘翅，則推測不合理基因控制生物的性狀而性狀的形成還受到環(huán)境的影響【解析】

基因突變是指DNA分子中堿基對的增添、缺失或替換，而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變，基因突變的結(jié)果是產(chǎn)生新基因，因此基因突變時生物變異的根本來源，為生物的進(jìn)化提供了最初的原材料?；蛲蛔兙哂衅毡樾?、隨機(jī)性、低頻性、不定向性和多害少利性。生物的性狀是由基因控制的，但同時也受環(huán)境的影響，因此說，表現(xiàn)型=基因型+環(huán)境?！驹斀狻浚?）由于A組的結(jié)果為正常溫度（25℃）條件下培養(yǎng)獲得且均為長翅，性狀表現(xiàn)與性別無關(guān)，因此可知蘭花螳螂長翅的遺傳方式是常染色體顯性遺傳。（2）研究小組對B組實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析認(rèn)為，基因突變具有低頻性，而B組F1中15%的表現(xiàn)殘翅，15%異常頻率表現(xiàn)較高，因此認(rèn)為，F(xiàn)1中殘翅的出現(xiàn)不是基因突變的結(jié)果，而可能是環(huán)境引起的。（3）研究小組推測B組殘翅的變異屬于不可遺傳的變異，變異的原因是溫度通過影響了酶的活性影響代謝過程進(jìn)而影響了生物的性狀。為了證明上述結(jié)論設(shè)計實(shí)驗(yàn)如下：選取B組中殘翅個體自由交配獲得子代，在25℃下培養(yǎng)，若子代中有長翅出現(xiàn)或子代中長翅∶殘翅=3∶1，則推測合理，若子代仍為殘翅，則推測不合理。（4）基因、環(huán)境和性狀之間的關(guān)系表現(xiàn)為生物的性狀是由基因控制的，但同時也受環(huán)境的影響，換句話說，基因控制生物的性狀而性狀的形成還受到環(huán)境的影響，即表現(xiàn)型=基因型+環(huán)境?！军c(diǎn)睛】熟知基因突變的概念和特點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵，學(xué)會遺傳學(xué)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計是解答本題的另一關(guān)鍵！根據(jù)雜交結(jié)果辨別性狀的遺傳類型也是本題的考點(diǎn)之一。8、濾杯、濾膜和濾瓶酒精燈火焰接種固體鑒別3100提供氧氣，使大腸桿菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸高于短于【解析】

濾膜法是檢測水樣中大腸細(xì)菌數(shù)量的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌的菌落即可推測計算出水樣中的大腸桿菌數(shù)；大腸桿菌在伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)后菌落呈深紫色，并有金屬光澤?！驹斀狻浚?）過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進(jìn)行滅菌處理的有濾杯、濾膜和濾瓶，與過濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌的污染。（2）將完成過濾之后的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上，可將濾膜上的菌體“復(fù)印”在培養(yǎng)基上，使其在培養(yǎng)基上生長，這屬于微生物培養(yǎng)中的接種操作。從物理狀態(tài)分析，EMB培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，從功能上分析，由于培養(yǎng)基上加有伊紅美藍(lán)，所以屬于鑒別培養(yǎng)基。（3）在無菌操作下將10ml待測水樣加入到90ml無菌水中，即稀釋了10倍，稀釋后的菌液通過濾膜法測得EMB培養(yǎng)基上的菌落數(shù)平均為124，黑色菌落數(shù)平均為31，由于黑色菌落為大腸桿菌，所以可推測1升待測水樣中的大腸桿菌數(shù)目為31×（1000÷10）=3100個。（4）用搖床振蕩培養(yǎng)，可達(dá)到供應(yīng)微生物所需氧氣，同時使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)與大腸桿菌充分接觸的目的，使大腸桿菌的繁殖速度加快。（5）不同種類的微生物，一般需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間，在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時，細(xì)菌培養(yǎng)溫度應(yīng)高于霉菌培養(yǎng)溫度，但培養(yǎng)時間短于霉菌培養(yǎng)時間?！军c(diǎn)睛】本題以實(shí)驗(yàn)流程圖為載體，考查了微生物的分離與計數(shù)的有關(guān)知識，要求考生掌握濾膜法的原理和步驟，掌握無菌技術(shù)的主要內(nèi)容，識記大腸桿菌鑒定的方法等，結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題。9、石油為唯一碳源選擇達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值稀釋涂布平板法涂布不均勻劃線過程接種環(huán)上的菌種逐漸減少篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選菌株的過程要使用選擇培養(yǎng)基，操作過程中要注意無菌操作，常用的固體培養(yǎng)基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法；微生物計數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計數(shù)板計數(shù)法。【詳解】（1）為篩選出能分解石油的細(xì)菌，步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中所以石油是唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。低溫常壓不能達(dá)到滅菌的目的，故培養(yǎng)基的滅菌時間應(yīng)該從達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值開始計時。

（2）接種細(xì)菌常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖B中該同學(xué)的接種方法為稀釋涂布平板法，出現(xiàn)圖B的結(jié)果可能是操作過程中涂布不均勻?qū)е碌?。?）根據(jù)圖示：同學(xué)乙采用的接種方法是平板劃線法純化菌株，培養(yǎng)后的菌落分布如圖C，平板中部分菌落越來越稀少，因?yàn)槭莿澗€過程每次劃線的菌種都來自上次劃線的末端，隨劃線次數(shù)的增加接種環(huán)上的菌種逐漸減少，最后形成分散成單個菌，進(jìn)而繁殖成菌落。（4）步驟⑤后取樣測定石油含量，進(jìn)一步操作是為篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌?！军c(diǎn)睛】本題主要考查微生物的篩選與分離與微生物的培養(yǎng)等知識，意在加強(qiáng)學(xué)生對相關(guān)知識點(diǎn)的識記與理解。10、之后果膠酶（和果膠甲酯酶）含糖量較低干酵母（懸液）出現(xiàn)氣泡酵母下沉無菌空氣/氧氣抑制雜菌反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度、反應(yīng)時間氯化鈣CaCl2不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素項(xiàng)端分生組織繼代培養(yǎng)【解析】

1.釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)。與酒和醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物分別是酵母菌和醋桿菌，它們各有不同的菌種。菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。本實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖進(jìn)行酒精發(fā)酵(乙醇發(fā)酵)的產(chǎn)物。酵母菌只有在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵，即將葡萄糖氧化成乙醇，而且當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式如下。醋桿菌在有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸，醋桿菌所產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中醋酸的含量高達(dá)13%。2.基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【詳解】（一）（1）制備山楂果原汁通常選成熟的山楂果，為了避免雜菌污染，通常在用清水沖洗山楂果之后去梗。將山楂果切片并去籽，為了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果膠酶（和果膠甲酯酶）處理，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵時通常需要在發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以彌補(bǔ)山楂果原汁含糖量較低的不足，同時也是為了滿足酵母菌發(fā)酵需要的底物量，從而獲得酒精含量較高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（懸液）后，置于適宜環(huán)境下進(jìn)行發(fā)酵，由于酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，所以在發(fā)酵過程中會有氣泡產(chǎn)生，當(dāng)發(fā)酵液中不再出現(xiàn)氣泡時，意味著發(fā)酵完成，然后過濾獲得果酒；也可發(fā)酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即為果酒。（3）醋酸發(fā)酵中，由于醋化醋桿菌在有氧氣的條件下將酒精變?yōu)闉橐胰?，進(jìn)而變?yōu)橐掖?，所以整個發(fā)酵過程需要通入無菌空氣/氧氣。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，食鹽起到了調(diào)味和抑制雜菌的作用，進(jìn)而防止果醋被其他微生物發(fā)酵分解。（二）（1）①為構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，則兩者會出現(xiàn)相同的粘性末端從而使得拼接變得容易，但這種方法存在明顯的缺點(diǎn)是在拼接時會出現(xiàn)反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化等情況。影響拼接效率的因素主要有鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素，除此外，還有且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度和反應(yīng)時間也會影響拼接的效率。（2）②過程為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，為了提高導(dǎo)入的成功率，可用氯化鈣CaCl2處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。因?yàn)閷?dǎo)入的成功率較低，也就是說，并不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒，可能有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，或者沒有導(dǎo)入成功，所以需要在特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進(jìn)行篩選，由于圖中重組質(zhì)粒上含有標(biāo)記基因四環(huán)素抗性基因，而抗青霉素的基因被破壞，為了篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，需要將待篩選的農(nóng)桿菌分別接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基和含青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，最終篩選到成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡。（3）③過程為再分化成植株的過程，該過程中需要通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑