GPC操作作業(yè)規(guī)程專業(yè)資料

排阻色譜SEQ分析排阻色譜SEQ分為GPC（凝膠滲入色譜）和GFC（凝膠過濾色譜）GPC重要用于聚合物領域，GFC重要用于生物科學領域。如下簡介島津GPC分析系統(tǒng)特點：★以分子量大小分離：分子量大先洗出，小后洗出。按保存時間計算分子量分布?！飳Ｓ蒙V柱分類：●以分子量大小分類（表白分離線性范疇）?！褚粤鲃酉喾诸愂褂盟臍溥秽髁鲃酉唷Ｊ褂肈MF作流動相。（二甲基甲酰胺）使用氯仿作流動相。使用水性溶液作流動相。依照色譜柱線性分布，色譜柱可以串連使用，先連接分子量大，再接分子量小。島津GPCVol.1.02軟件操作一方面，在CLASS-VP中對原則品進行色譜分析，優(yōu)化積分后，得到抱負色譜圖和數(shù)據(jù)，即去掉雜質峰和負峰（Method∈IntegrationEvents中MinArea最小峰面積，Intergateoff禁止積分，WIDTH半峰寬等等）。然后進入GPC分析軟件：點擊開始∈程序∈GPC∈GPCforCLASS-VP浮現(xiàn)下面對話框：在Datafilename下為從CLASS-VP中由色譜文獻（***。dat）轉換成相應GPC文獻起名和排序號******.D**（如DLSICA。D01）。然后點擊OK進入下面菜單：在窗口中有如下七個解決功能圖標：GPCGPCMolGPCSuperSingleFileconfigurationMethodWeightBatchImposeChrmatogramManagerGPC配備GPC辦法分子量批解決疊加單色譜文獻管理上述圖標中選取GPCGPC辦法即可以滿足尋常分析應用。Method2．下面再返回到CLASS-VP工作站中操作，先將其他界面最小化，如圖：如圖：選取File∈Data∈Open打開原則品色譜數(shù)據(jù)選取數(shù)據(jù)文獻后，打開選取File∈Method∈Open打開分析該原則品辦法（已優(yōu)化積分完畢）選取Analysis∈Analyze分析計算該原則品一次。3．點擊最下方圖標欄中GPCforCLASS-VP圖標，如圖：進入下面界面：雙擊GPC辦法圖標，進入下面菜單：該菜單分為三某些：CalibrationCurveTable為校準曲線表，編輯原則品保存時間Time，分子量Molecular等參數(shù)CalibrationCurve（Linear）標定后，顯示校準曲線。Chromatograph顯示打開原則品GPC格式圖譜。4．如圖選取File∈LoadLCDatafile選?。?）中分析原則品時轉換GPC數(shù)據(jù)文獻，擬定后顯示下面界面：點擊該界面中GET鍵，得到下面界面：提問與否ClearCalibrationTable？（清除當前校準表？）選取是顯示下面界面：在CalibrationCurveTable校準曲線表中Molecular項中，分別鍵入各個組分峰分子量然后點擊該表左下角Draw顯示得到擬合曲線界面：在該界面（CalibrationCurve（Linear）中，顯示標定后校準曲線。如果校準曲線擬合不抱負，可以點擊該曲線左下角Type鍵，顯示下面界面，選中合理擬合類型：點擊OK得到下面重新擬合后曲線：●修正：*如果樣品與原則品一致（例如皆為聚苯乙烯）則不需修正。在上面界面中選取Parameter∈GPCParameter如圖：浮現(xiàn)下面界面：NameQfactorV---αV---k樣品名粘度系數(shù)原則品α值原則品k值如無則粘度系數(shù)Q和α，k皆輸入1，點擊OK校準曲線及時得到修正。*如果樣品與原則不一致（原則與樣品不一致）則需修正。在上面界面中選取Parameter∈MHConversion如圖：浮現(xiàn)下面界面：V—α粘度系數(shù)（據(jù)MH公式手冊查出鍵入），V—k粘度系數(shù)（據(jù)MH公式手冊查出鍵入）PolymerA原則品α，k值。PolymerB樣品α，k值。點擊OK校準曲線及時得到修正。如果查不到樣品粘度系數(shù)α，k值，則不做該相修正。粘度修正Parameter∈MHConversion在闡明書后有簡介，請仔細閱讀。有時樣品α，k值化學手冊查不到，可以不修正，則最后樣品分析報告，為相對于標樣(如聚苯乙烯)分子量分布。（Mn，M/W等）●保存校準曲線：點擊File∈SaveFileAs浮現(xiàn)下面界面：在Filename中鍵入****在Pathname中擬定保存途徑＊:\＊:\＊:\點擊Save鍵，該校準曲線已保存完畢，將來使用者再做相似樣品，相似條件GPC分析時可以隨時打開調用，不用每次分析都做原則品分析標定。需要注意是，如果分析條件發(fā)生變化（如流動相，流速等），出峰保存時間產(chǎn)生偏移較大時，應當重新分析原則品標定校準曲線，以保證分析成果精確。5．樣品GPC分析：當前可以返回到CLASS-VP中對樣品進行色譜分析，分析結束后，執(zhí)行分析計算一次即可。也可以調入已做完樣品色譜數(shù)據(jù)，執(zhí)行分析計算一次，都會得到相應轉換GPC文獻。然后進入GPC辦法界面，點擊如圖Calculation∈GPCCalculation：浮現(xiàn)下面界面：在LCCalc。Data：中點擊圖標■打開需要樣品GPC文獻名在GPGMethod：中確認所用校準曲線文獻名，如下圖：點擊擬定再點擊上面界面中Calculation鍵，顯示下面界面：樣品GPC計算即告完畢。6．分析報告檢查：點擊View菜單中各項點擊View∈Slice檢查 切片數(shù)據(jù)點擊View∈Peak檢查 個峰數(shù)據(jù)點擊View∈AverageMolecularWeight檢查分子量數(shù)據(jù)點擊Report∈Format編輯報告輸出格式在下面界面