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文檔簡介
2025屆河南省漯河高中高考考前提分生物仿真卷注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑;如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動(dòng),先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.測定玉米正常植株和矮化突變體植株的內(nèi)源赤霉素含量,結(jié)果如下圖。用等量外源赤霉素分別處理正常植株和矮化突變體植株的莖,正常植株莖的節(jié)間無顯著變化,矮化突變體植株莖的節(jié)間恢復(fù)到正常植株的長度。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.赤霉素能促進(jìn)玉米莖節(jié)間的伸長B.該實(shí)驗(yàn)不能說明赤霉素作用的兩重性C.不能確定該矮化突變體是由基因突變所致D.矮化突變體的莖可能對赤霉素的作用不敏感2.如圖為一種植物扦插枝條經(jīng)不同濃度IAA浸泡30min后的生根結(jié)果(新生根粗細(xì)相近),對照組為不加IAA的清水。下列敘述正確的是A.對照組生根數(shù)量少是因?yàn)橹l中沒有IAAB.四組實(shí)驗(yàn)中,300mg/LIAA誘導(dǎo)莖細(xì)胞分化出根原基最有效C.100與300mg/LIAA處理獲得的根生物量相近D.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果體現(xiàn)了IAA對根生長作用的兩重性3.榕樹隱頭花序(俗稱榕果)的苞片可以防止小蜂進(jìn)入其內(nèi)產(chǎn)卵。傳粉榕小蜂能撕咬并鉆過苞片進(jìn)入榕果產(chǎn)卵,并幫助榕樹傳粉。楊氏榕樹金小蜂通常利用傳粉榕小蜂咬出的通道才能進(jìn)入榕果并完成產(chǎn)卵。科研人員研究榕果內(nèi)的不同種類的產(chǎn)卵小蜂對榕果種子產(chǎn)量以及它們后代數(shù)量的影響,結(jié)果如下表所示。對實(shí)驗(yàn)的分析不正確的是()榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂的種類榕果內(nèi)種子數(shù)量傳粉榕小蜂后代數(shù)量楊氏榕樹金小蜂后代數(shù)量傳粉榕小蜂5.5408.50傳粉榕小蜂和楊氏榕樹金小蜂10.010.580.7A.楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似B.楊氏榕樹金小蜂進(jìn)入榕果內(nèi)產(chǎn)卵有助于榕樹傳粉C.榕果內(nèi)傳粉榕小蜂比楊氏榕樹金小蜂的競爭力強(qiáng)D.傳粉榕小蜂與榕樹之間的關(guān)系為互利共生4.勞斯肉瘤病毒能引起禽類患惡性腫瘤。研究人員做了以下實(shí)驗(yàn):①將病毒分別加入到含有雞胚細(xì)胞的A、B兩燒杯中(A中提前加入RNA酶);②再分別向A、B燒杯中加入用3H標(biāo)記的4種脫氧核苷酸。結(jié)果:只在B燒杯中出現(xiàn)了含放射性的大分子物質(zhì)M。以下推測合理的是()A.物質(zhì)M是DNA或RNAB.勞斯肉瘤病毒的遺傳物質(zhì)是DNAC.該病毒感染細(xì)胞后可能進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄D.將雞胚細(xì)胞換成營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)液結(jié)果相同5.將若干生理狀況基本相同,長度為3cm的鮮蘿卜條分為四組,分別置于三種濃度相同的溶液(實(shí)驗(yàn)組)和清水(對照組)中,測量每組蘿卜條的平均長度,結(jié)果如圖。據(jù)圖分析,下列敘述錯(cuò)誤的是()A.對照組中蘿卜條長度增加較少的原因是細(xì)胞壁的伸縮性較小B.蔗糖溶液中的蘿卜條不能恢復(fù)原長度是因?yàn)檎崽遣荒苓M(jìn)入細(xì)胞C.實(shí)驗(yàn)曲線圖推測出蘿卜細(xì)胞膜上運(yùn)載葡萄糖的載體比甘油載體數(shù)量少D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,實(shí)驗(yàn)組中的蘿卜條的細(xì)胞液濃度都比實(shí)驗(yàn)前大6.如圖是某森林在遭受火災(zāi)完全燒毀前后植被的分布及變化情況,下列敘述正確的是()A.a(chǎn)~b段,三類植物呈斑塊鑲嵌分布體現(xiàn)水平結(jié)構(gòu)B.b~d段,由于森林完全燒毀發(fā)生的演替屬于初生演替C.群落演替過程中,雪松等喬木常形成均勻分布型D.b~d段群落演替的過程中,該群落的主要物種沒有發(fā)生變化7.某地的草地貪夜蛾種群約有19%攜帶有機(jī)磷類殺蟲劑的抗性基因A。大量使用有機(jī)磷類殺蟲劑,假設(shè)該種群中非抗性個(gè)體全都死亡,存活個(gè)體繁殖一代后,抗性個(gè)體所占的比例約為()A.280/361 B.9/19 C.10/19 D.81/3618.(10分)圖中是以每個(gè)營養(yǎng)級生物的數(shù)量多少而繪制的金字塔,其中1、2、3分別代表第一、二、三個(gè)營養(yǎng)級的生物,下面哪條食物鏈與該金字塔相符()①草②樹③昆蟲④兔⑤鳥⑥狼A.②→③→⑤ B.①→④→⑥C.①→③→⑥ D.③→④→⑥二、非選擇題9.(10分)某天然池塘中生活著不同食性的多種魚類,在不受外界因素干擾的情況下,該生態(tài)系統(tǒng)可穩(wěn)定存在。有人將該天然池塘改造成了以養(yǎng)殖鯰魚為主的人工魚塘,在養(yǎng)殖過程中要投放魚飼料。回答下列問題:(1)天然池塘中不同食性的魚類往往占據(jù)不同的水層,不同食性魚類的這種分層現(xiàn)象主要是由____________決定的。天然池塘可穩(wěn)定存在是由于生態(tài)系統(tǒng)具有____________能力。(2)與天然池塘相比,人工魚塘的魚產(chǎn)量較高,若天然池塘與人工魚塘中生產(chǎn)者固定的能量相同,從能量流動(dòng)的角度分析可能的原因是____________(答出兩點(diǎn))。(3)如圖為該人工魚塘中主要生物的捕食關(guān)系圖。圖中輪蟲與水蚤的種間關(guān)系是____________。若一年內(nèi)該魚塘中水草同化的能量為Q,動(dòng)物X同化的能量為M,不考慮人工投放的魚飼料,理論上這一年內(nèi)鯰魚同化的能量最多為________________________。10.(14分)某農(nóng)業(yè)科學(xué)工作者探究溫室中茄子在晴天和陰雨天一天中光合速率的變化,結(jié)果如下圖所示。請據(jù)圖回答問題:(1)晴天一天中茄子在11:00時(shí)光合速率低于10:00,原因是________________________________________________,此時(shí)光合速率_____(填“大于”、“等于”、“小于”)呼吸速率。(2)陰雨天溫度變化較小,接近20℃,但光合速率較小,此時(shí)限制因素是_____________________。此時(shí)欲提高茄子產(chǎn)量,可采取的措施是____________________________________________________。(3)晴天中午14:00時(shí)突然降低光照強(qiáng)度,茄子葉綠體中C3_______、C5含量________。(4)某農(nóng)民結(jié)合該研究成果栽種茄子,結(jié)果長勢不良,分析原因發(fā)現(xiàn)是短期施肥過量所致,請分析原因__________________________________________________________________________________。11.(14分)將人IL-12基因表達(dá)載體導(dǎo)入T細(xì)胞,可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖分化,促進(jìn)淋巴因子分泌,增強(qiáng)效應(yīng)T細(xì)胞的殺瘤活性?;卮鹣铝袉栴}:(l)體外采用PCR技術(shù)擴(kuò)增IL-12基因時(shí),依據(jù)的原理是____,該技術(shù)使用Taq酶而不使用細(xì)胞DNA聚合酶的主要原因是____。(2)構(gòu)建的IL-12基因表達(dá)載體的組成有IL-12基因、復(fù)制原點(diǎn)_____(至少答2點(diǎn))等,將其導(dǎo)入T細(xì)胞常采用的方法是____。(3)檢測IL-12基因在T細(xì)胞中是否翻譯出IL-12蛋白,可采用____,若出現(xiàn)____,則成功翻譯。(4)研究表明:正常機(jī)體T細(xì)胞導(dǎo)入IL-12基因表達(dá)載體后,抗體的數(shù)量明顯增多。原因是________12.玉米和小麥?zhǔn)俏覈鴥煞N重要的糧食作物,圖甲和圖乙分別是不同條件下兩種農(nóng)作物的凈光合作用速率測定結(jié)果。請回答:(1)結(jié)合圖甲分析,如果將小麥和玉米幼苗種植在同一密閉溫室(光照、溫度等條件適宜)內(nèi)一段時(shí)間,可能最先死亡的是__________________原因是_________________細(xì)胞間隙CO2濃度在C時(shí),小麥和玉米實(shí)際光合作用速率是否相等?為什么?_______________。(2)圖乙中,小麥在10~12時(shí)、16~18時(shí)光合作用速率下降的主要原因分別是____和____。(3)為探究高溫(35°C)對小麥、玉米凈光合速率的影響,請?jiān)O(shè)計(jì)簡要的實(shí)驗(yàn)思路(常溫為25°C)_________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
分析題圖,矮化突變體玉米中的內(nèi)源赤霉素含量較正常玉米低,但在施加外源赤霉素處理后,矮化突變體植株莖的結(jié)節(jié)恢復(fù)到正常植株的水平,可推斷矮化突變體玉米是由于自身產(chǎn)生的內(nèi)源性赤霉素不足而導(dǎo)致的結(jié)節(jié)長度短,植株本身能夠正常利用赤霉素使莖結(jié)節(jié)伸長?!驹斀狻緼、矮化突變體植株添加了外源赤霉素恢復(fù)到正常植株的長度說明赤霉素能促進(jìn)玉米莖節(jié)間的伸長,A正確。B、該實(shí)驗(yàn)中沒有現(xiàn)象可以說明赤霉素對莖的生長起抑制作用,故不能體現(xiàn)赤霉素作用的兩重性,B正確;C、根據(jù)題目中的信息,無法得知矮化突變體的產(chǎn)生原因,C正確;D、矮化突變體產(chǎn)生的原因是內(nèi)源性赤霉素產(chǎn)生不足,仍能利用赤霉素使莖結(jié)節(jié)伸長,D錯(cuò)誤;故選D。2、B【解析】
據(jù)圖分析,該實(shí)驗(yàn)的自變量是IAA的濃度,因變量是平均生根數(shù)和平均根長;與對照組相比,隨著IAA濃度的增加,平均生根數(shù)先增加后減少,平均根長先增加后略有減少?!驹斀狻繉φ战M生根數(shù)量少是因?yàn)橹l中IAA較少,A錯(cuò)誤;據(jù)圖分析可知,四組實(shí)驗(yàn)中,300mg/L的IAA濃度下平均生根數(shù)最多,說明誘導(dǎo)莖細(xì)胞分化出根原基最有效,B正確;圖中顯示,100與300mg/L處理獲得的根的長度相近,但是數(shù)量不相等,因此兩者獲得的根的生物量不相等,C錯(cuò)誤;與對照組相比,高濃度下沒有體現(xiàn)抑制生根數(shù)和根長的現(xiàn)象,因此不能體現(xiàn)出IAA對根生長作用的兩重性,D錯(cuò)誤?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是對于柱狀圖的分析,找出實(shí)驗(yàn)的自變量和因變量,并與對照組相比得出平均生根數(shù)和平均根長隨IAA濃度的變化規(guī)律。3、C【解析】
表格分析:比較榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂只有傳粉榕小蜂時(shí)和榕果內(nèi)產(chǎn)卵小蜂有楊氏榕樹金小蜂、傳粉榕小蜂時(shí),可以看出,有兩種小蜂的榕果內(nèi)種子數(shù)量較多,傳粉小蜂后代數(shù)量減少,而楊氏榕樹金小蜂后代數(shù)量增多,說明楊氏榕樹金小蜂和傳粉榕小蜂共同存在有利于榕果內(nèi)種子數(shù)量的增加,同時(shí)這兩種小蜂存在競爭關(guān)系,并且是楊氏榕樹金小蜂在競爭中占優(yōu)勢?!驹斀狻緼、由題干信息“楊氏榕樹金小蜂可以利用傳粉格小蜂咬出的通道進(jìn)入榕果并完成產(chǎn)卵”,說明楊氏榕樹金小蜂與傳粉榕小蜂體型可能相似,A正確;B、由表格分析可知,楊氏榕樹金小蜂和傳粉榕小蜂共同存在有利于榕果內(nèi)種子數(shù)量的增加,說明楊氏榕樹金小蜂進(jìn)入榕果內(nèi)產(chǎn)卵有助于榕樹傳粉,B正確;C、由上分析可知,榕果內(nèi)楊氏榕樹金小蜂比傳粉榕小蜂具有更強(qiáng)的資源競爭能力,C錯(cuò)誤;D、榕樹依靠傳粉榕小蜂為之傳粉,傳粉榕小蜂在榕樹榕果中產(chǎn)卵,為其幼體唯一的棲息場所和食物來源,說明是互利共生關(guān)系,D正確。故選C。4、C【解析】
A和B的區(qū)別是是否加入RNA酶,加入RNA酶后不能利用脫氧核苷酸,說明該病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒?!驹斀狻緼、物質(zhì)M是DNA,A錯(cuò)誤;B、勞斯肉瘤病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,B錯(cuò)誤;C、A燒杯加入RNA酶后,沒有合成DNA,說明該病毒是以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成DNA,C正確;D、病毒只能在活細(xì)胞中生存,不能換用培養(yǎng)液培養(yǎng),D錯(cuò)誤。故選C。5、C【解析】
分析圖示,在清水中,蘿卜條長度先稍微變長一點(diǎn),然后保持不變,說明細(xì)胞吸收了少量的水;在甘油溶液、葡萄糖溶液中,蘿卜條長度先變短,再變長,最后保持原來的長度不變,說明細(xì)胞先失水,后來由于甘油(葡萄糖)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞吸水復(fù)原;在蔗糖溶液中,蘿卜條長度先變短,再然后保持不變,說明細(xì)胞先失水,后來由于蔗糖不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞大小保持不變。【詳解】A、對照組中細(xì)胞吸水,但由于細(xì)胞壁的伸縮性相對較小,所以細(xì)胞體積增大較小,A正確;B、細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí),當(dāng)溶質(zhì)分子不能被細(xì)胞吸收(或進(jìn)入細(xì)胞)時(shí)(如蔗糖),細(xì)胞不能發(fā)生質(zhì)壁分離的自動(dòng)復(fù)原;而當(dāng)溶質(zhì)分子能夠被吸收時(shí)(不論是主動(dòng)吸收如KNO3還是被動(dòng)吸收如甘油),細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分離的自動(dòng)復(fù)原,B正確;C、甘油為脂溶性小分子,進(jìn)入細(xì)胞為自由擴(kuò)散,所以細(xì)胞膜上沒有運(yùn)輸甘油的載體蛋白,C錯(cuò)誤;D、蔗糖組只失去水分,所以細(xì)胞液濃度變大,甘油組和葡萄糖組由于都吸收了溶質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞,所以細(xì)胞液濃度也變大了,D正確。故選C。6、A【解析】
1、三類植物在群落中呈斑塊狀鑲嵌分布應(yīng)為群落水平結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)。2、根據(jù)題圖,b~d段,植物群落的演替情況是草本植物被灌木優(yōu)勢取代,灌木又被喬木優(yōu)勢取代。3、群落演替的原因:生物群落的演替是群落內(nèi)部因素(包括種內(nèi)關(guān)系、種間關(guān)系等)與外界環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果?!驹斀狻緼、由于環(huán)境和人為因素影響,同一地段種群密度有差別,常呈鑲嵌分布,為群落的水平結(jié)構(gòu),A正確;B、b~d段,由于森林完全燒毀發(fā)生的演替屬于次生演替,B錯(cuò)誤;C、均勻分布型屬于種群的空間特征而喬木不屬于一個(gè)種群,C錯(cuò)誤;D、b~d段群落演替的過程中優(yōu)勢種不斷的變化,D錯(cuò)誤。故選A。7、A【解析】
基因頻率是種群基因庫中某一基因占該基因及其等位基因的比例;可遺傳變異為生物進(jìn)化提供原材料,自然選擇通過定向改變種群基因頻率而使種群的基因頻率發(fā)生定向改變,進(jìn)而決定生物進(jìn)化的方向?!驹斀狻糠N群中有19%的個(gè)體攜帶對有機(jī)磷類殺蟲劑的抗性基因A,則群體中隱性個(gè)體(aa)占81%,A基因的頻率為0.1,a基因的頻率為0.9,AA個(gè)體占1%,Aa個(gè)體占18%。當(dāng)群體中的非抗性個(gè)體全部死亡后,A基因頻率變?yōu)?0/19,a基因頻率變?yōu)?/19,繁殖一代后,aa個(gè)體占81/361,Aa和AA個(gè)體占280/361,A正確,故選A。8、A【解析】
根據(jù)題意和圖示分析可知:圖示為以每個(gè)營養(yǎng)級生物的數(shù)量多少而繪制的金字塔,其中a、b、c分別代表第一、二、三營養(yǎng)級的生物,即第二營養(yǎng)級生物數(shù)量最多,其次是第三營養(yǎng)級,而生產(chǎn)者數(shù)量最少?!驹斀狻緼、在②→③→⑤這條食物鏈中,昆蟲的數(shù)量最多,其次是鳥,最后是樹,與題圖相符,A正確;B、在①→④→⑥這條食物鏈中,草的數(shù)量多于兔,與題圖不符合,B錯(cuò)誤;C、在①→③→⑥這條食物鏈中,草的數(shù)量多于昆蟲,與題圖不符合,C錯(cuò)誤;D、在③→④→⑥中起點(diǎn)是昆蟲,昆蟲屬于第二營養(yǎng)級,不符合食物鏈的寫法,食物鏈必須從第一營養(yǎng)級開始,且位于第一營養(yǎng)級的生物必須是生產(chǎn)者,D錯(cuò)誤。故選A。二、非選擇題9、食物自我調(diào)節(jié)人工投放的魚飼料中的能量被鯰魚利用;營養(yǎng)級較少,能量流動(dòng)中損失的能量較少競爭【解析】
生態(tài)系統(tǒng)的概念:生物群落與它的無機(jī)環(huán)境相互作用而形成的統(tǒng)一整體。生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和食物鏈、食物網(wǎng),其功能包括能量流動(dòng)、物質(zhì)循環(huán)和信息傳遞?!驹斀狻浚?)天然池塘中,不同食性的魚類占據(jù)垂直空間上不同的水層,這體現(xiàn)了群落的垂直結(jié)構(gòu),影響魚類垂直結(jié)構(gòu)的主要因素是食物。生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力,所以在通常情況下生態(tài)系統(tǒng)會(huì)保持穩(wěn)定。(2)與天然池塘相比,人工魚塘的魚產(chǎn)量較高,從能量流動(dòng)的角度分析,可能的原因有:人工投放的魚飼料中的能量被魚利用;營養(yǎng)級較少,能量流動(dòng)中損失的能量較少等。(3)圖中輪蟲與水蚤均以水草為食,故二者的種間關(guān)系為競爭。根據(jù)題意可知,輪蟲和水蚤的最大同化量之和為Q×20%-M,故理論上鯰魚同化的能量最多為(Q×20%-M)×20%【點(diǎn)睛】本題需要考生綜合生態(tài)學(xué)的知識(shí),難點(diǎn)是對食物網(wǎng)進(jìn)行分析,結(jié)合能量流動(dòng)的特點(diǎn)進(jìn)行計(jì)算。10、與10:00相比,11:00時(shí)溫度過高,蒸騰作用過強(qiáng),失水過多,部分氣孔關(guān)閉,影響CO2的吸收,影響了光合作用的暗反應(yīng)過程大于光照強(qiáng)度增大光照強(qiáng)度(或降低溫室溫度)高低施肥過量,土壤溶液濃度過高,導(dǎo)致根毛細(xì)胞不能吸收甚至失水【解析】
本題結(jié)合圖示主要考查影響光合作用的環(huán)境因素,意在強(qiáng)化學(xué)生對影響光合作用的環(huán)境因素的理解與應(yīng)用。影響光合作用的環(huán)境因素主要有光照強(qiáng)度、溫度和二氧化碳難度等.回顧和梳理影響光合作用的環(huán)境因素的相關(guān)知識(shí),結(jié)合坐標(biāo)圖認(rèn)真分析各個(gè)小題,即可正確作答?!驹斀狻浚?)與10:00相比,11:00時(shí)溫度較高,蒸騰作用較強(qiáng),氣孔關(guān)閉,CO2供應(yīng)不足,則11:00時(shí)光合速率低于10:00。由于11:00時(shí),凈光合速率大于0,則此時(shí)光合速率大于呼吸速率。(2)陰雨天溫度接近20℃,但光照強(qiáng)度較低,故光合速率較小,此時(shí)可通過增大光照強(qiáng)度,增大光合速率,或降低溫室溫度,降低呼吸速率,從而提高茄子產(chǎn)量。(3)光照強(qiáng)度降低,光反應(yīng)產(chǎn)物[H]和ATP少,C3還原弱,則C3含量高,C5含量低。(4)施肥過量,土壤溶液濃度過高,導(dǎo)致根毛細(xì)胞不能吸水甚至失水,植株萎蔫,長勢不良【點(diǎn)睛】蒸騰作用指的是植物通過蒸發(fā)由葉片失水的過程。蒸騰作用可以促進(jìn)植物體內(nèi)水分及無機(jī)鹽的運(yùn)輸;促進(jìn)根部對礦質(zhì)離子的吸收;降低植物葉片表面的溫度;為大氣提供大量的水蒸氣,使當(dāng)?shù)氐目諝獗3譂駶?,使氣溫降低,讓?dāng)?shù)氐挠晁渑?,形成良性循環(huán)。11、DNA(雙鏈)復(fù)制Taq酶熱穩(wěn)定性高,而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因顯微注射法抗原一抗體雜交雜交帶正常機(jī)體T細(xì)胞導(dǎo)入IL–12基因表達(dá)載體后,T細(xì)胞分泌淋巴因子增多,促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化為漿細(xì)胞的能力增強(qiáng),從而產(chǎn)生更多的抗體【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)PCR擴(kuò)增目的基因利用的是DNA雙鏈復(fù)制的原理,該過程利用的Taq酶熱穩(wěn)定性高,而細(xì)胞DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活。(2)基因表達(dá)載體的組成有l(wèi)L–12基因、復(fù)制原點(diǎn)、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等,將其導(dǎo)入T細(xì)胞等動(dòng)物細(xì)胞常采用的方法是顯微注射法。(3)檢測IL–12基因是否導(dǎo)入、轉(zhuǎn)錄和翻譯分別用DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù),若出現(xiàn)雜交帶,則說明翻譯成功。(4)正常機(jī)體T細(xì)胞導(dǎo)入IL–12基因表達(dá)載體后,促進(jìn)T細(xì)胞分泌淋巴因子,而淋巴因
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