藥物生殖和發(fā)育毒性作用

關(guān)于藥物生殖和發(fā)育毒性作用反應(yīng)停事件(沙利度胺;酞胺哌啶酮)

1957–1961第2頁,共52頁，星期六，2024年，5月第3頁,共52頁，星期六，2024年，5月生殖發(fā)育是哺乳動(dòng)物繁衍種族的生理過程，其中包含生殖細(xì)胞發(fā)生（即精子發(fā)生和卵細(xì)胞發(fā)生）、配子的釋放、性周期和性行為、卵細(xì)胞受精、受精卵的卵裂、胚泡的形成、植入或著床、胚胎形成、胚胎發(fā)育、器官發(fā)生（或稱器官形成）、胎仔發(fā)育、分娩和哺乳過程。生殖發(fā)育也可稱繁殖過程。第4頁,共52頁，星期六，2024年，5月外源化學(xué)物對(duì)生殖發(fā)育的影響干擾生殖發(fā)育的任何環(huán)節(jié)，并造成損害作用。可以通過對(duì)內(nèi)分泌系統(tǒng)，特別是對(duì)性腺的作用，發(fā)生間接的影響。神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)內(nèi)分泌功能也有調(diào)節(jié)作用，通過下丘腦-垂體-睪丸軸(下丘腦-垂體-卵巢軸)兩條途徑作用于生殖發(fā)育過程。第5頁,共52頁，星期六，2024年，5月外源化學(xué)物對(duì)生殖發(fā)育損害作用的特點(diǎn)

生殖發(fā)育過程較機(jī)體其他系統(tǒng)更為敏感外源化學(xué)物對(duì)生殖發(fā)育過程影響的范圍較為廣泛和深遠(yuǎn)

第6頁,共52頁，星期六，2024年，5月生殖毒理學(xué)(reproductivetoxicology)主要研究外源化學(xué)物對(duì)生殖細(xì)胞發(fā)生、卵細(xì)胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳過程的損害作用及其評(píng)定，評(píng)定方法即為生殖毒性試驗(yàn)。發(fā)育毒理學(xué)(developmentaltoxicology)主要研究外源化學(xué)物對(duì)胚胎發(fā)育、胎仔發(fā)育以及出生幼仔發(fā)育的影響及其評(píng)定，評(píng)定方法稱為發(fā)育毒性試驗(yàn)，其中主要為致畸試驗(yàn)。

第7頁,共52頁，星期六，2024年，5月一、生殖毒性和發(fā)育毒性常用的術(shù)語1、胚胎毒性指藥物對(duì)胚胎的選擇毒性作用。2、胚胎毒物具有胚胎毒性的物質(zhì)。3、致畸性指胚胎在器官發(fā)育期接觸藥物后，能造成永久性結(jié)構(gòu)或功能畸形。第8頁,共52頁，星期六，2024年，5月4、致畸劑

具有致畸性并使出生缺陷發(fā)生率明顯增加的物質(zhì)。5、母體毒性

指對(duì)懷孕動(dòng)物的毒性效應(yīng)。6、致畸指數(shù)

指藥物等對(duì)母體的半數(shù)致死量與最小致畸量之比。第9頁,共52頁，星期六，2024年，5月二、藥物生殖毒理學(xué)1.男性生殖毒理學(xué)

2.女性生殖毒理學(xué)

3.生殖毒性的評(píng)價(jià)

第10頁,共52頁，星期六，2024年，5月1、男性生殖毒理學(xué)

精子的產(chǎn)生精子輸送神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)分泌系統(tǒng)第11頁,共52頁，星期六，2024年，5月1.1精子發(fā)生易感性精子的產(chǎn)生過程第12頁,共52頁，星期六，2024年，5月特定靶位—睪丸內(nèi)環(huán)境

與精子快速生成過程有關(guān)的細(xì)胞分裂和代謝活性，對(duì)某些類型的損傷特別敏感。藥物特別容易損害DNA或影響快速生長(zhǎng)組織需要的細(xì)胞蛋白功能或細(xì)胞呼吸。

DNA損害：X射線、丙烯酰胺、1,3-丁二烯、絲裂霉素C、依托泊苷

蛋白質(zhì)損傷（修飾使其不能參加生化反應(yīng)）：甲氨蝶呤、阿霉素、環(huán)磷酰胺、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿

第13頁,共52頁，星期六，2024年，5月1.2下丘腦-垂體-性腺軸激素調(diào)節(jié)

下丘腦-垂體-性腺軸：

促性腺激素釋放激素促性腺激素(黃體生成素)

雄激素

第14頁,共52頁，星期六，2024年，5月2、女性生殖毒理學(xué)女性生殖系統(tǒng)的功能

第15頁,共52頁，星期六，2024年，5月2.1卵細(xì)胞毒性

阻滯原始卵母細(xì)胞，影響進(jìn)一步的成熟和排卵。如抗癌藥--白消安。2.2卵巢體細(xì)胞和生殖道毒性卵巢體萎縮—環(huán)氧樹脂、呋喃妥因輸卵管和子宮萎縮—鎘第16頁,共52頁，星期六，2024年，5月2.3生殖功能激素調(diào)節(jié)和相關(guān)毒性

下丘腦-垂體-性腺軸:

促性腺激素釋放激素（GnRH）黃體生成素LH

促卵泡素FSH

雌激素及孕激素第17頁,共52頁，星期六，2024年，5月

外源化學(xué)物對(duì)生殖的過程的損害作用可以表現(xiàn)為性淡漠，性無能或各種形式的性功能減退。雌性可出現(xiàn)排卵規(guī)律改變，月經(jīng)失調(diào)或失經(jīng)，卵巢萎縮，受孕減少，胚胎死亡，生殖能力的降低不孕或不育等。雄性可表現(xiàn)為睪丸萎縮或壞死，精子數(shù)目減少。第18頁,共52頁，星期六，2024年，5月3、生殖毒性的評(píng)價(jià)

外源化學(xué)物對(duì)生殖過程作用的評(píng)定主要通過生殖毒性試驗(yàn)來進(jìn)行。生殖毒性試驗(yàn)可以全面反映外源化學(xué)物對(duì)性腺功能、發(fā)情周期、交配行為、受孕、妊娠過程、分娩、授乳以及幼仔斷乳后生長(zhǎng)發(fā)育可能發(fā)生的影響。第19頁,共52頁，星期六，2024年，5月評(píng)定的主要依據(jù)是交配后母體受孕情況（受孕率）、妊娠過程情況（正常妊娠率）、子代動(dòng)物分娩出生情況（出生存活率）、授乳哺育（哺育成活率）以及斷奶后發(fā)育情況等。是檢查外源化學(xué)物對(duì)動(dòng)物生育繁殖機(jī)能有無損害作用的試驗(yàn)。第20頁,共52頁，星期六，2024年，5月試驗(yàn)方法原則受試動(dòng)物：性成熟大鼠、小鼠或家兔劑量分組:一般設(shè)立三個(gè)劑量組（至少兩個(gè)劑量組）和一個(gè)對(duì)照組染毒途徑:動(dòng)物接觸受試物的方法應(yīng)參照人類實(shí)際接觸途徑動(dòng)物數(shù):每組雌雄各16到20只，或雌16到20只，雄8到10只第21頁,共52頁，星期六，2024年，5月試驗(yàn)方案F３bF３aF１bF２bF２aF１aF０（斷奶或出生８周）

給予受試物８到１２周觀察三個(gè)月，喂飼普通飼料，觀察其生長(zhǎng)發(fā)育情況

斷乳后給予受試物８到１２周觀察三個(gè)月，喂飼普通飼料，觀察其生長(zhǎng)發(fā)育情況

斷乳后給予受試物８到１２周第22頁,共52頁，星期六，2024年，5月試驗(yàn)方案2F２斷奶，檢查發(fā)育情況F２出生，每窩留８只幼仔F１交配斷奶，給予受試物F１（每窩選留幼仔８只，雌雄各半）第１６-１９周雌雄交配出生第８周給予受試物（F０）第23頁,共52頁，星期六，2024年，5月觀察指標(biāo)：受孕率（％）:反映雌性動(dòng)物生育能力以及雌性動(dòng)物受孕情況正常分娩率（％）:反映雌性動(dòng)物妊娠過程是否受到影響

幼仔出生存活率（％）:反映雌性動(dòng)物分娩過程是否正常

幼仔哺育成活率（％）:反映雌性動(dòng)物授乳哺育幼仔的能力除上述４個(gè)指標(biāo)外，還應(yīng)該注意出生幼仔是否有畸形存在，對(duì)死亡的幼仔應(yīng)進(jìn)行畸形檢查，可為下一步致畸試驗(yàn)提供參考第24頁,共52頁，星期六，2024年，5月三、藥物發(fā)育毒理學(xué)

發(fā)育毒理學(xué)關(guān)注的是受精后胚胎發(fā)育的整個(gè)過程。

第25頁,共52頁，星期六，2024年，5月1、發(fā)育毒性(developmentaltoxicity)

指出生前經(jīng)父體和(或)母體接觸外源性理化因素引起的在子代到達(dá)成體之前出現(xiàn)的有害作用。具體表現(xiàn)可分為:

生長(zhǎng)遲緩:即胚胎與胎仔的發(fā)育過程在外源化學(xué)物影響下，較正常的發(fā)育過程緩慢。致畸作用:由于外源化學(xué)物干擾，活產(chǎn)胎仔胎兒出生時(shí)，某種器官表現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)異常。第26頁,共52頁，星期六，2024年，5月功能不全或異常:即胎仔的生化、生理、代謝、免疫、神經(jīng)活動(dòng)及行為的缺陷或異常。胚胎或胎仔致死作用:某些外源化學(xué)物在一定劑量范圍內(nèi)，可在胚胎或胎仔發(fā)育期間對(duì)胚胎或胎仔具有損害作用，并使其死亡。

第27頁,共52頁，星期六，2024年，5月2、母體毒性作用與致畸作用關(guān)系具有致畸作用，但無母體毒性出現(xiàn)。出現(xiàn)致畸作用的同時(shí)也表現(xiàn)母體毒性。不具有特定致畸作用機(jī)理，但可破壞母體正常生理穩(wěn)態(tài)。僅具有母體毒性，但不具有致畸作用。在一定劑量下，既不呈現(xiàn)母體毒性，也未見致畸作用。第28頁,共52頁，星期六，2024年，5月3、致畸作用機(jī)理Wilsom(1977)提出了畸形發(fā)生的9種機(jī)制，包括突變、染色體斷裂、有絲分裂改變、改變核酸完整性或功能、減少前體或底物的補(bǔ)給、減少能源支持、改變膜特性、滲透壓不平衡和酶抑制作用。近年來在分子水平的研究有很大的進(jìn)展，雖然胚胎有代償機(jī)制彌補(bǔ)外源性化學(xué)物的影響，但是，是否產(chǎn)生畸形依賴于在致病過程中的每個(gè)步驟在損傷和修復(fù)之間的平衡。第29頁,共52頁，星期六，2024年，5月干擾基因表達(dá)基因突變與染色體畸變損傷細(xì)胞和分子水平的翻譯細(xì)胞調(diào)亡干擾細(xì)胞通過胎盤毒性引起發(fā)育毒性干擾母體穩(wěn)態(tài)內(nèi)分泌干擾作用第30頁,共52頁，星期六，2024年，5月4、外源化學(xué)物發(fā)育毒性的評(píng)價(jià)

傳統(tǒng)常規(guī)致畸試驗(yàn)動(dòng)物選擇劑量分組動(dòng)物交配處理胎仔檢查第31頁,共52頁，星期六，2024年，5月動(dòng)物選擇:

致畸試驗(yàn)的動(dòng)物選擇，除參照毒性試驗(yàn)中選擇動(dòng)物的一般原則，即食性和對(duì)受試物代謝過程與人類接近，體型小，馴服，容易飼養(yǎng)和繁殖及價(jià)廉外，還應(yīng)特別注意妊娠過程較短、每窩產(chǎn)仔數(shù)較多和胎盤構(gòu)造及厚度與人類接近等特點(diǎn)。第32頁,共52頁，星期六，2024年，5月劑量分組一般應(yīng)先進(jìn)行預(yù)試，目的是找出引起母體中毒的劑量。最少設(shè)3個(gè)劑量組，另設(shè)對(duì)照組。原則上最高劑量組，可以引起母體輕度中毒，即進(jìn)食量減少、體重減輕、死亡不超過10%。最低劑量組不應(yīng)觀察到任何中毒癥狀；中間劑量組可以允許母體出現(xiàn)某些極輕微中毒癥狀。其劑量與高劑量和低劑量成等比級(jí)數(shù)關(guān)系。

一般最高劑量不超過LD50的1/5～1/3，低劑量可為1／100～1／30。

第33頁,共52頁，星期六，2024年，5月動(dòng)物交配處理每組動(dòng)物大鼠或小鼠為12～20只，家兔8～12只，狗等大動(dòng)物3～4只。

將性成熟雌雄動(dòng)物按雌雄l：1或2：1比例同籠交配。每日將已確定受孕雌鼠隨機(jī)分入各劑量組和對(duì)照組。出現(xiàn)陰栓或精子之日即為受孕0日，也有人作為第1日由于致畸作用有極為明確的敏感期，應(yīng)精確掌握動(dòng)物接觸受試物的時(shí)間，必須在器官發(fā)生期。

第34頁,共52頁，星期六，2024年，5月胎仔檢查自然分娩前1-2日將受孕動(dòng)物處死，剖腹取出子宮及活產(chǎn)胎仔，并另行記錄死胎及吸收胎。一般大鼠在受孕后第19-20天，小鼠第18-19天，家兔在第29天。第35頁,共52頁，星期六，2024年，5月下列幾方面進(jìn)行畸形檢查：外觀畸形肉眼檢查，例如露腦；肉眼檢查內(nèi)臟及軟組織畸形，例如腭裂；骨骼畸形檢查，例如顱頂骨缺損，分叉肋等?；螜z查只限活產(chǎn)胎仔。第36頁,共52頁，星期六，2024年，5月結(jié)果評(píng)定活產(chǎn)幼仔平均畸形出現(xiàn)數(shù):即根據(jù)出現(xiàn)的畸形總數(shù)，計(jì)算每個(gè)活產(chǎn)幼仔出現(xiàn)的畸形平均數(shù)。

畸形出現(xiàn)率:即作為畸胎的幼仔在活產(chǎn)幼仔總數(shù)中所占的百分率。

母體畸胎出現(xiàn)率

:即出現(xiàn)畸形胎仔的母體在妊娠母體總數(shù)中所占的百分率。

第37頁,共52頁，星期六，2024年，5月確定受試物是否具有致畸作用時(shí)需注意以下幾點(diǎn)：任何結(jié)果必須通過統(tǒng)計(jì)計(jì)算方法進(jìn)行劑量組與對(duì)照組對(duì)比；必須具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義才能認(rèn)為是陽性結(jié)果。應(yīng)該掌握所用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系的自然畸形發(fā)生率。致畸作用中動(dòng)物物種和品系差異較為顯著，因此要求在兩種動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。由于物種差異，對(duì)動(dòng)物不具有致畸作用的外源化學(xué)物對(duì)人是否致畸的問題，應(yīng)格外認(rèn)真對(duì)待。第38頁,共52頁，星期六，2024年，5月發(fā)育毒性的替代試驗(yàn)大鼠全胚胎培養(yǎng)胚胎細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞試驗(yàn)發(fā)育毒性的體內(nèi)預(yù)篩試驗(yàn)(C.K.試驗(yàn))

第39頁,共52頁，星期六，2024年，5月5、致發(fā)育毒性藥物

5.1組織形成受阻-沙立度胺

第40頁,共52頁，星期六，2024年，5月5.2胎兒乙內(nèi)酰脲綜合癥-抗癲癇藥苯妥英、丙戊酸鈉等

顱面骨異常發(fā)育特征四肢改變生長(zhǎng)學(xué)習(xí)改變第41頁,共52頁，星期六，2024年，5月5.3與致癌相關(guān)的致畸劑-己烯雌酚生殖系統(tǒng)癌癥4、煙堿5、中草藥6、其它人類致畸劑：四環(huán)素族、甲氨蝶呤；白消安、環(huán)磷酰胺第42頁,共52頁，星期六，2024年，5月小結(jié)一、常用術(shù)語

1、胚胎毒性

2、致畸性

3、致畸劑

4、母體毒性

5、至畸指數(shù)二、男性生殖毒理學(xué)

1、精子易感性

2、下丘腦-垂體-性腺軸激素調(diào)節(jié)三、女性生殖毒理學(xué)1、卵細(xì)胞毒性

2、卵巢體細(xì)胞和生殖毒性

3、生殖功能激素調(diào)節(jié)和相關(guān)毒性四、發(fā)育毒理學(xué)胚胎毒性反應(yīng)第43頁,共52頁，星期六，2024年，5月

焦點(diǎn)：藥用空心膠囊鉻超標(biāo)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局19日公布了藥用空心膠囊鉻超標(biāo)事件的第一批抽檢結(jié)果。在第一批抽檢的33個(gè)品種42個(gè)批次中，有23個(gè)批次不合格。第44頁,共52頁，星期六，2024年，5月經(jīng)查實(shí)，浙江省新昌縣卓康膠囊有限公司、浙江省新昌縣華星膠囊廠、浙江新大中山膠囊有限公司存在嚴(yán)重違法違規(guī)行為，國(guó)家食品藥品監(jiān)管局已責(zé)成浙江省食品藥品監(jiān)管局按照法定程序，吊銷上述企業(yè)的藥品生產(chǎn)許可證。第45頁,共52頁，星期六，2024年，5月藥用空心膠囊在我國(guó)實(shí)行許可管理。藥用空心膠囊生產(chǎn)企業(yè)必須取得藥品生產(chǎn)許可證，采購(gòu)的明膠應(yīng)符合藥用要求，經(jīng)檢驗(yàn)合格后方可入庫和使用。生產(chǎn)的產(chǎn)品應(yīng)由企業(yè)質(zhì)量管理部門檢驗(yàn)合格后才能出廠銷售。一旦用的原料不符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的要求，就是一種違法行為。第46頁,共52頁，星期六，2024年，5月

明膠明膠(Gelatin）是膠原的水解產(chǎn)物，是一種無脂肪的高蛋白，且不含膽固醇，是一種天然營(yíng)養(yǎng)型的食品增稠劑。第47頁,共52頁，星期六，2024年，5月藥用明膠、食用明膠和工業(yè)明膠，從