2024年高考生物一輪復習知識清單知識清單22 基因工程（解析版）

寶典22基因工程內(nèi)容概覽第一部分高考考情速遞第二部分知識導圖第三部分考點清單（五大考點）第四部分易錯易混（四大易錯點）第五部分真題賞析常考考點真題舉例生物學實驗、DNA粗提取2023·江蘇·統(tǒng)考高考真題2023·浙江·統(tǒng)考高考真題、PCR2023·浙江·統(tǒng)考高考真題基因工程的應用、改良農(nóng)作物2023·湖南·統(tǒng)考高考真題構建基因表達載體2023·湖北·統(tǒng)考高考真題PCR技術2023·浙江·統(tǒng)考高考真題DNA粗提取和鑒定的原理2023·廣東·統(tǒng)考高考真題重組表達載體構建2023·山西·統(tǒng)考高考真題基因工程的應用2022·重慶·統(tǒng)考高考真題基因檢測、基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì)2023·湖南·統(tǒng)考高考真題植物組織培養(yǎng)過程2023·海南·高考真題考點一考點一基因工程科技探索之路1．基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。從技術操作層面看，由于基因工程是在DNA分子水平上進行設計和施工的，因此又叫作重組DNA技術。（P67）2．1944年，艾弗里等人通過肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實驗，不僅證明了遺傳物質(zhì)是DNA，還證明了DNA可以在同種生物的不同個體之間轉(zhuǎn)移。（P68）3．1958年，梅塞爾森和斯塔爾用實驗證明了DNA的半保留復制。隨后不久，克里克提出中心法則。（P68）4．1967年，科學家發(fā)現(xiàn)，在細菌擬核DNA之外的質(zhì)粒有自我復制能力，并可以在細菌細胞間轉(zhuǎn)移。（P68）5．1973年，科學家證明質(zhì)?？梢宰鳛榛蚬こ痰妮d體，構建重組DNA，導入受體細胞，使外源基因在原核細胞中成功表達，并實現(xiàn)物種間的基因交流。至此，基因工程正式問世。（P69）6．1983年，科學家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出世界上第一例轉(zhuǎn)基因煙草。此后，基因工程進入了迅速發(fā)展的階段。（P69）7．1985年，穆里斯等人發(fā)明PCR，為獲取目的基因提供了有效手段。（P69）考點二考點二重組DNA技術的基本工具1．切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶，簡稱限制酶，這類酶主要是從原核生物中分離純化出來的。它們能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，產(chǎn)生黏性末端或平末端兩種形式的末端。（P71）2．DNA連接酶分為兩類，一類是E.coliDNA連接酶，另一類是T4DNA連接酶。后者既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端，又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端的效率相對較低。（P72）3．質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構簡單、獨立于真核細胞細胞核或原核細胞擬核DNA之外，并具有自我復制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。（P72）4．在基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎上進行過人工改造的。這些質(zhì)粒上常有特殊的標記基因，如四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因等，便于重組DNA分子的篩選（如下圖）。（P72）5．在基因工程中使用的載體除質(zhì)粒外，還有噬菌體、動植物病毒等。它們的來源不同，在大小、結(jié)構、復制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大差別。（P73）6．載體必須具備的條件：①能在受體細胞中保存下來并能自我復制；②具有1個或多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。③具有標記基因。（P72）7．DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精，利用這一原理，可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液。在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。（P74“探究·實踐”）考點三考點三基因工程的基本操作程序1．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉主要需要四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。（P76）2．PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫。它是一項根據(jù)DNA半保留復制的原理，在體外提供參與DNA復制的各種組分與反應條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術。（P77）3．PCR反應過程可以在PCR擴增儀（PCR儀）中自動完成，完成以后，常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。（P79）4．基因表達載體要包括以下四個基本的結(jié)構：目的基因、啟動子、終止子、標記基因。（P80）5．構建基因表達載體的目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。（P80）6．啟動子位于目的基因的上游，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。（P80）7．標記基因的作用：鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。（或供重組DNA的鑒定和選擇）。8．花粉管通道法有多種操作方式。例如，可以用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；可以在植物受粉后的一定時間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道進入胚囊。除此之外，將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ玫姆椒ㄟ€有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。（P81）9．轉(zhuǎn)化是指目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。（P81“資料卡”）10．在獲得轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的過程中，還可以通過構建基因文庫來獲取目的基因。（P82）考點四考點四基因工程的應用1．科學家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，通過顯微注射的方法導入哺乳動物的受精卵中，由這個受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動物在進入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應器或乳房生物反應器。（P90）2．用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達的菌類一般稱為基因工程菌。（P91“相關信息”）3．目前，科學家正嘗試利用基因工程技術對豬的器官進行改造，采用的方法是在器官供體的基因組中導入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達，或設法除去抗原決定基因，然后再結(jié)合克隆技術，培育出不會引起免疫排斥反應的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。（P91）考點五考點五蛋白質(zhì)工程的原理和應用1．蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。（P93）2．基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)，這些天然蛋白質(zhì)是生物在長期進化過程中形成的，它們的結(jié)構和功能符合特定物種生存的需要，卻不一定完全符合人類生產(chǎn)和生活的需要。（P93）3．蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（P94）易錯點1誤認為目的基因的插入位點是“隨機”的點撥：目的基因的插入位點不是隨機的，基因表達需要啟動子與終止子的調(diào)控，所以目的基因應插入啟動子與終止子之間的部位，若目的基因插入啟動子內(nèi)部，啟動子將失去原功能。易錯點2誤認為切取目的基因與切取載體時“只能”使用“同一種酶”點撥：(1)在獲取目的基因和切割載體時通常用同種限制酶，以獲得相同的黏性末端。但如果用兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同時，在DNA連接酶的作用下目的基因與載體也可以連接起來。(2)為了防止載體或目的基因的黏性末端自己連接即所謂“環(huán)化”，可用不同的限制酶分別處理目的基因和載體，使目的基因兩側(cè)及載體上具有兩個不同的黏性末端。易錯點3混淆啟動子與起始密碼子，終止子與終止密碼子，不明確標記基因的作用點撥：啟動子≠起始密碼子，終止子≠終止密碼子。(1)啟動子：一段有特殊結(jié)構的DNA片段，位于基因的首端。它是RNA聚合酶識別、結(jié)合的部位。(2)終止子：一段有特殊結(jié)構的DNA片段，位于基因的尾端。作用是使轉(zhuǎn)錄過程停止。(3)起始密碼子和終止密碼子位于mRNA上，分別控制翻譯過程的啟動和終止。(4)標記基因：一般為抗生素抗性基因或熒光基因等，其作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因(目的基因是否導入成功)，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。易錯點4誤認為基因工程可導致受體細胞或生物產(chǎn)生“新基因”或“新蛋白質(zhì)”點撥：基因工程的實質(zhì)是“基因重組”，它是將外源基因?qū)胧荏w細胞，使該基因在受體細胞中表達——由于“外源基因”是自然界已存在的“現(xiàn)成”基因，故基因工程并未產(chǎn)生新基因，因此目的基因表達時也未產(chǎn)生新蛋白質(zhì)，基因工程只不過是讓受體細胞(或生物)實現(xiàn)了“外源基因的表達”。一、單選題1．（2023·江蘇·統(tǒng)考高考真題）某生物社團利用洋蔥進行實驗。下列相關敘述正確的是（）A．洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮可代替半透膜探究質(zhì)膜的透性B．洋蔥勻漿中加入新配制的斐林試劑，溶液即呈磚紅色C．制作根尖有絲分裂裝片時，解離、漂洗、按壓蓋玻片都能更好地將細胞分散開D．粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后顯藍色【答案】A【分析】觀察細胞有絲分裂實驗的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成，目的是使細胞分散開來）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過程中壓片是為了將根尖細胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）?！驹斀狻緼、洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮的原生質(zhì)層具有選擇透過性，可代替半透膜探究質(zhì)膜的透性，A正確；B、洋蔥勻漿中加入新配制的斐林試劑，需要水浴加熱才可能出現(xiàn)磚紅色沉淀，若出現(xiàn)磚紅色，則可說明洋蔥勻漿中含有還原糖，B錯誤；C、制作根尖有絲分裂裝片時，解離、按壓蓋玻片得目的都是為了獲得單層細胞，即這些操作均能更好地將細胞分散開，C錯誤；D、粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后經(jīng)過水浴加熱可顯藍色，D錯誤。故選A。2．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）紫外線引發(fā)的DNA損傷，可通過“核苷酸切除修復（NER）”方式修復，機制如圖所示。著色性干皮癥（XP）患者的NER酶系統(tǒng)存在缺陷，受陽光照射后，皮膚出現(xiàn)炎癥等癥狀?；颊哂啄臧l(fā)病，20歲后開始發(fā)展成皮膚癌。下列敘述錯誤的是（）

A．修復過程需要限制酶和DNA聚合酶B．填補缺口時，新鏈合成以5’到3’的方向進行C．DNA有害損傷發(fā)生后，在細胞增殖后進行修復，對細胞最有利D．隨年齡增長，XP患者幾乎都會發(fā)生皮膚癌的原因，可用突變累積解釋【答案】C【分析】1、2023·浙江·統(tǒng)考高考真題：①解旋：在解旋酶的作用下，把兩條螺旋的雙鏈解開。②合成子鏈：以解開的每一條母鏈為模板，以游離的四種脫氧核苷酸為原料，遵循堿基互補配對原則，在有關酶的作用下，各自合成與母鏈互補的子鏈。③形成子代DNA：每條子鏈與其對應的母鏈盤旋成雙螺旋結(jié)構。從而形成2個與親代DNA完全相同的子代DNA分子。2、限制酶和DNA聚合酶作用的對象都是磷酸二酯鍵?！驹斀狻緼、由圖可知，修復過程中需要將損傷部位的序列切斷，因此需要限制酶的參與；同時修復過程中，單個的脫氧核苷酸需要依次連接，要借助DNA聚合酶，A正確；B、填補缺口時，新鏈即子鏈的延伸方向為5’到3’的方向進行，B正確；C、DNA有害損傷發(fā)生后，在細胞增殖中進行修復，保證DNA復制的正確進行，對細胞最有利，C錯誤；D、癌癥的發(fā)生是多個基因累積突變的結(jié)果，隨年齡增長，XP患者幾乎都會發(fā)生皮膚癌的原因，可用突變累積解釋，D正確。故選C。3．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）鹽堿脅迫下植物應激反應產(chǎn)生的H2O2對細胞有毒害作用。禾本科農(nóng)作物AT1蛋白通過調(diào)節(jié)細胞膜上PIP2s蛋白磷酸化水平，影響H2O2的跨膜轉(zhuǎn)運，如圖所示。下列敘述錯誤的是（

）

A．細胞膜上PIP2s蛋白高磷酸化水平是其提高H2O2外排能力所必需的B．PIP2s蛋白磷酸化被抑制，促進H2O2外排，從而減輕其對細胞的毒害C．敲除AT1基因或降低其表達可提高禾本科農(nóng)作物的耐鹽堿能力D．從特殊物種中發(fā)掘逆境脅迫相關基因是改良農(nóng)作物抗逆性的有效途徑【答案】B【分析】分析題圖：AT1蛋白通過抑制PIP2s蛋白的磷酸化而抑制細胞內(nèi)的H2O2排到細胞外，從而導致植物抗氧化脅迫能力減弱，進而引起細胞死亡。AT1蛋白缺陷，可以提高PIP2s蛋白的磷酸化水平，促進細胞內(nèi)的H2O2排到細胞外，從而提高植物抗氧化的脅迫能力，進而提高細胞的成活率?！驹斀狻緼、由題圖右側(cè)的信息可知，AT1蛋白缺陷，可以促進PIP2s蛋白的磷酸化，進而促進H2O2排出膜外，A正確；B、據(jù)題圖左側(cè)的信息可知，AT1蛋白能夠抑制PIP2s蛋白的磷酸化，減少了H2O2從細胞內(nèi)輸出到細胞外的量，導致抗氧化脅迫能力弱，不能減輕其對細胞的毒害，B錯誤；C、結(jié)合對A選項的分析可推測，敲除AT1基因或降低其表達，可提高禾本科農(nóng)作物抗氧化脅迫的能力，進而提高其成活率，C正確；D、從特殊物種中發(fā)掘逆境脅迫相關基因，可通過基因工程技術改良農(nóng)作物抗逆性，D正確。故選B。4．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）用氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、四環(huán)素抗性基因（TetR）作為標記基因構建的質(zhì)粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構建基因表達載體（重組質(zhì)粒），并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述錯誤的是（）

A．若用HindⅢ酶切，目的基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因C．若用SphⅠ酶切，可通過DNA凝膠電泳技術鑒定重組質(zhì)粒構建成功與否D．若用SphⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）和Tet的培養(yǎng)基中能形成菌落【答案】D【分析】圖中質(zhì)粒內(nèi)，氨芐青霉素抗性基因（AmpR）內(nèi)含有AcaI和PvuI的酶切位點，四環(huán)素抗性基因（TetR）內(nèi)含有HindIII、SphI和SalI的酶切位點?！驹斀狻緼、若用HindⅢ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同，A正確。B、若用PvuⅠ酶切，重組質(zhì)粒和質(zhì)粒中都有四環(huán)素抗性基因（TetR），因此在含Tet（四環(huán)素）培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因，B正確；C、DNA凝膠電泳技術可以分離不同大小的DNA片段，重組質(zhì)粒的大小與質(zhì)粒不同，能夠鑒定重組質(zhì)粒構建成功與否，C正確；D、SphⅠ的酶切位點位于四環(huán)素抗性基因中，若用SphⅠ酶切，重組質(zhì)粒中含氨芐青霉素抗性基因（AmpR），因此攜帶目的基因的受體菌在含Amp（氨芐青霉素）的培養(yǎng)基中能形成菌落，在含Tet的培養(yǎng)基中不能形成菌落，D錯誤。故選D。5．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實驗得到能正常表達兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設計了引物1和引物2用于PCR擴增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。

下列敘述正確的是（）A．Gata3基因的啟動子無法控制GFP基因的表達B．翻譯時先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白C．2號條帶的小鼠是野生型，4號條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子D．若用引物1和引物3進行PCR，能更好地區(qū)分雜合子和純合子【答案】B【分析】PCR技術是聚合酶鏈式反應的縮寫，是一項根據(jù)DNA半保留復制的原理，在體外提供參與DNA復制的各種組分與反應條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術?！驹斀狻緼、分析圖中可知，啟動子在左側(cè)，GFP基因整合Gata3基因的右側(cè)，啟動子啟動轉(zhuǎn)錄后，可以使GEP基因轉(zhuǎn)錄，Gata3基因的啟動子能控制GFP基因的表達，A錯誤；B、因啟動子在左側(cè)，轉(zhuǎn)錄的方向向右，合成的mRNA從左向右為5′→3′，剛好是翻譯的方向，所以翻譯時先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，B正確；C、整合GFP基因后，核酸片段變長，2號個體只有大片段，所以是Gata3-GFP基因純合子，4號個體只有小片段，是野生型，C錯誤；D、用引物1和引物3進行PCR擴增，擴增出的片段大小差異較小，無法較好的區(qū)分片段，D錯誤。故選B。6．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）“DNA粗提取與鑒定”實驗的基本過程是：裂解→分離→沉淀→鑒定。下列敘述錯誤的是（

）A．裂解：使細胞破裂釋放出DNA等物質(zhì)B．分離：可去除混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等C．沉淀：可反復多次以提高DNA的純度D．鑒定：加入二苯胺試劑后即呈現(xiàn)藍色【答案】D【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化鈉中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。2、DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。3、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。【詳解】A、裂解是加蒸餾水讓細胞吸水漲破，釋放出DNA等物質(zhì)，A正確；B、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液，將溶液過濾，即可將混合物中的多糖、蛋白質(zhì)等與DNA分離，B正確；C、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精，可以反復多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA純度，C正確；D、將DNA溶解于NaCl，加入二苯胺試劑，沸水浴五分鐘，待冷卻后，能呈現(xiàn)藍色，D錯誤。故選D。7．（2023·山西·統(tǒng)考高考真題）某同學擬用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA連接酶為工具，將目的基因（兩端含相應限制酶的識別序列和切割位點）和質(zhì)粒進行切割、連接，以構建重組表達載體。限制酶的切割位點如圖所示。

下列重組表達載體構建方案合理且效率最高的是（

）A．質(zhì)粒和目的基因都用酶3切割，用E.coliDNA連接酶連接B．質(zhì)粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4DNA連接酶連接C．質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4DNA連接酶連接D．質(zhì)粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coliDNA連接酶連接【答案】C【分析】DNA連接酶：（1）根據(jù)酶的來源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶。這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低。（2）DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵?！驹斀狻緼、酶3切割后得到的是平末端，應該用T4DNA連接酶連接，A錯誤；B、質(zhì)粒用酶3切割后得到平末端，目的基因用酶1切割后得到的是黏性末端，二者不能連接，B錯誤；C、質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割后得到黏性末端，用T4DNA連接酶連接后，還能保證目的基因在質(zhì)粒上的連接方向，此重組表達載體的構建方案最合理且高效，C正確；D、若用酶2和酶4切割質(zhì)粒和目的基因，會破壞質(zhì)粒上的抗生素抗性基因，連接形成的基因表達載體缺少標記基因，無法進行后續(xù)的篩選，D錯誤。故選C。8．（2022·重慶·統(tǒng)考高考真題）將人胰島素A鏈上1個天冬氨酸替換為甘氨酸，B鏈末端增加2個精氨酸，可制備出一種人工長效胰島素。下列關于該胰島素的敘述，錯誤的是（

）A．進入人體后需經(jīng)高爾基體加工 B．比人胰島素多了2個肽鍵C．與人胰島素有相同的靶細胞 D．可通過基因工程方法生產(chǎn)【答案】A【分析】基因工程只能生產(chǎn)已有的蛋白質(zhì)，人工長胰島素A鏈有氨基酸的替換，B鏈增加了兩個氨基酸，需要通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)。【詳解】A、胰島素作用于細胞表面的受體，不需要經(jīng)高爾基體的加工，A錯誤；B、人工長效胰島素比人胰島素的B鏈上多了兩個精氨酸，氨基酸與氨基酸之間通過肽鍵連接，故多2個肽鍵，B正確；C、人工胰島素和人胰島素作用相同，都是降血糖的作用，故靶細胞相同，C正確；D、人工長效胰島素是對天然蛋白質(zhì)的改造，需要通過基因工程生產(chǎn)，D正確。故選A。二、綜合題9．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）基因檢測是診斷和預防遺傳病的有效手段。研究人員采集到一遺傳病家系樣本，測序后發(fā)現(xiàn)此家系甲和乙兩個基因存在突變：甲突變可致先天性耳聾；乙基因位于常染色體上，編碼產(chǎn)物可將葉酸轉(zhuǎn)化為N5-甲基四氫葉酸，乙突變與胎兒神經(jīng)管缺陷（NTDs）相關；甲和乙位于非同源染色體上。家系患病情況及基因檢測結(jié)果如圖所示。不考慮染色體互換，回答下列問題：

(1)此家系先天性耳聾的遺傳方式是。1-1和1-2生育育一個甲和乙突變基因雙純合體女兒的概率是。(2)此家系中甲基因突變?nèi)缦聢D所示：正?；騿捂溒?'-ATTCCAGATC……（293個堿基）……CCATGCCCAG-3'突變基因單鏈片段5'-ATTCCATATC……（293個堿基）……CCATGCCCAG-3'研究人員擬用PCR擴增目的基因片段，再用某限制酶（識別序列及切割位點為

）酶切檢測甲基因突變情況，設計了一條引物為5′-GGCATG-3'，另一條引物為（寫出6個堿基即可）。用上述引物擴增出家系成員Ⅱ-1的目的基因片段后，其酶切產(chǎn)物長度應為bp（注：該酶切位點在目的基因片段中唯一）。(3)女性的乙基因純合突變會增加胎兒NTDs風險。葉酸在人體內(nèi)不能合成，孕婦服用葉酸補充劑可降低NTDs的發(fā)生風險。建議從可能妊娠或孕前至少1個月開始補充葉酸，一般人群補充有效且安全劑量為0.4~1.0mg.d-1，NTDs生育史女性補充4mg.d-1。經(jīng)基因檢測胎兒（Ⅲ-2）的乙基因型為-/-，據(jù)此推薦該孕婦（Ⅱ-1）葉酸補充劑量為mg.d-1?！敬鸢浮?1)常染色體隱性遺傳病1/32(2)5'-ATTCCA-3'8和302(3)4【分析】基因分離定律和自由組合定律的實質(zhì)：進行有性生殖的生物在進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中，位于同源染色體上的等位基因隨同源染色體分離而分離，分別進入不同的配子中。隨配子獨立遺傳給后代，同時位于非同源染色體上的非等位基因進行自由組合【詳解】（1）由遺傳系譜圖可知，由于I-1與I-2均表現(xiàn)正常，他們關于甲病的基因型均為+/-，而他們的女兒Ⅱ-4患病，因此可判斷甲基因突變導致的先天性耳聾是常染色體隱性遺傳病，由I-1、I-2和Ⅱ-3關于乙病的基因可以推出乙基因突變導致的遺傳病也是常染色體隱性遺傳病，所以I-1和I-2生出一個甲和乙突變基因雙純合體女兒的概率為1/4×1/4×1/2=1/32。（2）本題研究甲基因突變情況，二代1為雜合子，兼有正常甲基因和突變甲基因。目的基因為甲基因，擴增引物應與兩基因共有的TAAGGT片段結(jié)合，應為ATTCCA。可擴增出大量正常甲基因和突變甲基因供后續(xù)鑒定。此時酶切，正常甲基因酶切后片段為8和2+293+7=302bp,突變甲基因無法被酶切，故不寫。后續(xù)可通過電泳等手段區(qū)分開，達到檢測甲基因突變情況的目的。（3）Ⅲ-2關于乙的基因型為-/-，有患NTDs的可能，因此推薦該孕婦（Ⅱ-1）葉酸補充劑量為4mg·d-1。10．（2023·海南·高考真題）基因遞送是植物遺傳改良的重要技術之一，我國多個實驗室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)（切—浸—生芽Cut-Dip-Budding，簡稱CDB法）。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖。

回答下列問題。(1)圖1中，從外植體轉(zhuǎn)變成愈傷組織的過程屬于；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長素和，該過程還需要光照，其作用是。(2)圖1中的愈傷組織，若不經(jīng)過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的。圖1中，含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A若用于生產(chǎn)種子，其包裝需標注。(3)圖1與圖2中，農(nóng)桿菌侵染植物細胞時，可將外源基因遞送到植物細胞中的原因是。(4)已知某酶（PDS）缺失會導致植株白化。某團隊構建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體（含有綠色熒光蛋白標記基因），利用圖2中的CDB法