第三章 滅菌與無(wú)菌空氣的制備課件

第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備

第一節(jié)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備的滅菌

(Sterilization)一、消毒與滅菌方法消毒：指用物理或化學(xué)方法殺死物料、容器、器具內(nèi)外的病原微生物。滅菌：指用物理或化學(xué)方法殺死或除去環(huán)境中所有微生物。第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備工業(yè)生產(chǎn)上的滅菌方法有加熱滅菌、化學(xué)藥劑滅菌、射線滅菌等?；瘜W(xué)藥劑滅菌、射線滅菌用于無(wú)菌間、培養(yǎng)室及車間空氣滅菌。

干熱滅菌：火焰滅菌、烘箱滅菌加熱滅菌濕熱滅菌：巴氏滅菌、間歇滅菌、高壓蒸汽滅菌二、濕熱滅菌原理

致死溫度：指殺死微生物的最低溫度。第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備致死時(shí)間：在致死溫度下殺死全部微生物所需要的時(shí)間。1.微生物的熱阻

熱阻：微生物對(duì)熱的抵抗力。

微生物對(duì)濕熱的相對(duì)抵抗力微生物名稱大腸桿菌細(xì)菌芽孢霉菌孢子病毒相對(duì)抵抗力13×1062～101～5第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備2.微生物的熱死規(guī)律——對(duì)數(shù)殘留定律

100℃時(shí)不同時(shí)間微生物存活數(shù)時(shí)間（min）存活數(shù)（個(gè)/mL)時(shí)間（min）存活數(shù)（個(gè)/mL)0679119×1071.2×1078×1065×1063×106152025301×1062×1052×104≈0第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備5菌的死亡率（活菌的減少率）:

與任何時(shí)候殘留的活菌數(shù)N成正比。對(duì)數(shù)殘留定律：N—?dú)埩舻幕罹鷶?shù)（個(gè)）

t—受熱時(shí)間（min)K—反應(yīng)速度常數(shù)（min-1)第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備

將上式積分得：兩邊取對(duì)數(shù)：對(duì)數(shù)殘留規(guī)律公式：

—開(kāi)始滅菌時(shí)原有活菌數(shù)（個(gè)）

—經(jīng)過(guò)t時(shí)間滅菌后的殘留菌數(shù)（個(gè)）第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備3.反應(yīng)速度常數(shù)k

在相同溫度下，k值愈小，則此微生物愈耐熱。同一種微生物在不同溫度下，k值也不相同，滅菌溫度愈低，k值愈小，溫度愈高，k值愈大。

121℃某些細(xì)菌芽孢的k

值細(xì)菌芽孢名稱K值min-1枯草芽孢桿菌FS5230硬脂嗜熱芽孢桿菌FS1518硬脂嗜熱芽孢桿菌FS617產(chǎn)氣梭狀芽孢桿菌PA36793.8～2.60.772.91.8第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備4．培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇實(shí)驗(yàn)測(cè)定：加熱溫度每升高10℃

物質(zhì)化學(xué)反應(yīng)1.5～2

芽孢熱死反應(yīng)5～10

微生物營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞熱死反應(yīng)35

第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備結(jié)論：溫度升高，菌死亡速率大于培養(yǎng)基成分破壞的速率。不同溫度滅菌時(shí)間及培養(yǎng)基破壞情況

在實(shí)際生產(chǎn)中為了既達(dá)到滅菌目的又較好地保存營(yíng)養(yǎng)成分，最好采用高溫快速滅菌法。溫度（℃）滅菌時(shí)間（min)營(yíng)養(yǎng)成分破壞（%）溫度（℃）滅菌時(shí)間（min)營(yíng)養(yǎng)成分破壞（%）1001101151204003015499.36750271301401500.50.080.0182＜1第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備三、影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素1．培養(yǎng)基成分

2．PH值

pH值對(duì)滅菌時(shí)間的影響溫度（℃）孢子數(shù)（個(gè)/mL)滅菌時(shí)間（min）pH6.1pH5.3pH5.0pH4.7pH4.5120115110100100001000010000100008257074072565720512351803133015031324150第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備3．培養(yǎng)基中的顆粒

4．泡沫

四、工業(yè)滅菌方法

1．連續(xù)滅菌（連消）(Continuoussterilization):

是采用專一滅菌設(shè)備—-連消塔，在高溫下對(duì)液體培養(yǎng)基進(jìn)行短時(shí)間加熱滅菌。優(yōu)點(diǎn)：（1）培養(yǎng)基受熱時(shí)間短（可在20～30s達(dá)到預(yù)定滅菌溫度），營(yíng)養(yǎng)成分破壞少；（2）質(zhì)量均勻；（3）適用于自動(dòng)控制。適用條件：大規(guī)模生產(chǎn)，培養(yǎng)基中不含有固體顆粒或泡沫較少。第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備2.分批滅菌(實(shí)消):(Batchsterilization)

指培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中滅菌。優(yōu)點(diǎn)：無(wú)需專一滅菌設(shè)備，但易發(fā)生局部過(guò)熱而破壞營(yíng)養(yǎng)成分的現(xiàn)象。適用條件：當(dāng)培養(yǎng)基中含有固體顆?；蚺囵B(yǎng)基有較多泡沫時(shí)，以采用分批滅菌為好。對(duì)于容積小的發(fā)酵罐，連續(xù)滅菌的優(yōu)點(diǎn)不明顯，而采用分批滅菌比較方便。第三章滅菌與無(wú)菌空氣的制備3.設(shè)備滅菌

(Stearilizationoffermenter)

實(shí)罐滅菌時(shí)，發(fā)酵罐