桔梗的化痰止咳作用

桔梗的化痰止咳作用實驗?zāi)康?.通過桔梗煎劑對小鼠的作用了解桔?；抵箍鹊乃幚碜饔?.掌握這些藥物的研究方法，并進(jìn)一步研究作用機(jī)理3.熟悉中藥化痰止咳藥的研究概況，掌握幾種常用的篩選方法。

實驗：一、止咳藥的實驗二、化痰藥的實驗一、止咳藥實驗法：①小鼠氨水引咳法：用濃氨水引起小鼠咳嗽，借以觀察藥物的止咳作用，是止咳藥常用篩選方法之一。②二氧化硫致咳法：通過二氧化硫的刺激，觀察咳嗽的潛伏期，以篩選藥物的鎮(zhèn)咳作用。③豚鼠枸椽酸引咳法：用枸椽酸噴霧引起豚鼠咳嗽，以觀察藥物的鎮(zhèn)咳作用，豚鼠受枸椽酸刺激后引起的咳嗽聲音較大，易于記錄。④刺激貓喉上神經(jīng)引咳法：通過小鼠氨水、二氧化硫等引咳法篩選出的鎮(zhèn)咳藥，進(jìn)一步研究其作用機(jī)制是中樞性還是末梢性，可進(jìn)行本實驗。凡能抑制咳嗽中樞的藥物均能抑制刺激喉上神經(jīng)引起的咳嗽。實驗原理：

桔梗所含皂苷成分經(jīng)口服刺激胃黏膜，反射性地增加支氣管黏膜分泌，使痰液稀釋而被排出。桔梗所含皂苷同時具有鎮(zhèn)咳作用。小鼠灌服桔梗煎劑的LD50為24g/kg。小鼠灌胃桔梗皂苷的LD50為420mg/kg,腹腔注射為22.3mg/kg。濃氨水作為化學(xué)刺激物，當(dāng)被動物吸入后，作用于呼吸道感受器，引起咳嗽。故凡能抑制咳嗽中樞或降低呼吸道感受器敏感性的藥物均有止咳作用。

實驗器材：動物:小鼠10只，雌雄各半（20-22g）器材:小鼠灌胃器，秒表，負(fù)壓吸引器（薩克星），玻璃鐘罩，小鼠固定裝置，超聲霧化器，電子秤。試劑:濃氨水（分析純）（28%），稀鹽酸（中和氨水）。桔梗煎劑液1g/ml，苦味酸。實驗方法（1）10kPa負(fù)壓，噴霧5s，觀察咳嗽潛伏期、2min、3min內(nèi)的咳嗽次數(shù)。記錄數(shù)據(jù)。選取咳嗽反射陽性（3min內(nèi)咳嗽10次以上者）小鼠10只。（2）將選出的小鼠秤重，編號。給小鼠灌胃桔梗煎劑稀釋液，30min后，先讓玻璃鐘罩內(nèi)充滿霧化的濃氨水，將小鼠裝入固定器，放入玻璃鐘罩的同時予負(fù)壓10kPa抽吸霧化的濃氨水，5s后取出小鼠的同時按下秒表。記錄咳嗽的潛伏期、2min內(nèi)小鼠的咳嗽次數(shù)、3min內(nèi)小鼠的咳嗽次數(shù)（以聽到小鼠響亮的咳嗽聲音為標(biāo)準(zhǔn)）。求出潛伏期延長的百分率及咳嗽減少百分率。數(shù)據(jù)記錄與處理：與給藥前相比*P<0.05,**P<0.01；組別劑量mg/kg潛伏期（sec）咳嗽頻率延長百分率（%）給藥前給藥后給藥前給藥后2min3min2min3min2min3min2min3min12345678910桔梗的止咳效果（n=10）注意事項藥物稱量、配制及給藥的準(zhǔn)確程度是本實驗成功與否的關(guān)鍵。不能將小鼠長時間放入玻璃鐘罩內(nèi)，否則將會導(dǎo)致小鼠死亡影響實驗結(jié)果。實驗時仔細(xì)觀察小鼠腹部運動，如果在小鼠出現(xiàn)典型快速揚頭張口，腹部急速抽動的同時聽到清脆的咳嗽聲音，立即記為一次咳嗽。二、化痰藥的實驗：①小鼠酚紅氣管排出實驗法。用小鼠通過酚紅從氣管的排出量，觀察藥物對呼吸道分泌的影響。此法簡便，但用強(qiáng)堿洗出氣管內(nèi)酚紅能損傷氣管粘膜。②家兔酚紅排出實驗法。經(jīng)小鼠酚紅法篩選有效時，再用家兔進(jìn)行實驗。③影響大鼠氣管纖毛粘液運行速度的實驗方法。用印度墨汁（稀釋4～5倍）注入氣管1滴，觀察藥物對大鼠氣管纖毛粘液運行速度的影響，作為化痰藥的一個實驗指標(biāo)。實驗原理

小白鼠腹腔注射酚紅后，后者可部分的從氣管分泌排出有祛痰作用的藥物在使支氣管分泌液增加的同時，其由呼吸道粘膜排出的酚也隨之增加。因而可從藥物對氣管內(nèi)酚紅排泌量的影響來觀察其祛痰作用。酚紅在堿性溶液中呈紅色，將從道中洗出的液體用比色法（分光光度計）測出酚紅的排泌量。從而得出藥物的祛痰作用。實驗器材：

動物：小鼠10只，雌雄各半（20-22g）。禁食

12h，不禁水藥品：桔梗煎劑液1g/ml，并以蒸餾水稀釋成所需要的濃度灌胃給藥,小鼠劑量為5.73ml/kg，生理鹽水。酚紅，用時配制成濃度0.5%;苦味酸,NaOH溶液器材：超聲波霧化器；可見紫外分光光度計，鼠籠灌胃器，電子秤，手術(shù)器材，剪子，鐘罩，鑷子實驗步驟

藥物的稀釋濃度同小鼠濃氨水引咳法，將小鼠分為兩組，實驗組小鼠灌胃桔梗水煎液（0.2ml/10g），對照組小鼠灌胃生理鹽水。30min后，腹腔注射酚紅溶液0.1ml/10g，注射酚紅后30min，斷頸處死小鼠，背位固定，分離氣管。剝離氣管周圍組織，剪下假狀軟骨至氣管分枝處一段氣管，立即放入盛有2ml生理鹽水的試管中，加入0.1ml氫氧化鈉溶液，以721型分光光度計，波長546nm測定吸光度。根據(jù)酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線計算酚紅含量。數(shù)據(jù)記錄與處理組別小鼠數(shù)(n)劑量(mg/kg)酚紅排泌量（ug/ml）12345678910與對照組相比*P<0.05,P<0.01桔梗的化痰作用注意事項藥物稱量、配制及給藥的準(zhǔn)確程度是本實驗成功與否的關(guān)鍵。給藥至處死動物的時間必須準(zhǔn)確解剖時，必須將周圍的組織去除干凈，氣管段周圍如果粘附有血液應(yīng)立即用濾紙吸凈。呼吸道沖洗時，NaHCO3用量要準(zhǔn)確，灌洗時動作要輕，以免穿破氣管和肺臟，抽推速度也盡可能相同，并盡可能將洗液抽盡。桔梗有毒性，只能口服，不能注射。給藥量必須準(zhǔn)確。

謝謝觀賞！桔梗桔梗(Platycodongrandiforus)，桔梗科桔梗屬植物，多年生草本，葉子卵形或卵狀披針形，花暗藍(lán)色或暗紫白色，可作觀賞花卉；朝鮮族人用作野菜食用；其根可入藥，有止咳祛痰、宣肺、排膿等作用。全國各地均產(chǎn)。主產(chǎn)安徽、河南、湖北、遼寧、吉林、河北、內(nèi)蒙古等地。桔梗植物學(xué)名：Platycodongrandiflorum(Jacq.)A.DC.中藥材學(xué)名∶

RadixPlatycodonis.英語名稱：platycodonroot、Chinesebellflower、Japanesebellflower、commonballoonflower、balloonflower花語：1、永恒不變的愛；真誠、柔順、悲哀。

2、無望的愛桔?！拘晕杜c歸經(jīng)】味苦、辛，性平。歸肺、胃經(jīng)。

【功效】宣肺，利咽，祛痰排膿。

【臨床應(yīng)用】1、宣肺：用于肺氣不宣的咳嗽痰多，胸悶不暢；

2、利咽：用于咽喉腫痛，失音；

3、祛痰排膿：用于肺癰吐膿。

【用法用量】煎服，3～10g。桔梗的藥（毒）理學(xué)

桔梗煎劑以1g/kg給麻醉狗灌胃，可使呼吸道分泌增加；桔梗皂甙粗品具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛及解熱等中樞抑制作用，并有抗炎及鎮(zhèn)咳祛痰、擴(kuò)張血管、降壓、抗?jié)冏饔?；桔梗甲醇提取物及粗皂甙灌服，可增?qiáng)小鼠碳粒廓清速率．桔梗皮也有祛痰作用．桔梗皂甙有溶血作用．桔梗所含皂甙口服時對咽喉粘膜及胃粘膜造成某種程度的刺激，反射地引起呼吸道粘膜分泌亢進(jìn)，使痰液稀釋，促使其排出，粗制桔梗皂甙有鎮(zhèn)咳作用。豚鼠腹腔注射和鎮(zhèn)咳半數(shù)有效量為6.4mg/kg。小鼠灌胃桔梗煎劑的半數(shù)致死量為24g/kg，兔灌胃該品煎劑40g/kg，于24小時內(nèi)5兔全部死亡，劑量為20g/kg時，則全部存活，桔梗皂甙有很強(qiáng)的溶血作用，其溶血指數(shù)與來源產(chǎn)地和生長年限、采集時間、加工方法等而異，從1：100到1：1000不等，韌皮部的溶血作用為本質(zhì)部的4.4-6.5倍