遼寧省沈陽市郊聯(lián)體2025屆高考仿真卷生物試題含解析

遼寧省沈陽市郊聯(lián)體2025屆高考仿真卷生物試題注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．如圖為人類的性染色體組成。不考慮突變和基因重組，下列有關敘述不正確的是（）A．紅綠色盲基因位于Ⅱ一2片段，男性發(fā)病率高，且女患者的父親和兒子均為患者B．抗維生素D佝僂病基因位于Ⅱ一2片段，女性發(fā)病率高，但部分女患者癥狀較輕C．正常情況下，X、Y染色體在減數(shù)第一次分裂后期分離D．男性某一細胞中不可能出現(xiàn)2條X染色體2．不同濃度的生長素影響某植物乙烯生成和成熟葉片脫落的實驗結果如下圖所示。下列有關敘述正確的是（）A．乙烯濃度越高脫落率越高B．脫落率隨生長素濃度達到一定值后不斷降低C．生長素和乙烯對葉片脫落的作用是相互拮抗的D．生產(chǎn)上要噴施高濃度生長素類似物降低脫落率3．某研究小組進行某植物的栽培試驗，圖1表示在適宜的光照、CO2濃度等條件下測得的光合曲線和黑暗條件下的呼吸曲線；圖2為在恒溫密閉玻璃溫室中，連續(xù)24h測定的溫室內(nèi)CO2濃度以及植物CO2吸收速率的變化曲線。據(jù)圖分析，下列說法中錯誤的是A．圖1中，當溫度達到55℃時，植物光合作用相關的酶失活B．6h時，圖2葉肉細胞產(chǎn)生[H]的場所有葉綠體、線粒體和細胞質(zhì)基質(zhì)等C．18h時，圖2葉肉細胞中葉綠體產(chǎn)生的O2量大于線粒體消耗的O2量D．該植株在進行光合作用且吸收CO2的量為0時，在兩圖中的描述點共有4個4．猴面包樹根系發(fā)達、樹干粗壯高大，木質(zhì)松如海綿。旱季時樹葉完全脫落，雨季大量吸水，迅速長葉開花結果，花在夜間開放，吸引果蝠等動物傳粉。猴面包樹的果實是猴子等動物喜愛的食物，樹干中的水分也可以被動物取用，使其獲得“熱帶草原生命之樹”的美譽。由此無法推斷出（）A．熱帶草原的季節(jié)性變化引起猴面包樹產(chǎn)生有利變異B．落葉使猴面包樹的水分散失減少，有利于其度過旱季C．猴面包樹的夜間開花是與果蝠等傳粉動物共同進化的結果D．猴子等動物的取食行為可以幫助猴面包樹傳播種子5．下列關于乳酸菌和酵母菌的敘述，正確的是（）A．遺傳物質(zhì)都是DNA，都與蛋白質(zhì)結合組成染色體B．在無氧條件下，兩者的有氧呼吸過程都會受到抑制C．在有氧條件下，兩者都能將葡萄糖分解產(chǎn)生C02并釋放能量D．在基因指導蛋白質(zhì)合成時，兩種微生物共用一套遺傳密碼6．工作在第一線的醫(yī)護人員采取多種措施，全力救治重癥的新冠肺炎患者，挽救了許多患者的生命。下列有關措施與其生物學原理的對應關系中正確的是（）A．利用呼吸機等設備提高患者的血氧水平——有氧呼吸各個階段都需要氧氣參與B．為患者提供更多的營養(yǎng)物質(zhì)——免疫系統(tǒng)的結構與功能增強需要消耗有機物和能量C．將新冠肺炎康復者的血漿輸入患者體內(nèi)——康復者血漿中含有B細胞D．增強患者戰(zhàn)勝疾病的信心——大腦皮層中有免疫調(diào)節(jié)中樞二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某科技小組的同學，欲測算農(nóng)田中某種農(nóng)作物在晴朗的白天6～9時有機物的制造量，進行了如下操作：在農(nóng)田中隨機選取多個樣方；用透明玻璃罩罩住樣方內(nèi)所有植株形成密閉小室，并與二氧化碳傳感器相連；分成甲、乙兩組，甲組置于自然光下，乙組將玻璃罩用黑布罩??；兩組在該時間段內(nèi)連續(xù)采集數(shù)據(jù)3小時。請回答下列問題：（1）6～9時，限制光合作用強度的環(huán)境因素主要是_____________________，此時間段內(nèi)測得甲罩內(nèi)CO2濃度先升高后下降，CO2濃度升高的原因是_________________。（2）6～9時，甲組罩內(nèi)CO2濃度最高時，葉肉細胞內(nèi)光合作用強度_________________（選填“大于”或“小于”或“等于”）葉肉細胞呼吸作用強度，原因是__________________________________。（3）若該小組測得6～9時甲組罩內(nèi)CO2平均減少量為a，乙組3小時各罩內(nèi)CO2平均增加量為b，則__________表示6～9時樣方內(nèi)該農(nóng)作物固定CO2的總量，進而可推算有機物的制造量。有同學分析后認為該結果與農(nóng)田中該種農(nóng)作物有機物的實際制造量會有較大誤差。請從非生物因素角度分析，造成誤差的原因主要是____________________________。8．（10分）2018年11月，一對名為“露露”和“娜娜”的基因編輯嬰兒的誕生引發(fā)了國內(nèi)巨大的爭議?；蚓庉嬤^程的實質(zhì)是用特殊的引導序列將“基因剪刀--Cas9酶”精準定位到所需修飾的基因上然后進行編輯?；卮鹣铝袉栴}：（1）科學家用______法將特殊的引導序列與“基因剪刀--Ca9酶”導入目的細胞，上述實例中目的細胞為______。（2）“露露”與“娜娜”其實也是試管嬰兒，試管嬰兒需讓成熟且______的精子與成熟的卵細胞結合形成受精卵，然后進行早期胚胎培養(yǎng)。該時期所用培養(yǎng)液中含有的物質(zhì)有無機鹽和有機鹽類、氨基酸、維生素、______、______、水和血清等。（3）一個處于囊胚期的早期胚胎經(jīng)過______技術可形成兩個甚至多個胚胎，該技術操作的關鍵是要做到將______，若科學家想在早期胚胎時就知道“露露”的性別，可通過______實現(xiàn)。9．（10分）鳥類的性染色體組成是ZW型。某種鳥的羽色和喙長由兩對基因控制，某生物興趣小組用黃羽長喙雄鳥與黃羽短喙雌鳥交配，結果子代雌雄鳥均有黃羽和白羽，短喙全為雄鳥，長喙全為雌鳥。請回答下列問題：（1）鳥羽色和喙長中，顯性性狀分別是___________________，控制鳥羽色和喙長的基因_____（填“是”或“否”）遵循基因自由組合定律，原因是_______________________。（2）羽色基因用A/a表示，喙長基因用B/b表示，則親代基因型是__________________，子代黃羽短喙雄鳥基因型中純合子占___________。（3）若子代白羽短喙雌鳥與黃羽長喙雄鳥交配，后代黃羽短喙雄鳥出現(xiàn)的概率是______。10．（10分）基因打靶技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發(fā)展起來的一種分子生物學技術。請結合圖示回答下列有關問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導致細胞死亡。（1）將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞，這樣打靶載體和與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機會發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行__________保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后，體內(nèi)同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細胞”或“生殖細胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。11．（15分）蘋果除了直接食用外，還可以制作成多種產(chǎn)品，如蘋果汁、蘋果醋等。利用固定化酶技術和固定化細胞技術能提高產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量，提高經(jīng)濟效益。請回答下列問題：（1）利用圖的裝置制作澄清蘋果汁的原理和優(yōu)點是：將果膠酶固定在____的載體上，使酶既能與反應物接觸，又能____，同時，固定在載體上的酶還可以被反復利用，大大降低了生產(chǎn)成本。（2）被固定的果膠酶包括三類：____和果膠酯酶。（3）為了探究果膠酶的最適用量，需要在____條件下進行，看看獲得一定量的果汁究竟需要多少果膠酶合適。（4）獲得的蘋果汁可以進一步用于蘋果醋的制作，為了研究固定化醋酸菌的相關特性，實驗室利用下面的裝置進行探究。①利用海藻酸鈉制作含有醋酸菌的凝膠珠屬于固定化細胞技術中的____法。②該裝置能夠制作蘋果醋的原理是____。③當關閉開關后，發(fā)酵很快停止，原因是____。（5）載體固定了酶或細胞后，使用前____（填“需要”或“不需要”）進行滅菌。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

伴X染色體隱性遺傳病的發(fā)病特點：①男患者多于女患者；②男患者將致病基因通過女兒傳給他的外孫（交叉遺傳）。③女患者的父親和兒子均為患者。伴X染色體顯性遺傳病的發(fā)病特點：①女患者多于男患者；②男患者的母親和女兒均為患者。【詳解】A、X、Y為同源染色體，Ⅱ–1、Ⅱ–2為X、Y染色體的非同源區(qū)段，I為X、Y的同源區(qū)段。紅綠色盲是伴X隱性遺傳病，紅綠色盲基因（Xb）位于Ⅱ–2片段，女性基因型為：XBXB、XBXb、XBXB，男性基因型為XBY、XbY，男性發(fā)病率高于女性，女患者（XbXb）父親和兒子的基因型都是XbY，均為患者，A正確；B、抗維生素D佝僂病是伴X顯性遺傳病，抗維生素D佝僂病基因位于Ⅱ–2片段，女性基因型為：XDXD、XDXd、XdXd，男性基因型為XDY、XdY，女性發(fā)病率高于男性，但部分女患者（XDXd）癥狀較輕，B正確；C、減數(shù)第一次分裂后期同源染色體（如X和Y染色體）分離，C正確；D、男性某一細胞正常情況下有1條X染色體。在有絲分裂后期著絲點斷裂會出現(xiàn)2條，在減數(shù)分裂過程中可能出現(xiàn)0、1或2條，D錯誤。故選D?！军c睛】本題考查伴性遺傳的遺傳規(guī)律和人類遺傳病的類型，意在考查考生對伴性遺傳規(guī)律的理解及識記人類遺傳病的類型特點。2、B【解析】

分析曲線圖：隨著生長素濃度的升高，乙烯的濃度也不斷提高，成熟葉片的脫落率是先增加后減少；在一定范圍內(nèi)隨著乙烯濃度的升高，脫落率提高，但是超過一定范圍后，隨著乙烯濃度的升高，脫落率逐漸降低。【詳解】A、在一定范圍內(nèi)隨著乙烯濃度的升高，脫落率提高，但是超過一定范圍后，隨著乙烯濃度的升高，脫落率逐漸降低，A錯誤；

B、隨生長素濃度的增加，成熟葉片的脫落率是先增加后減少，即脫落率隨生長素濃度達到一定值后不斷降低，B正確；

C、生長素濃度較低時，隨著生長素濃度的增加，乙烯濃度和葉片脫落率均增加，乙烯與生長素對葉片脫落不是拮抗作用，C錯誤；

D、由圖可知，高濃度生長素可降低成熟葉片脫落率，由于不同器官、幼嫩部位與衰老部位對生長素的敏感程度不同，高濃度的生長素可能降低了成熟葉的脫落率，但有可能提高了幼嫩葉或花的脫落率，此實驗結果不一定適用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，D錯誤。

故選B。3、D【解析】

A、圖1中的虛線始終為二氧化碳的釋放，因此表示呼吸速率隨溫度變化的情況。而實線會低于0，因此表示凈光合速率隨溫度變化的情況。圖中看出，當溫度達到55℃時，光合作用不再吸收二氧化碳，只剩下呼吸作用消耗二氧化碳的曲線，表示植物不再進行光合作用，只進行呼吸作用，A正確；

B、分析圖2可知，6h時，二氧化碳的吸收速率為0，此時密閉小室內(nèi)二氧化碳濃度達到最大值，此時光合作用強度與合成作用強度相等，因此葉肉細胞產(chǎn)生[H]的場所有葉綠體、線粒體和細胞質(zhì)基質(zhì)等，B正確；

C、分析圖2可知，18時，二氧化碳的吸收速度等于0，說明此時植株的光合作用強度等于有氧呼吸的強度。因為植株的光合作用等于呼吸作用，所以植株的葉肉細胞的葉綠體產(chǎn)生的O2量就必須大于線粒體消耗的O2量，這樣才能保證非葉肉細胞的O2供應，而使植株的光合作用強度等于有氧呼吸的強度，C正確；

D、圖2中當光合速率等于呼吸速率時，凈光合速率為0，處于室內(nèi)二氧化碳濃度曲線的拐點，因此圖2中光合速率和呼吸速率相等的時間點有2個，圖1中，光合作用與呼吸作用相等的溫度條件是40℃，共3個，D錯誤。

故選D。4、A【解析】

1、共同進化：不同物種之間，生物與無機環(huán)境之間在相互影響中不斷進化和發(fā)展，這就是共同進化。2、生物多樣性的形成：（1）生物多樣性的內(nèi)容：①基因多樣性、②物種多樣性、④生態(tài)系統(tǒng)多樣性（2）生物多樣性形成的進化歷程生物的進化歷程可概括為：從原核生物到真核生物，從無性生殖到有性生殖，由簡單到復雜，由水生到陸生，由低等到高等。3、生物進化的實質(zhì)：種群的基因頻率發(fā)生變化的過程?！驹斀狻緼、熱帶草原的季節(jié)性變化對猴面包樹具有一個選擇作用，變異發(fā)生在選擇之前，A錯誤；B、落葉使猴面包樹的水分散失減少，有利于其度過旱季，B正確；C、猴面包樹的夜間開花是與果蝠等傳粉動物共同進化的結果，C正確；D、猴子等消費者的取食行為可以幫助猴面包樹傳播種子，D正確。故選A。5、D【解析】

本題考查原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結構的異同、細胞呼吸等知識，要求學生識記原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結構的異同，明確原核細胞只有DNA，無染色體；明確乳酸菌只能進行無氧呼吸，能結合所學的知識準確判斷各選項。【詳解】A、乳酸菌屬于原核生物，只有DNA，無染色體，A錯誤；B、乳酸菌只能進行有氧呼吸，B錯誤；C、乳酸菌不能進行有氧呼吸，只能進行無氧呼吸，有氧條件會抑制乳酸菌的無氧呼吸，且其分解產(chǎn)物為乳酸，C錯誤；D、原、真核生物的遺傳密碼是通用的，因此在基因指導蛋白質(zhì)合成時，兩種微生物共用一套遺傳密碼，D正確。故選D。6、B【解析】

1、有氧呼吸的過程：（1）有氧呼吸的第一階段是葡萄糖酵解產(chǎn)生丙酮酸和[H]，同時合成少量ATP，發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中；（2）有氧呼吸的第二階段是丙酮酸和水反應形成二氧化碳和[H]，同時合成少量ATP，發(fā)生在線粒體基質(zhì)中；（3）有氧呼吸的第三階段是[H]與氧氣結合形成水，合成大量ATP，發(fā)生在線粒體內(nèi)膜上。2、腦包括大腦、小腦、腦干。大腦是由左右兩個半球組成，大腦半球的表層是灰質(zhì)，稱為大腦皮層，大腦皮層是調(diào)節(jié)人體生理活動的最高級中樞，可以劃分為若干個功能區(qū)，如軀體運動中樞（管理身體對側骨骼肌的隨意運動）、軀體感覺中樞（管理身體對側皮膚、肌肉等處的感覺）、視覺中樞、聽覺中樞、以及人類特有的語言中樞等?！驹斀狻緼、只有有氧呼吸第三階段需要氧氣參與，A錯誤；B、為患者提供更多的營養(yǎng)物質(zhì)，可以為增強免疫系統(tǒng)的結構與功能提供有機物和能量，B正確；C、康復者血漿中含有抗體，C錯誤；D、大腦皮層沒有免疫調(diào)節(jié)中樞，D錯誤。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、光照強度和溫度（溫度可不寫）光照較弱時，呼吸作用產(chǎn)生的多于光合作用消耗的大于此時植株的產(chǎn)生量等于消耗量，但植株中有部分細胞不能進行光合作用，所以，此時葉肉細胞中光合作用強度大于呼吸作用強度。a+b用玻璃罩罩住樣方內(nèi)作物后罩內(nèi)溫度和濃度等與農(nóng)田相比都會發(fā)生變化【解析】

1、溫度對光合作用的影響：在最適溫度下酶的活性最強，光合作用強度最大，當溫度低于最適溫度，光合作用強度隨溫度的增加而加強，當溫度高于最適溫度，光合作用強度隨溫度的增加而減弱。2、二氧化碳濃度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強度隨二氧化碳濃度的增加而增強。當二氧化碳濃度增加到一定的值，光合作用強度不再增強。3、光照強度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強度隨光照強度的增加而增強。當光照強度增加到一定的值，光合作用強度不再增強?！驹斀狻浚?）6~9時，由于光照較弱，植物的光合速率還沒有達到最大值，所以此時影響光合作用強度的環(huán)境因素主要是光照強度，此時間段內(nèi)測得罩內(nèi)CO2濃度先升高后下降，CO2濃度升高的原因是光照較弱時，呼吸作用產(chǎn)生的二氧化碳多于光合作用消耗的二氧化碳。（2）6~9時，罩內(nèi)CO2濃度最高時，葉肉細胞內(nèi)光合作用強度大于呼吸作用強度，原因是此時植株二氧化碳的產(chǎn)生量等于消耗量，但植株中有部分細胞不能進行光合作用，所以，此時葉肉細胞中光合作用強度大于呼吸作用強度。（3）若該小組測得6~9時各罩內(nèi)CO2平均減少量為a黑暗處理3小時各罩內(nèi)CO2平均增加量為b，則a+b表示6~9時樣方內(nèi)該農(nóng)作物固定CO2的總量，進而可推算有機物的制造量。有同學分析后認為該結果與實際會有較大誤差，原因是用玻璃罩罩住樣方內(nèi)作物后，罩內(nèi)溫度和二氧化碳濃度等與農(nóng)田相比都會發(fā)生變化。【點睛】此題主要考查影響光合作用的環(huán)境因素的相關知識，意在考查學生對基礎知識的理解掌握，難度適中。8、顯微注射受精卵獲能激素核苷酸胚胎分割內(nèi)細胞團均等分割取囊胚期胚胎的滋養(yǎng)層細胞進行染色體（或DNA）分析【解析】

本題主要考查基因工程和胚胎工程的相關知識，在基因工程中，常以動物的受精卵作為受體細胞，采用顯微注射法將目的基因?qū)耄咛シ指钚枰獙?nèi)細胞團均等分割。【詳解】(1)將特殊的引導序列與“基因剪刀——Ca9酶”導入目的細胞是受精卵細胞，采用顯微注射法。（2）體外受精需要將成熟的精子獲能后與成熟的卵細胞結合形成受精卵；早期胚胎培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基需要加入無機鹽和有機鹽類、氨基酸、維生素、激素、核苷酸、水和血清等。（3）將囊胚期的早期胚胎采用胚胎分割技術可形成兩個甚至多個胚胎，該技術操作的關鍵是要做到將內(nèi)細胞團均等分割，取囊胚期胚胎的滋養(yǎng)層細胞進行染色體（或DNA）分析可以判斷胎兒的性別?！军c睛】本題的解題關鍵是要熟悉胚胎發(fā)育的過程。9、黃羽、短喙是控制羽色的基因位于常染色體上，控制喙長的基因位于Z染色體上AaZbZb×AaZBW01/3【解析】

本題考查基因自由組合定律的應用和基因位置的判斷，理解伴性遺傳的特點是解題的關鍵。【詳解】（1）就羽色而言，親本均為黃羽，子代有黃羽和白羽，且雌雄均有，說明黃羽是顯性性狀，基因位于常染色體上；就喙長而言，子代雄鳥全為短喙，雌鳥全為長喙，說明控制喙長的基因位于Z染色體上，子代雌鳥表現(xiàn)型只與父本一致，雄鳥表現(xiàn)型由父本和母本共同決定，故短喙是顯性性狀。（2）由于子代有黃羽和白羽，則親本羽色基因型均為Aa。由于短喙是顯性性狀，長喙是隱性性狀，故親本基因型是ZbZb和ZBW，則親本基因型是AaZbZb×AaZBW，子代黃羽短喙雄鳥基因型為AAZBZb或AaZBZb，全為雜合子。（3）子代白羽短喙雌鳥基因型為aaZBW，黃羽長喙雄鳥基因型為1/3AAZbZb、2/3AaZbZb，交配后代黃羽短喙雄鳥（A_ZBZ--）出現(xiàn)的概率是2/3×1/2=1/3。【點睛】常染色體遺傳與伴性遺傳比較

①常染色體上遺傳病與性別無關，即子代無論男女得病的概率或正常的概率相同；

②性染色體上的遺傳病與性別有關，子代男女得病概率或正常的概率不同。

③伴X顯性遺傳病：女性患者多余男性；

伴X隱性遺傳?。耗行曰颊叨嘤嗯裕?/p>

常染色體：男女患者比例相當。10、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細胞【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）分析題圖可知，將目的基因和與細胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構建打靶載體（基因表達載體）。（2）打靶載體測序驗證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術導入胚胎干細胞，這樣打靶載體與細胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導致細胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術鑒定同源重組的細胞（去除靶基因），將這樣的細胞通過動物細胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細胞。其中，暫時不用的細胞進行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情）的母鼠體內(nèi)，一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查，確保其生下嵌合小鼠。這種嵌