中藥、天然藥物質(zhì)量研究課件

中藥、天然藥物質(zhì)量研究1中藥、天然藥物

質(zhì)量控制的研究中藥、天然藥物質(zhì)量研究2藥品質(zhì)量藥品質(zhì)量概念可以理解為藥品的物理、化學、生物藥劑學、安全性、有效性、穩(wěn)定性、均一性等指標符合規(guī)定標準的程度。1、物理學指標：藥品活性成分、輔料的含量、制劑的重量、外觀等。2、化學指標：藥品活性成分化學、生物化學特性變化等。3、生物藥劑學指標：藥品的崩解、溶出、吸收、分布、代謝、排泄等。中藥、天然藥物質(zhì)量研究3藥品質(zhì)量4、安全性指標：藥品的“三致”、毒性、不良反應(yīng)和副作用、藥物相互作用和配伍、使用禁忌等。5、有效性指標：藥品針對規(guī)定的適應(yīng)癥在規(guī)定的用法、用量條件下治療疾病的有效程度指標。6、穩(wěn)定性指標：藥品在規(guī)定的儲藏條件下在規(guī)定的有效期內(nèi)保持其物理、化學、生物藥劑學、安全性、有效性指標穩(wěn)定的指標。中藥、天然藥物質(zhì)量研究4藥品質(zhì)量7、均一性指標：藥品活性成分在每一單位（片、粒、瓶、支、袋）藥品中的物理、化學、生物藥劑學、安全性、有效性、穩(wěn)定性等指標等等同程度的指標。藥品質(zhì)量好壞≠藥品活性成分的含量藥品包裝材料特性和質(zhì)量、包裝及標簽、使用說明、廣告及宣傳品中的信息與藥品質(zhì)量都有關(guān)中藥、天然藥物質(zhì)量研究5中藥、天然藥物的鑒別研究中藥、天然藥物含量測定的研究與評價中藥、天然藥物制劑檢查的有關(guān)要求中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究中藥、天然藥物注射劑質(zhì)量控制的研究與評價中藥、天然藥物質(zhì)量研究6中藥、天然藥物的鑒別研究

意義：藥品研究中的各個環(huán)節(jié)都需要一個盡可能完善的質(zhì)量標準。鑒別是質(zhì)量標準中的重要項目之一。

要求：

⑴原則上處方中各藥味均應(yīng)進行鑒別研究。根據(jù)試驗情況，選擇可行的鑒別方法列入質(zhì)量標準，不行的列入到起草說明里。中藥、天然藥物質(zhì)量研究7⑵根據(jù)方解首選方中君臣藥、貴重藥進行鑒別研究，同時注意毒性藥物的鑒別檢查。⑶鑒別的內(nèi)容按照藥典的格式和術(shù)語進行描述。例如：寫濾過而不是過濾；“照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗”而不是“照薄層色譜法（附錄ⅥB）試驗”；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，而不是對照品和對照藥材⑷鑒別的方法要求專屬、靈敏、快捷、簡便中藥、天然藥物質(zhì)量研究8鑒別方法的研究

1、來源鑒別（科名、中文名、拉丁學名、藥用部位）

2、性狀鑒別（形狀、顏色、表面、質(zhì)地、斷面、氣味）

3、顯微鑒別（組織、細胞、內(nèi)含物）

4、理化鑒別（有效成分、主成分或特征成分）

5、薄層色譜鑒別（處方中藥味或成分）

6、氣相色譜鑒別（揮發(fā)性成分）

7、高效液相色譜鑒別

8、電泳鑒別（蛇類含蛋白質(zhì)的藥材）

9、紅外光譜鑒別10、紫外光譜鑒別（最好不用）11、分子生物學鑒別（DNA）中藥、天然藥物質(zhì)量研究9薄層色譜鑒別

圖譜內(nèi)容：供試品、對照品或（和）對照藥材、陰性對照三個部分。對照藥材與對照品的選擇：⑴當對照品的種類太多時，選用對照藥材好過選擇對照品。⑵當藥材來源很多，很難用對照藥材進行鑒別而有效成分明確時，用對照品。如：陳皮⑶當處方中有含同一有效成分的兩味藥材，需用雙陰性對照鑒別。如：黃蓮與黃柏、當歸與川芎、蛇床子與獨活西洋參與紅參。中藥、天然藥物質(zhì)量研究101.蘆薈大黃素2.大黃酸3、大黃素4、大黃素甲醚5、大黃酚6、混合對照品1-57、大黃對照藥材（掌葉大黃）8、大黃對照藥材（唐古特大黃）9、大黃對照藥材（藥用大黃）10-13、大黃樣品中藥、天然藥物質(zhì)量研究111、供試品2、供試品3、供試品4、赤芍對照藥材5、芍藥苷對照品6、赤芍陰性對照1～3、供試品4、黃柏對照藥材

5、鹽酸小檗堿6、陰性對照中藥、天然藥物質(zhì)量研究12需注意的內(nèi)容：1、提供有關(guān)的圖譜和照片2、注意鑒別的重現(xiàn)性3、所用對照品和對照藥材應(yīng)符合有關(guān)的技術(shù)要求4、質(zhì)量標準的起草說明中應(yīng)附圖譜及參考文獻中藥、天然藥物質(zhì)量研究13蒼術(shù)正已烷提取物不同濕度條件下的薄層色譜鑒別圖譜中藥、天然藥物質(zhì)量研究14

中藥、天然藥物含量測定的研究1、含量測定是認識產(chǎn)品質(zhì)量的一個“窗口”，是中藥質(zhì)量標準的一個重要組成部分。2、法規(guī)及技術(shù)要求中的相關(guān)內(nèi)容：⑴未在國內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物中提取的有效成分及制劑，其單一有效成分的含量應(yīng)當占總提取物的90%以上。⑵未在國內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物中提取的有效部位制成的制劑，其有效部位的含量應(yīng)當占總提取物的50%以上。⑶由數(shù)類有效成分組成的有有效部位，應(yīng)當測定每類成分的含量，并對每類成分進行含量測定且規(guī)定下限（對有毒性的成份增加上限控制）。⑷凈藥材投料的靜脈注射劑，有效部位的含量應(yīng)不低于總固體量的25%（肌注20%）；有效部位投粒的靜脈注射劑，有效部位的含量應(yīng)不低于總固體量的80%（肌注70%）。中藥、天然藥物質(zhì)量研究15含量測定的指標選擇⑴含量測定的指標應(yīng)盡可能體現(xiàn)與安全性、有效性的關(guān)聯(lián)性，體現(xiàn)質(zhì)量控制研究的根本目的。⑵中藥復(fù)方制劑是在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下遣方用藥的，其含量測定的指標選擇需體現(xiàn)與中醫(yī)理論的關(guān)系，君臣佐使。⑶中藥中成分受工藝的影響，含測指標的選擇應(yīng)體現(xiàn)與工藝的聯(lián)系。如：何首烏水提時不應(yīng)以大黃素類作含量測定的指標，而應(yīng)以二苯乙烯苷類成分作為指標；丹參⑷有合適生物活性指標時，也可用效價。如蚓激酶效價測定。⑸含量測定指標的選擇應(yīng)體現(xiàn)與藥物穩(wěn)定性考察的關(guān)系。中藥、天然藥物質(zhì)量研究16含量測定的指標選擇

（6）含量過低時增加含測指標（7）中西復(fù)方制劑需測定每味化學藥的含量（8）分幾條路線對藥材分別提取的需增加含測指標（9）建議建立多個含測指標中藥、天然藥物質(zhì)量研究17含量測定限度⑴根據(jù)足夠的實測的、具有代表性樣品的實測值制定。⑵同時考濾中試轉(zhuǎn)移率、藥材的含量狀況、大生產(chǎn)條件、穩(wěn)定性研究結(jié)果等實際情況。并提供所用藥材及中試樣品含測成分的含量數(shù)據(jù)，計算轉(zhuǎn)移率。⑶一般只規(guī)定下限，或按照其標示量制定百分幅度。⑷藥理活性較強的成分，及既有效又有毒的成分，建議在質(zhì)量標準中規(guī)定合理的含量范圍；毒性成分的含量必須制定幅度。中藥、天然藥物質(zhì)量研究18國務(wù)院列入毒劇藥管理的中藥材

砒石、砒霜、水銀、生馬錢子、生川烏、生草烏、生白附子、生附子、生半夏、生南星、生巴豆、斑蝥、青娘蟲、紅娘蟲、生甘遂、生狼毒、生藤黃、生千金子、生天仙子、鬧洋花、雪上一枝蒿、紅升丹、白降丹、蟾酥、洋金花、紅粉、輕粉、雄黃中藥、天然藥物質(zhì)量研究19含馬兜鈴酸的藥材取消關(guān)木通、青木香、廣防己的藥用標準，分別采用木通、土木香、防己代替。暫停含馬兜鈴、尋骨風、天仙藤、和朱砂蓮中成藥的已有國家標準品種的注冊申請。中藥、天然藥物質(zhì)量研究20總多糖的含測－槐耳菌質(zhì)WS-151（Z-31）-92樣品處理：取本品粗粉約2g，精密稱定，加水回流提取，濾過，濾液濃縮，加10倍量乙醇，搖勻，靜置過夜，用布氏漏斗抽濾，加熱水使沉淀溶解，并定量轉(zhuǎn)移至量瓶中，搖勻。測定：硫酸蒽酮法中藥、天然藥物質(zhì)量研究21總蛋白質(zhì)的含測－塞隆風濕酒WS-249(Z-037)-95

總氮：照氮測定法項下半微量法測定，計算出總氮量非蛋白氮：精密量取本品2ml，置具塞離心管中，加蛋白質(zhì)沉淀劑（40%三氯醋酸溶液10ml中含有硅鎢酸0.5g）1ml，混勻，于3000-3500/分離心20分鐘，精密量取上清液1ml，置凱氏瓶中，照氮測定法測定，計算出非蛋白氮后，再按公式計算。蛋白質(zhì)含量（mg/ml）=（總氮－非蛋白氮）×5.56中藥、天然藥物質(zhì)量研究22含量測定方法的驗證內(nèi)容1、準確度以回收率進行評價2、精密度以重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性進行評價3、專屬性以陰性對照和樣品圖譜的差異進行評價4、線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖5、范圍測試方法適用的高低濃度或量的區(qū)間6、耐用性在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。中藥、天然藥物質(zhì)量研究23

含量測定方法的考察內(nèi)容及驗證要求

a、提取、純化方法考察：

b、檢測波長的選擇：

c、測定條件選定：應(yīng)考察制劑、藥材、陰性對照的測定結(jié)果，藥材和制劑所測成分的分離度要達到藥典的要求，陰性應(yīng)無干擾。

d、標準品純度考察：應(yīng)進行進樣量或點樣量10μg以上進行考察，其純度達到98％以上，附純度考察圖譜。

e、標準曲線制作：應(yīng)考察線性關(guān)系、是否通過原點、線性范圍、相關(guān)系數(shù)等。

f、穩(wěn)定性試驗：一般考察36小時。中藥、天然藥物質(zhì)量研究24含量測定方法的考察內(nèi)容及驗證要求

g、精密度試驗：取同一樣品，連續(xù)測定五次，相對標準偏差RSD％不得大于3％。

h、重復(fù)性試驗：同一批號樣品，按樣品測定方法操作，測定五份，相對標準偏差RSD％不得大于3％。

i、加樣回收試驗：一般回收率要求在95～105％，操作復(fù)雜的特殊樣品要求在90～110％。

j、含量限幅度的制定：申報臨床，必須根據(jù)原料來源不同的三批以上樣品測定結(jié)果，確定含量范圍；申報生產(chǎn)，必須累積十批以上樣品的數(shù)據(jù)。中藥、天然藥物質(zhì)量研究25含量測定方法的考察內(nèi)容及驗證要求

k、藥材含量與提取率考察：根據(jù)不同產(chǎn)地、不同來源藥材的含量測定結(jié)果，確定藥材中有效成分或指標性成分的含量范圍；根據(jù)藥材含量和成品含量，計算提取率，一般要求提取率在60％以上，對于提取、純化工藝復(fù)雜的產(chǎn)品，要求提取率在50％以上。中藥、天然藥物質(zhì)量研究26中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究目的：

通過研究藥物在不同條件下隨時間變化的規(guī)律，為藥品的生產(chǎn)、包裝、貯存、運輸條件的確定和有效期的建立提供科學的依據(jù)。穩(wěn)定性研究的內(nèi)容及一般要求：

（一）對樣品的要求

1、成品的穩(wěn)定性考察應(yīng)在工藝研究、質(zhì)量標準建立工作完成以后，再進行穩(wěn)定性考察。

2、樣品應(yīng)與大生產(chǎn)所用工藝、設(shè)備、流程一致，使穩(wěn)定性研究結(jié)果盡可能代表將來上市產(chǎn)品穩(wěn)定性。中藥、天然藥物質(zhì)量研究27中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

（一）對樣品的要求

3、樣品的批次、規(guī)模：選擇3批中試以上規(guī)模的樣品，必須有足夠的量。

4、包裝條件：包裝材料應(yīng)與上市包裝材料在結(jié)構(gòu)上保持一致。中藥、天然藥物質(zhì)量研究28中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

（二）貯存條件的選擇

1、首先應(yīng)充分考慮到日后產(chǎn)品儲存、運輸及使用過程中可能遇到的環(huán)境因素。

2、穩(wěn)定性考察放置條件應(yīng)考慮劑型、包材等多種因素。

3、進行穩(wěn)定性試驗所用設(shè)備應(yīng)能較好的對試驗條件進行控制和監(jiān)控。中藥、天然藥物質(zhì)量研究29中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

（三）考察時間點的設(shè)置

加速試驗：

開始考察時間應(yīng)在樣品制備后一個月內(nèi)，以開始考察的結(jié)果作為0月結(jié)果，以后每個月考察一次，不得少于3個月。室溫留樣試驗：在室溫條件下考察，應(yīng)從0月開始，一般可在初步穩(wěn)定性考察后繼續(xù)考察，即在初步穩(wěn)定性考察三個月后，放置3個月再考察一次，然后每6個月測定一次。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究30中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

（三）考察項目及指標的選擇1、首先應(yīng)以質(zhì)量標準中確定的檢測項目為考察指標。2、不同劑型考察項目不同。一般均進行的考察項目：性狀、鑒別、檢查、含量測定。主要不同在于不同劑型有不同的特殊檢查項。特殊劑型應(yīng)增加相應(yīng)的考察項目。如：注射劑還要考察澄明度、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、重金屬、草酸、熾灼殘渣的檢查（控制雜質(zhì)）還需增加無菌、熱源（細菌內(nèi)毒素）、溶血、PH值、異常毒性、刺激性、過敏性等檢查。熱源、無菌、微生物檢查只需0月、3月、最終考察時間點即可。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究31中藥、天然藥物質(zhì)量研究32

注：無菌、衛(wèi)生學檢查和安全性試驗一般可于零月、三月和考察終止時進行三次。中藥、天然藥物質(zhì)量研究33中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

加速試驗方法

模擬市售包裝三批樣品，一般選擇37~40℃±2℃、RH75%±5%條件下進行3個月試驗，在試驗期間第0、1、2、3月未取樣。如不符合質(zhì)量標準要求，則應(yīng)進行室溫留樣穩(wěn)定性考察。對熱敏感藥品的長期留樣試驗可適當降低考察溫度進行試驗，取樣時間間隔同上。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究34制劑初步穩(wěn)定性試驗報告表中藥、天然藥物質(zhì)量研究35中藥、天然藥物穩(wěn)定性研究

長期室溫留樣試驗方法

模擬市售包裝三批樣品，一般選擇25℃±2℃、RH60%±10%條件下進行3個月試驗，在試驗期間第0、1、2、3月各取樣一次，然后每6個月取樣一次。至規(guī)定的考察時間。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究36制劑穩(wěn)定性試驗報告表中藥、天然藥物質(zhì)量研究37批號123性狀內(nèi)容物為棕黃色的顆粒；氣微，味微苦內(nèi)容物為棕黃色的顆粒；氣微，味微苦內(nèi)容物為棕黃色的顆粒；氣微，味微苦鑒別（1）顯微鑒別，檢出鹿茸顯微鑒別，檢出鹿茸顯微鑒別，檢出鹿茸（2）TLC檢出丹參TLC檢出丹參TLC檢出丹參（3）TLC檢出黃芪TLC檢出黃芪TLC檢出黃芪（4）TLC檢出當歸TLC檢出當歸TLC檢出當歸檢查水分4.0%4.2%4.2%崩解時限14分鐘13分鐘15分鐘裝量差異符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定含量測定每粒含橙皮苷為1.08mg每粒含橙皮苷為1.12mg每粒含橙皮苷為1.16mg重金屬(ppm)<10<10<10砷鹽(ppm)<2<2<2細菌302030霉菌101010大腸桿菌未檢出未檢出未檢出活螨未檢出未檢出未檢出例3**膠囊劑----中試產(chǎn)品檢測報告：中藥、天然藥物質(zhì)量研究38影響因素試驗

目的和要求

1、考察藥品在極端條件下固有的穩(wěn)定性，了解其降解途徑和可能的降解產(chǎn)物，為保存條件的確定提供依據(jù)，如果表明對光不穩(wěn)定，則貯存時應(yīng)注意避光。

2、影響因素試驗的結(jié)果還為藥品選擇合適的包裝材料和容器提供支持，如產(chǎn)品對高溫不穩(wěn)定，則應(yīng)選擇對濕密封性好的包裝材料。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究39影響因素試驗影響因素試驗內(nèi)容

1、高溫試驗

2、高濕試驗

3、強光照射試驗

4、熱循環(huán)（凍融）試驗影響因素試驗應(yīng)用范圍

一般情況下只是一類新藥原料藥需進行影響因素試驗。如果其他類別新藥在進行穩(wěn)定性試驗時發(fā)現(xiàn)藥品不穩(wěn)定時，需進行此試驗，查找不穩(wěn)定因素，通過控制工藝條件或改變包裝條件，控制藥品的質(zhì)量和穩(wěn)定性。中藥、天然藥物質(zhì)量研究40影響因素試驗

高溫試驗方法

于60℃下放置10天，于第5天和第10天取樣，檢測評價指標。若供試品有明顯的變化（如含量下降5%），則在40℃下同法進行試驗。若在60℃條件下無明顯變化，不再進行40℃試驗。

中藥、天然藥物質(zhì)量研究41影響因素試驗

高濕試驗方法

在25℃、RH90%±5%條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，指標可包括吸濕增重項。若吸濕增重5%以上，則在25℃、RH75%±5%條件下同法進行實驗；若吸濕增重5%以下，且其他考察項目符合要求，則不再進行此項試驗。中藥、天然藥物質(zhì)量研究42穩(wěn)定性研究結(jié)果的作用

整體評價藥品穩(wěn)定性，確定藥品保存條件、包裝材料/容器、有效期。包裝材料應(yīng)該是經(jīng)有關(guān)部門批準應(yīng)用的材料，最好能提供相關(guān)的證明材料。有效期的確定應(yīng)以室溫度留樣穩(wěn)定性考察數(shù)據(jù)來確定。中藥、天然藥物質(zhì)量研究43制劑檢查的有關(guān)要求1、檢查的目的和意義2、檢查研究的原則和要求3、常見制劑檢查項目不合格的原因分析4、部分制劑檢查的有關(guān)方法中藥、天然藥物質(zhì)量研究44制劑檢查的有關(guān)要求

制劑檢查：是某一類制劑應(yīng)達至的共性的要求。各類制劑，除品種項下另有規(guī)定外，均應(yīng)符合各制劑通則項下有關(guān)的各項規(guī)定。制劑檢查的內(nèi)容：

安全性：大孔吸附樹脂殘留物、有機溶劑殘留物、砷鹽和重金屬、毒性藥材的限量、甲醇含量、注射劑的一些檢查、黃曲霉素等。

有效性：溶出度、釋放度等

均一性：含量均勻性、重量差異、裝量差異、崩解時限、分子量分布檢查等。

純度：如大黃中檢測土大黃苷（三黃片）。

其它：碘值、皂化值和酸值等。中藥、天然藥物質(zhì)量研究45重金屬、砷鹽檢查2005版藥典中“鉛、鎘、砷、汞、銅測定法”的測定方法：原子吸收分光光度法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法注意樣品處理方法。2005版藥典中新增“鉛、鎘、砷、汞、銅測定法”，其中樣品的處理有3種方法：A：微波消解法，B：濕法消解（硝酸－高氯酸），C：干法消解。其中，干法消解用于中藥常需加穩(wěn)定劑。需注意應(yīng)進行有機破壞。中藥、天然藥物質(zhì)量研究46

砷鹽檢查－舉例標準砷斑試劑空白試劑空白+標準砷供試品供試品+標準砷中藥、天然藥物質(zhì)量研究47制劑檢查的有關(guān)要求

一般情況下，中藥新藥制劑中重金屬小于10PPm，砷鹽小于2PPm時，有關(guān)檢查可不列入質(zhì)量標準。超過該限度需查找原因，并將相關(guān)檢查項列入質(zhì)量標準。并提供足夠證明其服用安全性的安全性試驗資料。

如鹿角膠

【性狀】本品為扁方形塊，長3～4cm，厚約0.6cm。黃棕色或紅棕色，半透明，有的上部有黃白色泡沫層。質(zhì)脆，易碎，斷面光亮。氣微，味微甜?！緳z查】水分取本品1g，粉碎成粗粉，精密稱定，照水分測定法附錄ⅨH第一法）測定，不得過15.0%。

總灰分取本品1.0g，依法測定（附錄ⅨK），不得過3.0%。

重金屬取總灰分項下的殘渣，依法檢查（附錄ⅨE第二法），含重金屬不得過百萬分之三十。

砷鹽取本品1.0g，加氫氧化鈣1g，混合，加少量水，攪勻，干燥后，先用小火燒灼使炭化，再在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸5ml與水2ml，依法檢查（附錄ⅨF），含砷量不得過百萬分之二。

其他應(yīng)符合膠劑項下有關(guān)的各項規(guī)定（附錄ⅠG）。中藥、天然藥物質(zhì)量研究48制劑檢查的有關(guān)要求

黃連上清丸【處方】黃連10g桅子（姜制）80g連翹80g蔓荊子（炒）80g防風40g荊芥穗80g白芷80g黃芩80g菊花160g薄荷40g酒大黃320g黃柏（酒炒）40g桔梗80g川芎40g石膏40g

旋覆花20g甘草40g【制法】以上十七味，粉碎成細粉，過篩，混勻。每100g粉末加煉蜜150～170g制成大蜜丸，即得?！拘誀睢勘酒窞楹诤稚拇竺弁瑁粴夥枷?，味苦?！捐b別】【檢查】

重金屬取本品5丸，切碎，過二號篩，取1.0g，稱定重量,照熾灼殘渣檢查法（附錄ⅨJ）熾灼至完全灰化。取遺留的殘渣，依法檢查（附錄ⅨE第二法），含重金屬不得過百萬分之二十五。砷鹽取本品5丸，切碎，過二號篩，取1.0g，稱定重量。加無砷氫氧化鈣1g，加少量水，攪勻，烘干，用小火緩緩熾灼至炭化，再在500～600℃熾灼至完全灰化（同時作空白，留做標準砷斑用），放冷，加鹽酸7ml使溶解，再加水21ml，依法測定（附錄ⅨF第一法）。含砷量不得過百萬分之二。其他應(yīng)符合丸劑項下有關(guān)的各項規(guī)定（附錄ⅠA）。中藥、天然藥物質(zhì)量研究49制劑檢查中有關(guān)毒性藥材的檢查馬兜鈴酸：含馬兜鈴酸的藥材有馬兜鈴科馬兜鈴屬植物及細辛屬植物。當處方中含有細辛或其它暫未要求替代、禁用的馬兜鈴屬藥材時，一般要求提供馬兜鈴酸的檢測資料。要求替代的藥材有：關(guān)木通（馬兜鈴科）→木通（木通科）廣防已→防已青木香→土木香

其它：烏頭生物堿、士的寧、千里光（吡咯里西啶類生物堿）、山豆根（金雀花堿）、黃曲霉素、農(nóng)藥殘留等。中藥、天然藥物質(zhì)量研究50中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價

質(zhì)量控制的特殊性

注射劑質(zhì)量控制的要求不同于其它的劑型，其質(zhì)量控制更加嚴格。強調(diào)從原藥材、溶媒、輔料、附加劑及工藝過程的全程質(zhì)量控制，包括特殊檢查，以達到質(zhì)量穩(wěn)定的目的。中藥、天然藥物質(zhì)量研究51中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價

原料

注射劑原料主要包括藥材（包括凈藥材和飲片）、有效成分和有效部位。以凈藥材投料的注射劑關(guān)注原藥材的質(zhì)量穩(wěn)定。一般藥材要固定產(chǎn)地、固定品種，制定中藥材的指紋圖譜，建立藥材的內(nèi)控質(zhì)量標準。以有效部位、有效成分投料的注射劑，其含量和組成應(yīng)基本穩(wěn)定。中藥、天然藥物質(zhì)量研究52中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價

溶媒、輔料和附加劑

注射劑所用溶媒應(yīng)符合注射用要求。注射劑使用的輔料、附加劑質(zhì)量要求與其它劑型不同，必須符合藥用標準。并符合注射用要求，沒有標準時，應(yīng)補充其注射用要求作為內(nèi)控標準。使用附加劑時，應(yīng)提供附加劑選擇的試驗研究資料。中藥、天然藥物質(zhì)量研究53中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價

半成品的質(zhì)量控制

根據(jù)不同的處方組成、工藝路線，建立多個關(guān)鍵工序的工藝參數(shù)及相關(guān)的檢測數(shù)據(jù)，注意建立中間體的內(nèi)控質(zhì)量標準，包括定性和定量指標，確保最終產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定。忽視了中間體的質(zhì)量控制，導(dǎo)致最終產(chǎn)品的質(zhì)量不穩(wěn)定。中藥、天然藥物質(zhì)量研究54中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制常規(guī)檢查：《中國藥典》注射劑項下規(guī)定的檢查項目：裝量差異、澄明度、無菌、不溶性微粒等特殊性檢查：色澤：色差應(yīng)不超過規(guī)定色號±1色號，或經(jīng)研究制訂出可行的檢查方法及標準pH值：一般應(yīng)在pH4.0～9.0之間。但同一品種的pH值允許差異范圍應(yīng)不超過2.0蛋白質(zhì)：取注射液1ml，加新配制的30％磺基水楊酸試液1ml，混合放置5分鐘，不得出現(xiàn)渾濁。注射液中如含有遇酸能生產(chǎn)沉淀的成分，可改加鞣酸試液1～3滴，不得出現(xiàn)混濁。中藥、天然藥物質(zhì)量研究55中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制特殊性檢查：鞣質(zhì)：1、產(chǎn)生沉淀和疼痛2、1％雞蛋清法或明膠氯化鈉溶液法3、含有聚山梨脂、聚氧乙烯基物質(zhì)的注射液，雖有鞣質(zhì)也不產(chǎn)生沉淀，對這類注射液應(yīng)取未加輔料前的半成品進行檢查4、如含有吐溫-80的鞣質(zhì)檢查會出現(xiàn)假陰性，丹參酚酸可能產(chǎn)生假陽性。重金屬：10ppm以下砷鹽：2ppm以下草酸鹽：取注射液2ml，加3％氯化鈣試液2～3滴，放置10分鐘，不得出現(xiàn)渾濁或沉淀中藥、天然藥物質(zhì)量研究56中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制特殊性檢查：鉀離子：按法檢查，一般控制在20-40mg/100ml樹脂：取注射液5ml，加鹽酸1滴，放置30分鐘，應(yīng)無樹脂狀物析出。注射液中如含有遇酸能產(chǎn)生沉淀的成分，可改加氯仿10ml振搖提取，分取氯仿液，置水浴上蒸干，殘渣加冰醋酸2ml使溶解，置具塞試管中，加水3ml，混勻，放置30分鐘，應(yīng)無樹脂狀物析出(規(guī)定不得檢出)熾灼殘渣：不得過1.5％(g/ml)水分：注射用無菌粉末應(yīng)制訂標準中藥、天然藥物質(zhì)量研究57中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制特殊性檢查：異常毒性：溶血試驗：刺激性試驗：肌肉或血管刺激性試驗過敏試驗：總固體量測定：精密量取注射液10ml，置于恒重的蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干后，在105℃干燥3小時，移置干燥器中冷卻30分鐘，迅速稱定重量。計算總固體的量(mg/ml)中藥、天然藥物質(zhì)量研究58中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制特殊性檢查：異常毒性：溶血試驗：刺激性試驗：肌肉或血管刺激性試驗過敏試驗：總固體量測定：精密量取注射液10ml，置于恒重的蒸發(fā)皿中，于水浴上蒸干后，在105℃干燥3小時，移置干燥器中冷卻30分鐘，迅速稱定重量。計算總固體的量(mg/ml)中藥、天然藥物質(zhì)量研究59中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價與安全性有關(guān)的質(zhì)量控制特殊性檢查：熱原、細菌內(nèi)毒素和無菌檢查：不得含有熱原、達到無菌要求澄明度和不溶性微粒檢查：配伍的穩(wěn)定性考察：有機溶劑殘留檢測：注射劑的制備工藝過程中使用的有機溶劑，如：醋酸乙酯、正丁醇、氯仿等應(yīng)除盡，并要對有機溶劑殘留量進行研究，建立檢測方法，列入質(zhì)量標準中，規(guī)定不得檢出。中藥、天然藥物質(zhì)量研究60中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價定性、定量控制1、應(yīng)建立方中藥材、半成品和成品的含測方法和含量幅度。多個主要成分之間比例應(yīng)相對穩(wěn)定。2、以有效部位為組份的注射劑，所測定有效部位的含量應(yīng)不少于總固體量的70%（靜脈應(yīng)不少于80%）。調(diào)節(jié)滲透壓等的附加劑應(yīng)按實際加入量扣除。3、以凈藥材為組份配制的注射劑，所測定成分的總含量應(yīng)不低于總固體量的25%（肌注20%）中藥、天然藥物質(zhì)量研究61中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價定性、定量控制4、以有效部位或以有效部位為組份的注射劑含量均以標示量的上下限范圍表示；以藥材為組份的注射劑含量建議以含量幅度表示。5、含有毒性藥味時，必須制定有毒成分的限量范圍。6、對含量測定方法的研究除理化方法外，也可采用生物測定法或其它方法。中藥、天然藥物質(zhì)量研究62中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價定性、定量控制7、組份中含有化學藥品的，應(yīng)單獨測定該化學藥品的含量，由總固體內(nèi)扣除，不計算在含量測定的比例數(shù)內(nèi)。8、注射劑所用輔料一般應(yīng)具有藥用標準。所用輔料若存在安全性擔憂的，需提供相關(guān)資料以證實其安全性。依地酸二鈉、PVP9、由于中藥注射劑的過敏反應(yīng)較多，且不能排除貯存與過敏反應(yīng)具有相關(guān)性的可能，故應(yīng)將過敏試驗列入穩(wěn)定性考察內(nèi)容。中藥、天然藥物質(zhì)量研究63中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價定性、定量控制常見問題1、達不到中藥注射劑含量測定的基本要求。2、含有多種成分，但未對每味藥材所貢獻成分進行定量控制。3、注射劑中的輔料，如葡萄糖，氯化鈉、甘露醇等應(yīng)建立輔料的含量測定方法列入質(zhì)量標準。4、以葡萄糖為輔料的，同時要控制藥品中5-羥甲基糠醛的含量，列入質(zhì)量標準。因為5-羥甲基糠醛是葡萄糖等單糖在高溫或弱酸等條件下脫水產(chǎn)生的一個醛類化合物，對人體橫紋肌和內(nèi)臟有損害。同時，它也代表葡萄糖的分解程度。中藥、天然藥物質(zhì)量研究64中藥注射劑質(zhì)量控制的研究與評價含多糖的注射劑質(zhì)量控制要點含多糖的中藥注射劑，要研究明確多大分子量范圍的有效的多糖，并盡可能地進行分離純化，建立定性、定量的質(zhì)量控制方法，如分子量和分子量分布，指紋圖譜、含量測定等，制定專屬性質(zhì)控方法。含多糖的注射劑質(zhì)量控制常見問題

分子量分布不清楚，專屬不強（多糖測定時未除去單糖的量）。中藥、天然藥物質(zhì)量研究65中藥注射劑的指紋圖譜建立指紋圖譜的意義及要求：中藥發(fā)揮療效的物質(zhì)基礎(chǔ)是其化學成分。由于中藥的復(fù)雜性，對所含的大多數(shù)成分進行定量控制幾乎是不可能的，通過指紋圖譜研究，希望能對全成分進行定性控制，表達所含物質(zhì)的穩(wěn)定，達到批間質(zhì)量的穩(wěn)定。為加強中藥注射劑的質(zhì)量，以保證中藥注射劑批間質(zhì)量的一致性。

技術(shù)要求規(guī)定中藥注射劑所用的中藥材在固定品種、產(chǎn)地的前提下，制定中藥材、有效部位或中間體、成品的指紋圖譜。指紋圖譜的建立應(yīng)根據(jù)具體情況，在深入研究的基礎(chǔ)上，對所含的各類成分進行控制，建立多張指紋圖譜。中藥、天然藥物質(zhì)量研究66中藥注射劑的指紋圖譜常見問題：

1、未針對各類成分建立多張指紋圖譜，大多數(shù)只一張指紋圖譜，不能反映產(chǎn)品所含成分的全貌。根據(jù)各類成分進行多種成分（如黃酮、生物堿）的指紋圖譜。2、未分析藥材、中間體和成品的相關(guān)性。3、成品中的色譜峰較少，不能客規(guī)地控制所含成分。4、未進行充分的方法學研究。5、數(shù)據(jù)累積不夠，導(dǎo)致后期生產(chǎn)過程中達不到指紋圖譜的要求。中藥、天然藥物質(zhì)量研究67中藥指紋圖譜的意義是全面反應(yīng)中藥所含內(nèi)在化學成分的種類與數(shù)量，進而反映中藥的質(zhì)量，尤其在現(xiàn)階段中藥的有效成分絕大多數(shù)沒有明確，采用中藥指紋圖譜的方式，將有效地表征中藥質(zhì)量和穩(wěn)定性有利于中藥及其產(chǎn)品進入國際市場中藥、天然藥物質(zhì)量研究68中藥指紋圖譜建立的原則系統(tǒng)性：指紋圖譜所反映的化學成分，應(yīng)包括中藥有效部位所含大部成分的種類，或指標成分的全部特征性：指紋圖譜中反映的化學成分信息（具體表現(xiàn)為保留時間或位移值）是具有高度選擇性的，是這些信息的綜合結(jié)果穩(wěn)定性：指紋圖譜在規(guī)定的方法與條件下應(yīng)能作出相對一致的指紋圖譜色譜特征的穩(wěn)定性：特征峰 特征區(qū) 特征參數(shù)色譜條件穩(wěn)定性：不同儀器的驗證 不同實驗室的驗證不同操作者的驗證中藥、天然藥物質(zhì)量研究69注意事項（1）所有成分應(yīng)在2小時左右洗脫，并提供2小時的指紋圖譜（2）可建立各個組分的指紋圖譜（3）可建立多種方法的指紋圖譜（4）可選擇典型樣品的指紋圖譜，或標準提取物的指紋圖譜，或具有代表性的勾兌樣品的指紋圖譜作為標準指紋圖譜2.指紋圖譜標準的建立（1）藥材、中間體指紋圖譜標準為企業(yè)內(nèi)控標準，列入起草說明（2）10批供試品（3）標準的規(guī)定：供試品的指紋圖譜與對照提取物（標準提取物的指紋圖譜一致；或供試品的指紋圖譜與對照指紋圖譜（標準圖譜）一致；或通過對各特征峰的位置（相對保留時間、比移值等）、豐度（積分面積或峰高）及相對豐度、光譜特性（顏色）等綜合參數(shù)的描述予以確定。中藥、天然藥物質(zhì)量研究70指紋圖譜標準書寫格式液相色譜法

【指紋圖譜】照高效液色譜法（中國藥典一部附錄VID），結(jié)合指紋圖譜的要求測定。色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗如以對照品做系統(tǒng)適用性試驗，則參照中國藥典書寫格式。如以隨行對照提取物做系統(tǒng)適用性試驗，則只書寫所用儀器、色譜柱型號及有關(guān)參數(shù)和各項具體試驗條件。對照品溶液的制備如有對照品則照中國藥典書寫格式。供試品溶液的制備精密吸取供試品溶液、對照品溶液（或?qū)φ沼锰崛∥锶芤海└鱔Xml，分別流入液相色譜儀，測定。本品指紋圖譜的主要特征供試品指紋圖譜與質(zhì)量標準所附的對照指紋圖譜（或隨行對照提取物指紋圖譜）經(jīng)計算軟件計算，相似度大于XX，符合要求（或相似度小于XX，不符合要求）。中藥、天然藥物質(zhì)量研究71（二）、樣品的選擇與收集要求：

10個批次道地藥材與GAP基地藥材典型性與代表性離散樣品的剔除中藥、天然藥物質(zhì)量研究72（三）、供試品的制備依據(jù)：有效組分的物理化學性質(zhì)生產(chǎn)或提取工藝檢測方法的需要中藥、天然藥物質(zhì)量研究73（1）檢測波長的選擇（2）柱溫的選擇（3）進樣量（4）色譜柱的選擇（5）檢測成分的選擇（6）流動相（梯度表）的選擇

高效液相色譜法HPLC中藥、天然藥物質(zhì)量研究74

示例：蜂膠(BeePropolis)

檢測波長的選擇中藥、天然藥物質(zhì)量研究75

=280nm

=360nm

=254nm

=210nm中藥、天然藥物質(zhì)量研究76波長選擇：

=280nm中藥、天然藥物質(zhì)量研究77（4）色譜柱的選擇

選用市場上較常見的填料所填充的色譜柱，例如：Eka-Nobel的KromasiC18(5mm)，其分離效果好、性能穩(wěn)定，無論是國產(chǎn)填充的Kromasi色譜柱，還是國外公司填充的Kromasi色譜柱，在分離效果上基本相同。因此對于大多數(shù)中藥注射劑，可選用Kromasi色譜柱。如選用乙腈-緩沖溶液，應(yīng)根據(jù)緩沖溶液的特點，選用相應(yīng)的色譜柱：①如為酸性緩沖溶液，可選用ZorbaxSB-C18色譜柱（pH<2）；②如為堿性緩沖溶液，可選用Ecl