miR-101通過靶基因GJA1參與再灌注性心律失常發(fā)生的機制研究的任務書

miR-101通過靶基因GJA1參與再灌注性心律失常發(fā)生的機制研究的任務書任務書：miR-101通過靶基因GJA1參與再灌注性心律失常發(fā)生的機制研究一、研究背景再灌注性心律失常是冠心病患者在急性心肌梗死后，經(jīng)過再灌注后出現(xiàn)的一種嚴重并發(fā)癥，嚴重影響患者的生存質(zhì)量和預后。目前對該病的發(fā)病機制還不完全清楚，缺乏有效的臨床治療手段。miRNA是一類長約21-24個核苷酸的非編碼RNA分子，能夠負調(diào)控調(diào)節(jié)基因的表達，進而影響重要的生理過程。目前有研究發(fā)現(xiàn)miR-101在心臟疾病發(fā)生中發(fā)揮重要作用，而gapjunctionalpha1(GJA1)是miR-101的預測靶基因，目前已有文獻表明GJA1參與了心臟電傳導過程。因此，本研究將探究miR-101在再灌注性心律失常發(fā)生中的作用及其與GJA1的配合，為尋找治療該疾病的新靶點提供參考。二、研究目的本研究旨在探究miR-101在再灌注性心律失常發(fā)生中的作用及其與GJA1的相互作用，揭示其作用機制，為心腦血管疾病的診斷和治療提供新的思路和方法。三、研究內(nèi)容和方法1.對miR-101及其靶基因GJA1進行篩選使用生物信息學方法對miR-101及其預測靶基因GJA1進行篩選，通過多個公共數(shù)據(jù)庫進行交叉驗證，篩選出符合標準的miR-101和GJA1。2.構(gòu)建miR-101和GJA1轉(zhuǎn)染模型通過miRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)，將miR-101和siRNA靶向GJA1轉(zhuǎn)染入心肌細胞中，利用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效果，并進行RNA提取，qPCR驗證轉(zhuǎn)染效果。同時建立miR-101和GJA1過表達的細胞模型，以便進行后續(xù)實驗的比較分析。3.觀察miR-101和GJA1對心肌細胞電傳導的影響利用細胞電生理技術(shù)觀察miR-101和GJA1對心肌細胞電傳導的影響，并進行臨床樣本的實驗驗證。4.探究miR-101和GJA1對鈣調(diào)蛋白的調(diào)控作用通過Westernblot分析，比較miR-101和GJA1的過表達和下調(diào)與心肌細胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白的表達情況，探索miR-101和GJA1對心肌細胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白的調(diào)節(jié)作用。5.觀察miR-101和GJA1對再灌注性心律失常的影響建立小鼠冠狀動脈阻塞再灌注模型，在各組小鼠中擴增miR-101或GJA1基因，觀察再灌注后小鼠心肌的預存活狀況和心肌梗死面積，比較不同組之間的差異，以揭示miR-101和GJA1對再灌注性心律失常發(fā)生的影響。四、研究預期成果1.篩選出miR-101及其預測靶基因GJA1并進行相關(guān)實驗驗證2.揭示miR-101和GJA1在心臟電傳導中的作用機制，并且發(fā)現(xiàn)miR-101可逆轉(zhuǎn)GJA1的表達，并通過電生理學和臨床的實驗驗證。3.探究miR-101和GJA1對心肌細胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白的調(diào)節(jié)作用4.闡明miR-101和GJA1在再灌注性心律失常發(fā)生中的作用機制，并為治療該疾病提供新的思路和方法。五、研究意義本研究將探究miR-101在再灌注性心律失常發(fā)生中的作用及其與GJA1的配合，為尋