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第第頁(yè)25.(10分)科研人員構(gòu)建了可表達(dá)WRK10-MYC融合蛋白的重組農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并成功轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞得到轉(zhuǎn)基因植株,該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖1所示,其中Kan為卡那霉素抗性基因,Hyg為潮霉素抗性基因,MYC標(biāo)簽序列編碼標(biāo)簽短肽MYC,WRK10蛋白為轉(zhuǎn)錄因子,可與圖2中PIF4基因啟動(dòng)子某區(qū)段結(jié)合并激活該基因的轉(zhuǎn)錄。(1)位于Ti質(zhì)粒不同位置的卡那霉素抗性基因和潮霉素抗性基因的作用分別是。圖中啟動(dòng)子的方向與對(duì)應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄的方向一致,從編碼鏈的角度分析P1和P2方向不同的原因是。(2)已知利用LP和RP擴(kuò)增結(jié)果為大帶,BP和RP擴(kuò)增結(jié)果為小帶??捎脠D中三引物進(jìn)行兩次PCR的方法鑒定轉(zhuǎn)基因植物后代中的純合轉(zhuǎn)基因植株。T-DNA插入植物染色體DNA分子后會(huì)抑制原插人位點(diǎn)兩側(cè)引物的擴(kuò)增產(chǎn)物的出現(xiàn),則純合轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測(cè)結(jié)果為(填“大帶”或“大帶和小帶”或“小帶”)。(3)為了探究WRK10蛋白與PIF4基因啟動(dòng)子結(jié)合的具體區(qū)段(如圖2所示),科研工作者利用短肽MYC抗體處理了對(duì)應(yīng)的基因表達(dá)產(chǎn)物,后經(jīng)一系列過(guò)程,得到圖3所示的結(jié)果,由此推測(cè)轉(zhuǎn)基因植株體內(nèi)WRK10蛋白在條件下能夠結(jié)合PIF4基因啟動(dòng)子的區(qū)段從而激活該基因的表達(dá)。MYC標(biāo)簽序列編碼的標(biāo)簽短肽MYC的作
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