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PAGE6-微生物的試驗室培育(30分鐘100分)一、選擇題(共5小題,每小題7分,共35分)1.在制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的過程中加入瓊脂這一志向的凝固劑,下列關于瓊脂的說法錯誤的是 ()A.不被所培育的微生物分解利用,對所培育的微生物無毒害作用B.在微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài)C.瓊脂凝固點低,利于微生物的生長D.瓊脂在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強【解析】選C。瓊脂不會被微生物利用且對微生物無毒害作用,在滅菌過程中不會被破壞,透亮度好,凝固力強,A、D正確。瓊脂在水中加熱至95℃時起先熔化,溫度降至40℃時才起先凝固,微生物生長最相宜的溫度范圍一般為16~30℃,所以在微生物生長溫度范圍內保持固體狀態(tài),B正確。瓊脂的凝固點相對于微生物生長的溫度較高,凝固劑的凝固點不能太低,否則不利于微生物的生長,C錯誤。2.防止雜菌入侵獲得純凈的培育物,是探討和應用微生物的前提。下列敘述錯誤的是 ()A.試驗室里可以用紫外線或化學藥物進行消毒B.接種環(huán)、接種針等金屬用具,干脆在酒精燈火焰的內焰部位灼燒滅菌C.在試驗室中,切不行吃東西、喝水,離開試驗室時肯定要洗手,以防止被微生物感染D.運用后的培育基丟棄前肯定要進行滅菌處理,以免污染環(huán)境【解析】選B。對接種環(huán)等金屬用具進行灼燒滅菌,應在酒精燈火焰的充分燃燒層,即外焰處灼燒。3.巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,該消毒法就是加熱到70~75℃、保持30min,或加熱到80℃、保持15min,能殺死一般雜菌和病原菌。與滅菌的要求相比,巴氏消毒法 ()A.不能殺滅芽孢和耐高溫的細菌B.能殺滅芽孢等休眠狀態(tài)的細菌C.能殺滅各種細菌,包括芽孢D.能殺滅各種真菌,包括孢子【解析】選A。由于酒、奶等食品中的某些成分在高溫下易被破壞,不宜實行高溫滅菌法,雖然巴氏消毒法不能殺滅芽孢和耐高溫細菌,但由于奶、酒等的污染并不嚴峻,巴氏消毒法還是能達到消毒要求的。4.在細菌的連續(xù)培育過程中,要以肯定速度不斷添加新的培育基,同時以同樣速度放出老的培育基。如圖表示培育基的稀釋率(培育基的更新速率)與培育容器中養(yǎng)分物質濃度、細菌代時(細菌數目增加一倍所需的時間)、細菌密度的關系。下列相關敘述不正確的是 ()A.在稀釋率很低的狀況下,稀釋率的增加會導致細菌密度增加B.稀釋率從A到B的改變過程中,細菌生長速率不斷提高C.稀釋率超過B點后,養(yǎng)分物質濃度過高導致細菌死亡率增大,細菌密度降低D.為持續(xù)高效地獲得發(fā)酵產品,應將稀釋率限制在B點旁邊【解析】選C。稀釋率超過B點,細菌密度降低,并不是由于養(yǎng)分物質濃度過高而使細菌死亡,養(yǎng)分物質濃度增加不會造成細菌死亡。圖中細菌密度削減是由于稀釋率過高,細菌數目削減的速率過大,無法通過繁殖速率的提高來補充造成的。5.在斜面培育基上接種時,其正確的操作依次是 ()①用左手大拇指、食指和無名指夾住菌種試管和待接種的斜面試管,管口并齊,使斜面對上保持水平狀態(tài)。②右手擰松棉塞,但不取下。③在火焰邊用右手無名指和小指夾住兩個棉塞,將它們取下,同時左腕轉動,灼燒管口一周。④將接種環(huán)伸入管內,讓環(huán)先接觸培育基上未長菌的部位,使環(huán)冷卻,然后輕輕挑取少量菌體,馬上將接種環(huán)抽出。⑤右手拿接種環(huán),在火焰上灼燒滅菌。⑥在火焰旁快速將沾有菌體的接種環(huán)伸到斜面培育基的底部,由里向外輕輕畫蛇形細線。⑦抽出接種環(huán),再用火焰灼燒管口,并在火焰上方將棉塞塞上。A.①②③④⑤⑥⑦B.①②⑤③④⑥⑦C.①③②④⑤⑥⑦D.②③①④⑤⑦⑥【解析】選B。在斜面培育基上接種時,其正確的操作依次是:①用左手大拇指、食指和無名指夾住菌種試管和待接種的斜面試管,管口并齊,使斜面對上保持水平狀態(tài);②右手擰松棉塞,但不取下;⑤右手拿接種環(huán),在火焰上灼燒滅菌;③在火焰邊用右手無名指和小指夾兩個棉塞,將它們取下,同時左腕轉動,灼燒管口一周;④將接種環(huán)伸入管內,讓環(huán)先接觸培育基上未長菌的部位,使環(huán)冷卻,然后輕輕挑取少量菌體,馬上將接種環(huán)抽出;⑥在火焰旁快速將沾有菌體的接種環(huán)伸到培育基的底部,由里向外輕輕畫蛇形曲線;⑦抽出接種環(huán),再用火焰灼燒管口,并在火焰上方將棉塞塞上。故選B。二、非選擇題(共4小題,共65分)6.(17分)(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與細菌培育相關的問題。(1)在細菌培育時,培育基中能同時供應碳源、氮源的成分是______________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制備培育基時要依據所培育細菌的不同來調整培育基的pH,其緣由是______________________________________。硝化細菌在沒有碳源的培育基上______________(填“能夠”或“不能”)生長,緣由是__
__________________________________________________。
(2)用平板培育細菌時一般須要將平板____________(填“倒置”或“正置”)。
(3)單個細菌在平板上會形成菌落,探討人員通??梢罁涞男螒B(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物,緣由是________________________________________________。
(4)有些運用后的培育基在丟棄前須要經過______________處理,這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。
【解析】(1)蛋白胨含有C、H、O、N等元素,葡萄糖只含有C、H、O,NaNO3不含有C,所以培育基中蛋白胨能同時供應碳源和氮源。不同細菌生長繁殖所須要的pH不同,因此培育不同的細菌,須要調整培育基的不同pH。硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型細菌,可以將空氣中的二氧化碳等無機物合成為有機物,它可以在沒有碳源的培育基上生長。(2)用平板培育基培育細菌時,一般須要將平板倒置,以防止培育皿蓋上凝聚的水珠滴落,導致污染。(3)不同種的微生物在肯定條件下培育,可在培育基上形成大小、顏色、形態(tài)等不同的菌落,這是一種比較穩(wěn)定的特征,可依據菌落的特征區(qū)分不同種的微生物。(4)運用后的培育基須要用劇烈的物理或化學手段進行滅菌,以殺滅其中全部的微生物,避開污染環(huán)境。答案:(1)蛋白胨不同細菌生長繁殖所需的pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在肯定的培育條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌7.(15分)(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關的問題:(1)分別培育酵母菌通常運用__________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基,該培育基應采納____________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時間后可視察到菌落,菌落的含義是______________。
(2)酵母菌液體培育時,若通入氧氣,可促進________(填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”);若進行厭氧培育,可促進________(填“菌體快速增殖”“乙醇產生”或“乳酸產生”)。
(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的緣由是____________________________________。
【解析】(1)麥芽汁瓊脂培育基含糖量高,更適合酵母菌培育;該培育基應采納高壓蒸汽滅菌法滅菌;若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時間后可視察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。(2)酵母菌液體培育時,若通入氧氣,進行有氧呼吸產生H2O和CO2,釋放能量多,菌體增殖快;若進行厭氧培育,進行無氧呼吸,產生乙醇和CO2,釋放能量少,菌體增殖慢。(3)制作面包時,在面粉中添加肯定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產生CO2,CO2是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。答案:(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產生(3)酵母菌分解葡萄糖會產生CO2,CO2使面包松軟8.(19分)微生物的分別和培育是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié)。如圖甲、乙、丙是大腸桿菌分別和培育過程中部分操作和試驗結果示意圖,請據圖回答有關問題:(1)圖甲所示的是制備固體培育基時的試驗操作步驟之一,它稱為________,若用該培育基培育大腸桿菌,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮________、________和滲透壓等條件。
(2)培育大腸桿菌時,在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應采納的檢測方法是______________________________________。
(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作依次是A→B→__________________(用字母和箭頭表示);找出圖乙中兩處錯誤的操作(用字母表示):________、________。
(4)圖丙是某同學用平板劃線法接種后的培育基培育12h后的試驗結果,假如培育基上
__________________________,
則說明無菌操作基本符合要求?!窘馕觥?1)圖甲所示操作為倒平板,須要在酒精燈火焰旁進行操作。培育基中除養(yǎng)分成格外,還應考慮pH、氧氣、無菌、溫度、滲透壓等條件。(2)檢測培育基是否被污染的方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產生,如有菌落,說明該培育基已被污染。(3)平板劃線法的操作依次為灼燒接種環(huán),冷卻,挑取菌種,劃線,灼燒接種環(huán),劃線,灼燒接種環(huán),平板倒置培育,即A→B→G→F→E→C→D→H。圖乙中C操作應在酒精燈旁邊進行,D中劃線的首尾不應當相接。(4)同一菌種的菌落顏色、形態(tài)、大小基本一樣,如有雜菌污染,會有異樣菌落出現(xiàn),可依據菌落的特征確定該菌落是否為大腸桿菌。答案:(1)倒平板溫度(氧氣)pH(無菌)(2)將未接種的培育基在相宜的溫度下放置相宜的時間,視察培育基上是否有菌落產生(3)G→F→E→C→D→HCD(4)生長的菌落顏色、形態(tài)、大小基本一樣,并符合大腸桿菌菌落的特點9.(14分)某學校準備開拓一塊食用菌栽培基地,以豐富學生的勞動技術課內容。首先對食用菌試驗室進行清掃和消毒處理,準備食用菌栽培所需的各種原料和用具,然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題。(1)牛肉膏蛋白胨固體培育基的配方如下:牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂蒸餾水5.0g10.0g5.0g20.0g定容至1000mL其中供應氮源的是________________,供應碳源的主要物質是____________。
(2)微生物在生長過程中對各種成分所需量不同,配制培育基時各成分要有合適的____________。在燒杯中加入瓊脂后要不停地____________,防止______________________________________。
(3)將配制好的培育基分裝到試管中,加棉塞后若干個試管一捆,包上牛皮紙并用皮筋勒緊后放入____________中滅菌,壓力為100kPa,溫度為____________,時間為____________。滅菌完畢拔掉電源,待鍋內壓力自然降到0時,將試管取出。假如棉塞上沾有培育基,此試管應____________________________。
(4)運用高壓蒸汽滅菌鍋時應留意,要先向鍋內倒入__________________,并加熱煮沸,將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。
(5)從一支試管向另一支試管接種時應留意,接種環(huán)要在酒精燈____________(填“內”或“外”)焰滅菌,并且待接種環(huán)______________后沾取菌種,試管口不能離開酒精燈火焰旁邊。將接種的試管在適溫下培育,長成菌落后放入____℃冰箱中保藏。
【解析】(1)牛肉膏和蛋白胨均為自然成分,均能供應碳源和氮源,但是供應碳源的主要物質是牛肉膏。(2)微生物的培育基的成分應依據微生物的須要,并有合適的比例。在燒杯中加入瓊脂后易出現(xiàn)糊底現(xiàn)象,應不斷用玻棒攪拌。(3)培育基應在高壓蒸汽滅菌鍋內滅菌,壓力為100kPa,溫度為121℃,時間為15~30min。假如棉塞上沾有培育基,則很簡單造成雜
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