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文檔簡介
第4節(jié)蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用
基礎(chǔ)鞏固
1.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法,正確的是()
A.蛋白質(zhì)工程無須構(gòu)建基因表達(dá)載體
B.蛋白質(zhì)工程需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶
C.對蛋白質(zhì)的改造是通過直接改造相應(yīng)的mRNA來實(shí)現(xiàn)的
D.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過程是相同的
答案:B
解析:蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過改造或合成
基因,來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì),或制造一種新的蛋白質(zhì),故需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,也需要限制性內(nèi)切核
酸酶和DNA連接酶。蛋白質(zhì)工程要對基因改造后再合成蛋白質(zhì),與天然蛋白質(zhì)的合成過程不同。
2.科學(xué)家為提高玉米中賴氨酸的含量,計(jì)劃將天冬氨酸激酶第352位的氨基酸由蘇氨酸變成異亮氨
酸或?qū)⒍渑宥晁岷铣擅钢械?04位的氨基酸由天冬酰胺變成異亮氨酸,這樣就可以使玉米葉
片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍。下列對蛋白質(zhì)的改造,操作正確的是()
A.直接通過分子水平改造蛋白質(zhì)
B.直接改造相應(yīng)的mRNA
C.對相應(yīng)的基因進(jìn)行操作
D.重新合成新的基因
答案:C
3.下列各項(xiàng)不屬于蛋白質(zhì)工程研究內(nèi)容的是()
A.分析蛋白質(zhì)分子的精細(xì)結(jié)構(gòu)
B.對蛋白質(zhì)進(jìn)行有目的地改造
C.分析氨基酸的化學(xué)組成
D.按照人的意愿將天然蛋白質(zhì)改造成新的蛋白質(zhì)
答案:C
解析:蛋白質(zhì)工程不需要分析氨基酸的化學(xué)組成,因?yàn)榻M成蛋白質(zhì)的氨基酸的基本組成元素都是C、
H、0、N,元素組成不會影響設(shè)計(jì)新的蛋白質(zhì)。
4.蛋白質(zhì)工程中對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行設(shè)計(jì)時,主要包括()
①進(jìn)行少數(shù)氨基酸的替換②從氨基酸的排列順序出發(fā)設(shè)計(jì)全新的蛋白質(zhì)③直接改變蛋白質(zhì)的
空間結(jié)構(gòu)
A.①③B.①②
C.①@@D.②③
答案:B
5.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較,錯誤的是()
A.基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程可以對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或
制造一種新的蛋白質(zhì)
B.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,蛋白質(zhì)工程最終還是要通過基因改造或基因合成
來完成
C.當(dāng)?shù)玫娇梢栽谝欢l件下延長保存時間的干擾素后,在相關(guān)酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下,
干擾素可以大量自我合成
D.基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的
答案:C
6.水蛭素是由65個氨基酸縮合而成的凝血酶特異性抑制劑,在臨床上可用來治療血栓疾病。為提
高水蛭素的活性,科學(xué)家將水蛭素的第47位的天冬酰胺變?yōu)橘嚢彼?其抗血栓形成的效率提高了20
倍。這一生物技術(shù)是()
A.基因工程B.蛋白質(zhì)工程
C.基因突變D.基因修復(fù)
答案:B
7.下圖表示蛋白質(zhì)工程的操作流程,下列敘述錯誤的是()
A.蛋白質(zhì)工程中對蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作
B.蛋白質(zhì)工程是完全擺脫基因工程技術(shù)的一項(xiàng)全新的生物工程技術(shù)
C.圖中a、b過程分別表示轉(zhuǎn)錄、翻譯
D.通過蛋白質(zhì)工程可制造出一種新的蛋白質(zhì)
答案:B
解析:蛋白質(zhì)工程中對蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的了解是非常關(guān)鍵的工作,如蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)、氨基酸的
排列順序等,這對于合成或改造基因至關(guān)重要;蛋白質(zhì)工程的進(jìn)行離不開基因工程,因?yàn)閷Φ鞍踪|(zhì)的
改造要通過對基因的改造來完成;圖中a、b過程分別表示轉(zhuǎn)錄、翻譯;通過蛋白質(zhì)工程可對現(xiàn)有蛋
白質(zhì)進(jìn)行改造,也可制造出一種全新的蛋白質(zhì)。
8.凝乳酶是一種催化奶凝結(jié)的關(guān)鍵酶,從牛胃液中分離得到的凝乳酶以催化能力強(qiáng)而被廣泛應(yīng)用于
如酪和酸奶的制作。研究發(fā)現(xiàn),如果將該凝乳酶第20位和24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?其催化能
力將提高2倍。通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)高效凝乳酶,所需步驟可能有a、b、c、d、e、f(未按操作順
序)。請把需要的步驟選出來并按照操作順序排列()
a.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)b.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析c.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定向改造d.凝乳酶基因的
定向改造&將改造后的凝乳酶基因?qū)胧荏w細(xì)胞f.將定向改造的凝乳酶導(dǎo)入受體細(xì)胞
A.abcdefB.bade
C.baefD.bacd
答案:B
解析:蛋白質(zhì)工程的過程為根據(jù)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),再對目的基因進(jìn)行定向改
造,然后將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。故正確的排列順序?yàn)閎ade。
9.為提高糧食產(chǎn)量,解決世界糧食問題,科學(xué)家在基因工程和蛋白質(zhì)工程方面作出了不懈的努力。
下面是科學(xué)家提高光合作用效率的嘗試,下列有關(guān)敘述正確的是()
①改良二磷酸核糖竣化酶,使它的反應(yīng)平衡偏向于對二氧化碳的固定,減少呼吸的浪費(fèi),增加對二氧
化碳的固定速率,提高農(nóng)作物的產(chǎn)量。
②C3植物向C4植物的轉(zhuǎn)化。將二磷酸核糖陵化能除去或滅活,引入基因改造過的葉綠體,同時增加
導(dǎo)致C4固定的酶的活性。即使C3型葉綠體與C4型葉綠體共存于一個細(xì)胞內(nèi)。
③對光調(diào)節(jié)基因進(jìn)行改造,提高光合作用的效率。
④將固氮基因轉(zhuǎn)移到不能固氮的農(nóng)作物中,提高對氮的利用,增加作物產(chǎn)量。
A.①②?④都屬于基因工程,都是通過基因來改變生物性狀的
B.①②?④都屬于蛋白質(zhì)工程,都在一定程度改造了蛋白質(zhì)
C.①②?屬于蛋白質(zhì)工程,④屬于基因工程
D.②③屬于蛋白質(zhì)工程,①④屬于基因工程
答案:C
10.請回答下列與基因工程和蛋白質(zhì)工程有關(guān)的問題。
⑴獲取真核細(xì)胞內(nèi)目的基因的途徑主要有,目的基因進(jìn)入
受體細(xì)胞需要的協(xié)助。
⑵基因工程的核心步驟是,此過程用到的工具酶是。
⑶為獲得能大量產(chǎn)生人干擾素的轉(zhuǎn)基因牛,經(jīng)常采用的受體細(xì)胞是,將目的基因?qū)氪?/p>
受體細(xì)胞常用的方法是。
⑷在蛋白質(zhì)工程中,引起蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該蛋白質(zhì)肽鏈的序列發(fā)生
了改變。
答案:(1)從細(xì)胞中分離和化學(xué)方法人工合成載體
⑵構(gòu)建基因表達(dá)載體限制酶和DNA連接酶
⑶受精卵顯微注射
⑷氨基酸
解析:(1)獲取真核細(xì)胞內(nèi)目的基因的途徑主要有從細(xì)胞中分離和化學(xué)方法人工合成;目的基因進(jìn)入
受體細(xì)胞需要載體的協(xié)助。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心
步驟。此過程用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。(3)培育轉(zhuǎn)基因動物時常采用受精卵作受體細(xì)
胞。常用顯微注射技術(shù)將目的基因?qū)雱游锏氖芫?。?)在蛋白質(zhì)工程中,引起蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)
改變的原因是組成該蛋白質(zhì)肽鏈的氨基酸序列發(fā)生了改變。
11.干擾素是動物體內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì),可以用于治療病毒感染和癌癥,如果將其分子上的一個半
胱氨酸變成絲氨酸,在一定條件下,可以延長保存時間。
⑴蛋白質(zhì)的合成是受基因控制的,因此獲得能夠控制合成“可以保存的干擾素”的基因是生產(chǎn)的
關(guān)鍵。下圖表示依據(jù)蛋白質(zhì)工程原理,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程,讓動物生產(chǎn)”可以保存的干擾素”,請將其補(bǔ)
充完整。
⑵基因工程和蛋白質(zhì)工程相比較,基因工程在原則上只能生產(chǎn)的蛋白質(zhì),不一定
符合人類生產(chǎn)和生活的需要。而蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作
為基礎(chǔ),通過或,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足
人類生產(chǎn)和生活的需求。
⑶蛋白質(zhì)工程實(shí)施的難度很大,原因是蛋白質(zhì)具有十分亞雜的結(jié)構(gòu)。
⑷對天然蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,應(yīng)該直接對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作,還是通過對基因的操作來實(shí)現(xiàn)?原因
是什么?。
答案:(1)預(yù)期蛋白質(zhì)的功能預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)應(yīng)有的氨基酸序列找到并改變相對應(yīng)的脫氧
核甘酸序列(基因)或合成新的基因所需要的蛋白質(zhì)
⑵自然界已存在改造合成基因改造
⑶空間(或高級)
⑷通過對基因的操作來實(shí)現(xiàn)?;蚩刂频鞍踪|(zhì)的合成,并且基因能遺傳給下一代
能力提升
1.下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述,錯誤的是()
A.將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用顯微注射法
B.設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時,不必考慮表達(dá)載體的序列
C.蛋白質(zhì)工程是通過基因改造或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新蛋白質(zhì)的技術(shù)
D.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)
答案:B
解析:將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用顯微注射法。設(shè)計(jì)的引物應(yīng)能與表達(dá)載體兩端的序
列互補(bǔ)配對。蛋白質(zhì)工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ),通過基因改造或基因合成,對現(xiàn)有的
蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì)的技術(shù)。通過蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白
質(zhì)。
2.iPS細(xì)胞是利用病毒將四個基因(應(yīng)6Sox?、4”和。的矽導(dǎo)入動物體細(xì)胞使其轉(zhuǎn)化為類似胚胎
干細(xì)胞的一種細(xì)胞。在力5細(xì)胞培育過程中()
A.運(yùn)用了基因工程、蛋白質(zhì)工程等現(xiàn)代生物技術(shù)
B.病毒的作用只是通過侵染將基因?qū)胧荏w細(xì)胞中
C.使用的工具酶主要有限制酶和DNA連接酶
D.僅有龐公So照、4"和。肛。能夠轉(zhuǎn)錄、翻譯
答案:C
解析:在iPS細(xì)胞培育過程中,先利用基因工程技術(shù)獲得含有四個基因的動物細(xì)胞,再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)
獲得iPS細(xì)胞,沒用到蛋白質(zhì)工程。病毒的作用是通過侵染將基因?qū)胧荏w細(xì)胞,同時使目的基因
在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)。使用的工具酶是限制的和DNA連接酶。除了。。冰Sox?、奴工和
c妙。能夠表達(dá)(轉(zhuǎn)錄、翻譯)外,動物體細(xì)胞中原來的許多基因也能夠表達(dá)。
3.(不定項(xiàng)選擇題)天然胰島素制劑易形成二聚體或六聚體,降低療效,科學(xué)家希望對胰島素進(jìn)行改
造,從而降低它的聚合作用。研究人員通過解析人胰島素的晶體結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),人胰島素由A鏈和B鏈
構(gòu)成,其中B鏈的第20~29位氨基酸是胰島素分子相互作用形成多聚體的關(guān)鍵區(qū)域,科學(xué)家通過改
造胰島素基因?qū)崿F(xiàn)了對相應(yīng)氨基酸序列的改造,使B28位脯氨酸替換為天冬氨酸或者將它與B29位
的賴氨酸交換位置,從而有效抑制了胰島素的聚合,由此研發(fā)出的速效胰島素類似物產(chǎn)品已經(jīng)在臨
床上廣泛應(yīng)用。據(jù)此分析下列敘述錯誤的是()
A.速效胰島素類似物的研發(fā)是蛋白質(zhì)工程在醫(yī)藥方面的重要應(yīng)用
B.在改造胰島素的過程中利用了基因定點(diǎn)突變技術(shù)
C.B28位氨基酸與B29位氨基酸交換位置后,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)沒變
D.改造的胰島素基因在胰島A細(xì)胞也能表達(dá)
答案:CD
解析:B28位氨基酸與B29位氨基酸交換位置后,蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序發(fā)生了改變,胰島素的
結(jié)構(gòu)也隨之發(fā)生改變。胰島素由胰島B細(xì)胞分泌,胰島A細(xì)胞不分泌胰島素,因此改造的胰島素基
因在胰島A細(xì)胞中不表達(dá)。
4.從某海洋動物中獲得一基因,其表達(dá)產(chǎn)物為??種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前,在P1的
基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是()
A.合成編碼目的肽的DNA片段
B.構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體
C.依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計(jì)多條模擬肽
D.篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽
答案:C
解析:未改造前的基因表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1,在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性
強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物,所以必須對其改造,保持其抗菌性強(qiáng),抑制其溶血性。第一步應(yīng)是根據(jù)預(yù)
期的蛋白質(zhì)功能,依據(jù)P1氨基酸序列,設(shè)計(jì)多條模擬肽。
5.T4溶菌酹在高溫時易失去活性。研究人員對編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行改造,使T4溶菌酶第3位
的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成一個二硫鍵,提高了酶的耐熱
性。下列相關(guān)敘述正確的是()
A.T4溶菌酶耐熱性提高的原因是組成該酶的氨基酸數(shù)量發(fā)生了改變
B.T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程,自然界中的能都可通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改造
C.蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動方向一致,即DNA-mRNA-蛋白質(zhì)
D.若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,蛋白質(zhì)的功能也會受到影響
答案:D
解析:在該過程中,T4溶菌酶的氨基酸數(shù)量沒發(fā)生改變。對T4溶菌酶的改造屬于蛋白質(zhì)工程,蛋白
質(zhì)工程只能用于改造蛋白質(zhì)類的酶,自然界中的酶有些是RNA,RNA類酶無法通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行改
造。蛋白質(zhì)工程與中心法則的流動方向相反,即預(yù)期蛋白質(zhì)的功能一預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)一推測應(yīng)有
的氨基酸序列一找到相應(yīng)的脫氧核甘酸序列或合成新的基因。若高溫使蛋白質(zhì)分子的空間結(jié)構(gòu)發(fā)
生改變,蛋白質(zhì)的功能會受到影響。
6.降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。
某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素,從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā),推測相
應(yīng)的脫氧核甘酸序列,并人工合成了兩條含72個堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個堿基對形成部
分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補(bǔ)平,獲得雙鏈DNA,過程如下圖所示。在此過程中發(fā)現(xiàn),合成較
長的核甘酸單鏈易產(chǎn)生堿基缺失的現(xiàn)象。分析回答下列問題。
(1)Klenow酶是一種酶,合成的雙鏈DNA有個堿基對。
⑵獲得的雙鏈DNA經(jīng)歷蘇I(識別序列和切割位點(diǎn)是一G-ATTC-)和加砒1(識別序列和切割位
點(diǎn)是一GPATCC-)雙酶切后,插入大腸桿菌質(zhì)粒中,篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌并進(jìn)行DNA測序驗(yàn)
證。
①大腸桿菌是理想的受體細(xì)胞,這是因?yàn)樗?
②設(shè)計(jì)Ecc^I和BanRI雙酶切的目的是。
③要進(jìn)行重組質(zhì)粒的鑒定和選擇,需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有0
⑶經(jīng)DNA測序表明,最初獲得的多個重組質(zhì)粒,均未發(fā)現(xiàn)完全正確的核甘酸序列,最可能的原因
是
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