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山羊弓形蟲代謝分泌抗原免疫應(yīng)答研究的任務(wù)書任務(wù)書課題名稱:山羊弓形蟲代謝分泌抗原免疫應(yīng)答研究任務(wù)背景:山羊弓形蟲是一種造成寵物羊、山羊和家畜不育的寄生蟲。這種寄生蟲能夠引起人類疾病的嚴(yán)重影響。據(jù)統(tǒng)計(jì),全球有超過一半的人口感染了弓形蟲,盡管在許多國家,已經(jīng)采取了各種措施來減少感染,但這種疾病的發(fā)病率依然很高,治療效果也不滿意。因此,研究山羊弓形蟲代謝分泌抗原對于控制弓形蟲感染和提高治療效果具有重要的意義。任務(wù)目標(biāo):本課題的目標(biāo)是通過研究山羊弓形蟲代謝分泌抗原對免疫應(yīng)答的影響,探究山羊弓形蟲感染的免疫機(jī)制,為弓形蟲感染的治療和預(yù)防提供理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。任務(wù)內(nèi)容:1、篩選山羊弓形蟲代謝分泌抗原收集山羊弓形蟲的分泌物,通過PCR技術(shù)提取其中的代謝物基因,再通過特異性基因擴(kuò)增和純化來獲得代表性物質(zhì)。2、制備蛋白質(zhì)重組根據(jù)篩選出的代謝物基因信息,對其進(jìn)行突變,利用質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)將其插入到大腸桿菌中,制備出結(jié)構(gòu)完整的蛋白質(zhì)重組。3、制備山羊弓形蟲抗體通過實(shí)驗(yàn)室內(nèi)小鼠的免疫技術(shù)制備抗山羊弓形蟲基因蛋白的抗體。4、鑒定蛋白質(zhì)抗原性與功能通過WesternBlot等技術(shù)手段和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測,鑒定蛋白質(zhì)重組的抗原性和在山羊弓形蟲免疫反應(yīng)中的功能。5、分析蛋白質(zhì)重組的免疫學(xué)效應(yīng)利用ELISA等免疫技術(shù),對蛋白質(zhì)重組的免疫學(xué)效應(yīng)進(jìn)行研究,包括其免疫原性,抗原特異性,免疫球蛋白等影響因素。任務(wù)進(jìn)度:1、前期準(zhǔn)備,包括收集山羊弓形蟲樣本,提取代謝物基因等。預(yù)計(jì)需要1個(gè)月時(shí)間。2、蛋白質(zhì)重組制備,包括質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、突變等技術(shù)。預(yù)計(jì)需要2個(gè)月時(shí)間。3、小鼠免疫制備。預(yù)計(jì)需要2個(gè)月時(shí)間。4、WesternBlot等技術(shù)鑒定。預(yù)計(jì)需要1個(gè)月時(shí)間。5、免疫學(xué)效應(yīng)分析。預(yù)計(jì)需要2個(gè)月時(shí)間??傆?jì)任務(wù)時(shí)間:8個(gè)月任務(wù)成果:通過本次任務(wù)的研究,期望獲得山羊弓形蟲代謝分泌抗原的篩選方法,蛋白質(zhì)重組的制備方法,免疫學(xué)效應(yīng)的分析和相關(guān)數(shù)據(jù),為弓形蟲感染的治療和預(yù)防提供一定的理論指導(dǎo)和實(shí)踐依據(jù),為相關(guān)研究提供新思路、新方法和新證據(jù)。參考文獻(xiàn):1.矢車司宏昭隆原益田中孝行.弓形蟲代謝抗原的免疫學(xué)研究進(jìn)展[J].日本寄生蟲學(xué)會(huì)會(huì)報(bào),.2012,vol.61,no.5,pp.283-290.2.盧仕勇趙晶,兔和狗血清學(xué)檢測弓形蟲抗體的比較研究[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,.2010,vol.33,no.3,pp.390-393.3.王玉娥李晶晶王姣萍邱銳張淼鄭海鷗弓形蟲代謝物的篩選及其

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