高中生物選修3浙科版知識點總結(jié)

第一章基因工程

一、工具酶的發(fā)覺和基因工程的誕生

1、基因工程的概念：

(1)廣義的遺傳工程：泛指把一種生物的遺傳物質(zhì)(細(xì)胞核、染色體脫氧核糖核酸等)

移到另一種生物的細(xì)胞中去，并使這種遺傳物質(zhì)所帶的遺傳信息在受體細(xì)胞中表達(dá)。

(2)基因工程：

就是把一種生物的基因轉(zhuǎn)入另一種生物體中，使其產(chǎn)生我們須要的基因產(chǎn)物，或者讓

它獲得新的遺傳性狀?；蚬こ痰暮诵氖菢?gòu)建重組DNA分子。由于基因工程是在DNA分

子程度上進(jìn)展設(shè)計和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

(3)基因工程誕生的理論根底：

DNA是遺傳物質(zhì)的發(fā)覺過程、DNA雙螺旋構(gòu)造確實立、遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定。

2、基因工程的根本工具

(1)“分子手術(shù)刀”一一限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)

①來源：主要是從原核生物中分別純化出來的。

②功能：可以識別雙鏈DNA分子的某種特定的核昔酸序列，并能切割(使每一條鏈中特

定部位的兩個核昔酸之間的磷酸二酯鍵斷開)，因此具有專一性。

例如：某種限制性核酸內(nèi)切酶能識別的序列是GAATTC,能在G和A之間切割DNA,如

下圖所示。

③結(jié)果：能將DNA分子切割成很多不同的片段。

備注：不同DNA分子用同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端都一樣；同一個

DNA分子用不同限制性核酸內(nèi)切酶切割，產(chǎn)生的黏性末端一般不一樣。

(2)“分子縫合針”一一DNA連接酶

①作用：將具有末端堿基互補的2個DNA片段連接在一起(縫合磷酸二酯鍵)形成的D

NA分子稱為重組DNA分子。

因此,DNA連接酶具有縫合DNA片段的作用，可以將外源基因和載體DNA連接在一起。

(3)“分子運輸車”一一載體一一質(zhì)粒

①載體具備的條件：

1)能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。

2)具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。

3)具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

②最常用的載體一一質(zhì)粒：

質(zhì)粒在細(xì)菌中以獨立于擬核之外的方式

存在，是一種特殊的遺傳物質(zhì)，并具DNA

有自我復(fù)制實力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒。

O—大腸桿菌細(xì)胞

③其它載體：噬菌體的衍生物、動植物質(zhì)粒

病毒

二、基因工程的原理和技術(shù)抗菌素抗性基因

1、基因工程的根本原理：控制質(zhì)粒DNA

轉(zhuǎn)移的基因

是讓人們感愛好的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地表達(dá)。

為了實現(xiàn)基因工程的母版，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細(xì)胞等根本

要素，并根據(jù)肯定的程序進(jìn)展操作：目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導(dǎo)入受

體細(xì)胞（宿主細(xì)胞），挑選含有目的基因的受體細(xì)胞、基因表達(dá)。

2：目的基因的獲得：

即獲得我們所須要的基因，如人的胰島素基因。

（1）目的基因：是指能編碼蛋白質(zhì)的構(gòu)造基因。

（2）獲得目的基因的兩種方法：

①目的基因的序列已知：用化學(xué)方法合成目的基因。如胰島素基因

或用聚合酶鏈?zhǔn)椒错懀≒CR）擴增目的基因

②目的基因的序列未知：建立一個包括目的基因在內(nèi)的基因文庫，從基因文庫中找到

目的基因

3、形成重組DNA分子：

就是將目的基因及載體DNA連接在一起。

通常是用一樣的限制性核酸內(nèi)切酶分別切割目的基因和載體DNA（如質(zhì)粒），就會在目

的基因和載體DNA的兩端形成一樣的黏性末端，然后用DNA連接酶將目的基因和載體DNA

連接在一起，形成重組DNA分子。

4、將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞

用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑿纬傻闹亟MDNA分子轉(zhuǎn)移到適宜的受體細(xì)胞中。

常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、枯草桿菌、酵母菌和動植物細(xì)胞等。如用質(zhì)粒作載體，

宿主細(xì)胞應(yīng)選擇大腸桿菌，用氯化鈣處理大腸桿菌，增加大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性，使含

有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入大腸桿菌宿主細(xì)胞。

5、挑選含有目的基因的受體細(xì)胞：

并不是全部細(xì)胞都接納了重組DNA分子，因此須要挑選含有目的基因的受體細(xì)胞。

采納選擇性培育基挑選。

6、目的基因的表達(dá)：

目的基因在宿主細(xì)胞中表達(dá)，能產(chǎn)生人們須要的功能物質(zhì)。

三：本章總結(jié)：

基因工程就是把一種生物的基因轉(zhuǎn)入另一種生物體中，使其產(chǎn)生我們須要的基因產(chǎn)

物，或者讓它獲得新的遺傳性狀。基因工程的核心是構(gòu)建重組DNA分子。DNA是遺傳物質(zhì)

的發(fā)覺過程、DNA雙螺旋構(gòu)造確實立和遺傳信息傳遞方式的認(rèn)定是基因工程誕生的理論根

底，而限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和質(zhì)粒載體的發(fā)覺及應(yīng)用，又為基因工程的創(chuàng)立供

應(yīng)了技術(shù)上的保障。

基因工程的操作一步包括：目的基因的獲得、重組DNA的形成、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)

胞（也稱宿主細(xì)胞）、挑選含有目的基因的受體細(xì)胞核母妃基因表達(dá)。

第二章克隆技術(shù)

一、什么是克隆

1、繁殖的方式：

(1)有性繁殖：經(jīng)過異性生殖細(xì)胞的結(jié)合，產(chǎn)生合子，再由合子發(fā)育成下一代個體的繁

殖方式。

(2)無性繁殖：不經(jīng)過異性生殖細(xì)胞的結(jié)合，干脆由母體產(chǎn)生下一代個體的繁殖方式。

無限繁殖產(chǎn)生的個體保持了親本的遺傳性狀，一次產(chǎn)生后代的數(shù)量可以很大，可以

快速擴大其種群的數(shù)量。

2、無性繁殖系：個體通過無性繁殖可連續(xù)傳代并形成群體，這樣的群體稱為無性繁殖系。

克隆就是指無性繁殖系。

3、克隆技術(shù)：

是指才眾多的基因或細(xì)胞群體中通過無性繁殖和選擇獲得目的基因或特定類型細(xì)胞的

操作技術(shù)。

在分子程度上，基因克隆是指某種目的基因的復(fù)制、分別的過程；

在細(xì)胞程度上，細(xì)胞克隆技術(shù)在利用雜交瘤制備單克隆抗體的技術(shù)中得到應(yīng)用；

在個體程度上，克隆技術(shù)就是一種通過單個細(xì)胞，特殊是來自特定活體的單個體細(xì)胞

進(jìn)展無性繁殖從而產(chǎn)生新個體的過程或技術(shù)。

基因克隆和細(xì)胞克隆是現(xiàn)代生物技術(shù)中的關(guān)鍵技術(shù)。

從理論上說，由于細(xì)胞核具有基因組合全套遺傳信息，生物的體細(xì)胞有潛力干脆發(fā)育

成胚胎和形成及核供體完全一樣的個體克隆。

二、植物的克?。?/p>

1、細(xì)胞全能性

(1)植物細(xì)胞全能性：指植物體的每個活細(xì)胞都具有遺傳上的全能性，因此都具有發(fā)育

成完好植株的潛能。

緣由：從理論上講，每個細(xì)胞都包含該物種的全部遺傳物質(zhì)(全部基因)，所以每

個活細(xì)胞都應(yīng)具有全能性。

(2)植物細(xì)胞全能性的表達(dá)：

全能性表達(dá)的難易程度：受精卵〉生殖細(xì)胞〉干細(xì)胞〉體細(xì)胞；植物細(xì)胞＞動物細(xì)胞

①植物細(xì)胞全能性表達(dá)實力強：

理論說明，植物體的幾乎全部組織(如根、莖、葉、花藥、子房及幼胚等組織)的細(xì)

胞，通過誘導(dǎo)都可再生新植株。即植物體的每個活細(xì)胞，即使是已經(jīng)高度成熟和分化的細(xì)

胞，都保持了復(fù)原到分生狀態(tài)的實力，都具有遺傳上的全能性。所以植物的組織培育比動

物更便利。

②不同植物或同種植物不同基因型個體的細(xì)胞全能性有差異：

由于不同種類植物或同種植物的不同基因型個體之間遺傳性的差異，細(xì)胞全能性的表

達(dá)程度大不一樣。如擬南芥、煙草和番茄等能在多個世代中保持細(xì)胞全能性的表達(dá)；而小

麥、要么和水稻等在屢次繼代培育后會喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)實力。

③長期培育中，細(xì)胞全能性表達(dá)實力下降的緣由：

1)遺傳物質(zhì)不行逆變更：

染色體畸變、細(xì)胞核變異或非整倍體產(chǎn)生，且其結(jié)果不行逆；

2)生長發(fā)育條件變更：

細(xì)胞或組織中激素平衡被打破，或細(xì)胞對外源生長物質(zhì)的敏感性發(fā)生變更；

3)由于其他緣由產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系。

④植物克隆勝利所需的條件：

1）深化討論特定植物細(xì)胞全能性的表達(dá)條件（激素配比）；

2）在植物克隆試驗中，選擇性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型。

2.植物組織培育程序

（1）概念：

植物組織培育就是在無菌和人工限制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞培育

在人工配制的培育基上，賜予相宜的培育條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、生芽，最終形成完

好的植株。

（2）培育過程：

離體的植物器官、組織或細(xì)胞一一愈傷組織-一試管苗一一植物體

愈傷組織：一種相對沒有分化的活的薄壁細(xì)胞團組成的新生組織。（細(xì)胞排列疏松、無規(guī)

則）

脫分化：已經(jīng)高度分化的植物細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)重新復(fù)原了分裂實力，產(chǎn)生愈傷組織的過程,

又稱去分化。

再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織經(jīng)培育，重新分化根或芽等器官的過程。

組織培育詳細(xì)過程：

①配制含有適當(dāng)養(yǎng)分物質(zhì)和植物生長調(diào)整劑的半固體培育基（滅菌）；

②從消毒的根、莖或葉上切取一些小組織塊；

③將組織塊放在培育基上培育，獲得愈傷組織；（無需光）

植物組織切口處的細(xì)胞在創(chuàng)傷的刺激下發(fā)生脫分化稱為分裂的細(xì)胞，不斷進(jìn)展分裂增

殖，在創(chuàng)傷外表形成一種由相對沒有分化的活的的薄壁細(xì)胞團組成的新生組織，即愈傷組

織。

④以適當(dāng)配比的養(yǎng)分物質(zhì)和生長調(diào)整劑誘導(dǎo)愈傷組織，直到再生出新植株。（須要

光）

（3）培育基的養(yǎng)分成分：

無機養(yǎng)分成分：水、礦質(zhì)元素（全部），如硝酸鹽、鏤鹽

有機養(yǎng)分成分：1）碳源：蔗糖

2)含N物質(zhì)：氨基酸、維生素

3)瓊脂：0.7%—1%,起支持作用

植物生長調(diào)整劑：細(xì)胞分裂素、生長素

PH值：5.0-6.0

3、植物的克?。?/p>

（1）理論根底：植物細(xì)胞的全能性

（2）技術(shù)根底：植物組織培育

（3）主要技術(shù)：植物細(xì)胞培育；植物器官培育；原生質(zhì)體培育

4、植物細(xì)胞培育

（1）概念：

指以單個游離細(xì)胞為外植體的離體無菌培育。其目的是通過大規(guī)模的細(xì)胞培育以獲

得人類所需的細(xì)胞次級代謝產(chǎn)物。

（2）采納技術(shù)：懸浮細(xì)胞培育：

通過液體懸浮培育使愈傷組織分散成單細(xì)胞，經(jīng)相宜培育基中成分的誘導(dǎo)，可從單

細(xì)胞依次到細(xì)胞團、球形胚、心形胚和胚狀體，最終而形成新植株。

5、器官培育:

（1）概念：指以植物的根、莖、葉、花、果等器官為外植體的離體無菌培育。

(2)如何實現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成：

主要通過平衡的植物激素配比進(jìn)展調(diào)控。

1)誘導(dǎo)芽的分化：細(xì)胞分裂素〉生長素(激烈素)

2)誘導(dǎo)根的分化：生長素(IAA(四噪乙酸)＞細(xì)胞分裂素

(3)細(xì)胞培育和器官培育的意義：

細(xì)胞培育和器官培育時，植物克隆的結(jié)果，不肯定是植物，也可以是器官，甚至

是細(xì)胞群(愈傷組織)。人們要的可以是植物，也可以是細(xì)胞或者是細(xì)胞代謝產(chǎn)物。

6、原生質(zhì)體培育：

(1)概念：用纖維素酶或果膠酶水解細(xì)胞壁，獲得球形的植物細(xì)胞原生質(zhì)體(細(xì)胞中

有代謝活性的原生質(zhì)局部，包括質(zhì)膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核)，用適當(dāng)方法進(jìn)展原生質(zhì)體培育,

也可獲得新植株。

(2)植物原生質(zhì)體的獲得方法：

在0.5—0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境(較高浸透壓)下用纖維素酶和果膠酶混合液處

理根尖、葉片、愈傷組織或懸浮培育細(xì)胞，將細(xì)胞壁消化除去，獲得球形的原生質(zhì)體。

問題：為什么要加較高浸透壓的甘露醇？

緣由：防止原生質(zhì)體吸水脹破。

7、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

在原生質(zhì)體培育勝利的根底上，形成了體細(xì)胞雜交技術(shù)(原生質(zhì)體交融)。

(1)概念：

植物體細(xì)胞雜交是指將來自兩個不同植物的體細(xì)胞交融成一個雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)

胞培育成新的植物體的方法。

(2)過程：

(3)誘導(dǎo)交融的方法:物理法包括離心、

振動、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙

二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。

(4)交融完成的標(biāo)記:新細(xì)胞壁的形成。

(5)意義：克制了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障

礙。植物細(xì)胞B

8、植物細(xì)胞工程：

(1)概念：

培育植物細(xì)胞(包括原生質(zhì)體)，借助基因工程方法，將外源遺傳物質(zhì)(DNA)導(dǎo)入

受體細(xì)胞(包括原生質(zhì)體)中或通過細(xì)胞交融、顯微注射等將不同來源的遺傳物質(zhì)重新組

合，再通過對這些轉(zhuǎn)基因細(xì)胞或重組細(xì)胞進(jìn)展培育，獲得具有特定性狀的新植株。

9、植物組織培育的應(yīng)用：

試管苗的快速繁殖、無病毒植物的培育、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工

廠化消費、轉(zhuǎn)基因植物的培育等。

練習(xí)：

(1)為什么體內(nèi)細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織、器官？

答：基因在特定空間和時間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果。在個體發(fā)育的不同時期，生物體不

同部位的細(xì)胞表達(dá)的基因是不同的，合成的蛋白質(zhì)也不一樣，從而形成了不同的組織和器

官。

(2)在植物組培過程中，為什么要進(jìn)展一系列的消毒，滅菌，并且要求無菌操作？

答：避開雜菌在上面快速生長消耗養(yǎng)分，且有些雜菌會危害培育物的生長。

(3)列舉植物克隆的成就：

答：1)細(xì)胞培育：如人工種子的制造，細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化消費

2)器官培育：如無病毒植物的培育，試管苗快速繁殖

3)原生質(zhì)體培育和植物細(xì)胞工程：轉(zhuǎn)基因植物培育、培育作物新品種

三、動物的克隆

1、動物細(xì)胞、組織培育

(1)動物細(xì)胞培育：就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，經(jīng)過機械消化或胰酶消化，使

其分散成單個細(xì)胞，然后放在相宜的培育基中，讓這些細(xì)胞生存、生長和繁殖。

在某種程度上像體內(nèi)一樣呈現(xiàn)肯定的組織特性。

(2)動物組織培育：體外培育動物組織，使其維持生活狀態(tài)或生長特性?？梢园殡S組織

分化，但最終成為細(xì)胞培育。

2、動物細(xì)胞培育過程：

(1)培育條件：

①無菌、無毒的環(huán)境：培育液應(yīng)進(jìn)展無菌處理。通常還要在培育液中添加肯定量的抗生素,

以防培育過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培育液，防止代謝產(chǎn)物

積累對細(xì)胞自身造成危害。

②養(yǎng)分：合成培育基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需參加

血清(能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附)、血漿等自然成分。

③溫度：相宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2?7.4。

④氣體環(huán)境：95%空氣+5%C02。Oz是細(xì)胞代謝所必需的，CO?的主要作用是維持培育液的pH。

(2)動物細(xì)胞培育的過程：

取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)一剪碎一用胰蛋白酶或膠原蛋

白酶處理分散成單個細(xì)胞一制成細(xì)胞懸液一轉(zhuǎn)入培育瓶中進(jìn)展原代培育一貼滿瓶壁

的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞接著傳代培育。

(3)培育過程中的幾點說明：

①用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞：動物組織細(xì)胞間隙中含有肯定量

的膠原纖維蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)形成具有肯定彈性和韌性的組織和器官。用蛋白酶可使其

消化，從而使細(xì)胞互相分別。

②原代培育和傳代培育須要在C02保養(yǎng)箱中保溫培育：

通過在培育箱內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞或組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，如恒定的

pH值(7.2-7.4)、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對濕度(95%)、穩(wěn)定的C02程度(5%),

來對細(xì)胞或組織進(jìn)展體外培育的一種裝置。

③原代培育：從機體取出后馬上進(jìn)展的細(xì)胞、組織培育。

④傳代培育：將原代培育細(xì)胞分成若干份，接種到若干份培育基中，使其接著生長、

增殖。

⑤傳代培育的緣由：假如不進(jìn)展傳代培育，就會因細(xì)胞密度過大和代謝消耗引起養(yǎng)

分枯竭，不能正常生長。

(4)離體動物細(xì)胞的生長特性：

①細(xì)胞貼壁：懸浮液中分散的細(xì)胞緊貼培育瓶內(nèi)壁才能生長。

②接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到外表互相接觸時，細(xì)胞就會停頓分裂。

③正常的生命活動：生長、分裂、有規(guī)律的蒼老、死亡等現(xiàn)象，但不分化。

(5)動物細(xì)胞培育技術(shù)的應(yīng)用：制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培育

醫(yī)學(xué)討論的各種細(xì)胞。

3、細(xì)胞系、細(xì)胞株：

條件合適時，可以由傳代細(xì)胞建成細(xì)胞系或細(xì)胞株。

(1)細(xì)胞系：指可連續(xù)傳代的細(xì)胞。原代培育物在首次傳代時就成為細(xì)胞系。

連續(xù)細(xì)胞系：遺傳物質(zhì)變更，不死性

有的連續(xù)細(xì)胞系是惡性細(xì)胞系，具有異體致瘤性；有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但

保存接觸抑制現(xiàn)象，不致癌。

(2)細(xì)胞株：通過肯定的選擇或純化方法，從原代培育物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性

質(zhì)的細(xì)胞系。如：單抗細(xì)胞株

細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同工酶類型、病毒敏感性和生化特性等。遺傳物

匡+—甘中汨］一類基因：維持生存，各種細(xì)胞中都處于活動狀態(tài)

質(zhì)未變更。動物基因組』

［一類基因：隨著組織器官和發(fā)育階段不同而選擇性表達(dá)

細(xì)胞系泛指可傳代的細(xì)胞，細(xì)胞株指具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系。

4.克隆培育法(細(xì)胞克隆)：

(1)概念：把一個單細(xì)胞從群體中分別出來單獨培育，使之繁衍成一個新的細(xì)胞群體的

技術(shù)，叫克隆培育法或細(xì)胞克隆。

(2)特點：遺傳性狀均一、表現(xiàn)的性狀相像，便于討論

(3)細(xì)胞克隆的最根本要求：保證所建成的克隆來源于單個細(xì)胞

(4)合適于克隆的細(xì)胞：對環(huán)境有較大適應(yīng)范圍和具有較強獨立生存實力的細(xì)胞

群體細(xì)胞>單細(xì)胞

無限細(xì)胞系、轉(zhuǎn)化或腫瘤細(xì)胞系〉原代細(xì)胞、有限細(xì)胞系

(5)進(jìn)步細(xì)胞克隆形成率的措施：

?選擇相宜的培育基

?添加血清(胎牛血清)(能促進(jìn)細(xì)胞的生長、增殖和貼附)

?以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(經(jīng)射線照耀的小鼠成纖維細(xì)胞)

?激素刺激(胰島素等)

?運用C02培育箱，調(diào)整PH

(6)細(xì)胞克隆的主要途徑

從一般細(xì)胞系中分別出缺乏特殊基因的突變細(xì)胞系。

用于討論細(xì)胞的遺傳規(guī)律和生理特性。

5、細(xì)胞交融及細(xì)胞雜交：

(1)細(xì)胞交融：指用自然或人工方法，使兩個或多個不同的細(xì)胞交融成一個細(xì)胞的過程。

(2)誘導(dǎo)交融的方法：1)生物法：滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)交融，是動物細(xì)胞交融所特有的

2)化學(xué)法：聚乙二醇誘導(dǎo)交融

3)物理法：電交融技術(shù)：效率很高

(3)細(xì)胞雜交：基因型不同的細(xì)胞間的交融稱為細(xì)胞雜交。

(4)動物細(xì)胞交融技術(shù)的應(yīng)用

由于細(xì)胞雜交中染色體簡單喪失，因此利用雜交細(xì)胞檢測特定染色體喪失及特定基因

產(chǎn)物削減的對應(yīng)關(guān)系，可以進(jìn)展基因定位。

（5）動物細(xì)胞交融的意義：克制了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為討論細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、

腫瘤和生物新品種培育的重要手段。

（6）動物細(xì)胞交融及植物體細(xì)胞雜交的比擬：

動物細(xì)胞交融及植物原生質(zhì)體交融的原理根本一樣，誘導(dǎo)動物細(xì)胞交融的方法及植物

原生質(zhì)體交融的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。

比擬工程細(xì)胞交融的原理細(xì)胞交融的方法誘導(dǎo)手段用處

植物體細(xì)細(xì)胞膜的流淌性去除細(xì)胞壁后誘離心、電刺激、克制了遠(yuǎn)緣雜交

胞雜交導(dǎo)原生質(zhì)體交融振動，聚乙二醇的不親和性，獲得

等試劑誘導(dǎo)雜種植株

動物細(xì)胞細(xì)胞膜的流淌性使細(xì)胞分散后誘除應(yīng)用植物細(xì)胞制備單克隆抗體

交融導(dǎo)細(xì)胞交融雜交手段外，再加的技術(shù)之一

滅活的病毒誘導(dǎo)

6、雜交瘤技術(shù)和單克隆抗體制備:

（1）雜交瘤技術(shù)：

將抗體生成細(xì)胞同瘤細(xì)胞進(jìn)展雜交的技術(shù)。該技術(shù)解決了抗血清的異質(zhì)性問題。

（2）雜交瘤技術(shù)制備單抗體：

①抗體：一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分別出的抗體產(chǎn)量低、

純度低、特異性差。

②雜交瘤技術(shù)制備單抗體的根本方法：

1）用外界抗原刺激烈物（如小鼠），使其發(fā)生免疫反響，使B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗

體；

2）利用仙臺病毒或聚乙二醇等作介導(dǎo)，使經(jīng)免疫的動物的脾細(xì)胞及可以無限傳

代的骨髓瘤細(xì)胞交融；

3）經(jīng)過挑選、克隆培育，獲得來自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異抗體、又能無限增

殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。

③單克隆抗體的制備過程:

抗原注入小鼠體內(nèi)

④制備過程中七M(jìn)?訶題：

1）、古窿特麻帝制夕^云田了哪些動物細(xì)胞工程技泠？

3胞交融髓瘤細(xì)胞口

2）制備過程中進(jìn)展該挑選L每次鄴選的目的亮不2不

答：兩次挑選：在細(xì)胞交融后選出雜國一緞趣次融不交瘤細(xì)胞進(jìn)展培育后選出能

產(chǎn)生特定抗體的細(xì)用雜交覆細(xì)胞_________

（3）雜交瘤細(xì)胞的特點：既能大量繁殖，文露,薔猛或算體。

（4）雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗弱的伊占.而以」茬導(dǎo)抗原放氣比例極少的抗原混合物中

獲得Ip。in算茬盤再提糜又同。?

（5）單克隆抗體的作）注入小鼠1培育基

①作為診斷試劑：精確［體內(nèi)%育（微小差母體;卜培育下生特異性結(jié)合,

具有精確、高效給日擊H優(yōu)點。

②用于治療疾病和進(jìn)從蠲腹綠水蘇提"取‘生k用干治療癌癥治療，可血%叢￥,叫尊塞取,也有少量

用于治療匚單克隆抗體

7、動物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度：

受精卵一二分裂球一四分裂球f八分裂球一桑根胚一囊胚一原腸胚一組織、器官一幼體

①動物的受精卵，卵裂球含有2-8個細(xì)胞時，每個細(xì)胞具有全能性。

②隨著胚胎發(fā)育的接著，有的細(xì)胞只具有分化出各種組織細(xì)胞的潛能，這樣的細(xì)胞叫多

能干細(xì)胞。

③有的細(xì)胞只能分化為一種細(xì)胞，叫單能干細(xì)胞。

在動物體內(nèi)，已經(jīng)分化的細(xì)胞不再分化為其他細(xì)胞，甚至終生不再分裂，如高度分化的神

經(jīng)細(xì)胞

④動物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度

受精卵〉胚胎干細(xì)胞〉多能干細(xì)胞〉單能干細(xì)胞〉體細(xì)胞

低等動物細(xì)胞：全能性一般簡單表達(dá)。

癌細(xì)胞：仍能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞。

無論分化還是癌變，變更的都是表現(xiàn)型，基因組成的完好性可以保存。

8、動物難以克隆的根本緣由：

基因的選擇性表達(dá)（差異表達(dá)），使得細(xì)胞中合成了專一的蛋白質(zhì)，即動物細(xì)胞已經(jīng)

發(fā)生了分化。分化的細(xì)胞，其細(xì)胞核中物種的基因組完好，具有全能性，但其基因組中的

基因不同時進(jìn)展活動，有的基因開放，有的基因關(guān)閉（如哺乳動物的紅細(xì)胞），不能像受

精卵那樣發(fā)揮細(xì)胞的全能性，以此為起點進(jìn)展細(xì)胞克隆，難度很大。

9、細(xì)胞核移植試驗和動物的克隆繁殖：

（1）核移植概念：就是利用一個細(xì)胞的細(xì)胞核（核供體）來取代另一細(xì)胞中的細(xì)胞核，

形成一個重建的“合子”。

（2）哺乳動物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植（比擬簡單）和體細(xì)胞核移植（比擬難）。

（3）選用去核卵（母）細(xì)胞的緣由：卵（母）細(xì)胞比擬大，簡單操作；卵（母）細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,

養(yǎng)分豐富。

（4）體細(xì)胞核移植的大致過程是：

核移植

胚胎移植

（5）多莉的培育用到了哪些技術(shù)？

答：核移植、動物細(xì)胞培育、胚胎移植

（6）體細(xì)胞克隆羊的培育勝利，證明了什么？

答：1）高度分化細(xì)胞經(jīng)肯定技術(shù)處理，也可回復(fù)到類似受精卵時期的功能。

2）在胚胎和個體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核（包括異源的細(xì)胞核）發(fā)育的作用。

（7）體細(xì)胞克隆羊勝利的分子細(xì)胞生物學(xué)機理有哪些？

答：1）重組卵細(xì)胞最初分裂時雖然復(fù)制了DNA,但轉(zhuǎn)錄并未開場

2）重組卵細(xì)胞的供體核DNA喪失了來源于乳腺細(xì)胞的阻擋核基因表達(dá)的調(diào)整蛋白。

3）重組卵細(xì)胞開場第三次分裂時，原乳腺細(xì)胞的調(diào)整蛋白全部被卵細(xì)胞質(zhì)中的蛋白因子

交換了，核DNA被重新編排，胚細(xì)胞開場表達(dá)自己的基因，進(jìn)而調(diào)控胚在代孕母親子宮中

的進(jìn)一步發(fā)育。。

4）核移植前對乳腺細(xì)胞的養(yǎng)分限制性培育（調(diào)整牛血清濃度）和電脈沖細(xì)胞交融技術(shù)，

有利于核的變更和細(xì)胞交融后基因表達(dá)分子開關(guān)啟動。

（8）體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：

①加速家畜遺傳改進(jìn)進(jìn)程，促進(jìn)良畜群繁育；②愛護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量；

③消費寶貴的醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；

⑤用于組織器官的移植等。

（9）體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題:

克隆動物存在著安康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。

（10）動物克隆勝利的條件：

1）具有包含本物種完好基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞。如：乳腺上皮細(xì)胞；

2）能有效調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的細(xì)胞質(zhì)物質(zhì)。如：去核卵的細(xì)胞質(zhì)；

3）完成胚胎發(fā)育的必要的環(huán)境條件。

如：誘導(dǎo)重組細(xì)胞生長、分化的試驗條件和懷胎母體的子宮環(huán)境

10、練習(xí)：

（1）用于動物細(xì)胞培育的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或誕生不久的幼齡動物的器官或組織,

其主要緣由是這樣的組織細(xì)胞（）

A、簡單產(chǎn)生各種變異B、具有更強的全能性

C、取材非常便利D、分裂增殖的實力強

（2）下列為有關(guān)動物細(xì)胞培育的敘述，其中不正確的是（）

A.用于培育的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織

B.將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)展處理使其分散成單個細(xì)胞

C.在培育瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液

D.動物細(xì)胞培育只能傳50代左右，所培育的細(xì)胞全部蒼老死亡

（3）用動、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)展離體培育，下列敘述正確的是（）

A.都需用C02培育箱B.都須用液體培育基

C.都要在無菌條件下進(jìn)展D.都可表達(dá)細(xì)胞的全能性

（4）動物細(xì)胞克隆是指（）

A.一個單細(xì)胞培育成一個新的細(xì)胞群的技術(shù)

B.一個重組細(xì)胞經(jīng)分裂、分化發(fā)育成一個動物個體的技術(shù)

C.幾個同種動物的細(xì)胞培育成一個新的細(xì)胞群的技術(shù)

D.一個卵裂球經(jīng)胚胎分割發(fā)育成四個細(xì)胞群的技術(shù)

（5）某討論小組為測定藥物對體外培育細(xì)胞的毒性，打算對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）

和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)展動物細(xì)胞培育。下列說法正確的是（）

A.在利用兩種肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時，也可用胃蛋白酶處理

B.細(xì)胞培育應(yīng)在含5%C02的恒溫培育箱中進(jìn)展，C02的作用是刺激細(xì)胞的呼吸

C.甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培育過程中，乙會出現(xiàn)停頓增殖的現(xiàn)象

D.僅用該培育液也能用來培育乙肝病毒

（6）下列關(guān)于動物細(xì)胞培育的敘述，正確的是（）

A.培育中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體

B.培育中的人B細(xì)胞可以無限地增殖

C.人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培育能形成細(xì)胞株

D.用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細(xì)胞

（7）世界上第一只克隆綿羊“多莉”的培育等程序如圖

所示。請細(xì)致看右圖后答復(fù)問題：

1）圖中a過程為。通過a過程形成的重組

細(xì)胞核遺傳物質(zhì)及質(zhì)遺傳物質(zhì)各來自哪里？

2）施行a時，所需的受體細(xì)胞大多采納動物卵細(xì)胞的緣由是：。

3）b過程細(xì)胞分裂的方式是，此過程是否進(jìn)展細(xì)胞分化？（答

“有”或“無”）

4）圖中c所指過程為，圖中d指的是克隆綿羊“多莉”經(jīng)過在母體子宮內(nèi)

后o

5）“多莉”面部的毛色和性別及綿羊一樣，請根據(jù)遺傳學(xué)原理說明推斷根

據(jù)：O

6）若不考慮環(huán)境因素影響，多莉的性狀是否全部像以上綿羊？為什么？

7）植物組織培育之后，克隆綿羊培育勝利，證明動物o

8）圖中技術(shù)具有多種用處，但是不能（）

A.有選擇地繁殖某一性別的家畜B.繁殖家畜中的優(yōu)良個體

C.用于保存物種D.變更動物的核基因

（9）在現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動物體內(nèi)分別出來的成熟的體細(xì)胞干脆培育成一個

新個體，而是必需將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個體，你認(rèn)為

緣由最可能是（）

A.卵細(xì)胞大，便于操作B.卵細(xì)胞含有的養(yǎng)分物質(zhì)多

C.卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)D.重組細(xì)胞才具有全能性

答案：（1）D；（2）D（3）A（4）A（5）C（6）D

（7）：1）細(xì)胞核移植；2）具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的細(xì)胞質(zhì)物質(zhì)；3）有絲分裂；有；

4）胚胎移植；妊娠；誕生；5）白面；“多莉”綿羊的核基因和性染色體全部來自白面

綿羊；6）卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能限制某些性狀；7）細(xì)胞核也具有全能性；

8）D；（9）C

四、本章總結(jié)

生命的根本特征之一是自我復(fù)制和自我繁殖。個體通過無性繁殖可連續(xù)傳代并形成群

體，這樣的群體稱無性繁殖系?？寺【褪侵笩o性繁殖系。在分子程度上，基因克隆是指某

種目的基因的復(fù)制、分別過程；在細(xì)胞程度上，細(xì)胞克隆技術(shù)在利用雜交瘤制備單克隆抗

體的技術(shù)中得到充分運用；在個體程度上，克隆技術(shù)就是一種通過單個細(xì)胞，特殊是來自

特定活體的單個體細(xì)胞進(jìn)展無性繁殖從而產(chǎn)生新個體的過程或技術(shù)。

克隆技術(shù)在分子細(xì)胞核個體程度上都得到很大開展。從理論上講，細(xì)胞（主要是包含

遺傳物質(zhì)的細(xì)胞核）具有的發(fā)育全能性是生物克隆的根本條件。實際討論說明，生物（特

殊是高等動物）的克隆須要以下根本條件：具有包含物種完好基因組的細(xì)胞核的活細(xì)胞、

能有效調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的細(xì)胞質(zhì)物質(zhì)、完成胚胎發(fā)育的必要的環(huán)境條件。

植物克隆的技術(shù)根底是植物的細(xì)胞核組織培育，理論根底是植物細(xì)胞的全能性。植物

克隆可用于植物細(xì)胞培育植物器官培育，在植物的細(xì)胞培育中，原生質(zhì)體的分別及培育在

解決整體植株上討論植物性狀及其遺傳特性的困難中，起到了重要作用。原生質(zhì)體培育勝

利后，植物細(xì)胞工程技術(shù)得以開展，即在原生質(zhì)體培育的根底上，由原生質(zhì)體交融（體細(xì)

胞雜交）和轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合的技術(shù)。植物組織培育和克隆的討論剛好間經(jīng)驗了一個世紀(jì)的

開展，解決了人類生存的關(guān)鍵問題（糧食問題）。

動物克隆的技術(shù)根底是動物的細(xì)胞和組織培育。動物細(xì)胞培育可以獲得須要的細(xì)胞株

系，把一個單細(xì)胞從群體中分別出來單獨培育，使之繁殖成一個新的細(xì)胞群體的克隆培育

技術(shù)可以獲得純系細(xì)胞。動物細(xì)胞工程的主要技術(shù)手段是細(xì)胞培育和細(xì)胞交融，通過其開

展起來的單克隆抗體技術(shù)帶來了細(xì)胞免疫學(xué)中的一次革命。由于動物個體發(fā)育過程中基因

的選擇性表達(dá)，使得動物難以通過克隆進(jìn)展繁殖。胚胎細(xì)胞克隆技術(shù)和體細(xì)胞核移植技術(shù)

已經(jīng)勝利實現(xiàn)了局部動物的克隆繁殖。

第三章胚胎工程

一、從受精卵談起:

1、受精作用：

（1）概念：成熟的精卵交融成為受精卵的過程。

（2）場所:輸卵管

（3）過程：

（4）結(jié)果：形成受精卵

（5）相關(guān)問題：

①為什么只有同種動物精卵才能結(jié)合？

答：同種動物精子、卵細(xì)胞外表有特異性互相識別的蛋白，這是同種動物精卵才能

結(jié)合的緣由之一。

②受精作用完成的標(biāo)記是什么？

答：在卵細(xì)胞膜和透亮帶的間隙可以視察到兩個極體時，說明卵子已經(jīng)完成受精。

2、胚胎發(fā)育的過程

受精卵是動物個體發(fā)育的起點。

（1）胚胎發(fā)育過程：

受精卵—卵裂球（包括包括2細(xì)胞期、4細(xì)胞期、8細(xì)胞、16細(xì)胞期、32細(xì)胞期）

―囊胚期—原腸胚期（包括內(nèi)、中、外三胚層和原腸腔）―幼體

（2）各發(fā)育時期的特點：

①卵裂期：細(xì)胞有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎的總體體積并不增加，或略

有減小。當(dāng)卵裂球含2—8個細(xì)胞時，每個細(xì)胞都具有全能性，均可以發(fā)育成一個完好的

個體。

②桑根胚：胚胎細(xì)胞數(shù)目到達(dá)32個左右時，胚胎形成致密的細(xì)胞團，形似桑根。仍

處于卵裂期，是全能細(xì)胞。

③囊胚：細(xì)胞開場出現(xiàn)分化（該時期細(xì)胞的全能性仍比擬高，也可用于胚胎分割）：

1）個體較小的滋養(yǎng)層細(xì)胞：位于囊胚外表，發(fā)育成胚胎的附屬構(gòu)造或胚外構(gòu)造，

胚胎可通過這些組織從母體中獲得正常發(fā)育所需的氧氣和養(yǎng)分物質(zhì)。

2）聚集在胚胎一端個體較大的細(xì)胞：稱為內(nèi)細(xì)胞團，即胚胎干細(xì)胞，是一種未分

化的細(xì)胞，具有發(fā)育全能性，將來發(fā)育成胎兒的各種組織。

3）中間的空腔稱為囊胚腔。

④原腸胚：有了三胚層的分化，具有囊胚腔和原腸腔。原腸胚的內(nèi)、中、外三個胚

層漸漸分化形成各種器官原基。

⑤器官的形成：

3、總結(jié)：

1）受精卵是新生命的第一個細(xì)胞，全能性最高。細(xì)胞全能性隨發(fā)育的深化而降低。

2）發(fā)育中的細(xì)胞分裂均為有絲分裂，產(chǎn)生的是體細(xì)胞；原腸胚階段是個體發(fā)育中分化

程度最高的階段，但應(yīng)留意細(xì)胞分化貫穿整個個體發(fā)育過程。

二、胚胎工程

1、胚胎工程概念：泛指在動物胚胎發(fā)育過程中所進(jìn)展的各種胚胎操作技術(shù)。

胚胎工程的討論對象主要限定于高等脊椎動物，特殊是哺乳動物。討論的重點內(nèi)容有：

體外受精、胚胎體外培育、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培育等。

2、體外受精和胚胎體外培育：

(1)體外受精概念：就是采集雌性動物的卵細(xì)胞和雄性動物的精子，使其在試管中受精。

(2)體外受精步驟：

①卵母細(xì)胞的采集和培育：

主要方法：用促性腺激素處理，使其排出更多的卵子，然后用穿刺針汲取卵泡液，取

出卵母細(xì)胞，在體外經(jīng)人工培育成熟后，才能及獲能的精子受精。

②精子的采集和獲能：在體外受精前，要將成熟的精子放入培育液中培育，對精子進(jìn)

展獲能處理。

③受精：獲能的精子和培育成熟的卵細(xì)胞在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^

程。

(3)胚胎的體外培育：精子及卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培育液中接著培

育，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育實力。培育液成分較困難，除一些無機鹽和有機鹽外，

還需添加維生素、激素、氨基酸、核昔酸等養(yǎng)分成分，以及血清等物質(zhì)。當(dāng)胚胎發(fā)育到相

宜的階段時，可進(jìn)展植入或著床。通常移植的最相宜時期是發(fā)育到8細(xì)胞以上的胚胎，如

早期囊胚。

3、胚胎移植

(1)概念：也稱“借腹懷胎”

將經(jīng)濟價值較高、遺傳性狀優(yōu)秀的母畜，經(jīng)過激素處理，使其超數(shù)排卵后受精，然

后將發(fā)育的早期胚胎分別移植到同期發(fā)情的代孕母的子宮內(nèi)，通過代孕母妊娠產(chǎn)仔的技

術(shù)。

供體：供應(yīng)胚胎的個體。良種雌性動物

受體：承受胚胎的個體。一般品種的雌性動物。

(2)胚胎移植的根本程序：

①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和消費性能優(yōu)秀的供體，有安康的體質(zhì)和正

常繁殖實力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)展同期發(fā)情處理，用促性腺激素

對供體母牛做超數(shù)排卵處理。

②配種或人工授精。

③對胚胎的搜集、檢查、培育或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把

供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進(jìn)展質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到

桑根或胚囊胚階段。干脆向受體移植或放入一196℃的液氮中保存。

④對胚胎進(jìn)展移植。

⑤移植后的檢查。對受體母牛進(jìn)展是否妊娠的檢查。

(3)胚胎移植地位：如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項胚胎工程技術(shù)所消費的

胚胎，都必需經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最終一道“工序”。

(4)胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期，充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖

實力。

(5)胚胎移植的生理學(xué)根底：(看一下即可)

①挪動到任何一頭動物子宮內(nèi)都能發(fā)育嗎？

答：應(yīng)是同種動物。動物發(fā)情排卵后，同種動物的供、受體生殖器官的生理變更是一

樣的。這就為供體的胚胎移入受體供應(yīng)了一樣的生理環(huán)境。

②為什么能搜集到胚胎？

早期胚胎在肯定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的搜集供應(yīng)了可能。

③供體和受體會不會發(fā)生排擠？

同種動物的受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排擠反響。這為胚胎在受體的存

活供應(yīng)了可能。

④移植的胚胎能否保存供體雙親的特性，是否具有受體的性狀？

供體胚胎可及受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)絡(luò)，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過

程中不受影響。

（6）胚胎移植勝利及否要有兩個關(guān)鍵條件

?①胚胎移植一般應(yīng)在同種的雌性供體和受體之間進(jìn)展。

?②進(jìn)展胚胎移植的供體和受體的生理狀態(tài)要一樣。

4、胚胎分割

（1）概念：指借助顯微操作技術(shù)（采納機械方法）將早期胚胎切割成幾等份（如2等份、4

等份等），再移植到代孕母子宮，產(chǎn)生同卵多仔后代的技術(shù)。

（2）胚胎分割根本過程：

①將發(fā)育良好的胚胎移入含培育液的培育皿中；

②在顯微鏡下用切割針或切割刀分割胚胎，或用酶處理將卵裂球中的細(xì)胞分開；

③分割的胚胎或細(xì)胞干脆移植給受體，或在體外培育到囊胚階段再移植到受體內(nèi)，著床

發(fā)育產(chǎn)仔。

（3）意義：來自同一胚胎的后代具有一樣的遺傳物質(zhì)，屬于無性繁殖?？沙杀对黾优咛?shù)

量，可以快速繁殖良種畜。

（4）材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑根胚或囊胚。（桑植胚至囊胚的發(fā)育過程中，細(xì)胞開

場分化，但其全能性仍很高，可用于胚胎分割。）

（5）問題：對囊胚階段的胚胎進(jìn)展分割時。為什么要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割？

內(nèi)細(xì)胞團一般到囊胚階段才出現(xiàn)，它是發(fā)育為胚胎本身的根底細(xì)胞，其他細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞,

只為胚胎和胎兒發(fā)育供應(yīng)養(yǎng)分。若分割時不能將內(nèi)細(xì)胞團均等分割，會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團多

的局部正常發(fā)育的實力強，少的局部發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題

5、胚胎干細(xì)胞

（1）概念：（簡稱ES或EK細(xì)胞），是由早期胚胎（囊胚）的內(nèi)細(xì)胞團分別出來的一類

細(xì)胞。

（2）特點：

1）形態(tài)：體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯.

2）功能：具有發(fā)育的全能性和二倍體核型，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。

3）體外培育ES細(xì)胞可以增殖而不分化。對它可以進(jìn)展冷凍保存，也可以進(jìn)展遺傳改造。

（3）胚胎干細(xì)胞的培育：

①培育關(guān)鍵：

須要一種能促進(jìn)胚胎干細(xì)胞的生長，但抑制其分化的一種培育體系。（胚胎成纖維細(xì)胞）

②培育過程：

1）制備飼養(yǎng)層（胚胎成纖維細(xì)胞）：培育皿底部；

2）培育液中培育胚胎到內(nèi)細(xì)胞團突出飼養(yǎng)層；

3）酶消化或機械剝離內(nèi)細(xì)胞團；

4）酶消化為單個細(xì)胞。

5）加飼養(yǎng)層接著培育。

（4）胚胎干細(xì)胞核移植：

①概念：將胚胎干細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過胚激活、胚胎培育、胚胎移植

后干脆由受體完成克隆動物的技術(shù)。

利用該技術(shù)，可以培育出及細(xì)胞核

供體極為相像的“復(fù)制品”

②過程：細(xì)胞核移植；胚胎培育；胚

胎移植。

（5）胚胎干細(xì)胞的主要用處是：

①基因敲除，獲得移植器官

②培育出人造組織器官，用于器官

移植

③改進(jìn)創(chuàng)立動物新品種。

三、本章總結(jié)：

胚胎工程通常指各種胚胎操作技術(shù)。

其討論對象主要限定于高等脊椎動物，特克隆胚胎

殊是哺乳動物。討論的重點內(nèi)容有：體外