《藥物分析與檢驗技術(shù)》課件-色譜法檢查藥物中的特殊雜質(zhì)

色譜法檢查藥物中的特殊雜質(zhì)一、特殊雜質(zhì)的定義指在該藥物的生產(chǎn)或貯存過程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。阿司匹林----水楊酸鹽酸普魯卡因----對氨基苯甲酸如二、特殊雜質(zhì)的檢查方法色譜法光譜法化學(xué)法物理法三、色譜法（一）薄層色譜法（二）高效液相色譜法（三）氣相色譜法（四）毛細(xì)管電泳法三、色譜法（一）薄層色譜法根據(jù)藥物與雜質(zhì)對吸附劑的吸附或?qū)φ归_劑的解析能力不同（Rf值的差異），加以分離和檢查。本法靈敏、簡便、快速；不需特殊的設(shè)備、費用低；分離和鑒別同步進行。三、色譜法（一）薄層色譜法采用TLC法檢查雜質(zhì)，常用以下幾種方法：雜質(zhì)對照品法供試品溶液自身稀釋對照法雜質(zhì)對照品與供試品溶液自身稀釋對照并用法對照藥物法三、色譜法（一）薄層色譜法1.雜質(zhì)對照品法適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況。要求供試品中所檢雜質(zhì)斑點的大小與顏色，不得超過相應(yīng)雜質(zhì)的對照斑點。根據(jù)限量，取供試品溶液和限度量的雜質(zhì)對照品溶液，分別點樣于同一薄層板上，展開、定位、檢查。方法三、色譜法（一）薄層色譜法供試品雜質(zhì)對照品三、色譜法（一）薄層色譜法2.供試品自身稀釋對照法適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品的情況。將供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對照溶液，與供試品溶液分別點加于同一薄層板上，展開、定位、檢查。供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深于對照溶液所顯示斑點顏色。方法三、色譜法（一）薄層色譜法供試品液對照液(稀釋液)三、色譜法（一）薄層色譜法3.雜質(zhì)對照品法與供試品自身稀釋對照法并用。當(dāng)無適合的雜質(zhì)對照品，尤其是供試品顯示的雜質(zhì)斑點顏色與主成分斑點顏色有差異，難以判斷限量時，可用與供試品相同的藥物作為對照品，此對照物中所含待檢雜質(zhì)需符合限量要求，且穩(wěn)定性好。4.對照藥物法三、色譜法（一）薄層色譜法供試品對照藥物三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)分離效能高，專屬性強和檢測靈敏度高，根據(jù)供試品和雜質(zhì)對照品保留時間相同測定各雜質(zhì)峰面積。1.外標(biāo)法（雜質(zhì)對照品法）2.加校正因子的主成分自身對照法3.不加校正因子的主成分自身對照法4.面積歸一化法（粗略測量雜質(zhì)的含量）三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)1.外標(biāo)法（雜質(zhì)對照品法）：供試品→稱量→配成溶液→注入儀器→色譜圖AX精密雜質(zhì)對照品→稱量→配成溶液(CR)→注入儀器→色譜圖AR精密三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)1.外標(biāo)法（雜質(zhì)對照品法）：三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)2.加校正因子的主成分自身對照法（僅適用于已知雜質(zhì)的控制）建立方法時，需要雜質(zhì)對照品；雜質(zhì)檢查時，不需雜質(zhì)對照品①質(zhì)量研究階段得到f，將f

及tR直接載入各質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。②測定：供試液對照液分別測定

C雜三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)2.加校正因子的主成分自身對照法（僅適用于已知雜質(zhì)的控制）

三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)3.不加校正因子的主成分自身對照法無雜質(zhì)對照品，以供試品稀溶液為對照溶液，比較雜質(zhì)峰與對照液中主峰面積?！吨袊幍洹分屑橇_齊的有關(guān)雜質(zhì)檢查：例三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)3.不加校正因子的主成分自身對照法供試品流動相（10mg/ml）供試液對照液色圖譜(1)進樣取5μl定量稀釋（0.2mg/ml）5μl色圖譜(2)所有雜質(zhì)峰的面積和不得大于對照液主峰的面積規(guī)定三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)4.峰面積歸一化法：雜質(zhì)峰占所有峰總面積中比例不超過一定數(shù)值來限量。雜質(zhì)含量=（雜質(zhì)峰面積/總峰面積）×100%三、色譜法（二）高效液相色譜法(HPLC)4.峰面積歸一化法：ChP2020頭孢呋辛酯中“異構(gòu)體”的檢查。頭孢呋辛酯A異構(gòu)體峰面積與其A、B異構(gòu)體峰面積和之比應(yīng)為0.48～0.55。例如三、色譜法（三）氣相色譜法(GC)