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實(shí)驗(yàn)室病原微生物第1版邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室病原微生物危害評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403序號(hào)頁(yè)碼3第一章檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)生物危害評(píng)估報(bào)告第二章人類(lèi)免疫缺陷病毒HIV的危害評(píng)估第三章結(jié)核分枝桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告第四章霍亂弧菌的生物危害評(píng)估報(bào)告第五章流感病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第六章梅毒螺旋體的生物危害評(píng)估報(bào)告第七章SARS冠狀病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第八章腦炎病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第九章淋病奈瑟氏菌的生物危害評(píng)估報(bào)告第十章鼠疫耶爾森菌的生物危害評(píng)估報(bào)告第十一章傷寒桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告第十二章肝炎病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第十三章禽流感病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第十四章腸道病毒71型的生物危害評(píng)估報(bào)告第十五章漢坦病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告第十六章炭疽芽胞桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室病原微生物危害評(píng)估報(bào)告版本/修訂號(hào):1/0批準(zhǔn)令生效日期:20100403經(jīng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理委員會(huì)審核、研究,批準(zhǔn)本《實(shí)驗(yàn)室病原微生物危害評(píng)估報(bào)告》,并即時(shí)生效,請(qǐng)相關(guān)部門(mén)遵照?qǐng)?zhí)行!邵武市第二醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室生物安全管理委員會(huì)2011年12月3日5版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403為保證實(shí)驗(yàn)室工作人員在工作中不被危害性生物及物品所侵害,保證危害性物品不外泄,對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境進(jìn)行評(píng)估,以鑒定生物安全防護(hù)等級(jí),保證生物安全。一、危害程度分類(lèi)及生物安全防護(hù)水平評(píng)估本檢驗(yàn)科是為醫(yī)院診斷、預(yù)防、治療人體疾病或評(píng)估人體健康提供信息為目的,對(duì)來(lái)自人體的材料進(jìn)行臨床生物化學(xué)、臨床微生物、臨床免疫學(xué)、臨床血液、細(xì)胞遺傳學(xué)等檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室。生物源危害主要是由各種檢驗(yàn)標(biāo)本中的微生物,尤其是病原微生物引起的,包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)等,具有潛在危險(xiǎn)性,可能引起實(shí)驗(yàn)室感染;檢驗(yàn)科微生物室還進(jìn)行一定數(shù)量的各種條件致病性細(xì)菌及真菌的分離培養(yǎng)工作,工作過(guò)程存在病原微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)人員、環(huán)境污染的風(fēng)險(xiǎn);除之以外實(shí)驗(yàn)室還存在觸電、火災(zāi)、化學(xué)品腐蝕、偷盜等危險(xiǎn)。根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》,本檢驗(yàn)科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏,實(shí)驗(yàn)室采用一定防護(hù)措施就能控制感染或防范災(zāi)害,或者對(duì)相應(yīng)病原體存在有效的免疫方法。評(píng)估我檢驗(yàn)科生物安全防護(hù)水平按二級(jí)實(shí)驗(yàn)室(BSL-2)生物安全要求。二、實(shí)驗(yàn)人員和實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)的一般要求(1)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)絕對(duì)禁止吸煙;(2)點(diǎn)燃的香煙是易燃液體的潛在火種;(3)香煙、雪茄或煙斗都是傳染細(xì)菌和接觸毒物的途徑。2.實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)食用食物、飲料及其它危害評(píng)估及防護(hù)(1)實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)不得有食物、飲料及存在“手一口”接觸可能的其它物質(zhì)(2)實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)內(nèi)的冰箱禁止存放食物。專用存放食物的冰箱應(yīng)放置在允許進(jìn)食、喝水的休息區(qū)內(nèi)。3.使用化妝品危害評(píng)估及防護(hù)實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)禁止使用化妝品進(jìn)行化妝,但允許并建議經(jīng)常洗手的實(shí)驗(yàn)人員使用護(hù)手霜。4.實(shí)驗(yàn)中眼睛和面部的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及防護(hù)(1)處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時(shí),須使用安全鏡、面罩或其它保護(hù)眼睛和面部的防護(hù)用品。(2)工作人員在實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)區(qū)內(nèi)不要佩戴隱形眼鏡,除非同時(shí)使用護(hù)目鏡或面罩。(3)使用、處理能夠通過(guò)粘膜和皮膚感染的試劑,或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時(shí),必須佩帶護(hù)目鏡、面罩或面具式呼吸器。5.實(shí)驗(yàn)中服裝和個(gè)人防護(hù)裝備的一般要求(1)應(yīng)穿著符合實(shí)驗(yàn)室工作需要的服裝,工作服應(yīng)干凈、整潔。當(dāng)工作中有危險(xiǎn)物噴濺到身上的可能時(shí),應(yīng)使用一次性塑料圍裙或防滲外罩。有時(shí)還需要佩戴其它防護(hù)裝備如:手套、護(hù)目鏡、披肩或面罩等。(2)采血員和其他需要接觸病員的工作人員,在接觸病員時(shí)需穿實(shí)驗(yàn)服或工作服。(3)個(gè)人防護(hù)服裝應(yīng)定期更換以保持清潔,遇被危險(xiǎn)物品嚴(yán)重污染,則應(yīng)立即更換6版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(4)不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)值班床,嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)住宿。6.實(shí)驗(yàn)中足部防護(hù)的一般要求位,可加套一次性防滲漏鞋套。帆布鞋可吸收化學(xué)物品和有傳染7.實(shí)驗(yàn)中頭發(fā)和飾物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及防護(hù)作區(qū)。頭發(fā)不得垂肩,應(yīng)與離心機(jī)、切片機(jī)等正8.實(shí)驗(yàn)中胡須的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及防護(hù)蓄有胡須的男性工作人員必須遵守上項(xiàng)(7)的規(guī)定。復(fù)使用或用手重裝在針管上。一次性注射器上的針在專用銳器盒內(nèi),在完全裝滿之前或48小時(shí)之內(nèi)更換。(1)“清潔”區(qū)和“非清潔”區(qū)施,防止電話、視頻顯示器終端、鍵盤(pán)、門(mén)柄及其它經(jīng)常被手或手污染,要求工作人員在觸摸設(shè)備(如計(jì)算機(jī)鍵盤(pán)及電話的保護(hù)罩等)前取下手套,制定儀被指定為“非清潔”的區(qū)域,允許戴手套接觸所有物品(如電話它物品),所有這些物品的表面都認(rèn)為是不清潔的。未戴手套的人員如果使用該區(qū)域內(nèi)的電(2)冰箱、冷凍柜、水浴和離心機(jī)應(yīng)該定期清洗和消毒(時(shí)間由實(shí)驗(yàn)室主任來(lái)決定),在發(fā)生嚴(yán)重污染后應(yīng)立即進(jìn)行清洗和消毒。進(jìn)行清洗、消(3)外衣:外衣(實(shí)驗(yàn)服、工作服、和圍裙)應(yīng)懸掛在遠(yuǎn)離散熱器、蒸汽管道、供暖裝7版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403置、以及有明火的地方,不要掛在壓縮氣瓶或滅火器上,也不要掛在門(mén)的玻璃隔板上,妨礙視線?!扒鍧崱钡暮汀胺乔鍧崱钡膫€(gè)人防護(hù)服要分開(kāi)存放。(4)垃圾處理:每天至少清理垃圾一次。(5)裝飾:不得在電燈、燈座或儀器上進(jìn)行裝飾,更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹(shù)等有引起火災(zāi)危險(xiǎn)的裝飾品。(6)為便于清潔消毒,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不應(yīng)有織物裝飾的用具或椅子。(7)個(gè)人物品:實(shí)驗(yàn)工作區(qū)不得存放個(gè)人物品,如錢(qián)包、外套、皮靴、咖啡杯、運(yùn)動(dòng)服、預(yù)包裝的食品和藥品等。(8)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)配備應(yīng)急設(shè)備,如應(yīng)急洗眼裝置,酒精等消毒用品。(9)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)安裝非手觸式洗手裝置。(10)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)安裝防蚊蠅裝置,應(yīng)定期投撒滅蟑螂、老鼠的藥物。(11)用后的廢棄物品:實(shí)驗(yàn)工作區(qū)內(nèi)的用后廢棄物品存量不要太大。具危險(xiǎn)性的液體如酸或堿性液體應(yīng)放在視平線以下。較大的廢棄物容器應(yīng)靠近地面存放。(12)出口通路:實(shí)驗(yàn)室的出口和通道必須保持暢通無(wú)阻,不準(zhǔn)堆放物品、垃圾、裝置、或設(shè)備。安全門(mén)必須保持暢通,不得堵塞。注意:無(wú)論任何時(shí)間、何種原因都不得阻塞通往滅火器、火警箱、防火毯、安全淋浴或出14.使用玻璃器具的危害評(píng)估及防護(hù)操作玻璃器具時(shí)應(yīng)遵循下述安全規(guī)則:(1)不使用破裂或有缺口的玻璃器具。(2)不要用猛力取下玻璃試管上的塞子,粘緊的試管可用刀切開(kāi)分離。(3)接觸過(guò)傳染性物的玻璃器具,清洗之前,應(yīng)先行消毒。(4)破裂的玻璃器具和玻璃碎片應(yīng)丟棄在有專門(mén)標(biāo)記的、單獨(dú)的、不易刺破的容器里。(5)高熱操作玻璃器具時(shí)應(yīng)戴隔熱手套。(6)在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下,應(yīng)盡量減少使用玻璃器具。極少粘膜(眼結(jié)膜)可能可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)極少介)極少(1)氣溶膠:離心過(guò)程中應(yīng)控制氣溶膠的產(chǎn)生在最低水平。(2)操作:離心機(jī)只有在蓋好蓋板后,才能啟動(dòng)。(3)傳染性物品:所有能夠產(chǎn)生氣溶膠進(jìn)行播散的生物制品或標(biāo)本,都應(yīng)使用密封的離心管,并在蓋緊的離心頭或轉(zhuǎn)頭中進(jìn)行。(4)為防止氣溶膠飛溢,應(yīng)在離心停止30分鐘后打開(kāi)離心物。(5)清洗:按照消毒隔離制度要求清洗離心機(jī)。(6)平衡:離心時(shí)應(yīng)保持合適的平衡,以保證離心的順利進(jìn)行。8版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403極少粘膜(眼結(jié)膜)極少可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能介)極少盜竊可能極少無(wú)(1)每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺(tái)面及其它物表,并開(kāi)紫外燈消毒至少30分鐘,并做好記錄。(2)工人每天早晨更換消毒液,包括浸泡銳器、止血帶的消毒液和手消毒液。(3)工作人員必須穿工作服,戴好口罩、帽子、和手套。(4)使用合格的一次性用品。嚴(yán)禁使用包裝破損,超過(guò)有效期的一次性用品。(5)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌技術(shù)操作規(guī)程、靜脈采血必須一人一針一管一巾一帶。微量采血應(yīng)做到一人一針一管一片,對(duì)每位病人操作前洗手或手消毒。(6)無(wú)菌物品如棉球需每天更換,開(kāi)啟后使用不得超過(guò)24小時(shí)。(7)工作人員需對(duì)銳器如采血針采取高度預(yù)防措施,用過(guò)的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。極少粘膜(眼結(jié)膜)可能可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)極少介)極少盜竊可能無(wú)無(wú)(1)為了避免液滴和氣溶膠和擴(kuò)散,實(shí)驗(yàn)室儀器加樣、加液,清洗等過(guò)程應(yīng)在封閉罩內(nèi)進(jìn)行的。(2)實(shí)驗(yàn)中使后的比色盤(pán),反應(yīng)杯等廢棄物應(yīng)當(dāng)收集在封閉的容器內(nèi),集中處置。(3)在每一步完成后應(yīng)根據(jù)操作指南對(duì)對(duì)儀器進(jìn)行消毒。血液、體液污染物表時(shí),應(yīng)立即消毒。(4)工作人員要戴手套進(jìn)行操作。粘膜(眼結(jié)膜)9版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403經(jīng)血(針刺傷、切割傷)介)極少盜竊可能可能無(wú)(1)每天早晨做好實(shí)驗(yàn)室的清潔消毒工作。(2)工作人員要戴口罩、手套進(jìn)行操作。(3)實(shí)驗(yàn)中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(4)廢棄的標(biāo)本連同試管、蓋帽要用1000mg/L“84”消毒液浸泡,由工人統(tǒng)一清潔后進(jìn)行無(wú)害化處理。(5)實(shí)驗(yàn)中使用的吸頭、一次性塑料杯用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(6)標(biāo)本污染物表時(shí),應(yīng)立即消毒。(7)離心時(shí),發(fā)生試管破裂或標(biāo)本濺出,由操作者負(fù)責(zé)用有效消毒劑對(duì)離心機(jī)內(nèi)部進(jìn)行及時(shí)消毒處置。可能粘膜(眼結(jié)膜)可能可能可能經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能介)可能盜竊可能極少無(wú)(1)每天早晨開(kāi)紫外燈消毒空氣至少30分鐘,同時(shí)做好各物表、儀器的清潔消毒工作。(2)實(shí)驗(yàn)人員要戴手套、帽子進(jìn)行操作。當(dāng)估計(jì)會(huì)出現(xiàn)微生物和危險(xiǎn)物濺出時(shí)要戴好眼(3)操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。(4)可能產(chǎn)生致病性微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作如涂片、接種時(shí),應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作,并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。(5)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的各種標(biāo)本、菌種、培養(yǎng)基和其它廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室前必須滅活(高壓、浸泡),需運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室滅活的物品必須放在專用的密閉容器中。(6)操作過(guò)程中發(fā)生菌種污染物表時(shí),應(yīng)馬上采取措施進(jìn)行物表消毒。(7)當(dāng)發(fā)生致病性微生物氣溶膠污染時(shí),應(yīng)馬上進(jìn)行人員疏散,通知負(fù)責(zé)人到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行指導(dǎo)消毒。(8)對(duì)菌種的保存應(yīng)嚴(yán)格遵守菌種保存制度,嚴(yán)禁擅自保存各種國(guó)家法定傳染病菌株或毒株。(9)實(shí)驗(yàn)人員離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前要去除手套,確認(rèn)無(wú)污染或污染已排除,后方可洗手離去。(10)微生物、PCR實(shí)驗(yàn)室要設(shè)置紗窗、擋鼠板。三、特定實(shí)驗(yàn)活動(dòng)危害評(píng)估(見(jiàn)以下章節(jié)之各種病原體的危害評(píng)估)版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403本實(shí)驗(yàn)室共有技術(shù)人員6名,其中申請(qǐng)進(jìn)入BSL-2實(shí)驗(yàn)室6名。學(xué)士學(xué)位15名,2名全手冊(cè)并通過(guò)定期培訓(xùn)及考核成績(jī)合格,經(jīng)體檢無(wú)現(xiàn)患3名無(wú)其他患傳染性疾病的技術(shù)人員,健康狀態(tài)良好。本次評(píng)估本實(shí)驗(yàn)室共19項(xiàng)可能潛在危險(xiǎn)的實(shí)驗(yàn)活動(dòng),在實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)施過(guò)程中在無(wú)控制措施情況下可能產(chǎn)生的高危害度5項(xiàng),中度14項(xiàng),低度0項(xiàng);對(duì)危害發(fā)生的可能性分析,實(shí)驗(yàn)危害較大可能發(fā)生的有0項(xiàng),可能發(fā)生5項(xiàng),較少可能發(fā)生14項(xiàng);這些危害造成高度嚴(yán)重后果的5項(xiàng),后果嚴(yán)重性中度的14項(xiàng),后果嚴(yán)重性低度的0項(xiàng)。根據(jù)擬采取的預(yù)防控制措施后依然存在的殘留風(fēng)險(xiǎn)為高度0項(xiàng),中度0項(xiàng),低度危害19項(xiàng)。評(píng)估:邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科2010年4月3日邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403第二章人類(lèi)免疫缺陷病毒HIV的生物危害人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)病毒特異性地侵犯CD4*T淋巴細(xì)胞,造成機(jī)體為AIDS,病死率極高。到目前為止,還沒(méi)有找到一種治愈該病的方法。胞性又有嗜神經(jīng)性,主要感染CD4+T淋巴細(xì)胞,也能1.2HIV的抵抗力:HIV對(duì)外界抵抗力較弱,對(duì)熱敏感,56℃30分鐘能滅活。25%以上濃度的酒精即能滅活病毒,70%的效果最好;0.2%次氯酸鈉、5%~8%甲醛及有機(jī)氯溶液等均能滅活病毒。但對(duì)0.1%甲醛溶液、紫外線和x射線不敏天,在干燥的玻璃上可維持幾天。美國(guó)CDC證明干燥環(huán)境中的HIV濃度在幾小時(shí)內(nèi)降低90%~99%。2.1傳染源:病人和無(wú)癥狀病毒攜帶者是主要的傳染源,前者的傳染性最強(qiáng),2.2傳播途徑:世界公認(rèn)的傳播途徑有三種,即性傳播、血液傳播及母嬰傳播。2.3人群易感性:各個(gè)年齡均可感染,但同性戀和性亂交者,靜脈毒癮者,血友病患者,接受血、血制品或器官移植者,父母是HIV感染者的兒童,受感染邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403的危險(xiǎn)性比較大,屬高危人群,發(fā)病年齡主要為40歲以下的青狀年。3.臨床表現(xiàn)本病潛伏期較長(zhǎng),HIV-1侵入機(jī)體后2~10年左右可以發(fā)展為AIDS,HIV-24.實(shí)驗(yàn)?zāi)J郊拔:σ蛩胤治鲆虼藢?duì)于未知樣品的檢測(cè)具有潛在危險(xiǎn)性;而對(duì)于直接接觸HIV感染者或艾滋4.2HIV核酸檢測(cè):樣品有全血、血漿、組織和其他分泌物,有時(shí)還包括生物制品,此類(lèi)標(biāo)本具有潛在危險(xiǎn)性,對(duì)于HIV感染者或艾滋病病人的樣品,實(shí)驗(yàn)4.3HIV病毒培養(yǎng):培養(yǎng)物中含大量的HIV,對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員具有相當(dāng)高的傳染危險(xiǎn)性。應(yīng)該在P3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行操作,同時(shí)嚴(yán)格做好個(gè)人5.安全保障措施5.1個(gè)人防護(hù)5.1.1高標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)人保健對(duì)于減少感染的危險(xiǎn)性很重要。皮膚受損、生病都會(huì)5.1.2進(jìn)實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾,修剪長(zhǎng)的帶刺的指甲,以免刺破手套。5.1.3進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣,戴手套。如果接觸物傳染危險(xiǎn)性大,則應(yīng)戴雙邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號(hào):1/0生效日期:201004035.1.4離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前必須脫去隔離衣并洗手。5.1.5嚴(yán)禁在艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水、吸煙和化妝。5.1.6減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)利器的使用。5.2帶入和帶出實(shí)驗(yàn)室的物品5.2.1對(duì)所有帶入實(shí)驗(yàn)室的物品都應(yīng)進(jìn)行檢查。含有測(cè)試樣品的包裹應(yīng)在安全5.2.3污染或可能造成污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。5.3消毒方法5.3.1廢棄物缸:10%(V/V)次氯酸鈉(含10,000ppm有效氯)。5.3.2生物安全柜工作臺(tái)面和儀器表面:70%乙醇。5.3.3溢出物:10%次氯酸鈉(V/V)。5.3.4污染的臺(tái)面和器具:40%甲醛水溶液,也可以用過(guò)氧化氫或過(guò)氧乙酸邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(偶爾可由牛型或非洲型分枝桿菌)引起的一種細(xì)呼吸道感染(respiratortractinfection)是肺結(jié)核的主要傳染途徑(routesof肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽(yáng)性未經(jīng)治療者)。飛沬核(dropletnuclei)<10μ危害等級(jí)。結(jié)核分枝桿菌屬于3級(jí)危險(xiǎn)。3級(jí)危險(xiǎn)(對(duì)個(gè)體具有極大危害,對(duì)群體具有較大的危害性):指有特殊危(一)技術(shù)操作可能導(dǎo)致的感染及其預(yù)防措施。1.接種:應(yīng)使用無(wú)彈力的鉑絲接種環(huán),結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩2.混勻:吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡,應(yīng)沿容器壁排出。3.研磨:最好使用組織研磨器,乳缽易產(chǎn)生氣溶膠。4.移液:吸管上端的棉花松緊要適度,吸液時(shí)要從管底吸取,吹出時(shí)要輕5.開(kāi)封:要避免壓力和氣流的急劇變化。6.離心:離心管套底墊要完好,使用匹配的管、套、離心頭,加蓋。7.注射:做好個(gè)人防護(hù),正確使用注射器。8.搬運(yùn):室內(nèi)移動(dòng)要避免滑落,移出室外要有堅(jiān)實(shí)密閉的外包裝。(二)技術(shù)保障1.雙人原則,不允許單人操作1、2類(lèi)病原。2.入口處應(yīng)有危險(xiǎn)警示標(biāo)識(shí),并標(biāo)明所操作的微生物的種類(lèi)。4.完備的管理措施,技術(shù)操作規(guī)范。版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室工作人員,在分枝桿菌檢驗(yàn)過(guò)程中,會(huì)接觸到各種潛在感染源標(biāo)本和各種危險(xiǎn)物,特別是許多操作易產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠。含有結(jié)核分枝桿菌的微滴核(1-5微米)通過(guò)呼吸進(jìn)入人體肺泡,可以黏附在肺泡內(nèi)生長(zhǎng)繁殖。因此,首先要對(duì)實(shí)驗(yàn)室中生物危險(xiǎn)物產(chǎn)生的途徑和存在的地點(diǎn)有充分的認(rèn)識(shí),以便明確生物安全防護(hù)的環(huán)節(jié)。(一)分枝桿菌存在的地點(diǎn)1、各種臨床標(biāo)本,通常是痰,胃或支氣管灌洗液、腦脊液、尿液等。2、被污染的操作臺(tái)、器械、儀器、試劑等。3、收集的結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌菌株等。4、細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)室的部分區(qū)域。(二)產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠1、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可疑肺結(jié)核患者痰標(biāo)本的采集。2、樣本的制備和涂片的火焰固定。3、分離培養(yǎng)或接種培養(yǎng)物。4、用火焰燒灼接種環(huán)。5、使用移液器混合培養(yǎng)物。6、培養(yǎng)管或培養(yǎng)瓶中含有培養(yǎng)物的滴落物。7、溢出的分枝桿菌懸浮液。8、高速混合含有分枝桿菌的液體。9、轉(zhuǎn)移液態(tài)培養(yǎng)物和上清液,或培養(yǎng)液、上清液的傾倒。10、離心過(guò)程中離心管的破碎。11、用做原代培養(yǎng)所需的組織勻漿。安全防護(hù)(一)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程,任何時(shí)侯都要警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)后方可上崗。(二)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入,減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。完成實(shí)驗(yàn)工作離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室,要關(guān)好門(mén)窗。(三)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)避免攜帶非必需物品。(四)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,工作人員應(yīng)穿著工作服,操作時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)隔離衣、口罩、帽子和手套,長(zhǎng)發(fā)者應(yīng)將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。(五)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中絕對(duì)禁止吸煙、飲食等,不要以手撫頭面部等。(六)試驗(yàn)前須開(kāi)啟紫外線燈對(duì)實(shí)驗(yàn)室和操作區(qū)域進(jìn)行照射消毒1小時(shí)以上;試驗(yàn)結(jié)束后,立即開(kāi)啟紫外燈進(jìn)行照射消毒2小時(shí)以上。(七)任何試驗(yàn)的開(kāi)始和結(jié)束后,操作人員要用70%酒精浸泡雙手或仔細(xì)擦后,用清潔劑或清水洗凈。(八)每次試驗(yàn)結(jié)束后,必須清理好實(shí)驗(yàn)臺(tái),并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。(九)實(shí)驗(yàn)室中的生物危險(xiǎn)品要根據(jù)檢查項(xiàng)目和性質(zhì)不同,局限在相應(yīng)的試驗(yàn)區(qū)間,不得隨意將其帶到其它的實(shí)驗(yàn)室。版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(十)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何微生物的樣本,廢棄物都必須經(jīng)高溫高壓滅菌后,方可按一般垃圾處理。安全保障(一)首先各級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按等級(jí)要求完善實(shí)驗(yàn)設(shè)施,如簡(jiǎn)易安全柜內(nèi)的抽氣排風(fēng)功能、紫外燈消毒功能,生物安全柜維護(hù)與除菌濾膜定期更換等。(二)實(shí)驗(yàn)室采集病人痰標(biāo)本時(shí)應(yīng)在戶外進(jìn)行,避免因病人咳漱造成室內(nèi)氣(三)普通實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意氣流方向,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量避免強(qiáng)氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠(如:涂片、染色過(guò)程中)。(四)細(xì)菌的分離培養(yǎng)、菌種開(kāi)封、轉(zhuǎn)種、研磨、稀釋等操作,各級(jí)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)在簡(jiǎn)易安全柜或生物安全柜中進(jìn)行。(五)使用接種環(huán)進(jìn)行操作時(shí),接種環(huán)應(yīng)在工作燈的內(nèi)焰中燃燒,以避免菌液或菌塊飛濺。(六)稀釋菌液時(shí),吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部,小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。(七)使用注射器加樣時(shí),用過(guò)的針頭切勿再重新入套或拔開(kāi)注射器與針頭,應(yīng)直接放入銳器收集器,以免劃破皮膚造成接種感染。(八)菌株庫(kù)要設(shè)專人管理,并按照國(guó)家微生物菌毒種管理辦法執(zhí)行。(九)進(jìn)行毒菌操作過(guò)程中,不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門(mén)柄、儀器或毒菌區(qū)以外區(qū)域,避免由于粗心擴(kuò)大污染范圍。(十)試驗(yàn)結(jié)束后,操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品,能夠高壓消毒的必須高壓消毒,不能進(jìn)行高壓消毒的設(shè)備、儀器,應(yīng)使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間消毒。(十一)實(shí)驗(yàn)中發(fā)生意外污染情況,應(yīng)立即通知主管人員并做好處理污染物和相應(yīng)區(qū)域的準(zhǔn)備,不得擅自采用其它禁止的方法進(jìn)行消毒處理。(十二)實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)制定規(guī)章和程序,只有告知潛在風(fēng)險(xiǎn)并符合進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室特殊要求(如,經(jīng)過(guò)免疫接種)的人,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。(十三)操作致病性微生物時(shí),實(shí)驗(yàn)室入口處應(yīng)貼有生物危險(xiǎn)標(biāo)志,并顯示以下信息:有關(guān)病原、生物安全級(jí)別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號(hào)碼、在實(shí)驗(yàn)室中必須佩帶的個(gè)人防護(hù)設(shè)施、出實(shí)驗(yàn)室所要求的程序。(十四)實(shí)驗(yàn)室主任為實(shí)驗(yàn)室人員特別制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序或生物安全手冊(cè)中,應(yīng)包括生物安全程序。對(duì)于有特殊風(fēng)險(xiǎn)的人員,要求閱讀并在工作及程序上遵照?qǐng)?zhí)行。(十五)實(shí)驗(yàn)室主任保證實(shí)驗(yàn)及其輔助人員接受適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn),包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險(xiǎn)、防止暴露的必要措施和暴露評(píng)估程序。(十六)實(shí)驗(yàn)室所用任何個(gè)人防護(hù)裝備應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保具備足夠的有適當(dāng)防護(hù)水平的清潔防護(hù)服供使用。還應(yīng)穿戴其它的個(gè)人防護(hù)裝備,如手套、防護(hù)鏡、面具、頭部面部保護(hù)罩等。(十七)處理樣本的過(guò)程中易產(chǎn)生高危害氣溶膠時(shí),要求同時(shí)使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403防護(hù)裝備、生物安全柜和/或其它物理防護(hù)設(shè)備。如可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠,應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳锇踩裰胁僮鳌?十八)實(shí)驗(yàn)用鞋應(yīng)舒適,鞋底防滑。應(yīng)用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類(lèi)。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時(shí)可穿一次性防水鞋套。在實(shí)驗(yàn)室的特殊區(qū)域(例如有防靜電要求的區(qū)域)或BSL-3和BSL-4實(shí)驗(yàn)室要求使用專用鞋(例如一次性或橡膠靴子)。結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室廢物處理一、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理的目的:(一)將操作、收集、運(yùn)輸、處理及處置廢棄物的危險(xiǎn)減至最??;(二)將實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境的有害作用減至最小。二、實(shí)驗(yàn)室污物處理及消毒(一)實(shí)驗(yàn)室含有生物危險(xiǎn)物的臨床標(biāo)本及被污染的一次性用品,試驗(yàn)完成后,應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上,再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。(二)可重復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)用品及器材,完成實(shí)驗(yàn)后,應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上后,再交有關(guān)人員進(jìn)行高壓消毒和煮沸洗(三)實(shí)驗(yàn)用的試管、吸管、注射器,須裝在加蓋不漏的容器內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后取出。(四)培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)室垃圾,在丟棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間照射處理。不允許積存垃圾和實(shí)驗(yàn)室廢棄物。已裝滿的容器應(yīng)定期運(yùn)走。在去污染或最終處置之前,應(yīng)存放在指定的安全地方,通常在實(shí)驗(yàn)室區(qū)內(nèi)。(五)實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)置于適當(dāng)?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)臒o(wú)害化處理后排放,應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)的要(六)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如標(biāo)本或含標(biāo)本的前消化處理液被打翻污染了操作臺(tái)或地面,應(yīng)以吸滿70%酒精的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū),15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去。(七)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)未經(jīng)消毒的污水,禁止直接排入公共排水系統(tǒng),更不允許混入居民生活垃圾。意外事故的處理(一)如果發(fā)生意外,必須立即通知實(shí)驗(yàn)室主管人員,并在有關(guān)人員的指導(dǎo)監(jiān)督下對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理,絕對(duì)禁止未經(jīng)報(bào)告而私自對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)給予非規(guī)范的(二)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如污染物濺落到身體表面,或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理,更換被污染的實(shí)驗(yàn)服,皮膚表面用消毒液清洗,傷口以碘酒或酒精消毒,眼睛用無(wú)菌生理鹽水沖洗。(三)如果發(fā)生菌液溢出,含菌種的培養(yǎng)管破碎等,造成中、小面積污染,可用比污染面積大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域,邊緣用脫脂棉圍住,向紗布傾倒5%苯酚溶液或70%的酒精,浸泡2小時(shí)以上(其間適量加溶液防止干燥),再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時(shí)以上;被污染的器械、容器等立即浸泡邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403于70%酒精中2小時(shí)以上,實(shí)驗(yàn)完成后再進(jìn)行高壓消毒處理。(四)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,對(duì)污染區(qū)域進(jìn)行紫外燈照射消毒過(guò)夜;第二天對(duì)污染區(qū)進(jìn)行24小時(shí)封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法:5ml乙醛+2g高錳酸鉀/m3空間)。(五)絕對(duì)禁止使用的事故處理方法:1.任何有可能造成污染面積擴(kuò)大的去污方法,如使用70%乙醇或甲酚皂液3.使用消毒效果未經(jīng)證實(shí)的消毒劑進(jìn)行消毒。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403【流行病學(xué)】病人與帶菌者是霍亂的傳染源。典型病人的吐瀉物含菌量甚多,每ml糞便可含107~109弧菌,這對(duì)疾病傳播起重要作用。輕型病人易被忽略,健康帶菌者不易檢出,兩者皆為危險(xiǎn)傳染源。潛伏期帶菌者尚無(wú)吐瀉,恢復(fù)期帶菌者排菌時(shí)間一般不長(zhǎng),兩者作為傳染源的意義居次要地位。本病主要借水傳播,污染的食品和手以及蒼蠅等,對(duì)傳播疾病也起一定作用。男女老幼均對(duì)本病易感。在新感染區(qū),成人比兒童易受感染;在地方流行區(qū),兒童發(fā)病率較成人為高,后者對(duì)感染的抵抗力隨著對(duì)霍亂弧菌抗體滴度的升高而增加。病后丙次發(fā)生嚴(yán)重感染者少見(jiàn)。實(shí)驗(yàn)感染霍亂弧菌的志愿者,對(duì)第二次感染的具高度抵抗力,其時(shí)間至少可維持3年。古典霍亂弧菌初次感染的免疫力能(100%保護(hù)力)較埃爾托弧菌者(90%保護(hù)力)為強(qiáng)?;魜y患者雖然對(duì)新感染的保護(hù)免疫可達(dá)數(shù)年,但對(duì)霍亂毒素和細(xì)菌的腸抗體僅維持一致數(shù)月?!疚:Τ潭确旨?jí)】微生物按其是否致病、致病力強(qiáng)弱、危害人體的嚴(yán)重性、傳染性的大小、臨邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403近人群的抵抗力、有無(wú)免疫制劑和特效治療藥物等綜合評(píng)價(jià),可分為四個(gè)不同的危害等級(jí)。霍亂弧菌屬于3級(jí)危險(xiǎn)。3級(jí)危險(xiǎn)(對(duì)個(gè)體具有極大危害,對(duì)群體具有較大的危害性):指有特殊危險(xiǎn)的致病菌。感染后癥狀較重,并可能危及生命,或者缺乏有效的預(yù)防方法、發(fā)病后不易治療的微生物?!緦?shí)驗(yàn)室感染的原因及預(yù)防】(一)技術(shù)操作可能導(dǎo)致的感染及其預(yù)防措施。1.接種:應(yīng)使用無(wú)彈力的鉑絲接種環(huán),結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩散,酒精燈燒灼時(shí)要特別注意。2.混勻:吸管吸吹菌液時(shí)不要產(chǎn)生氣泡,應(yīng)沿容器壁排出。3.研磨:最好使用組織研磨器,乳缽易產(chǎn)生氣溶膠。4.移液:吸管上端的棉花松緊要適度,吸液時(shí)要從管底吸取,吹出時(shí)要輕緩,不要全部吹凈,以免產(chǎn)生氣泡,形成氣溶膠。5.開(kāi)封:要避免壓力和氣流的急劇變化。6.離心:離心管套底墊要完好,使用匹配的管、套、離心頭,加蓋。7.注射:做好個(gè)人防護(hù),正確使用注射器。8.搬運(yùn):室內(nèi)移動(dòng)要避免滑落,移出室外要有堅(jiān)實(shí)密閉的外包裝。(二)技術(shù)保障1.雙人原則,不允許單人操作1、2類(lèi)病原。2.入口處應(yīng)有危險(xiǎn)警示標(biāo)識(shí),并標(biāo)明所操作的微生物的種類(lèi)。3.培訓(xùn)考核上崗,掌握相關(guān)技術(shù)操作要領(lǐng),熟悉規(guī)章制度,適應(yīng)工作環(huán)境。4.完備的管理措施,技術(shù)操作規(guī)范。5.良好的工作行為可降低生物危害風(fēng)險(xiǎn)?!景踩雷o(hù)】(一)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程,實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)后方可上崗。(二)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格限制非實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入,減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外交叉生物污染。完成實(shí)驗(yàn)工作離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室,要關(guān)好門(mén)窗。(三)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)避免攜帶非必需物品。(四)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,工作人員應(yīng)穿著工作服,操作時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)隔離衣、口罩、帽子和手套,長(zhǎng)發(fā)者應(yīng)將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。(五)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中絕對(duì)禁止吸煙、飲食等,不要以手撫頭面部等。(六)試驗(yàn)前須開(kāi)啟紫外線燈對(duì)實(shí)驗(yàn)室和操作區(qū)域進(jìn)行照射消毒1小時(shí)以上;試驗(yàn)結(jié)束后,立即開(kāi)啟紫外燈進(jìn)行照射消毒2小時(shí)以上。(七)任何試驗(yàn)的開(kāi)始和結(jié)束后,操作人員要用70%酒精浸泡雙手或仔細(xì)擦后,用清潔劑或清水洗凈。(八)每次試驗(yàn)結(jié)束后,必須清理好實(shí)驗(yàn)臺(tái),并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。(九)實(shí)驗(yàn)室中的生物危險(xiǎn)品要根據(jù)檢查項(xiàng)目和性質(zhì)不同,局限在相應(yīng)的試驗(yàn)區(qū)間,不得隨意將其帶到其它的實(shí)驗(yàn)室。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-04版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(十)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)任何微生物的樣本,廢棄物都必須經(jīng)高溫高壓滅菌后,方可按一般垃圾處理?!景踩U稀?一)首先各級(jí)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按等級(jí)要求完善實(shí)驗(yàn)設(shè)施,如簡(jiǎn)易安全柜內(nèi)的抽氣排風(fēng)功能、紫外燈消毒功能,生物安全柜維護(hù)與除菌濾膜定期更換等。(二)實(shí)驗(yàn)室采集病人標(biāo)本時(shí)要格外注意。(三)普通實(shí)驗(yàn)室應(yīng)注意氣流方向,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量避免強(qiáng)氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠(如:涂片、染色過(guò)程中)。(四)細(xì)菌的分離培養(yǎng)、菌種開(kāi)封、轉(zhuǎn)種、研磨、稀釋等操作,各級(jí)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)在簡(jiǎn)易安全柜或生物安全柜中進(jìn)行。(五)使用接種環(huán)進(jìn)行操作時(shí),接種環(huán)應(yīng)在工作燈的內(nèi)焰中燃燒,以避免菌液或菌塊飛濺。(六)稀釋菌液時(shí),吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部,小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。(七)使用注射器加樣時(shí),用過(guò)的針頭切勿再重新入套或拔開(kāi)注射器與針頭,應(yīng)直接放入銳器收集器,以免劃破皮膚造成接種感染。(八)菌株庫(kù)要設(shè)專人管理,并按照國(guó)家微生物菌毒種管理辦法執(zhí)行。(九)進(jìn)行毒菌操作過(guò)程中,不要穿戴巳經(jīng)污染的防護(hù)性手套觸摸門(mén)柄、儀器或毒菌區(qū)以外區(qū)域,避免由于粗心擴(kuò)大污染范圍。(十)試驗(yàn)結(jié)束后,操作過(guò)程中所有可能與生物危險(xiǎn)物接觸或被污染的試驗(yàn)器械和物品,能夠高壓消毒的必須高壓消毒,不能進(jìn)行高壓消毒的設(shè)備、儀器,應(yīng)使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間消毒。(十一)實(shí)驗(yàn)中發(fā)生意外污染情況,應(yīng)立即通知主管人員并做好處理污染物和相應(yīng)區(qū)域的準(zhǔn)備,不得擅自采用其它禁止的方法進(jìn)行消毒處理。(十二)實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)制定規(guī)章和程序,只有告知潛在風(fēng)險(xiǎn)并符合進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室特殊要求(如,經(jīng)過(guò)免疫接種)的人,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。(十三)操作致病性微生物時(shí),實(shí)驗(yàn)室入口處應(yīng)貼有生物危險(xiǎn)標(biāo)志,并顯示以下信息:有關(guān)病原、生物安全級(jí)別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號(hào)碼、在實(shí)驗(yàn)室中必須佩帶的個(gè)人防護(hù)設(shè)施、出實(shí)驗(yàn)室所要求的程序。(十四)實(shí)驗(yàn)室主任為實(shí)驗(yàn)室人員特別制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序或生物安全手冊(cè)中,應(yīng)包括生物安全程序。對(duì)于有特殊風(fēng)險(xiǎn)的人員,要求閱讀并在工作及程序上遵照?qǐng)?zhí)行。(十五)實(shí)驗(yàn)室主任保證實(shí)驗(yàn)及其輔助人員接受適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn),包括和工作有關(guān)的可能存在的風(fēng)險(xiǎn)、防止暴露的必要措施和暴露評(píng)估程序。(十六)實(shí)驗(yàn)室所用任何個(gè)人防護(hù)裝備應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保具備足夠的有適當(dāng)防護(hù)水平的清潔防護(hù)服供使用。還應(yīng)穿戴其它的個(gè)人防護(hù)裝備,如手套、防護(hù)鏡、面具、頭部面部保護(hù)罩等。(十七)處理樣本的過(guò)程中易產(chǎn)生高危害氣溶膠時(shí),要求同時(shí)使用適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備、生物安全柜和/或其它物理防護(hù)設(shè)備。如可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠,邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-04版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403應(yīng)在適當(dāng)?shù)纳锇踩裰胁僮鳌?十八)實(shí)驗(yàn)用鞋應(yīng)舒適,鞋底防滑。應(yīng)用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類(lèi)。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時(shí)可穿一次性防水鞋套。在實(shí)驗(yàn)室的特殊區(qū)域(例如有防靜電要求的區(qū)域)或BSL-3和BSL-4實(shí)驗(yàn)室要求使用專用鞋(例如一次性或橡膠靴子)。【實(shí)驗(yàn)室廢物處理】一、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理的目的:(一)將操作、收集、運(yùn)輸、處理及處置廢棄物的危險(xiǎn)減至最小;(二)將實(shí)驗(yàn)室廢棄物對(duì)環(huán)境的有害作用減至最小。二、實(shí)驗(yàn)室污物處理及消毒(一)實(shí)驗(yàn)室含有生物危險(xiǎn)物的臨床標(biāo)本及被污染的一次性用品,試驗(yàn)完成后,應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上,再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。(二)可重復(fù)使用的實(shí)驗(yàn)用品及器材,完成實(shí)驗(yàn)后,應(yīng)在操作臺(tái)或?qū)嶒?yàn)區(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時(shí)以上后,再交有關(guān)人員進(jìn)行高壓消毒和煮沸洗(三)實(shí)驗(yàn)用的試管、吸管、注射器,須裝在加蓋不漏的容器內(nèi),經(jīng)高壓滅菌后取出。(四)培養(yǎng)物或?qū)嶒?yàn)室垃圾,在丟棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長(zhǎng)時(shí)間照射處理。不允許積存垃圾和實(shí)驗(yàn)室廢棄物。已裝滿的容器應(yīng)定期運(yùn)走。在去污染或最終處置之前,應(yīng)存放在指定的安全地方,通常在實(shí)驗(yàn)室區(qū)內(nèi)。(五)實(shí)驗(yàn)室廢棄物應(yīng)置于適當(dāng)?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)臒o(wú)害化處理后排放,應(yīng)符合國(guó)家相關(guān)的要(六)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如標(biāo)本或含標(biāo)本的前消化處理液被打翻污染了操作臺(tái)或地面,應(yīng)以吸滿70%酒精的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū),15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去。(七)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)未經(jīng)消毒的污水,禁止直接排入公共排水系統(tǒng),更不允許混入居民生活垃圾?!疽馔馐鹿实奶幚怼?一)如果發(fā)生意外,必須立即通知實(shí)驗(yàn)室主管人員,并在有關(guān)人員的指導(dǎo)監(jiān)督下對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行處理,絕對(duì)禁止未經(jīng)報(bào)告而私自對(duì)出事現(xiàn)場(chǎng)給予非規(guī)范的(二)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如污染物濺落到身體表面,或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)工作進(jìn)行緊急處理,更換被污染的實(shí)驗(yàn)服,皮膚表面用消毒液清洗,傷口以碘酒或酒精消毒,眼睛用無(wú)菌生理鹽水沖洗。(三)如果發(fā)生菌液溢出,含菌種的培養(yǎng)管破碎等,造成中、小面積污染,可用比污染面積大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域,邊緣用脫脂棉圍住,向紗布傾倒5%苯酚溶液或70%的酒精,浸泡2小時(shí)以上(其間適量加溶液防止干燥),再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時(shí)以上;被污染的器械、容器等立即浸泡于70%酒精中2小時(shí)以上,實(shí)驗(yàn)完成后再進(jìn)行高壓消毒處理。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(四)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染,應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,對(duì)污染區(qū)域進(jìn)行紫外燈照射消毒過(guò)夜;第二天對(duì)污染區(qū)進(jìn)行24小時(shí)封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法:5ml乙醛+2g高錳酸鉀/m3空間)。(五)絕對(duì)禁止使用的事故處理方法:1.任何有可能造成污染面積擴(kuò)大的去污方法,如使用70%乙醇或甲酚皂液3.使用消毒效果未經(jīng)證實(shí)的消毒劑進(jìn)行消毒。4.使用低濃度的消毒劑和紫外燈進(jìn)行短時(shí)間、長(zhǎng)距離的照射。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-05版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403不強(qiáng),來(lái)源常不明。20世紀(jì)曾有4次流感大流行。流感流行時(shí)造成的經(jīng)濟(jì)損失流感病毒在外界的抵抗力弱,在56℃30分鐘條件下易被滅活,在室溫下傳染性很快喪失,100℃1分鐘即被滅活,但在0~4℃能存活數(shù)周,在-20℃真空1.實(shí)驗(yàn)?zāi)J?.1流感病毒的分離培養(yǎng)1.2流感病毒血清學(xué)診斷血凝抑制試驗(yàn)(HI法)或微量中和法。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-05版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403必須采集雙份血清,疾病發(fā)作時(shí)頭3天立即采集(急性期血清),發(fā)病后2-3周采集(恢復(fù)期血清),在同一條件下進(jìn)行HI測(cè)定,在恢復(fù)期血清HI抗體滴度比急性期的高4倍或以上,就可加以確診。1.3流感病毒抗體檢測(cè)1.4流感病毒核酸檢測(cè)2.實(shí)驗(yàn)中危害因素分析蚊蟲(chóng)傳播等多種途徑。操作具有高致病性的甲性H5和H7兩亞型毒株必須在P3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行操作。特別是一些甲性流感毒株(H5N1,H9N2)通過(guò)何種途徑傳染3.安全措施3.1嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)室使用和安全操作技術(shù)規(guī)程及各個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的操作技術(shù)規(guī)程操3.2加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)。采用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的口罩、防護(hù)服等個(gè)人防護(hù)用品,3.3強(qiáng)化離心、移液等環(huán)節(jié)的標(biāo)準(zhǔn)操作。3.4抗體檢測(cè)用血清標(biāo)本可先以56℃30分鐘處理。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-06版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403梅毒螺旋體學(xué)名為蒼白密螺旋體(Treponemapallidum)是梅毒病的病梅毒螺旋體(Tre-ponemapalidum)1905年由法國(guó)科學(xué)家Schaudinn與Hoffmanu發(fā)現(xiàn)并報(bào)告的。梅毒螺旋體(如圖)是小而纖細(xì)的螺旋狀微生物,長(zhǎng)度為5-20nm,平均約8-10um,直徑小于0.2nm,有6—12個(gè)螺旋;肉眼在其前端有4-6根鞭毛樣細(xì)纖維束,其末端呈卷曲狀。在未受外界因素的影響時(shí),螺旋是規(guī)則的。因其透明不易著色,又稱之為蒼白螺旋體。梅毒螺旋體是厭氧菌,在體內(nèi)可長(zhǎng)期生存繁殖,只要條件適宜,便以橫斷裂方式一分蘇水、酒精、1:1000的高錳酸鉀液等)很容易將它殺死,陽(yáng)光照射和干燥環(huán)境都能很快使它死亡。梅毒螺旋體在人體外生存一般超不過(guò)1~2個(gè)小時(shí)。在缺氧的環(huán)境下它能生存數(shù)天,在潮濕的衣服上也能存活數(shù)小時(shí),在血庫(kù)中一般能存活24小時(shí)。梅毒螺旋體不耐高溫,40℃~60℃時(shí)2~3分鐘就能死亡,100℃時(shí)則即刻死亡。可以針對(duì)其弱點(diǎn)將梅毒螺旋體消滅。如將衣物放都能殺滅梅毒螺旋體,阻止它的傳播。梅毒由梅毒螺旋體(蒼白螺旋體)生多種多樣的癥狀和體征,病變幾乎能累及全身各個(gè)臟器。梅毒通過(guò)性行為可以在人群中相互傳播,并可以由母親傳染給者通過(guò)接吻、哺乳、接有傳染性損害病人的日常用品而傳染。在性傳播疾病(一)檢查螺旋體采取初期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的滲出物等,用暗視野或墨汁顯(二)血清學(xué)檢查1.非螺旋體抗原試驗(yàn):是用正常牛心肌的心類(lèi)脂(Cardiolipin)作為抗原,檢測(cè)病人血清中的反應(yīng)素。國(guó)際上常用性病研究實(shí)驗(yàn)室(UDRL)的玻片試驗(yàn)法;該法是一種簡(jiǎn)單的玻片沉淀試驗(yàn),試劑及對(duì)照已標(biāo)準(zhǔn)化。另外,還可用不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR),其抗原是UDRL抗原的改良,敏感性和特異性與UDRL相似。反應(yīng)素在第一期梅毒病變出現(xiàn)后1~2周就可測(cè)出,第二期陽(yáng)性率幾乎達(dá)100,第三期陽(yáng)性率較低。本試驗(yàn)所用抗原是非特異的,檢測(cè)的抗體時(shí)應(yīng)排除假陽(yáng)性反應(yīng),結(jié)合病史,臨床表現(xiàn)及多次的試驗(yàn)版本/修訂號(hào):1/0生效日期:201004032.螺旋體抗原試驗(yàn):抗原為梅毒旋體,以檢測(cè)血清中的特異性抗體,該試驗(yàn)特異性高,目前常用下述兩種方法。(1)熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA~ABS):為間接熒光抗體法,其敏感性及特異性均高,常用于梅毒的早期診斷。(2)梅毒螺旋體制運(yùn)試驗(yàn)(TPI):用來(lái)檢測(cè)血清中是否存在抑制螺旋體活動(dòng)的特異性抗體。用活梅毒螺旋體(Nichol株)加病人新鮮血清,35℃培養(yǎng)16小時(shí),同法作正常血清對(duì)照,然后用暗視野顯微鏡觀察活動(dòng)的螺旋體數(shù)目,如試驗(yàn)標(biāo)本活動(dòng)的螺旋體數(shù)目小于或等于對(duì)照血清標(biāo)本內(nèi)的40%,即為陽(yáng)(1)高標(biāo)準(zhǔn)的個(gè)人保健對(duì)于減少感染的危險(xiǎn)性很重要。皮膚受損、串病都會(huì)增加(7)離心:離心管套底墊要完好,使用匹配的管、套、離心頭,加蓋,離心時(shí)要版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(1)廢棄物缸:10%(V/V)次氯酸鈉(含10,000ppm有效氯)。(3)溢出物:10%次氯酸鈉(V/V)。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-07版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403膜表面有三種糖蛋白:刺突糖蛋白(S,SpikeProtein,是受體結(jié)合位點(diǎn)、溶細(xì)胞作用和主要抗原位點(diǎn));小包膜糖蛋白(E,EnvelopeProtein,較小,與包膜結(jié)合的蛋白);膜糖蛋白(M,MembraneProtein,負(fù)責(zé)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸、新生病毒出芽釋放與病毒外包膜的形成)。少數(shù)種類(lèi)還有血節(jié)段單鏈(+)RNA,長(zhǎng)27-31kd,是RNA病毒中最長(zhǎng)的RNA核酸鏈,具有正鏈RNA特有的重要結(jié)構(gòu)特征:即RNA鏈5’端有甲基化“帽子”,3’端有P身可以發(fā)揮翻譯模板作用的重要結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),而省去了RNA-DNA-RNA變了,氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)隨之發(fā)生變化,使其抗原性發(fā)生了變化。而抗原1RNApolymerase),它進(jìn)入宿主細(xì)胞后,直接以病毒基因組RNA為翻譯模板,表達(dá)出病毒RNA聚合酶。再利用這個(gè)酶完成負(fù)鏈亞基因組RNA(sub-ge切過(guò)程,而是直接通過(guò)RNA聚合酶和一些轉(zhuǎn)錄因子,以一種“不連續(xù)轉(zhuǎn)錄” (discontinuoustranscription)的機(jī)制,通過(guò)識(shí)別特定的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列 (transcriptionregulatingsequences,TSR),有選擇性的從負(fù)義鏈RN組RNA復(fù)制完成后,將在宿主細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)處裝配(assembly)生成新的冠狀病毒顆粒,并通過(guò)高爾基體分泌至細(xì)胞外,完成到目前為止,大約有15種不同冠狀病毒株被發(fā)現(xiàn),能夠感染多種哺乳冠狀病毒引起的人類(lèi)疾病主要是呼吸系統(tǒng)感染(包括嚴(yán)重急性呼吸綜合征,SARS)。該病毒對(duì)溫度很敏感,在33℃時(shí)生長(zhǎng)良好,但3到抑制。由于這個(gè)特性,冬季和早春是該病毒疾病的流行季節(jié)。冠狀病毒是成人普通感冒的主要病原之一,兒童感染率較高,主要是上呼吸道感染,一邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-07版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403般很少波及下呼吸道。另外,還可引起嬰兒和新生兒急性腸胃炎,主要癥狀是水樣大便、發(fā)熱、嘔吐,每天可拉10余次,嚴(yán)重者甚至出現(xiàn)血水樣便,極少數(shù)情況下也引起神經(jīng)系統(tǒng)綜合征。病毒的生長(zhǎng)多位于上皮細(xì)胞內(nèi),也可以感染肝臟、腎、心臟和眼睛,在另外的一些細(xì)胞類(lèi)型(例如巨噬細(xì)胞)中也能生長(zhǎng)。目前人類(lèi)冠狀病毒還沒(méi)有合適的可作研究用的動(dòng)物模型(人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型(animalmodelofhumandisease)是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類(lèi)疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。動(dòng)物疾病模型主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)(包括新藥篩選)研究),因此對(duì)冠狀病毒的分離工作難度很大,需用人肝臟細(xì)胞、氣管及鼻黏膜細(xì)胞,經(jīng)器官培養(yǎng)才能分離得到。增殖病毒也要用上述材料,亦很困難。冠狀病毒的血清型和抗原變異性還不明確。冠狀病毒可以發(fā)生重復(fù)感染,表明其存在有多種血清型(至少有4種已知)并有抗原的變異,其免疫較困難,目前尚無(wú)特異的預(yù)防和治療藥物。3、傳播途徑冠狀病毒通過(guò)呼吸道分泌物排出體外,經(jīng)口液、噴嚏、接觸傳染,并通過(guò)空氣飛沫傳播,感染高峰在秋冬和早春。病毒對(duì)熱敏感,紫外線、來(lái)蘇水、0.1%過(guò)氧乙酸及1%克遼林等都可在短時(shí)間內(nèi)將病毒殺死。4、預(yù)防及安全措施對(duì)其預(yù)防有特異性預(yù)防,即針對(duì)性預(yù)防措施(疫苗,疫苗的研制是有可能的,但需要時(shí)間較長(zhǎng),解決病毒繁殖問(wèn)題是其難題)和非特異性預(yù)防措施 (即預(yù)防春季呼吸道傳染疾病的措施,如保暖、洗手、通風(fēng)、勿過(guò)度疲勞及勿接觸病人,少去人多的公共場(chǎng)所等)。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403第一節(jié)流行性乙型腦炎病毒簡(jiǎn)稱乙腦病毒。流行性乙型腦炎的病原體。呈球狀,核疆、西藏、青海外,全國(guó)各地均有病例發(fā)生,年發(fā)病人數(shù)2.5萬(wàn),病死率10%,大約15%的患者留有不同程度的后遺癥。乙腦病毒為球形,直徑40nm,內(nèi)有衣殼蛋白(C)與核酸構(gòu)成的核心,外披以含脂質(zhì)的囊膜,表面有囊膜糖蛋白(E)刺端依次編碼結(jié)構(gòu)蛋白C、M、E以及非結(jié)構(gòu)蛋白NS1—NS5,病毒RNA在細(xì)胞漿內(nèi)直接起mRNA作用,翻譯出結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白,在胞漿粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)裝配邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403乙腦病毒囊膜糖白具有血凝特性,能凝集鵝、鴿、雛雞紅細(xì)胞,在pH6.2~6.4條件下凝集滴度高。病毒血凝素與紅細(xì)胞結(jié)合若將感染病毒的腦組織加入50%甘油緩沖鹽水中貯存在4℃,其病毒活力可維持?jǐn)?shù)月。乙醚、1:1000去氧膽酸鈉以及常用消毒劑均可滅活病毒。在酸性條件下蝙蝠,受染蝙蝠在10℃,不產(chǎn)生病毒血癥,可持續(xù)存在達(dá)3個(gè)月之外,當(dāng)蝙蝠返回室溫環(huán)境3天后,出現(xiàn)病毒血癥,構(gòu)成蚊一蝙蝠明顯癥狀或只發(fā)生輕微的前驅(qū)癥狀。約經(jīng)4~7日潛伏期后,在體內(nèi)增殖的大量邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(0.01%),這與病毒的毒力,侵入機(jī)體內(nèi)數(shù)量及感染者的免疫力有關(guān)。流行區(qū)成人大多數(shù)都有一定免疫力,多為隱性感染,10歲以下兒童及非流行區(qū)成人缺乏本病病后4~5天可出現(xiàn)血凝抑制抗體,2~4周達(dá)高峰,可維持一年左右。補(bǔ)體給合抗體在發(fā)病2~3周后方可檢出,約存在半年。中和抗體約在病后1周出現(xiàn),于5年內(nèi)維持高水平,甚至維持終生。流行區(qū)人群每年不斷受到帶蚊叮咬,逐漸增強(qiáng)免疫力,抗體陽(yáng)性率常隨年齡而增高,例如北京市20歲以上成年人90%血清中含有中和抗體。因此本病多見(jiàn)于10歲以下的兒童,但近些年—PCR檢測(cè)標(biāo)本中的病毒核酸片段,一般6個(gè)小時(shí)內(nèi)可初步報(bào)告結(jié)果。常規(guī)血滴度比急性期≥4倍時(shí),有輔助診斷意義,可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM,病后2~3周達(dá)到高峰,故單份血清可做出早期診斷??墒褂茫孩賚gM捕捉ELISA法(見(jiàn)23章);②2ME—NI法,血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中,將早期單份血清分成二份,一份用2巰基乙醇(2ME)處理,以破壞lgM,另一份不處理,然后同時(shí)做HI試驗(yàn),若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍,則為lgM陽(yáng)性;③微量間接免疫熒光法,用熒光素標(biāo)記的抗u鏈血清,檢測(cè)已與細(xì)胞抗原片結(jié)合的lgM,根據(jù)特異性熒光顆粒,判斷血清標(biāo)本中的lgM存在。1.血凝抑制試驗(yàn)對(duì)乙腦診斷而言,本法特異性較低,但敏感性高,簡(jiǎn)便易行。常用于病毒的初步鑒定,確定有無(wú)乙腦病毒存在。檢測(cè)血清標(biāo)本中的HI抗體,多采用2ME—HI法。2.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合抗體僅存在于lgG中,病后出現(xiàn)遲,消失快,適3.中和試驗(yàn)抗體存在于1gG、lgM中,出現(xiàn)早,維持久。中和試驗(yàn)特異性取病尸腦組織研磨成10%懸液,接種1-3日齡乳鼠腦內(nèi),待發(fā)病頻死時(shí),取邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403現(xiàn)用的乙腦滅活疫苗是用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)增殖,甲醛滅活制成,初次免疫時(shí),皮下注射2~3次,間隔7-10天,以后每年加強(qiáng)注射一次,免疫力維持半年左右,保護(hù)率達(dá)66-90%。我國(guó)已篩選出乙腦病毒減毒株,用地鼠腎細(xì)胞培養(yǎng)制成減毒活疫苗,只需皮下注射一次,安全有效,目前正作現(xiàn)場(chǎng)觀察。疫苗接種對(duì)象是10歲以下兒童和來(lái)自非疫區(qū)的軍民。流行區(qū)當(dāng)年飼養(yǎng)的仔豬接種乙腦疫苗,以杜絕傳染來(lái)源,也可使豬健康成長(zhǎng)。防蚊滅蚊是預(yù)防本病的有效措施。目前乙腦治療仍采用對(duì)癥處理及支持療法,有報(bào)道用病毒唑、干擾素、恢復(fù)期血清等治療,可能減輕病勢(shì),但已出現(xiàn)腦炎癥狀者,則無(wú)治療效果。我國(guó)采用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù),制備出高中和活性乙腦單克隆抗體,經(jīng)系統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)治療證明安全有效,95年經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)進(jìn)入I、Ⅱ期臨床試驗(yàn),是一種特異免疫治療制劑。第二節(jié)森林腦炎病毒森林腦炎病毒(簡(jiǎn)稱森腦病毒)由蜱傳播,在春夏季節(jié)流行于俄羅斯及我國(guó)東北森林地帶,故稱蘇聯(lián)春夏腦炎病毒(Russianspring-summerencephalitisvirus)。本病主要侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng),臨床上以發(fā)熱,神經(jīng)癥狀為特征,有時(shí)出現(xiàn)癱瘓后遺癥。森林腦炎病毒呈球形,直徑為30~40nm,衣殼二十面體對(duì)稱外有包膜,含血凝素糖蛋白,核酸為單正鏈RNA.抗原結(jié)構(gòu)與中歐蜱傳腦炎病毒相似,可能為同一病毒的兩個(gè)亞型。森腦病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性及抵抗力似乙腦病毒,但嗜神經(jīng)性較強(qiáng),接種成年小白鼠腹腔、地鼠或豚鼠腦內(nèi),易發(fā)生腦炎致死。接種猴腦內(nèi),可致四肢麻痹。也能凝集鵝和雛雞的紅細(xì)胞。本病毒儲(chǔ)存宿主蝙蝠,及哺乳動(dòng)物(刺猬、松鼠、野兔等),這些野生動(dòng)物受染后為輕癥感染或隱性感染,但病毒血癥期限有長(zhǎng)有短,如刺猬約23天。蜱是森腦病毒傳播媒介,又是長(zhǎng)期宿主,其中森林硬蜱的帶病毒率最高,成為主要的媒介。當(dāng)蜱叮咬感染的野生動(dòng)物,吸血后病毒侵入蜱體內(nèi)增殖,在其生活周期的各階段,包括幼蟲(chóng)、稚蟲(chóng)、成蟲(chóng)及卵都能攜帶本病毒,并可經(jīng)卵傳代。牛、馬、狗、羊等家畜在自然疫源地受蜱叮咬而傳染,并可把蜱帶到居民點(diǎn),成為人的傳本病毒的致病性與乙腦病毒相同,非疫區(qū)易感人被帶有病毒的蜱叮咬后,易感染發(fā)病,另外因喝生羊奶(羊感染時(shí)奶中有病毒或被蜱類(lèi)污染)而被傳染,約經(jīng)8~14天潛伏期后發(fā)生腦炎,出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死,少數(shù)痊愈者也常遺留肌肉麻痹。居住在森林疫區(qū)的發(fā)生腦炎,出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死,少數(shù)痊愈者也常遺留肌肉麻痹。居住在森林疫區(qū)的人,因受少量病毒的隱性感染,血中有中和抗體,對(duì)病毒有免疫力。病愈后皆產(chǎn)生持久的牢固免疫力。分離病毒及血清學(xué)檢驗(yàn)方法與乙腦相同。在疫區(qū)內(nèi)調(diào)查森腦病毒時(shí),可將小白鼠、小雞、地鼠或猴關(guān)在籠內(nèi),置于森林中地上,引誘蜱來(lái)叮咬而傳染,動(dòng)物邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403感染后雖可能不發(fā)病,但可根據(jù)測(cè)定血中有無(wú)產(chǎn)生特異性抗體而加以驗(yàn)證。預(yù)防此病,可給去森林疫區(qū)的人接種滅活疫苗,效果良好。在感染早期注射大量丙種球蛋白或免疫血清可能防止發(fā)病或減輕癥狀。此外,應(yīng)穿著防護(hù)衣襪,皮膚涂擦鄰苯二甲酸酯(Orthophenyldimethylphthalate),以防被蜱叮咬。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-09版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403淋病的病原體即奈瑟菌,是1879年由Neisseria首次分離出的淋病雙球菌呈腎形,兩個(gè)凹面相對(duì),大小一致,長(zhǎng)約0.7微米,寬0.5微米。它是嗜二氧化碳的需氧菌,革蘭染色陰性,最適宜在潮濕,溫度為35℃,含2.5-5%二氧化碳的環(huán)境中生長(zhǎng)。常存在多核白細(xì)胞內(nèi),橢圓或球形,常成雙排列,無(wú)鞭毛、無(wú)莢膜、不形成芽孢,對(duì)外界理化條件的抵抗力差,最怕干燥,在干燥環(huán)境中1--2小時(shí)即可死亡。在高溫或低溫條件下都易致死。對(duì)各種化一、分類(lèi)1、男性淋病急性前尿道炎的最早癥狀為尿道繼有稀薄粘液流出,引起排尿不適。24小時(shí)以后癥狀加劇,紅腫發(fā)展到整個(gè)尿困難、行動(dòng)不便,入晚YJ常有痛性勃起。少數(shù)病例有微熱及疲乏癥狀。兩側(cè)腹股溝淋巴結(jié)亦可受到感染而引起紅腫疼痛,甚至化膿。2、女性淋病女性淋病包括尿道淋病及生殖道淋病兩個(gè)方面,女性患者由于尿道短,故泌尿道癥狀往往不明顯,而常以白帶增多,下腹痛等生殖道癥狀為主。最常見(jiàn)的感染部位為宮頸、尿道、尿道旁腺、子宮內(nèi)膜及輸卵管。因此臨床診斷時(shí)除尿道分泌物涂片外,更主要的應(yīng)做陰道子宮頸涂片,否則容易漏診。10-20%婦女伴有盆腔炎、繼發(fā)不育或?qū)m外孕等婦科疾病。3、附性腺炎男性淋病患者的炎癥擴(kuò)散到后尿道時(shí),可出現(xiàn)急性前列腺4、婦女陰道炎由于小孩陰道是由柱狀上皮所包圍,極易被淋病雙球菌感染,會(huì)陰部紅腫,陰道及尿道有綠色分泌物,排尿疼痛,有時(shí)累及肛門(mén)。5、新生兒眼炎(淋病性結(jié)膜炎,gonococcalophthalmia)新生兒自孕旦延誤治療,則角膜呈蒸汽狀,可能穿透角膜,導(dǎo)臻失明。因此淋病孕婦的1、通過(guò)性接觸傳染:主要是通過(guò)性交或其他性行為傳染。男性淋病少部分是由性交接觸引起的,女性淋病也可由感染。淋病患者是傳染源,性接觸是淋病主要傳播方式,傳播速度快,而且感染率很高,感染后3-5天即可發(fā)病。也可通過(guò)被患者分泌物污染的衣服、被褥、便盆、醫(yī)療器械而間接傳染,特別是幼女常通過(guò)間接途徑而被感染;新生兒可通過(guò)患淋病孕婦的產(chǎn)道而被感染,引起淋菌性結(jié)膜炎。非淋是指除版本/修訂號(hào):1/0生效日期:201004032.非性接觸傳染(間接傳染):此種情況也較多,主要是接觸病人含淋病雙球菌的分泌物或被污染的用具,如沾有被,甚至于廁所的馬桶圈等均可傳染,特別是女性(包括幼女),因其尿道和生殖道短,很易感染。新生兒經(jīng)過(guò)患淋病母親成人特別是男性淋病20%-30%屬于性交傳染。目前,我國(guó)以暗娼為主要傳染源。調(diào)查資料表明,在淋病患者中男女一次性交感染率為22%-35%;為50%-90%,女性傳染給男性的為25%-50%,感染率與性交次數(shù)成正比。男性與女性病人性交感染率平均為19%-25%,2次為35%,3次為49%,4次為57%。人類(lèi)是淋球菌的唯一天然宿主,主要侵犯粘膜上皮所形成的粘膜有親和力。感染后淋菌侵入等處,由于其表面的菌毛含有粘附因子,因而聚集和吞噬引起局部急性炎癥,出現(xiàn)充血、水腫、化膿和疼痛。當(dāng)細(xì)菌進(jìn)入尿道腺體和隱窩后,腺管開(kāi)口及隱窩被阻塞,潛藏的(一)涂片檢查:取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對(duì)有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽(yáng)性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽(yáng)性率僅為50-60%,且有假陽(yáng)性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽(yáng)性率低,咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦5木?。另外?duì)癥狀不典型的涂片陽(yáng)性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。(二)培養(yǎng)檢查:淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對(duì)癥狀很輕或無(wú)癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽(yáng)性就可確診,在基因診斷問(wèn)世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和NewYorkCity(NYC)培養(yǎng)基。國(guó)內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長(zhǎng)。在36℃,70%濕度,含5%-10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24-48小時(shí)觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。培養(yǎng)陽(yáng)性率男性80%-95%,女性80-90%。版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(三)抗原檢測(cè)1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來(lái)檢測(cè)臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長(zhǎng)時(shí)間遠(yuǎn)送時(shí)使用,可以在婦女2.直接免疫熒光試驗(yàn):通過(guò)檢測(cè)淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗(yàn)。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人(四)基因診斷1.淋球菌的基因探針診斷淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。2.淋球菌的基因擴(kuò)增檢測(cè)上面講述的探針技術(shù)檢測(cè)淋球菌的方法,雖然比培養(yǎng)方法在靈敏度,特異性和方便性上有了很大的提高,但其仍有一定反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測(cè)淋球菌的靈敏性,它具有快速、簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),可以直接檢測(cè)臨床標(biāo)本中極微3.臨床基因診斷淋球菌的注意事項(xiàng)目前臨床檢測(cè)淋球菌的基因診斷方法主要采用PCR方法。PCR方法與LCP方法比傳統(tǒng)的培養(yǎng)法在靈敏性和特異性上有了很大的提高,時(shí)間也大大縮短。隨著基因診斷技術(shù)PCR方法與LCP方法在淋球菌的檢測(cè)將會(huì)成為常規(guī)的檢測(cè)方法。(五)藥敏試驗(yàn):在培養(yǎng)陽(yáng)性后進(jìn)一步作藥敏試驗(yàn)。用紙片擴(kuò)散法做敏感試驗(yàn),或用瓊脂平皿稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度(MIC),用以指導(dǎo)選用抗(六)PPNG檢測(cè):β-內(nèi)酰胺酶,用紙片酸度操作。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-10版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403病。臨床主要表現(xiàn)為高熱、淋巴結(jié)腫痛、出血傾向、肺部特殊炎癥等。本病遠(yuǎn)在2000年前即有記載。世界上曾發(fā)生三次大流行,第一次發(fā)生在公元6世紀(jì),從地中海地區(qū)傳入歐洲,死亡近1億人;第二次發(fā)生在14世紀(jì),波及歐、亞、非;第三次是18世紀(jì),傳播32個(gè)國(guó)家。14世紀(jì)大流行時(shí)波及體內(nèi)和早期培養(yǎng)中有莢膜。可在變通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在陳舊培養(yǎng)基及化膿病本菌的抗原成份:①莢膜FI(fractionI)抗原,分為兩種,一種是多糖蛋白質(zhì)(F--1),另一種為蛋白質(zhì)(F--IB)??乖暂^強(qiáng),特異性較高,有白細(xì)胞吞噬作用,可用凝集、補(bǔ)體結(jié)合或間接血凝檢測(cè);②毒力V/W抗原,并有在細(xì)胞內(nèi)保護(hù)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的能力,故與細(xì)菌的侵襲力有關(guān)。鼠疫桿菌產(chǎn)生二種毒素,一為鼠毒素或外毒素(毒性蛋白質(zhì)),對(duì)小鼠和大鼠有很強(qiáng)毒性,另一為內(nèi)毒素(脂多糖),較其它革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素鼠疫桿菌在低溫及有機(jī)體生存時(shí)間較長(zhǎng),在膿痰中存活10~20天,尸體內(nèi)可活數(shù)周至數(shù)月,蚤糞中能存活1個(gè)月以上;對(duì)光、熱、干燥及一般消毒劑均甚敏感。日光直射4~5小時(shí)即死,加熱55℃15分鐘或100℃1分鐘、5%石炭酸、5%來(lái)蘇,0.1升汞、5~10%氯胺均可將病菌殺死。在鼠間流行。鼠間鼠疫傳染源(儲(chǔ)存宿主)有野鼠、地鼠、狐、狼、貓、豹等,其中黃鼠屬和旱獺屬最重要。家鼠中的黃胸鼠、褐家鼠和黑家鼠是人間鼠疫重要傳染源。當(dāng)每公頃地區(qū)發(fā)現(xiàn)1至1.5只以上的鼠疫死鼠,該地區(qū)又有居民點(diǎn)的話,此地爆發(fā)人間鼠疫的危險(xiǎn)極高。各型患者均可成為傳染源,因肺鼠疫可通過(guò)飛沫傳播,故鼠疫傳染源以肺型鼠疫最為重要。敗血性鼠疫版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403(二)傳播途徑:動(dòng)物和人間鼠疫的傳播主要以鼠蚤為媒介。當(dāng)鼠蚤吸取含病菌的鼠血后,細(xì)菌在蚤胃大量繁殖,形成菌栓堵塞前胃,當(dāng)蚤再吸入血時(shí),病菌隨吸進(jìn)之血反吐,注入動(dòng)物或人體數(shù)可因直播接觸病人的痰液、膿液或病獸的皮、血、肉經(jīng)破損皮膚或粘膜受(三)人群易感性人群對(duì)鼠疫普遍易感,無(wú)性別年齡差別。病后可獲持(四)流行特征1.鼠疫自然疫源性世界各地存在許多自然疫源在。人間鼠疫多由野鼠傳至家鼠,由家鼠傳染于人引起。偶因狩獵(捕捉旱獺)、考查、施工、軍事活動(dòng)進(jìn)入疫區(qū)而被感染。2.流行性本病多由疫區(qū)籍交通工具向外傳播,形成外源性鼠疫,引起流對(duì)第一例病人及時(shí)發(fā)現(xiàn)與確診,對(duì)本病的控制與預(yù)防極為重要。流行病學(xué)資料當(dāng)?shù)卦惺箝g鼠疫流行或有赴疫區(qū)史;有接觸可疑動(dòng)物或類(lèi)似患者。臨床資料根據(jù)各型臨床特點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)室診斷是確定本病最重要依據(jù)。對(duì)一切可疑病人均需作細(xì)菌學(xué)檢查,對(duì)疑似鼠疫尸體,應(yīng)爭(zhēng)取病解或穿刺取材進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。血清學(xué)應(yīng)以雙份血清升高4倍以上作為診斷依據(jù)。1.常規(guī)檢查胞增高,以后中性粒細(xì)胞顯著增高,紅細(xì)胞、血紅蛋白與血小板減少。2.細(xì)菌學(xué)檢查采淋巴結(jié)穿刺液、膿、痰、血、腦脊液進(jìn)行檢查。(1)涂片檢查用上述材料作涂片或印片,革蘭氏染色,可找到G一兩端濃染的短桿菌。約50~80%陽(yáng)性。(2)細(xì)菌培養(yǎng)檢材接種于普通瓊脂或肉湯培養(yǎng)基。血培養(yǎng)在腺鼠疫早期陽(yáng)性率為70%,晚期可達(dá)90%左右。敗血癥時(shí)可達(dá)100%陽(yáng)性。(3)動(dòng)物接種將標(biāo)本制成生理鹽水乳劑,注射于豚鼠或小白鼠皮下或腹腔內(nèi),動(dòng)物于24~72小時(shí)死亡,取其內(nèi)臟作細(xì)菌檢查。(4)噬菌體裂解試驗(yàn)用鼠疫噬菌體加入已檢出的可疑細(xì)菌中,可看到3.血清學(xué)檢查(1)間接血凝用F1抗原檢測(cè)患者或動(dòng)物血清中F1抗體。F1抗體持續(xù)1~4年,故常用于流行病學(xué)調(diào)查及回顧性診斷。(2)熒光抗體染色檢查用熒光標(biāo)記的特異性抗血清檢測(cè)可疑標(biāo)本。特版本/修訂號(hào):1/0生效日期:201004031.管理患者發(fā)現(xiàn)疑似或確診患者,應(yīng)立即按緊急疫情上報(bào),同時(shí)將患者嚴(yán)密隔離,禁止探視及病人互相往來(lái)。病人排泄物應(yīng)徹底消毒,病人死亡應(yīng)火葬或深埋。接觸者應(yīng)檢疫9天,對(duì)曾接受預(yù)防接種者,檢疫期應(yīng)延至12.消滅動(dòng)物傳染源:對(duì)自然疫源地進(jìn)行疫情監(jiān)測(cè),控制鼠間鼠疫。廣泛開(kāi)展滅鼠愛(ài)國(guó)衛(wèi)生運(yùn)動(dòng)。旱獺在某些地區(qū)是重要傳染源,也應(yīng)大力捕殺。3.切斷傳播途徑:滅蚤必須徹底,對(duì)貓、狗,家畜等也要噴藥;加強(qiáng)交通及國(guó)鏡檢疫對(duì)來(lái)自疫源地的外國(guó)船只、車(chē)輛、飛機(jī)等均應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的國(guó)境衛(wèi)生檢疫,實(shí)施滅鼠、滅蚤消毒,對(duì)乘客進(jìn)行隔離留檢。1.預(yù)防接種自鼠間開(kāi)始流行時(shí),對(duì)疫區(qū)及其周?chē)木用?、進(jìn)入疫區(qū)的工作人員,均應(yīng)進(jìn)行預(yù)防接種。常用為EV無(wú)毒株干燥活菌苗,皮膚劃痕法接種,即2滴菌液,相距3-4cm。2周后可獲免疫。一般每年接種一次,必要時(shí)6個(gè)月后再接種一次。我國(guó)新研制的06173菌苗免疫動(dòng)物后產(chǎn)生F1抗體較EV株效果高1倍。2.個(gè)人防護(hù)進(jìn)入疫區(qū)的醫(yī)務(wù)人員,必須接種菌苗,兩周后方能進(jìn)入疫區(qū)。工作時(shí)必須著防護(hù)服,戴口罩、帽子、手套、眼鏡、穿膠鞋及隔離衣。接觸患者后可服下列一種藥物預(yù)防,四環(huán)素每日2g,分4次服;磺胺嘧啶每日2g,分4次服;或鏈霉素每日1g,分1~2次服用。邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-11版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403第十一章傷寒桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告?zhèn)?typhoidfever)是由傷寒桿菌引起的急性傳染病,以持續(xù)菌血癥,網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)受累,回腸遠(yuǎn)端微小膿腫及潰瘍形成為基本病理特征。典型的臨床表現(xiàn)包括持續(xù)高熱,腹部不適,肝脾腫大,白細(xì)胞低下,部分病人有玫瑰疹和相對(duì)緩脈。本病又稱為腸熱病(entericfever)。但本病的臨床表現(xiàn)主要系病原經(jīng)血播散至全身全器官,而并非腸道局部病變所引起?!静≡瓕W(xué)】傷寒沙門(mén)菌,又稱傷寒桿菌,屬沙門(mén)菌屬D組。革蘭染色陰性,呈短桿狀,周有鞭毛,能活動(dòng),不產(chǎn)生芽孢,無(wú)莢膜。在普通培養(yǎng)基上能生長(zhǎng),在含有膽汁的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)更好。傷寒桿菌在自然界中的生活力較強(qiáng),在水中可存活2—3周,在糞便中能維持1—2個(gè)月,在牛奶中不僅能生存,且可繁殖。耐低溫,在冰凍環(huán)境中可存活數(shù)月,但對(duì)光、熱、干燥及消毒劑的抵抗能力較弱,日光直射數(shù)小時(shí)即死,加熱至60~C后30分鐘或煮沸后立即死亡,消毒飲水余氯可迅速致死。傷寒桿菌只感染人類(lèi),在自然條件下不感染動(dòng)物。傷寒桿菌具有菌體("O")抗原、鞭毛("H")抗原和表面("i")抗原,均能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,但這些并非保護(hù)性抗體。由于“O”和“H”抗原性較強(qiáng),故常用于血清凝集試驗(yàn)(肥達(dá)反應(yīng))以輔助臨床診斷,亦可用以制備傷寒菌苗供預(yù)防接種?!癷”抗原見(jiàn)于新分離(特別是從病人血液分離)的菌株,能干擾血清中的殺菌效能和吞噬功能,是傷寒桿菌的重要毒力因子,但其抗原性不強(qiáng),所產(chǎn)生的"i"抗體的凝集效價(jià)一般較低且為時(shí)甚短。當(dāng)病原菌從人體中清除后,“i"抗體滴度迅速下降,故“i”抗體的檢出雖對(duì)本病的診斷無(wú)多大幫助,但有助于發(fā)現(xiàn)帶菌者。傷寒桿菌在菌體裂解時(shí)可釋放強(qiáng)烈的內(nèi)毒素,對(duì)本病的發(fā)生和發(fā)展起著較重要的作用?!玖餍胁W(xué)】(一)傳染源:為病人及帶菌者。病人從潛伏期開(kāi)始即可從糞便排菌,從病程第1周末開(kāi)始經(jīng)尿排菌,故整個(gè)病程中均有傳染性,尤以病程的2—4周內(nèi)傳染性最大。慢性帶菌者是本病不斷傳播或流行的主要傳染源。原有慢性肝膽管疾病(如膽囊炎、膽石癥等)的傷寒病人易成為慢性帶菌者,約1%—4%患者在腸道和膽囊中隱藏傷寒桿菌達(dá)數(shù)月或數(shù)年之久。(二)傳播途徑傷寒桿菌隨病人或帶菌者的糞、尿排出后,通過(guò)污染的水或食物、日常生活接觸、蒼蠅和蟑螂等傳播。其中,水源污染是本病傳播的重要途徑,亦是暴發(fā)流行的主要原因。食物污染也可引起本病的流行,而散發(fā)病例一般以日常生活接觸傳播為多。(三)人群易感性人對(duì)傷寒普遍易感。病后可獲得持久性免疫,再次患病者極少。(四)流行特征世界各地均有本病發(fā)生,以熱帶、亞熱帶地區(qū)多見(jiàn),可散發(fā)、地方性流行或暴發(fā)流行。在發(fā)展中國(guó)家主要因?yàn)樗次廴径┌l(fā)流行,邵武市第二醫(yī)院檢驗(yàn)科病原微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估報(bào)告文件編號(hào):SWSE-JYK-3-PG-11版本/修訂號(hào):1/0生效日期:20100403發(fā)達(dá)國(guó)家則以國(guó)際旅游感染為主。本病終年可見(jiàn),但以夏秋季最多。其中以兒童和青壯年居多。局部地區(qū)流行的傷寒耐藥菌株有所增加,耐藥譜也在逐漸擴(kuò)大。除耐氯霉素、復(fù)方磺胺甲嗯唑、氨芐【實(shí)驗(yàn)室檢查】(一)常規(guī)檢查血白細(xì)胞大多為3×109/L~4×109/L,伴中性粒細(xì)胞減少和嗜酸粒細(xì)胞消失,后者隨病情的好轉(zhuǎn)逐漸回升。極期嗜酸粒細(xì)胞>2%,(二)細(xì)菌學(xué)檢查①血培養(yǎng)是確診的論據(jù),病程早期即可陽(yáng)性,第7~10病日陽(yáng)性率可達(dá)90%,第三周降為30%~40%,第四周時(shí)常陰性;
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