植物工廠化育苗教學(xué)課件 8生根培養(yǎng)

生根培養(yǎng)——植物工廠化育苗繼代接種切割頂芽或腋芽萌發(fā)伸長(zhǎng)形成多節(jié)莖段嫩枝，剪成帶1-2枚葉片，帶一個(gè)芽或幾個(gè)芽的一兩個(gè)節(jié)間。遺傳穩(wěn)定。叢生芽可以先分成單株進(jìn)行接種，培養(yǎng)成明顯莖段的壯苗后按正常方式接種即可通過(guò)繼代培養(yǎng)，材料增殖到一定數(shù)量后，部分培養(yǎng)物進(jìn)入壯苗和生根過(guò)程。進(jìn)一步在生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，才能得到完整的植株。繼代培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞分裂素濃度增加有助于芽的分化和增殖，從而有助于增殖系數(shù)提升。但芽的分化增殖會(huì)伴有生長(zhǎng)勢(shì)減弱，芽，莖細(xì)弱等現(xiàn)象。這種苗移栽成活率低。必須經(jīng)過(guò)壯苗。生根培養(yǎng)有試管內(nèi)生根和試管外生根兩種方式。（一）試管內(nèi)生根

試管瓶?jī)?nèi)生根是指將長(zhǎng)到一定長(zhǎng)度的微枝（大于10mm）轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。1．試管苗根的形成類(lèi)型及生長(zhǎng)（1）試管苗根的類(lèi)型植物離體培養(yǎng)產(chǎn)生的根為不定根，不定根又分為皮部根和愈傷根兩種類(lèi)型。皮部根：維管束一般是與莖的維管束連通的，疏導(dǎo)組織連通，營(yíng)養(yǎng)成分和水可以順利在植物體內(nèi)運(yùn)輸。愈傷組織形成的根與莖的疏導(dǎo)組織不連通。尤其是容易產(chǎn)生愈傷組織的植物（如刺槐）的試管苗生根，輸導(dǎo)組織不通是試管苗根系質(zhì)量的主要問(wèn)題，也是限制移栽的主要因子。（2）根的生長(zhǎng)

試管苗生根的時(shí)間長(zhǎng)短不相同，草本植物一般較快，木本稍慢。一般形成根源基1周后即能長(zhǎng)出明顯的根，其顏色為白色，有的短粗，有的細(xì)長(zhǎng)。較好的根為白色較粗的小短根成活率較高。根在培養(yǎng)基中盤(pán)根錯(cuò)節(jié)的生長(zhǎng)，一段時(shí)間后逐漸由白色變成黃色，甚至褐色，根開(kāi)始老化。此時(shí)其吸收能力明顯降低，移苗成活率也低。2．生根的影響因素（1）植物材料的影響不同植物及同一植物不同基因型、不同材料和不同年齡對(duì)根的產(chǎn)生都有影響。扦插生根容易的植物，試管苗生根也容易。扦插生根難的植物，試管苗生根也難，如核桃、板栗等。植物生根的規(guī)律是：成年的比幼年的樹(shù)難生根；木本植物比草本植物難生根；喬木比灌木難生根。（2）培養(yǎng)基的影響試管苗生根是從異養(yǎng)狀態(tài)進(jìn)入自養(yǎng)狀態(tài)的一個(gè)變化。利用根系吸收營(yíng)養(yǎng)和水分是植物本能。培養(yǎng)基中濃度較高的營(yíng)養(yǎng)元素及糖可使試管苗產(chǎn)生依賴(lài)性而不易生根，減少營(yíng)養(yǎng)成分及糖的濃度即可刺激生根。培養(yǎng)基中的一些無(wú)機(jī)鹽成分不利于根的產(chǎn)生，要適當(dāng)降低無(wú)機(jī)鹽濃度才有利于根的分化。植物激素中生長(zhǎng)素有促進(jìn)根的分化的作用。一般可以用IBA、IAA、NAA等藥品單獨(dú)或者混合使用。胚軸、莖段、花梗等材料分化。根使用IBA居多，濃度為0.2-10.0mg/L，其中以1.0mg/L為多。生根培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)素含量也要適當(dāng)降低。細(xì)胞分裂素對(duì)生長(zhǎng)素有拮抗作用，能抑制根的形成。（3）培養(yǎng)條件的影響

溫度、光照對(duì)發(fā)根都有很大的影響。一般誘導(dǎo)生根所需要的溫度比增殖培養(yǎng)的溫度要適當(dāng)?shù)鸵恍^代培養(yǎng)時(shí)適宜溫度為25-28℃，生根適宜溫度20-25℃左右。溫度低于15℃，影響根分化生長(zhǎng)，溫度高于30℃，根的質(zhì)量變差、數(shù)量減少，且出現(xiàn)徒長(zhǎng)現(xiàn)象，移栽成活率會(huì)大大降低。大多數(shù)植物光照不抑制根原基的形成和生長(zhǎng)，用普遍的正常光照下培養(yǎng)即可。3．生根培養(yǎng)基配制原則（1）降低繼代培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽的濃度。一般MS大量母液減半或1／4；（2）去掉原培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素成份；（3）降低蔗糖濃度（如減半）（4）適當(dāng)濃度的生長(zhǎng)素；（5）適當(dāng)增加瓊脂濃度；--一般增加瓊脂濃度，增加吸水難度，加強(qiáng)自養(yǎng)，誘導(dǎo)生根能力（6）對(duì)有些植物可適當(dāng)加些吸附劑（如活性炭），有促進(jìn)生根的作用。例如：花楸繼代培養(yǎng)基：MS＋BA2mg/L＋I(xiàn)BA0.2mg/L+2%蔗糖+0.55%瓊脂花楸生根培養(yǎng)基：1/2MS＋I(xiàn)BA1.0mg/L+1%蔗糖+0.7%瓊脂4．轉(zhuǎn)接方法

高度在1cm長(zhǎng)以上的較為粗壯的芽苗可進(jìn)行生根培養(yǎng)。不足1cm的芽苗及愈傷組織用于繼代培養(yǎng)。繼代無(wú)菌芽苗在超凈臺(tái)上拿出后，芽叢縱向切成單株，將分離得到的單株植物的基部愈傷組織切掉，按形態(tài)上下極插入生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。

（二）試管瓶外生根

試管外生根是將組培苗的生根誘導(dǎo)同馴化培養(yǎng)結(jié)合在一起，直接將組培苗扦插到試管外有菌環(huán)境中，邊誘導(dǎo)生根邊馴化培養(yǎng)。試苗一般都在試管內(nèi)生根。對(duì)于一些較容易生根的植物，如楊樹(shù)，菊花、康乃馨、月季、櫻桃等樹(shù)種可以從試管內(nèi)取出進(jìn)行試管外生根，這樣把生根和馴化過(guò)程結(jié)合起來(lái)，既可大幅度降低成本，又可提高移栽成活率。1．試管瓶外生根方法（1）誘導(dǎo)出根源基后再扦插（2）生長(zhǎng)素處理法（1）誘導(dǎo)出根源基后再扦插

將繼代叢生芽轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，可插的密些，培養(yǎng)十天左右可見(jiàn)嫩莖基部明顯產(chǎn)生根源基時(shí)取出，移栽到事先準(zhǔn)備好的穴盤(pán)里進(jìn)行培養(yǎng)。（2）生長(zhǎng)素處理法將無(wú)根的試管苗取出后，用生長(zhǎng)素溶液浸泡一小時(shí)或蘸生根粉后進(jìn)行扦插。用生長(zhǎng)素濃度一般比誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基大10倍左右。草本可用IAA5mg/L＋NAA1mg/L，木本植物可用IBA5mg/L＋NAA1mg/L，浸泡1-2小時(shí)后扦插。生根粉ABT用法：將試管苗迅速放在1000mg/LABT生根粉溶液里蘸一下，然后進(jìn)行移栽。或者是用20mg/L-50mg/L生根粉溶液浸泡試管苗12個(gè)小時(shí)后移栽，可大大加強(qiáng)生根率。2．基質(zhì)選擇（1）腐殖土（或草炭土）及珍珠巖（或細(xì)沙）1：1或（2-3）：1配制。（2）草炭土、蛭石和珍珠巖按5：4：1配制。（3）1／2MS加IAA或IBA（1-5）mg/L組成營(yíng)養(yǎng)液加入基質(zhì)（如沙質(zhì)基質(zhì)內(nèi)）。

基質(zhì)配好后可以裝在穴盤(pán)、花盆、塑料育苗筐中進(jìn)行培養(yǎng)。3．插后管理

插后需要進(jìn)行栽后管理，以保證較高的成活率。濕度，環(huán)境要保持大于80℅濕度，一般要達(dá)到90℅以上飽和狀態(tài)。宜采用塑料薄膜密封或間歇噴霧的方式保證濕度。溫度，環(huán)境濕度以品種不同而異，有的要求略低于誘導(dǎo)溫度如20-25度，有的要求較高于溫度如30-35度。生根持續(xù)時(shí)間以植物種類(lèi)不同而異，如丁香和白樺約4-6周，杜鵑花6-8周。下圖是大花惠蘭的試管外煉苗在組織培養(yǎng)試管苗時(shí)，將無(wú)根苗采用快繁計(jì)算機(jī)智能系統(tǒng)及技術(shù)進(jìn)行瓶外生根(不經(jīng)生根培養(yǎng)基促使生根后再移植)，這樣可以降低成本，提高工效。

植物組培室，以開(kāi)發(fā)名、優(yōu)、特、奇觀賞植物為主，推動(dòng)花卉生產(chǎn)向高檔次縱深發(fā)展。組培室建筑面積800平方米，煉苗溫室大棚5000平方米，現(xiàn)已有16個(gè)名優(yōu)品種批量生產(chǎn)，年產(chǎn)組培苗達(dá)100萬(wàn)株，為