第四章 實驗動物質(zhì)量控制11課件

第四章實驗動物質(zhì)量控制實驗動物微生物及寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量控制實驗動物環(huán)境質(zhì)量控制實驗動物營養(yǎng)學(xué)質(zhì)量控制1第四章實驗動物質(zhì)量控制11第一節(jié)實驗動物分級及特點(diǎn)一、從微生物控制方面分級2第四章實驗動物質(zhì)量控制11(1)普通動物(conventionalanimal,CV)(2)清潔動物(cleaninganimal,CL)(3)無特定病原體動物(specificpathogenfreeanimal,SPF)(4)悉生動物(animalwithknownbacterialflora)(5)無菌動物(germfreeanimal,GF)1、按微生物學(xué)控制的動物分類3第四章實驗動物質(zhì)量控制112、國際分級法等級種類飼養(yǎng)條件控制程度備注三級無菌動物Germfreeanimal隔離系統(tǒng)Isolationsystem以封閉的無菌技術(shù)獲得,用現(xiàn)有方法不能檢出任何微生物和寄生蟲的動物。三級悉生動物Gnotobioticsanimal隔離系統(tǒng)Isolationsystem確知已帶的微生物，經(jīng)無菌條件飼養(yǎng)的動物。明確所帶的微生物。二級無特定病原體動物Specificpathogenfreeanimal屏障系統(tǒng)Barriersystem不帶有指定的致病性微生物和寄生蟲的動物。帶有非特定的微生物和寄生蟲一級普通動物Conventionalanimal開放系統(tǒng)Opensystem不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動物烈性傳染病的病原。對微生物攜帶狀況不明確4第四章實驗動物質(zhì)量控制113、國家標(biāo)準(zhǔn)分級等級種類飼養(yǎng)條件四級無菌動物GermfreeanimalGF隔離系統(tǒng)Isolationsystem四級悉生動物GnotobioticsanimalGN隔離系統(tǒng)Isolationsystem三級無特定病原體動物SpecificpathogenfreeanimalSPF屏障系統(tǒng)Barriersystem二級清潔動物CleananimalCL屏障系統(tǒng)Barriersystem一級普通動物ConventionalanimalCV開放系統(tǒng)Opensystem5第四章實驗動物質(zhì)量控制11二.主要動物特點(diǎn)及應(yīng)用1.清潔動物與SPF動物的應(yīng)用CL動物國際上認(rèn)為僅適合短期或部分科研實驗；我國認(rèn)為適用于大多數(shù)科研實驗，可用于生物醫(yī)學(xué)研究的各領(lǐng)域。SPF動物適用于所有科研實驗，是目前國際標(biāo)準(zhǔn)級別的實驗動物。6第四章實驗動物質(zhì)量控制112、無菌動物的特點(diǎn)形態(tài)學(xué)改變消化系統(tǒng):盲腸膨大，易發(fā)生盲腸扭轉(zhuǎn)，導(dǎo)致破裂。循環(huán)系統(tǒng)：心臟變小。免疫系統(tǒng)：胸腺上皮細(xì)胞變大，胞漿泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體變小。生理學(xué)改變免疫功能：免疫應(yīng)答慢，過敏反應(yīng)、對異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。對微生物感染非常敏感。生長率：豚鼠、兔生長率降低，大、小鼠改變不大。代謝：水分代謝周期延長，腸管對水的吸收率低。營養(yǎng)：體內(nèi)不能合成VitB、VitK?？馆椛淠芰Γ涸鰪?qiáng)。壽命：長于普通動物。7第四章實驗動物質(zhì)量控制113、悉生生物學(xué)(gnotobiology)：

1885年pasteur認(rèn)為宿主動物沒有腸道菌群參與，生命難以維持。無菌動物的問世，證明腸道菌群的存在，并非完全是哺乳動物生存所必需。悉生生物學(xué)是以無菌隔離技術(shù)提供的各種動物為實驗對象，研究實驗動物本身以及各種動物與微生物之間相互依存和制約關(guān)系的一門綜合科學(xué)。8第四章實驗動物質(zhì)量控制11悉生動物的特點(diǎn)（1）GN動物是動物與微生物的共生復(fù)合體。（2）腸道存在能合成維生素和氨基酸的細(xì)菌，不會出現(xiàn)維生素缺乏癥。（3）生活力、抵抗力明顯增強(qiáng)，易于飼養(yǎng)。9第四章實驗動物質(zhì)量控制114、GF動物的應(yīng)用微生物研究（1）GF是研究微生物與宿主相互作用，即微生生物與宏生生物相互關(guān)系，微生物與微生物的共生與拮抗關(guān)系的最佳動物。（2）口服霍亂弧菌使幼齡GF豚鼠死亡，口服前感染梭狀芽胞桿菌，動物不發(fā)生死亡；口服福氏痢疾桿菌使幼齡GF豚鼠死亡，口服前接種大腸桿菌，動物不發(fā)生死亡。（3）炎癥涉及細(xì)菌感染的多因素作用，GF可把多因素變成單因素，整體反應(yīng)變成局部反應(yīng)。10第四章實驗動物質(zhì)量控制11老年學(xué)研究

GF大鼠壽命比CV大鼠延長1/3。雌性GF壽命比雄性動物短，雌性CV動物比雄性長。

2-3年的GF大鼠臟器均未呈現(xiàn)同齡CV大鼠所具有的各種衰老變化。11第四章實驗動物質(zhì)量控制11腫瘤學(xué)研究在致癌因素中，微生物引起癌變的比重較大。GF大鼠比CV大鼠易發(fā)生激素依賴性腫瘤。GF動物口服蘇鐵素不出現(xiàn)腫瘤，但CV動物口服蘇鐵素出現(xiàn)腫瘤。12第四章實驗動物質(zhì)量控制11三.按遺傳學(xué)控制分類①近交系(inbredstrain)②封閉群（closedcolony）或遠(yuǎn)交系(outbredstock)③雜交群(hybrids)13第四章實驗動物質(zhì)量控制11（一）近交系的應(yīng)用1．遺傳組成和遺傳性狀一致，對實驗反應(yīng)一致，因此，只需用少量的動物，即可得到非常規(guī)律的實驗結(jié)果。2．組織相容性抗原一致，異體移植不產(chǎn)生排斥反應(yīng)，是組織細(xì)胞和腫瘤移植實驗中最為理想的材料。3．明顯的生物學(xué)特征，如先天畸形，高腫瘤發(fā)病率，對某些因子敏感和耐受等，這些特點(diǎn)在醫(yī)學(xué)研究中是天然模型，非常重要。4．多個近交系同時使用不僅可分析不同遺傳組成對某項實驗的不同反應(yīng)與影響，還可觀察實驗結(jié)果是否具有普遍意義。14第四章實驗動物質(zhì)量控制11（二）封閉群的特征及應(yīng)用1．封閉群動物的遺傳組成具有很高的雜合性，在遺傳學(xué)上可作為選擇實驗的基礎(chǔ)群體，用于某些性狀遺傳的研究。用于藥物篩選和毒性試驗等。2．封閉群動物具有較強(qiáng)的繁殖力和生活力，表現(xiàn)為每胎產(chǎn)仔多，胎間隔短，仔鼠死亡率低等、生長快、成熟早、對疾病抵抗力強(qiáng)、壽命長、生產(chǎn)成本低優(yōu)點(diǎn)。因而廣泛應(yīng)用于預(yù)實驗、學(xué)生教學(xué)等實驗中。3．突變種所攜帶的突變基因通常導(dǎo)致動物在某些方面的異常，從而可成為生理學(xué)、胚胎學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的模型。15第四章實驗動物質(zhì)量控制11（三）雜交一代動物的特征及應(yīng)用

1．遺傳和表型上的一致性

2．雜交優(yōu)勢

3．雜合的遺傳組成

4．作為某些疾病研究的模型16第四章實驗動物質(zhì)量控制11

一、微生物和寄生蟲感染的危害性

1．影響實驗結(jié)果實驗動物的微生物和寄生蟲感染可不同程度干擾實驗結(jié)果，從而影響研究工作的準(zhǔn)確性和可靠性，甚至得出錯誤的結(jié)論。隱性感染常導(dǎo)致動物生理生化指標(biāo)的改變，使實驗得不到應(yīng)有的結(jié)果?；蛞?qū)嶒炋幹?，動物抵抗力下降，使隱性感染顯性化，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。第二節(jié)實驗動物微生物與寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制17第四章實驗動物質(zhì)量控制112．影響動物生產(chǎn)某些烈性傳染病如鼠痘、兔出血癥、犬細(xì)小病毒性腸炎等的流行，可導(dǎo)致動物大批死亡或質(zhì)量下降，從而給動物的生產(chǎn)和實驗的正常進(jìn)行帶來嚴(yán)重影響。3．威脅人類健康許多人獸共患性疾病對飼養(yǎng)和研究人員的健康構(gòu)成威脅。特別是那些在動物呈隱性感染、而對人類呈致死性感染的病原微生物（如流行性出血熱病毒），應(yīng)引起我們高度重視。4．污染實驗材料如病原微生物污染了細(xì)胞培養(yǎng)物、腫瘤移植物或以動物組織和細(xì)胞為生產(chǎn)原料的生物制品，不僅干擾實驗，而且還可將病原擴(kuò)散，以至危害人類的健康。18第四章實驗動物質(zhì)量控制115.實驗動物感染寄生蟲后不僅蟲體對機(jī)體造成一定的損害，而且動物機(jī)體也對蟲體產(chǎn)生反應(yīng)，使動物機(jī)體的生理、生化及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生改變，從而影響實驗結(jié)果。

1）掠奪宿主的營養(yǎng)：

2）體外寄生蟲對動物的騷擾：

3）對宿主機(jī)體產(chǎn)生機(jī)械性損傷：

4）對宿主產(chǎn)生毒性作用：

5）對宿主生理、生化和免疫系統(tǒng)的影響。19第四章實驗動物質(zhì)量控制11二、實驗動物常見感染性疾病★重要的人獸共患病★主要的烈性傳染病★常見的微生物和寄生蟲感染20第四章實驗動物質(zhì)量控制111、重要的人獸共患病

（1）流行性出血熱

（2）弓形蟲病

（3）淋巴細(xì)胞脈絡(luò)從腦膜炎

（4）沙門菌病

（5）狂犬病

（6）猴B病毒感染

（7）猴結(jié)核病21第四章實驗動物質(zhì)量控制11疾病病原媒介動物人類臨床癥狀傳染途徑猴皰疹病毒感染(B-Virusinfection)cercopithecineHerpesvirusType1獼猴類肌痛、發(fā)熱、頭痛；迅速發(fā)展的上行性麻痹；感覺異常、復(fù)視、運(yùn)動失調(diào)、潴尿、抽搐、吞咽困難，直至死亡唾液(咬傷)、抓傷出血熱(Koreanhemorrhagicfever)HantaanVirus

大鼠、小鼠肌痛、咳嗽，發(fā)熱、腹瀉、出血、蛋白尿、腎臟損害，嚴(yán)重致死吸入感染、嚙齒類動物咬傷、傷口污染淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒感染癥(LCM)

Lyphocyticchoriomeningitisvirus

小鼠、倉鼠類似流行性感冒的癥狀，頭痛、肌痛、發(fā)熱、惡心、嘔吐、喉痛、畏光。接觸感染(接觸小鼠糞便和尿液)；吸入；咬傷，或由節(jié)肢動物如蚊子、蟑螂傳播狂犬病

(Rabies)Rhabdovirus

所有哺乳類頭痛、肌痛、發(fā)熱、恐水、狂妄、抽搐、昏厥、死亡

咬傷、皮膚傷口或黏膜感染含狂犬病毒的唾液

結(jié)核病(Tuberculosis)Mycobacteriumtu-berculosis犬、貓、猴

咳嗽、生痰、咳血、體重減輕、無力疲倦、發(fā)熱、發(fā)冷、惡病質(zhì)

吸入傳染，或經(jīng)口腔、傷口及消化道感染

弓形蟲病toxoplasmosis貓、豬、羊、狗、鼠等導(dǎo)致自然流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)和新生兒嚴(yán)重感染，后天：局限性感染以淋巴結(jié)炎最為多見；全身性感染多見于免疫缺損者（愛滋病、惡性腫瘤）①先天性弓形蟲病系通過胎盤傳染，②后天獲得性弓形蟲病主要經(jīng)口感染沙門氏菌病

(Salmonellosis)Salmonellatyphimu-riumS．enteritidis鼠類、犬、貓、靈長類急性腸胃炎，腹痛、腹瀉、惡心、發(fā)熱、厭食經(jīng)由食物、飲水感染22第四章實驗動物質(zhì)量控制112、主要的烈性傳染?。?）鼠痘（2）兔出血癥（兔瘟）疾病病原癥狀傳播方式控制小鼠脫腳病(ectromelia)Mousepoxvirus腳、尾、鼻出現(xiàn)皮疹和潰瘍，嚴(yán)重出現(xiàn)尾壞死脫落。皮膚傷口、呼吸道、消化道兔出血癥RabbithemorrhagicdiseaseRabbithemorrhagicdiseasevirus病兔精神沉郁，食欲不振或廢絕，飲欲增加，被毛零亂、無光澤，兔耳耷拉。幼兔多呈急性型，通常看不到臨床癥狀，突然死亡。病兔的排泄物及污染物等，空氣傳播是主要傳播方式。23第四章實驗動物質(zhì)量控制113、常見的微生物和寄生蟲感染

（1）鼠肝炎病毒感染

（2）仙臺病毒感染

（3）鼠肺支原體病

（4）嗜肺巴斯德桿菌病

（5）小鼠呼腸孤3型病毒感染

（6）球蟲病

（7）犬細(xì)小病毒感染

（8）犬瘟熱24第四章實驗動物質(zhì)量控制11三、實驗動物的微生物和寄生蟲控制國家標(biāo)準(zhǔn)不同等級嚙齒類、兔、犬和猴等實驗動物要求排除的細(xì)菌、病毒應(yīng)根據(jù)國家技術(shù)監(jiān)督局制定的有關(guān)實驗動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)(GB14922.2—2001)。有關(guān)實驗動物寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)是(GB14922.1—2001)

。25第四章實驗動物質(zhì)量控制1126第四章實驗動物質(zhì)量控制1127第四章實驗動物質(zhì)量控制1128第四章實驗動物質(zhì)量控制11

四、實驗動物的微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測（一）監(jiān)測的意義實施微生物學(xué)與寄生蟲學(xué)監(jiān)測，是保證實驗動物質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)化的必要手段。通過監(jiān)測可掌握動物群中病毒、細(xì)菌、寄生蟲的流行情況，及時診斷感染性疾病，發(fā)現(xiàn)并控制其傳播，以保證實驗動物的健康。（二）監(jiān)測的內(nèi)容不同級別實驗動物的微生物和寄生蟲監(jiān)測內(nèi)容不同。國家技術(shù)監(jiān)督局制定了標(biāo)準(zhǔn)(GBl4922.1—2001和GBl4922.2—2001)。（三）檢驗方法目前國標(biāo)推薦使用的方法學(xué)和詳細(xì)檢驗程序。病原菌以分離培養(yǎng)鑒定為主，病毒以檢測抗體為主，寄生蟲以鏡檢為主。29第四章實驗動物質(zhì)量控制11實驗動物微生物及寄生蟲監(jiān)測監(jiān)測程序：1.微生物檢測程序分離血清，檢查病毒抗體或其它病原的抗體

氣管分泌物，腸內(nèi)容物臟器分離細(xì)菌

真菌檢查動物編號外觀檢查麻醉皮膚取樣取血無菌解剖檢測檢測報告（四）檢驗程序

30第四章實驗動物質(zhì)量控制112.寄生蟲檢測程序弓形蟲檢測

體外寄生蟲檢測體內(nèi)寄生蟲檢測

體外寄生蟲檢測動物編號外觀檢查麻醉拔毛或梳毛取血擠壓或刀片刮取皮層物取樣檢測檢測報告解剖、臟器、腸內(nèi)容物、糞便取樣31第四章實驗動物質(zhì)量控制11取樣要求與監(jiān)測規(guī)則：1.普通動物、清潔級動物和無特定病原體動物每三個月至少檢測一次。2.無菌動物每年至少檢測一次。3.每2-4周檢測一次糞便標(biāo)本。32第四章實驗動物質(zhì)量控制11實驗動物不同生產(chǎn)繁殖單元取樣數(shù)量群體大小，只取樣數(shù)量<100100—150>500>5只>10只>20只

每個隔離器檢測2只取樣應(yīng)在每一生產(chǎn)繁殖單元的不同方位（如四角和中央）選取動物。動物的送檢容器應(yīng)按動物級別要求編號和標(biāo)記，包裝好后安全送達(dá)檢測實驗室，并附送檢測單，寫明送檢動物的品種品系、級別、數(shù)量和檢測項目。33第四章實驗動物質(zhì)量控制11檢測項目的分類

國標(biāo)對必須檢測和必要時檢測作了限定性說明：“必須檢測項目：是指在進(jìn)行實驗動物質(zhì)量評價時必須檢測的項目。必要時檢測項目：是指從國外引進(jìn)實驗動物時、懷疑有本病流行時、申請實驗動物生產(chǎn)許可證和實驗動物質(zhì)量合格證時必須檢測的項目”。34第四章實驗動物質(zhì)量控制11監(jiān)測方法：1.實驗動物病毒檢測：1）血清學(xué)診斷：血凝抑制試驗（HI）；酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。2）病原學(xué)檢查：接種細(xì)胞培養(yǎng)物觀察CPE出現(xiàn)（鼠痘、鼠肝炎）；血吸附試驗（仙臺病毒）；免疫酶試驗（LCM病毒）。連續(xù)三次傳代未有病毒跡象為陰性。接種敏感動物，觀察發(fā)病、抗體產(chǎn)生、病理改變、接種動物病毒再分離。動物組織細(xì)胞傳代培養(yǎng)。35第四章實驗動物質(zhì)量控制113）病毒顆粒、抗原和核酸的檢出光鏡檢查病理改變或包涵體的存在。電鏡檢查組織內(nèi)或排泄物中的病毒顆粒。PAGE、PCR檢查病毒核酸。免疫法檢查組織內(nèi)、排泄物中的病毒抗原。36第四章實驗動物質(zhì)量控制112.實驗動物細(xì)菌檢測：1）正常動物主要取氣管或鼻咽分泌物和盲腸內(nèi)容物作細(xì)菌培養(yǎng)。2）發(fā)病動物對發(fā)生病變的各組織和臟器做細(xì)菌檢查。3）細(xì)菌監(jiān)測多采用病原學(xué)方法。37第四章實驗動物質(zhì)量控制113.實驗動物寄生蟲檢測：1）體內(nèi)寄生蟲檢查直接涂片：適于腸道蠕蟲蟲卵、腸道原蟲及血液內(nèi)寄生蟲。蟲卵收集：飽和生理鹽水漂浮；沉淀集卵，用于吸蟲卵；透明膠紙粘取，用于蟯蟲蟲卵；尿液檢查，用于鼠膀胱線蟲卵；尸體剖檢。2）體外寄生蟲檢查被毛檢查透明膠紙粘取皮刮取法38第四章實驗動物質(zhì)量控制11

（五）報告規(guī)定了實驗動物質(zhì)量判定原則，即：經(jīng)檢測，如有一只動物的一項指標(biāo)不符合該級別標(biāo)準(zhǔn)要求，則判為不符合該級別標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)檢驗結(jié)果，由檢驗人員及其負(fù)責(zé)人簽發(fā)檢測報告。39第四章實驗動物質(zhì)量控制11第三節(jié)實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量控制

實驗動物的遺傳質(zhì)量控制主要包括兩個方面內(nèi)容，一是科學(xué)地進(jìn)行引種、繁殖和生產(chǎn)，即對生產(chǎn)過程進(jìn)行控制；二是建立定期的遺傳監(jiān)測制度，對產(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行控制。遺傳質(zhì)量控制的重點(diǎn)是近交系和封閉群動物。

遺傳監(jiān)測的目的是為了證實各品系應(yīng)具有的遺傳特性，以及是否發(fā)生遺傳突變和遺傳污染等，以確保被監(jiān)測的樣品符合該品系的要求。實驗動物遺傳質(zhì)量監(jiān)測應(yīng)作為常規(guī)工作，在某種程度上講，實驗動物遺傳質(zhì)量比微生物質(zhì)量對動物實驗結(jié)果的影響更大。40第四章實驗動物質(zhì)量控制11

遺傳是會發(fā)生改變的我們?yōu)槭裁撮L的不同呢？41第四章實驗動物質(zhì)量控制11一、遺傳改變的原因1、近交系遺傳改變的原因殘余的雜合性，盡管我們采用嚴(yán)格的兄妹交配，20代后還是存在1.4％的殘余雜合性，雜合子個體在受精率、繁殖率和生活力上均遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過純合子遺傳型個體，其在群體中地擴(kuò)散引起群體遺傳變異。1.4％42第四章實驗動物質(zhì)量控制11人為失誤造成外來的基因組雜交成一個近交系，產(chǎn)生遺傳污染可以避免染色體片段存在重復(fù)，缺失，易位，倒位，基因位點(diǎn)存在突變，若這些變異在繁育過程中固定下來，會引起群體遺傳改變。（染色體結(jié)構(gòu)的改變）43第四章實驗動物質(zhì)量控制11遺傳突變，來自DNA序列的變化，這種變化可能是某核苷酸堿基的置換、缺失或插入。（是在基因水平上遺傳物質(zhì)中任何可檢測的能遺傳的改變）各種品系分布到各地長期隔離繁育，造成品系特性發(fā)生很大變異44第四章實驗動物質(zhì)量控制112、封閉群（遠(yuǎn)交群）遺傳改變的原因

最主要的是選擇壓同近交系一樣，遺傳污染和基因突變都能造成遠(yuǎn)交群的遺傳差異，但遠(yuǎn)交群等位基因分布改變的主要原因在于選擇。

原因：理論上要保持一個遠(yuǎn)交群所有基因頻率的相對比例沒有變化，最恰當(dāng)?shù)暮诵姆庇簯?yīng)有1000個動物。45第四章實驗動物質(zhì)量控制11

但事實上我們不可能做到這一點(diǎn)，特別是近代，人們?yōu)榱丝刂莆⑸镂廴?，采用剖腹產(chǎn)和悉生生物學(xué)技術(shù)定期地重建新的群體。在重建過程中，群體驟然變小，近交系數(shù)必將上升，因而導(dǎo)致雜合性下降，這也意味著某些基因被固定下來。在不同的單位這種對位點(diǎn)的不同固定，往往導(dǎo)致了同一品種動物等位基因分布的改變。無主觀意識的定向選擇46第四章實驗動物質(zhì)量控制11

二、實驗動物的繁殖方法（一）近交系動物的繁殖方法

1、引種：引種動物應(yīng)來自近交系的基礎(chǔ)群

2、基礎(chǔ)群：目的是保持近交系自身的傳代繁衍和提供種源

3、血緣擴(kuò)大群：種動物來自基礎(chǔ)群

4、生產(chǎn)群：目的是生產(chǎn)供應(yīng)動物，種子來自基礎(chǔ)群或血緣擴(kuò)大群47第四章實驗動物質(zhì)量控制11（二）封閉群動物的繁殖方法1、引種：引種動物數(shù)量要足夠多，小型嚙齒類動物引種數(shù)目一般不少于25對。2、繁殖：封閉群應(yīng)足夠大，盡量避免近親交配。48第四章實驗動物質(zhì)量控制11

近交系動物國際命名的規(guī)則是根據(jù)動物在來源、歷史和培育經(jīng)過而命名的。除一些歷史較長已經(jīng)廣泛使用并獲得認(rèn)可的品系外，近交系、亞系和支系的命名按下面原則進(jìn)行。

1、普通近交系的命名

(1)一般均用1至4個大寫英文字母表示。如ABAAKRSTAR(2)有些品系可由大寫英文字母為首，結(jié)合數(shù)字加以命名。如C3HC57BL(3)非正規(guī)的命名，如果已為國際廣泛認(rèn)同者，可保留沿用，如129、6l5等，

(4)近交代數(shù)表示，一般在品系符號后括號里寫上代數(shù)，并在代數(shù)前加寫“F”如A(F78)。

(5)品系命名符號書寫要全，應(yīng)使用公布的全稱，不能隨便縮寫，尤其寫論文報告，在材料方法里一定要把品系命名符號寫全。例如C57這個縮寫意味著七、八個特征不同的品系；只寫C57BL也包括C57BL/1、C57BL/6J、C57BL/6NC57BL/10J等特征不同的亞系。

（三）實驗動物命名49第四章實驗動物質(zhì)量控制112、重組近交系的命名重組近交系的命名是在兩個祖系名稱縮寫中間加大寫字母X。同一系列中不同的近交系可在其后順加連字號，再加數(shù)字表示。例如AKR和C57BL/10雜交培養(yǎng)的一系列重組近交系可命名為AKXB3、亞系的命名方法是在原品系的名稱后加一道斜線，斜線后標(biāo)明亞系的符號，如DBA/2、C57BL/6J等。有些近交系的不同亞系之間遺傳差異較大，對實驗處理的反應(yīng)不同，在實驗報告或論文中應(yīng)注明所使用的亞系名稱。50第四章實驗動物質(zhì)量控制114、封閉群的命名封閉群由2～4個大寫英文字母命名，種群名稱前標(biāo)明保持者的英文縮寫名稱，第一個字母須大寫，后面的字母小寫，一般不超過4個字母。保持者與種群名稱之間用冒號分開。例如：N:NIH表示由美國國立衛(wèi)生研究院（N）保持的NIH封閉群小鼠。某些命名較早，又廣為人知的封閉群動物，名稱與上述規(guī)則不一致時，仍可沿用其原來的名稱。如：Wistar大鼠，日本的ddy小鼠等。

51第四章實驗動物質(zhì)量控制11

三、實驗動物遺傳學(xué)質(zhì)量監(jiān)測

(一)檢測目的是檢查是否發(fā)生遺傳變異、是否混入其它動物血緣或發(fā)生了錯誤的交配等，以確保檢測群體符合該遺傳群體的要求。52第四章實驗動物質(zhì)量控制11(二)實驗動物遺傳學(xué)監(jiān)測的一般性原則

1.整體性原則

2.必要性原則

3.連續(xù)性原則53第四章實驗動物質(zhì)量控制11四、實驗動物遺傳質(zhì)量監(jiān)測國家標(biāo)準(zhǔn)基本內(nèi)容（一）主題內(nèi)容與適用范圍（二）實驗動物的遺傳分類及命名（三）實驗動物的繁殖方法（四）近交系動物的遺傳質(zhì)量監(jiān)測54第四章實驗動物質(zhì)量控制11五、實驗動物遺傳學(xué)監(jiān)測的常用技術(shù)方法（一）近交系動物的遺傳質(zhì)量檢測原理：由一個基因和多個基因決定的任何特征都能用來檢測一個品系。1.生化標(biāo)志基因(Biochemicalmarkers)檢測法近交系小鼠生化基因位點(diǎn)有13個，近交系大鼠的生化基因位點(diǎn)有9個。2.免疫標(biāo)志（Immunogeneticmarkers）檢測法（1）皮膚移植法（Skingrafting）（2）混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)法（3）血清學(xué)反應(yīng)法（4）腫瘤移植法55第四章實驗動物質(zhì)量控制113．形態(tài)學(xué)標(biāo)記（Extermalmanifestations）檢測法（1）毛色基因測試（Coatcolorgenetesting）（2）下頜骨分析4.細(xì)胞遺傳學(xué)標(biāo)記（Cytogeneticmarkers）檢測法5.分子生物學(xué)標(biāo)記（DNAmarkers）檢測法（1）限制性酶切片段長度多態(tài)性（RFLP）（2）DNA指紋（3）微衛(wèi)星DNA的多態(tài)性（4）小衛(wèi)星DNA（5）隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）（6）單核苷酸多態(tài)性（SNP）56第四章實驗動物質(zhì)量控制1157第四章實驗動物質(zhì)量控制11形態(tài)學(xué)方法1.毛色基因檢測遺傳群體發(fā)生遺傳變異有時產(chǎn)生明顯可見的表型特征。58第四章實驗動物質(zhì)量控制11

近交系的毛色基因品系毛色基因品系毛色基因Aa.b.cDBA/2a.b.C.dABA.B.c.DNCA.b.C.D.S.AKRa.B.cNHa.B.C.D.p.s.ALA.b.cKKa.B.c.D.S.BALB/ca.b.cNZBa.B.C.BLA.B.CNZWA.b.c.CBAA.b.C.D.p.SWRA.B.c.CPB-Fa.b.c.D.p.101Aw.B.C.CPB-FTA.B.C.129Aw.B.cch.p.C3Ha.B.C.615a.b.C.DC57BLa.B.C.TA1a.b.c.DC57BL/6a.B.C.SSBa.b.c.DC57La.b.C.*A-野生色、aa非野生色、Aw-白腹野生色、B-黑色、bb褐色、C-有色、cch

青紫蘭色、cc白化、D-深色、dd淡色、In-鉛灰、in黑灰、S-無色斑、ss有色斑。許多遺傳變異并不涉及毛色的變化，現(xiàn)已很少用59第四章實驗動物質(zhì)量控制112.下頜骨形態(tài)分析法動物的骨骼形態(tài)具有高度的遺傳性，而各種骨骼的形態(tài)、大小及其出現(xiàn)的差異均可作為鑒定品系的方法。下頜骨形態(tài)分析圖

1972，英國實驗動物中心Festing提出60第四章實驗動物質(zhì)量控制11近交系動物遺傳監(jiān)測的免疫學(xué)方法在同一物種的不同個體之間，細(xì)胞膜表面抗原、免疫球蛋白和其它血清蛋白存在著不同類型，稱為同種異型，從而成為同種異型抗原。同種異型是由遺傳基因決定的，因此而被選擇作為遺傳監(jiān)測的標(biāo)記。微量細(xì)胞毒法是根據(jù)特異性抗體與細(xì)胞表面的同種異型抗原結(jié)合，在存在適當(dāng)?shù)难a(bǔ)體時，能殺死細(xì)胞的原理而進(jìn)行的測試方法。皮膚移植試驗的原理是由于個體間組織相容性抗原不同，受體對供體的組織細(xì)胞產(chǎn)生免疫排斥，導(dǎo)致植物壞死。61第四章實驗動物質(zhì)量控制11免疫標(biāo)記探測法1.皮膚移植，主要用于探測組織相容性基因的差異，它是一個敏感、使用廣泛的方法，以尾部皮膚移植法為好62第四章實驗動物質(zhì)量控制11小鼠組織相容性位點(diǎn)的分布63第四章實驗動物質(zhì)量控制112.紅細(xì)胞凝集試驗（檢測紅細(xì)胞抗原和某些H-2抗原）3.細(xì)胞毒試驗（檢測H-2抗原、Ia抗原和白細(xì)胞抗原）其它免疫學(xué)方法64第四章實驗動物質(zhì)量控制11生化標(biāo)記法

依據(jù)生化基因的產(chǎn)物（絕大多數(shù)是異構(gòu)蛋白和酶）在特定電場內(nèi)攜帶的電荷不同，采用