2025年外研版三年級起點選擇性必修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年外研版三年級起點選擇性必修3生物下冊月考試卷984考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、2017年，世界上首批體細胞克隆靈長類在我國誕生。科學家將一只流產(chǎn)胎猴的成纖維細胞的細胞核植入去核卵細胞中，獲得了79個重組細胞，并最終以“中中和“華華”兩只克隆猴的形成成功復活了該流產(chǎn)胎猴，下列有關敘述正確的是（）A.“中中”和“華華”的誕生，證明已經(jīng)分化的動物體細胞的細胞核具有全能性B.只要培養(yǎng)條件適宜，離體的成纖維細胞可以一直分裂下去C.“中中”和“華華”的成纖維細胞等體細胞是由受精卵經(jīng)過有絲分裂和細胞分化形成的D.“中中”和“華華”的誕生，說明人類已經(jīng)攻克死亡難題，可以隨意復活生命2、下列有關生物技術的安全性和倫理問題的敘述中，正確的是（）A.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴散而影響野生植物的基因多樣性B.若轉(zhuǎn)基因植物的外源基因來源于自然界，則不會存在安全性問題C.中國政府禁止生殖性克隆人和治療性克隆D.中國反對生物武器，但在特殊情況下可以生產(chǎn)生物武器3、“篩選”是生物工程中常用的技術手段，下列關于篩選的敘述錯誤的是（）A.基因工程中利用標記基因篩選出的細胞不一定含重組質(zhì)粒B.在誘變育種中需通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異C.植物體細胞雜交過程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細胞需進行篩選D.單克隆抗體制備過程中，第一次篩選的目的是獲得足夠數(shù)量的能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞4、已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)（P），該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運蛋白，由305個氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)（P1）不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。下列相關敘述錯誤的是（）A.上述對蛋白質(zhì)P的改造屬于蛋白質(zhì)工程B.可以通過修飾P基因或合成P1基因來獲得P1基因C.P1基因通過轉(zhuǎn)錄和翻譯獲得具有專一性的蛋白質(zhì)P1D.直接對蛋白質(zhì)P的氨基酸序列進行改造來獲得蛋白質(zhì)P15、下列關于治療性克隆和生殖性克隆的說法，錯誤的是（）A.使用病人自己的細胞產(chǎn)生胰島細胞以治療糖尿病屬于治療性克隆B.B；將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆。

C.治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖D.治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用到動物細胞培養(yǎng)和核移植6、下列有關電泳的敘述，不正確的是（）A.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程B.待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率C.進行電泳時，帶電粒子會向著與其所帶電荷相同的電極移動D.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定7、人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列敘述錯誤的是（）

A.制備抗HCG單克隆抗體的動物細胞工程技術有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合B.將純化HCG注入小鼠是為了從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟中獲得相應的B淋巴細胞C.圖中利用HAT培養(yǎng)液具有選擇作用，讓能合成抗HCG抗體的細胞大量增殖D.腹水中制備抗HCG單克隆抗體時，需要注射免疫抑制劑，使小鼠易于接納雜交瘤細胞8、下列關于傳統(tǒng)發(fā)酵技術應用的敘述，正確的是（）A.家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都不是純種發(fā)酵B.利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵C.酯酸菌是兼性厭氧微生物，是原核生物D.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中情況相反9、利用甲基化酶、去甲基化酶和基因編輯技術，改變了小鼠生殖細胞的“基因組印記”，使其“變性”。我國科研人員將一個極體注入修飾后的次級卵母細胞后（類似受精作用），最終創(chuàng)造出“孤雌生殖”的小鼠。實驗過程如下圖所示。下列敘述正確的是（）

A.體外培養(yǎng)卵母細胞時，為防止污染需將培養(yǎng)皿密閉培養(yǎng)在二氧化碳培養(yǎng)箱中B.胚胎移植前，需對供體和受體進行免疫檢查，避免發(fā)生免疫排斥反應C.甲基化會關閉基因的活性，對某些基因進行去甲基化后該基因可正常表達D.“孤雌小鼠”的誕生過程沒有精子參與，其基因型與提供卵母細胞的雌鼠相同評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)10、下圖為科學家在實驗室中培養(yǎng)“人造牛肉”的簡要過程；下列相關敘述正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理牛肌肉組織，獲得分裂能力強的肌肉母細胞B.生物反應器內(nèi)應控制好適宜的溫度，并沖入純氧保證細胞呼吸C.培養(yǎng)液中的支架提供了更多的細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長D.“人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)，減少環(huán)境污染11、下列關于動物細胞培養(yǎng)液的敘述，正確的是（）A.為了防止培養(yǎng)過程中出現(xiàn)細菌污染，可以在培養(yǎng)液中添加抗生素B.動物細胞培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相同C.CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pHD.培養(yǎng)液應該定期更換，以防止代謝物積累對細胞自身造成危害12、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標準是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測D.可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量13、下列有關微生物的分離與培養(yǎng)實驗的敘述，正確的是（）A.倒平板前，為了防止雜菌污染，需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰B.倒平板時，應將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應立即挑取菌落D.用移液器吸取相應的菌液前，需要將樣液充分搖勻14、世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒用到了能夠精確定位并修飾基因的基因編輯技術，即基因編輯時用約為頭發(fā)二十分之一細的針把Cas9蛋白和特定的RNA引導序列注入受精卵中，對CCR5基因進行修改，預期嬰兒出生后能天然抵抗人類免疫缺陷病毒，關于該技術的安全性問題，下列說法正確的是（）A.基因編輯時，引導序列可能發(fā)生變異，導致剪切錯誤，造成不可預知的后果B.經(jīng)過基因編輯的個體，有可能影響基因選擇性表達，而導致其他疾病的產(chǎn)生C.將基因編輯技術應用于治療性克隆，符合人類倫理道德D.只要加強監(jiān)管、完善法律法規(guī)、完善技術手段，不需擔心基因編輯技術的安全性15、下列說法中不正確的是（）A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類需要的蛋白質(zhì)，所以兩者沒有區(qū)別B.基因工程是蛋白質(zhì)工程的關鍵技術C.通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)仍然是天然的蛋白質(zhì)D.蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上直接改造蛋白質(zhì)評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)16、來源：主要是從______中分離純化出來的。17、動物基因工程：______。18、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80℃的高溫，而DNA在_________℃以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解或破壞_______，食鹽能____________細胞膜。19、對于DNA的粗提取而言，就是利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在__________方面的差異，提取DNA，去除雜質(zhì)。（人教P54）20、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。評卷人得分四、判斷題(共1題，共5分)21、蛋白質(zhì)工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P93）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)22、多發(fā)性硬化癥是一種由纖維蛋白滲入大腦引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病?？蒲腥藛T欲應用生物工程技術治療該病。請回答下面有關問題。

（1）研究人員將纖維蛋白作為_________注射到小鼠體內(nèi)，激活了小鼠的________免疫，進而制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）。該項技術屬于_______范疇（填寫下面正確選項）。

A．基因工程B．細胞工程C．胚胎工程D．蛋白質(zhì)工程。

（2）制備5B8的基本流程如下：從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取________，與小鼠的骨髓瘤細胞進行融合。然后用特定的__________篩選符合要求的雜交瘤細胞后；再通過克?。粰z測、篩選、培養(yǎng)等環(huán)節(jié)，最終從小鼠腹水中提取到5B8。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物；當吞噬細胞中大量產(chǎn)生ROS并釋放時，會毒害周圍神經(jīng)元。NADPH氧化酶是催化細胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。為研究5B8的作用機制，研究者檢測了經(jīng)5B8處理后吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，結(jié)果如圖一；圖二。

①作為標準參照的GADPH蛋白表達量穩(wěn)定且含量豐富，可排除_________對實驗結(jié)果的影響。

②綜合兩幅圖的檢測結(jié)果，通過對比_______組可知，纖維蛋白可以______________，使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害；而通過對比______組結(jié)果發(fā)現(xiàn):5B8能_________。

③經(jīng)臨床實驗證實，單克隆抗體5B8確實對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。請根據(jù)上述結(jié)果分析其具有療效的原因____________________。23、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測環(huán)境或食品中是否存在化學致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）?；卮鹣铝袉栴}：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時應注意：_____。

(2).檢測是否存在化學致癌劑時，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測結(jié)果的兩個重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實驗組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗后，結(jié)果如B所示，則實驗結(jié)果和結(jié)論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應做的處理及目的是_____。24、某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基；成功篩選到能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的__________。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”呼吸作用的類型是__________。

（3）在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關鍵是__________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線的方法進行接種，此過程中所用的接種工具是__________，操作時采用__________滅菌的方法。

（5）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是____________________。

（6）某同學計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了3個培養(yǎng)皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組對照實驗是__________，此對照實驗的目的是____________________。25、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）上圖中B淋巴細胞是取自______________的動物或人。融合的M細胞先用選擇培養(yǎng)基進行篩選，再進行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是______________。

（2）為了進一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡稱抗體X）的效果及作用機制；科學家開展了如下實驗：

實驗一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測抗體X對HA蛋白的親和力。實驗結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）?？贵w種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實驗二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測定小鼠存活情況和體重變化。實驗結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實驗一結(jié)果表明：對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實驗一和實驗二的結(jié)果差異，研究人員提出假說：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞。請以巨噬細胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細胞、細胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關抗體等為材料，設計實驗驗證上述假說。寫出實驗思路__________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共16分)26、現(xiàn)有兩份培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成如下表：。編號成分AKH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水B牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂、蒸餾水

回答下列相關問題。

（1）各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，從細胞中元素組成的角度考慮，提供氮源可以合成的物質(zhì)是_______至少寫出三種）。B培養(yǎng)基中氮源是_______；A培養(yǎng)基只有能合成_______的細菌才能在該培養(yǎng)基上生長；因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）B培養(yǎng)基可以培養(yǎng)大腸桿菌，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_______、_______和滲透壓等條件。在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行____________________滅菌。

（3）用稀釋涂布平板法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其原理是____________________。27、擴展青霉是腐爛蘋果中常見的微生物之一；其次級代謝產(chǎn)物棒曲霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，研究人員進行了如圖所示的實驗，其中“病健交界處”為腐爛部位與未腐爛部位的交界處，取樣分離的5個部分分別為①號部位；②號部位、③號部位、④號部位、⑤號部位。

(1)蘋果腐爛部位的微生物除擴展青霉外，還有枯草桿菌。兩種微生物在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是________。

(2)活化擴展青霉菌種使用的培養(yǎng)基成分如表所示，該培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)屬于________培養(yǎng)基，其中能為擴展青霉的生長繁殖提供能源的是________。蔗糖NaNO3MgSO4KCIFeSO4KH2PO4蒸餾水30g2g0.5g0.5g0.01g1g1000mL

(3)用平板劃線法分離擴展青霉時，劃線的某個平板培養(yǎng)后第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，其他區(qū)域的劃線上卻均無菌落。操作失誤的原因可能是________。接種擴展青霉前，應對蘋果進行________（填“消毒”或“滅菌”）。研究人員測定了病斑直徑為1；2、3cm的蘋果中①～⑤號部位的Pat含量；結(jié)果如圖。

(4)根據(jù)圖分析，下列說法正確的是____。A．腐爛部位中的Pat含量最高B．病斑越大，腐爛部位的Pat含量越高C．離腐爛部位越遠的果肉中Pat含量越低D．1cm和2cm病斑蘋果中，從①號到②號部位的Pat含量下降幅度較大(5)腐爛蘋果去除腐爛部位后是否仍可放心食用？請判斷并結(jié)合圖中信息闡述理由：_________。28、異丁醇具有燃值高；能量密度高等優(yōu)點；其開發(fā)和利用對優(yōu)化我國能源結(jié)構(gòu)和保護環(huán)境有非常重要的戰(zhàn)略意義。基于釀酒酵母的發(fā)酵途徑（圖甲）和圖乙的質(zhì)粒，研究者構(gòu)建了一種表達載體pUC18，用于過表達ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因，以實現(xiàn)異丁醇的大規(guī)模生產(chǎn)。已知氨芐青霉素能抑制細菌細胞壁的形成。據(jù)此回答下列問題：

(1)圖乙質(zhì)粒上有多個限制酶切位點，作用是____________。研究人員先用pUC18轉(zhuǎn)化經(jīng)_________（處理方法）的大腸桿菌，以便篩選、鑒定擴增重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒上有_________；所以能在大腸桿菌中擴增。

(2)將環(huán)狀載體pUC18導入釀酒酵母時，一般會將其進行酶切得到線性化載體，隨后再將其導入受體細胞。根據(jù)所學的知識推測酶切得到線性化載體的目的是______________。

(3)提取成功構(gòu)建的表達載體并導入不能合成組氨酸的釀酒酵母菌株，將菌株接種在培養(yǎng)基中以獲得單菌落，該過程稱為微生物的______培養(yǎng)。培養(yǎng)基中需要添加的物質(zhì)有_____（用下列字母填寫：a．組氨酸、b．氨芐青霉素；c瓊脂）。

(4)異丁醇的大量積累會傷害細胞；研究人員給該工程菌導入一個經(jīng)改造的光敏蛋白基因，使工程菌對特定的藍光敏感。進行不同的光照處理，使其在異丁酵產(chǎn)生階段和生長繁殖階段進行切換，結(jié)果如下圖丙所示。

注：5/10/20hpulse分別代表在黑暗條件下每隔5；10、20h發(fā)出15s和65s的藍光脈沖30min

①對照組的酵母菌需要導入________________。

②以葡萄糖為碳源，利用該轉(zhuǎn)基因釀酒酵母進行發(fā)酵時，若想進一步提高其異丁醇產(chǎn)量，綜合圖甲和圖乙信息，分別寫出進一步優(yōu)化菌株和工藝的措施（各一點）___________。29、人工栽培的馬鈴薯易感染病菌而出現(xiàn)青枯病導致產(chǎn)量降低。某研究小組采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗菌肽基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯中提高其抗性；具體步驟如下：基因表達載體的構(gòu)建（含抗菌肽基因與青霉素抗性基因）；重組DNA分子導入農(nóng)桿菌、轉(zhuǎn)化細胞的篩選、農(nóng)桿菌侵染外植體、愈傷組織的誘導與分化。請回答下列有關問題：

(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法利用的原理是其Ti質(zhì)粒的T-DNA片段具有_________的特點。本實驗中基因表達載體的組成除了有抗菌肽基因與青霉素抗性基因外，還有啟動子、終止子和__________等。

(2)將重組DNA分子導入農(nóng)桿菌時可用_________對農(nóng)桿菌進行處理；提高其吸收外源DNA的能力。

(3)將本實驗中農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入含有_________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；可以篩選出成功導入抗菌肽基因的細胞。

(4)使用不同種類農(nóng)桿菌對馬鈴薯外植體侵染后的轉(zhuǎn)化成功率不同。某研究小組為了尋找較高轉(zhuǎn)化效率的侵染方法；測定了不同種類農(nóng)桿菌侵染馬鈴薯外植體后的轉(zhuǎn)化效率，結(jié)果如下圖甲。

由圖甲可知，進行馬鈴薯農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化時應該選擇_________農(nóng)桿菌菌種。實驗中農(nóng)桿菌過度繁殖可能會使外植體細胞壞死，判斷依據(jù)是___________________________。

(5)為避免農(nóng)桿菌過度繁殖，被侵染后的外植體在培養(yǎng)一段時間后還需要進行脫菌處理，研究小組測定了不同抗生素對未導入質(zhì)粒的不同種農(nóng)桿菌抑菌率如圖乙。根據(jù)圖甲和圖乙分析，本實驗中導入了抗菌肽基因的農(nóng)桿菌與外植體共培養(yǎng)一段時間后，選擇_________作為抑菌抗生素能起到最佳脫菌效果。

(6)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，抑菌抗生素在對農(nóng)桿菌生長起抑制作用的同時，對馬鈴薯愈傷組織的誘導與分化也可能產(chǎn)生抑制作用，為探究是否存在這種毒副作用，還需要進行的實驗是__________________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

根據(jù)題意；我國克隆猴利用的是流產(chǎn)胎猴的成纖維細胞，該細胞是已分化的體細胞，利用該體細胞的細胞核移入一個去核的卵細胞中，形成新的重組細胞，經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植到代孕母體中發(fā)育成新個體，即為克隆猴。該過程體現(xiàn)了成纖維細胞核的全能性。

【詳解】

A；根據(jù)以上分析可知；“中中”和“華華”的誕生，利用了成纖維細胞的細胞核，成纖維細胞屬于已分化的動物體細胞，因此通過該過程說了已分化的動物細胞的細胞核具有全能性，A正確；

B；根據(jù)分析可知；成纖維細胞屬于已分化的細胞，具有一定的分裂能力，在培養(yǎng)條件適宜的情況下，離體的成纖維細胞可以進行分裂，一般最多不超過50代，B錯誤；

C；根據(jù)題意可知；“中中”和“華華”的成纖維細胞等體細胞是由重組細胞經(jīng)過有絲分裂和細胞分化形成的，C錯誤；

D；“中中”和“華華”的誕生；說明體細胞核移植技術在動物中獲得成功，但是成功率非常低，此外獲得的克隆動物還存在健康問題，總之，體細胞核移植技術的研究仍在繼續(xù)深入，人類對克隆技術的應用還有許多問題需要解決，D錯誤。

故選A。2、A【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴散而導致外源基因進入野生植物中；影響野生植物的基因多樣性，A正確；

B；無論轉(zhuǎn)基因植物的外源基因是否來源于自然界；都會存在安全性問題，B錯誤；

C；中國政府禁止生殖性克隆人；但不反對治療性克隆，C錯誤；

D；中國在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器；并反對生物武器及其技術和設備的擴散，D錯誤。

故選A。3、D【分析】【分析】

1；標記基因的作用：鑒定受體細胞中是否含有目的基因；從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

2；基因突變的特點：基因突變具有普遍性、低頻性（個體的基因突變率低；但種群中個體數(shù)，其突變率較高）、隨機性、不定向性、多害少利性。

3；單克隆抗體制備的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。

【詳解】

A；標記基因位于質(zhì)粒上；基因工程中利用標記基因篩選出的細胞不一定都含有重組質(zhì)粒，也可能只含有普通質(zhì)粒，A正確；

B；誘變育種的原理是基因突變；而基因突變具有不定向性和多害少利性，因此在誘變育種中需要通過篩選才能得到數(shù)量較少的有利變異，B正確；

C；植物體細胞雜交過程中；誘導原生質(zhì)體融合后，可獲得多種融合細胞，因此需要對獲得的細胞進行篩選，C正確；

D；單克隆抗體制備過程中；第一次篩選出的是雜交瘤細胞，第二次篩選出的是既能迅速大量增殖又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞，D錯誤。

故選D。4、D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程的過程為：預期蛋白質(zhì)功能→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有氨基酸序列→找到對應的脫氧核苷酸序列（基因）.蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。

【詳解】

A；根據(jù)上述分析可知題干中對蛋白質(zhì)P的改造屬于蛋白質(zhì)工程；A正確；

B；以P基因序列為基礎；獲得P1基因途進有兩個：修飾P基因，合成P1基因，B正確；

C；根據(jù)P1基因特定的堿基對的排列順序；經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯會獲得具有專一性的蛋白質(zhì)P1，C正確；

D；不能直接對蛋白質(zhì)P的氨基酸序列進行改造來獲得蛋白質(zhì)P1；蛋白質(zhì)工程屬于第二代基因工程，通過基因改造或基因修飾來完成，D錯誤。

故選D。5、C【分析】【分析】

1.“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

2.生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的克隆。即用生殖技術制造完整的克隆人。目的是產(chǎn)生一個獨立生存的個體。與此相對的是研究性克隆或醫(yī)學性克??；指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細胞。不產(chǎn)生可獨立生存的個體。

【詳解】

A、把病人的胚胎干細胞在一定的條件下，通過離體培養(yǎng)和誘導分化形成胰島細胞以治療糖尿病，屬于治療性克隆，A正確；

B、生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的進行克隆。即用生殖技術將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育成嬰兒的過程，B正確；

C、克隆是無性生殖，C錯誤；

D、治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用到動物細胞培養(yǎng)和核移植，D正確。

故選C。6、C【分析】【分析】

凝膠電泳法：（1）原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)；電量、形狀和大小不同；在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負電；加入帶負電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。

【詳解】

A；電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程；A正確；

B；待測樣品中各種分子的形狀、大小及帶電性質(zhì)的差異等會影響其在電泳中的遷移速度；B正確；

C；由于同性相斥、異性相吸；帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動，C錯誤；

D；常用的電泳方法是瓊脂糖凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；D正確。

故選C。

【點睛】7、C【分析】【分析】

據(jù)圖分析；給動物注射抗原HCG，產(chǎn)生已免疫的B淋巴細胞，加促融劑，與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基進行篩選，篩選出雜交瘤細胞，再進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，再進行大規(guī)模培養(yǎng)。

【詳解】

A；制備單克隆抗體過程中要用到動物細胞培養(yǎng)技術培養(yǎng)B淋巴細胞、骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞；動物細胞融合技術將B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，A正確；

B；在制備單克隆抗體過程中；首先要將純化HCG注入小鼠體內(nèi)，其目的是從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟中獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞，B正確；

C；圖中利用HAT培養(yǎng)液目的是篩選出雜交瘤細胞；但篩選的雜交瘤細胞不一定能產(chǎn)生抗HCG抗體，C錯誤；

D；可將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；從小鼠腹水中制備抗HCG單克隆抗體，此過程需要注射免疫抑制劑，降低小鼠的免疫能力，使小鼠易于接納雜交瘤細胞，D正確。

故選C。8、A【分析】【分析】

果酒制作原理是利用酵母菌無氧呼吸生成酒精和CO2。果醋制作原理是利用醋酸菌有氧呼吸生成醋酸。酸奶制作原理是利用乳酸菌無氧呼吸生產(chǎn)乳酸。制作果酒時；應該先通氣后密封，先通氣的目的是讓酵母菌進行有氧呼吸而大量繁殖，再密封的目的是讓酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精。

【詳解】

A；家庭制作果酒、果醋和泡菜通常都是利用天然的微生物進行發(fā)酵；不是純種發(fā)酵，A正確；

B；利用乳酸菌制作酸奶過程中；由于乳酸菌是厭氧型微生物，需要密封發(fā)酵，B錯誤；

C；醋酸菌是耗氧微生物；是原核生物，C錯誤；

D、果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低，果酒制作過程中由于產(chǎn)生CO2；發(fā)酵液pH也逐漸降低，D錯誤。

故選A。9、C【分析】【分析】

分析圖示；從卵泡中取出卵母細胞，再將經(jīng)過甲基化處理的卵母細胞進行早期胚胎培養(yǎng)；胚胎移植等獲得孤雌小鼠。

【詳解】

A；動物細胞培養(yǎng)過程中；為防止雜菌污染，需要加入抗生素，A錯誤；

B；胚胎移植不會發(fā)生免疫排斥；B錯誤；

C；DNA分子甲基化會影響基因的表達；從而關閉基因的活性，而對某些基因進行去甲基化后該基因可正常表達，C正確；

D、孤雌小鼠是由次級卵母細胞發(fā)育而來，如果提供卵細胞的基因型是AaBb；經(jīng)過減數(shù)分裂形成的次級卵母細胞基因型可以是AABB，所以二者基因型可能不同，D錯誤。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)10、A:C:D【分析】【分析】

用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。動物細胞培養(yǎng)過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2?！叭嗽炫Ｈ狻钡呐囵B(yǎng)不僅產(chǎn)量高；并可以減少成本和降低環(huán)境污染。

【詳解】

A；胰蛋白酶處理動物組織；可以使組織分散成單個細胞，利于動物細胞培養(yǎng)，A正確。

B、動物細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%CO2；B錯誤。

C；動物細胞培養(yǎng)過程中懸液中的細胞會很快貼附在瓶壁上。所以細胞貼附瓶壁的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑；無毒，易于貼附，如果想得到大量的產(chǎn)物，可以增大細胞吸附面積，有利于細胞貼壁生長，C正確。

D；人造牛肉”的培養(yǎng)有利于牛肉的工廠化生產(chǎn)；同時也可減少對土地、飲用水和飼料的需求，且溫室氣體等其他環(huán)境污染物也會減少，D正確。

故選ACD。11、A:C:D【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織；將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。

2；由于動物細胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚；所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境，因此在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。

3；動物細胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細胞代謝產(chǎn)物累積對細胞自身產(chǎn)生危害。

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：無機物（無機鹽；微量元素等）；有機物（糖、氨基酸、促生長因子等）、血清和血漿(提供細胞生長必須的營養(yǎng)成份)。

（3）溫度和pH（36.5±0.5℃；7.2～7.4）。

（4）氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO2的混合氣體），其中5%CO2氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定。

【詳解】

A；抗生素可以抑制細菌的生長；所以在進行動物細胞培養(yǎng)過程中可以在培養(yǎng)液中添加抗生素，用以防治細菌的污染，A正確；

B；動物細胞培養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基不同；動物細胞培養(yǎng)液通常需要加入動物血清、血漿，B錯誤；

C；在動物細胞培養(yǎng)過程中；氣體環(huán)境是95%的空氣+5%CO?的混合氣體，其中5%CO?氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定，C正確；

D；代謝產(chǎn)物積累會對細胞自身造成危害；營養(yǎng)物質(zhì)減少不利于細胞的培養(yǎng)，所以動物細胞培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液，為細胞提供充足營養(yǎng)并防治代謝產(chǎn)物積累危害細胞，D正確。

故選ACD。12、B:D【分析】【分析】

細菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較??；不能用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。13、A:D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：(1)右手持接種環(huán)；經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】

A；倒平板前；需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰，通過灼燒滅菌防止雜菌污染，A正確；

B；倒平板時；應將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免雜菌進入，而不是為了防濺，B錯誤；

C；接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應等到冷卻后再挑取菌落；否則高溫會使菌落死亡，C錯誤；

D；用移液器吸取相應的菌液前；需要將樣液充分搖勻，保證菌液中微生物均勻分布，提高實驗的準確性，D正確。

故選AD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術是指通過核酸酶對靶基因進行定點改造；實現(xiàn)特定DNA的定點敲除；敲入以及突變等，最終下調(diào)或上調(diào)基因的表達，以使細胞獲得新表型的一種新型技術。

【詳解】

A；基因編輯時的引導序列是RNA；RNA的堿基序列改變可能導致識別錯誤，導致剪切錯誤，造成不可預知的后果，A正確；

B；基因編輯后；基因的序列發(fā)生改變，基因的表達具有選擇性，可以相互影響，基因選擇性表達受干擾后，容易導致某些疾病的產(chǎn)生，B正確；

C；依據(jù)我國法律；生殖性克隆不符合人類倫理道德，治療性克隆符合人類倫理道德，C正確；

D；加強監(jiān)管、完善法律法規(guī)、完善技術手段；但基因編輯技術仍存在一定的安全性，所以要理性看待，D錯誤。

故選ABC。15、A:C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程和基因工程的區(qū)別。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程和基因工程的目的都是獲得人類需要的蛋白質(zhì)；但是二者有區(qū)別，蛋白質(zhì)工程可以獲得自然界中不存在的蛋白質(zhì)，而基因工程獲得的蛋白質(zhì)是自然界中已有的，A錯誤；

B；蛋白質(zhì)工程可以看做是第二代基因工程；因此，基因工程是蛋白質(zhì)工程的關鍵技術，B正確；

C；通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)不再是天然的蛋白質(zhì)；C錯誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是蛋白質(zhì)；但對蛋白質(zhì)的改造需要通過改造相應基因的結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】原核生物17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80細胞膜溶解19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】物理和化學性20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代四、判斷題(共1題，共5分)21、B【分析】【詳解】

基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎上延伸出來的第二代基因工程，通過改造和合成基因來改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)或制造出一種新的蛋白質(zhì)，可見蛋白質(zhì)工程可以制造出自然界不存在的、但是能符合人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)，故說法錯誤。五、實驗題(共4題，共8分)22、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞。①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。（6）單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，能大量制備。

【詳解】

（1）抗體參與體液免疫；科研人員將纖維蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，激活體液免疫過程，制備出抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）。該項技術為單克隆抗體的制備，屬于細胞工程范疇，即B正確，ACD錯誤。

故選B。

（2）制備抗纖維蛋白的單克隆抗體5B8的基本技術流程為：先從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取的相應的B細胞（能產(chǎn)生特定的抗體）與小鼠的骨髓瘤細胞融合獲得雜交細胞；用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選；獲得雜交瘤細胞；對雜交瘤細胞進行克隆和抗體檢測，獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；獲得的雜交瘤細胞在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)；然后從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。

（3）①活性氧（ROS）是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物；NADPH氧化酶是催化細胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。由于細胞中GAPDH蛋白表達量穩(wěn)定且含量豐富，在實驗中可作為標準參照，排除實驗操作等無關變量對結(jié)果的影響。

②對比1和2組檢測結(jié)果；細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量升高，說明纖維蛋白提高了吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害。通過對比1；2、3組結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)5B8處理后，NADPH氧化酶和ROS的含量會下降，說明5B8能減輕纖維蛋白對NADPH氧化酶和ROS的含量的影響，使兩種物質(zhì)含量下降。

③由第②題可知；經(jīng)5B8處理后，NADPH氧化酶和ROS的含量會下降，說明單克隆抗體588與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細胞NADPH氧化酶的量，進而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對神經(jīng)元的傷害，因此單克隆抗體5B8對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。

【點睛】

本題考查單克隆抗體的制備過程和抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）的作用機理，意在考查考生對所學知識的理解和應用能力?！窘馕觥靠乖w液B相應的B淋巴細胞；選擇培養(yǎng)基無關變量（如實驗操作等）1和2提高吞噬細胞中NADPH氧化酶和ROS的含量1、2、3組（2、3組）減輕纖維蛋白對NADPH氧化酶和ROS含量的影響，使兩種物質(zhì)含量下降單克隆抗體5B8與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細胞NADPH氧化酶的量，進而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對神經(jīng)元的傷害，起到治療多發(fā)性硬化癥的作用。23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)的方法?！拘?】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機鹽、生長因子等。倒平板時；應待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應在酒精燈火焰附近進行，以防止雜菌污染?！拘?】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實驗中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學致癌劑導致突變型菌株突變成野生型菌株。【小問3】

使用過的培養(yǎng)基應滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實驗操作者。

【點睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關知識，意在考查考生對所學知識的識記和理解能力。【解析】【小題1】①.碳源；氮源、水和無機鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學誘變劑，這些化學物質(zhì)具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環(huán)境造成污染24、略

【分析】【分析】

微生物的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的成分必須含有碳源；氮源、水和無機鹽。獲取純凈微生物的關鍵是防止外來雜菌入侵。實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。

【詳解】

（1）本實驗是分離出降解的有機化合物A的菌種；所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分析培養(yǎng)基的配方可知；該培養(yǎng)基由化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，其他成分中為體現(xiàn)出提供碳源和氮源，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；在培養(yǎng)過程中應該振蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的類型是有氧呼吸。

（3）獲得純凈“目的菌”的關鍵是無菌技術；防止外來雜菌入侵。

（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)；對于接種環(huán)的滅菌方法應該是灼燒滅菌。

（5））實驗結(jié)束后；使用過的培養(yǎng)基應該進行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）實驗設計過程應遵循對照原則；該實驗還應增設一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染，檢驗培養(yǎng)基是否滅菌合格。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術操作方法及接種微生物接種常用的兩種方法，能結(jié)合所學的知識準確答題。【解析】篩選目的菌選擇化合物A有氧呼吸防止外來雜菌入侵接種環(huán)灼燒防止造成環(huán)境污染不接種的空白培養(yǎng)基檢驗培養(yǎng)基是否滅菌合格25、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合；M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細胞進行細胞融合，M表示融合細胞，N表示篩選出的雜交瘤細胞；B淋巴細胞是取自感染H7N9病毒的動物或人；隨后將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，對融合后的細胞用選擇培養(yǎng)基進行篩選，挑選出B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞，然后再進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到符合要求的N細胞，N細胞的名稱是雜交瘤細胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細胞表面的受體相結(jié)合，從而增強巨噬細胞的吞噬作用，進而清除被病毒感染的靶細胞，需要進行抗體X和抗體Y的對照實驗，并與無關抗體進行比較，可以將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A；B、C三組細胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。

【點睛】

對單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測原理和實驗目的及用品的分析，是解決本題的關鍵?！窘馕觥竣?感染過H7N9病毒②.抗體檢測③.雜交瘤細胞④.Y⑤.將巨噬細胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細胞分別加入A、B、C三組細胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細胞的裂解百分比。六、綜合題(共4題，共16分)26、略

【分析】【分析】

據(jù)表分析：甲培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源；主要用于尿素分解菌的培養(yǎng)，屬于選擇培養(yǎng)基，用于微生物的篩選，乙培養(yǎng)基中是普通的培養(yǎng)基，各種微生物都可以培養(yǎng)。

【詳解】

（1）蛋白質(zhì)；核酸、ATP和磷脂等物質(zhì)都含有N元素；提供的氮源，可用于合成這些物質(zhì)，B培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨都含有N元素，都可以作為氮源，A培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只有尿素分解菌也就是能合成脲酶的細菌才能在這個培養(yǎng)基上生存。

（2）B培養(yǎng)基在培養(yǎng)大腸桿菌時；除考慮營養(yǎng)條件之外，還要考慮溫度；酸堿度和滲透壓等條件，培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿都可以采用高壓蒸汽滅菌。

（3）一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)；就能推測出樣品中的活菌數(shù)，這是用稀釋涂布平板法可以用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理。

【點睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關內(nèi)容，意在強化對選擇培養(yǎng)基的認識和理解?！窘馕觥康鞍踪|(zhì)、核酸、ATP、磷脂牛肉膏和蛋白胨脲酶溫度酸堿度高壓蒸汽一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中的活菌數(shù)27、略

【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析可知；①號部位為病斑區(qū)域，即腐爛部位，①與②交界處為“病鍵交界處”，是腐爛部位與未腐爛部位交界的地方，②③④⑤均為未腐爛部位，且距離腐爛部位依次邊遠。

2；在曲線圖中；病斑部位的Pat含量最高，而距離病斑部位越來越遠，Pat含量就會越來越少。

(1)

青霉是真菌；屬于真核生物，枯草桿菌屬于原核生物。二者在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是青霉有以核膜為界限的細胞核，即有成形的細胞核，而枯草桿菌沒有以核膜為界限的細胞核；

(2)

據(jù)表格可知；培養(yǎng)基中沒有凝固劑，屬于液體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基成分中只有蔗糖是有機物，其屬于糖類，糖類是主要的能源物質(zhì)，故能為擴展青霉的生長繁殖提供能源的是蔗糖；

(3)

第一區(qū)域劃線結(jié)束；接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端開始，都會導致培養(yǎng)基上第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，其他區(qū)域的劃線上卻均無菌落。接種擴展青霉前，為了避免蘋果上其他雜菌；病原微生物的污染，應對蘋果進行消毒處理；

(4)

A；由圖可知；①號為腐爛部位，曲線圖中每條曲線①號部位的Pat含量都是最高的，A正確；

B；在曲線圖中；3cm的①部位比2cm的①部位Pat含量要稍低，故病斑越大腐爛部位的Pat含量不一定越高，B錯誤；

C；①為腐爛部位；②③④⑤依次距離腐爛部位越來越遠，而曲線圖中從①到⑤Pat含量逐漸降低，故離腐爛部位越遠的果肉中Pat含量越低，C正確；

D；由曲線圖可知；1cm和2cm病斑蘋果中，從①號到②號部位的Pat含量下降0.9—1.2左右，故下降幅度較大，D正確。

故選ACD；

(5)

腐爛蘋果去除腐爛部位后不能食用。已知Pat是一種具有致突變作用的毒素；從曲線圖中可看出，腐爛部位Pat含量較高，而未腐爛部位也存在少量Pat，如果只去除腐爛部位，那么未腐爛部位中的Pat仍然會對人體造成傷害，存在健康風險，故腐爛蘋果去除腐爛部位后不能食用。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，意在考查考生分析圖解的能力，能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力，具備驗證簡單生物學事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析、處理的解答本題的關鍵。【解析】(1)擴展青霉有以核膜為界限的細胞核；枯草桿菌無。

(2)液體蔗糖。

(3)第一區(qū)域劃線結(jié)束；接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一區(qū)域末端開始消毒。

(4)ACD

(5)否，Pat是一種具有致突變作用的毒素，將腐爛蘋果的腐爛部位去除后，未腐爛部位仍含一定量的Pat，食用仍存在健康風險28、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。

（4）目的基因的檢測與鑒定。

【詳解】

（1）圖中質(zhì)粒作為載體將ILV2、ILV5、ILV3、AR010基因送入受體細胞中，所以質(zhì)粒DNA分子上多個限制酶切位點，其作用是供外源DNA片段（基因）插入；受體細胞不同，目的基因?qū)氲姆?/p>