2025年浙科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是。

A.改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài).果酒發(fā)酵過程中通入N2，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C.果醋的發(fā)酵周期與實驗設定的溫度密切相關(guān)D.氣體入口與氣體出口可以交換使用2、如圖表示培養(yǎng)和純化酵母菌的部分操作步驟。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.步驟①中，倒好的平板待培養(yǎng)基冷凝后應倒過來放置B.步驟②中，用灼燒后冷卻的接種環(huán)在火焰旁蘸取菌液C.步驟③中，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種稀釋分散D.步驟④中，可觀察到1至5區(qū)出現(xiàn)相同的的單菌落數(shù)3、植物細胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等技術(shù)，具有廣泛的應用前景和實用價值。下列對這些操作或應用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導植物原生質(zhì)體融合，再生出細胞壁是融合成功的標志B.植物體細胞雜交技術(shù)去壁前，需對兩種植物細胞進行滅菌處理，以防止雜菌污染C.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑，一般可以分為生長素類，細胞分裂素類和赤霉素類D.獲取植物原生質(zhì)體時，需在與細胞液濃度相當?shù)木彌_液中進行4、谷氨酸的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。下列有關(guān)發(fā)酵罐的監(jiān)測裝置作用及目的的敘述，不正確的是（）A.檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)目、產(chǎn)物濃度等B.監(jiān)控pH并及時添加堿性物質(zhì)以提高產(chǎn)量C.監(jiān)控溶解氧、溫度、通氣量和轉(zhuǎn)速等條件，以免影響其代謝途徑和產(chǎn)量D.此過程需要控制無氧和恒溫條件以利于谷氨酸棒狀桿菌和谷氨酸的生成5、下列有關(guān)限制酶和DNA連接酶的敘述正確的是（）A.E·coliDNA連接酶既可以連接黏性末端，又可以連接平末端B.用限制酶切割獲得一個目的基因時得到兩個切口，有2個磷酸二酯鍵被斷開C.限制酶—CATG↓—和—G↓GATCC—切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D.限制酶、DNA連接酶和Taq酶作用的化學鍵都是磷酸二酯鍵評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)6、哺乳動物的造血干細胞具有以下哪些性質(zhì)？（）A.分化為骨骼肌細胞B.分化為紅細胞C.分化為嗜中性粒細胞D.分化為神經(jīng)細胞7、大多數(shù)哺乳動物的早期胚胎具有調(diào)節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個完整的胎兒，調(diào)節(jié)能力隨著發(fā)育進程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調(diào)整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植8、以純化鑒定后的重組大腸桿菌RecQ解旋酶免疫小鼠（2n=40），融合免疫小鼠的脾細胞及骨髓瘤細胞（2n=62-68），篩選雜交瘤細胞，制備抗RecQ解旋酶單克隆抗體（mAb），相關(guān)檢測結(jié)果如圖A、B所示。有關(guān)說法正確的是（）

圖A雜交瘤細胞染色體數(shù)目圖B不同濃度mAb對RecQ蛋白結(jié)合DNA活性的影響A.重組大腸桿菌RecQ解旋酶可刺激相應B淋巴細胞增殖分化B.單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和2次抗原檢測C.雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數(shù)目的丟失D.該mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合，在稀釋度為1/800時可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合9、2022年6月10日；世界首例體細胞克隆北極狼在北京呱呱墜地?？寺”睒O狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園引進的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。克隆過程如圖所示，下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.體細胞核移植技術(shù)比胚胎干細胞核移植技術(shù)更易成功B.用電刺激、Ca2+載體等方法激活重構(gòu)胚，促進其分裂發(fā)育C.圖中細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組D.體細胞核移植技術(shù)有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量10、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標準是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測D.可用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量11、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進行克隆人實驗D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物12、黑尿癥是一種單基因遺傳?。辉摬≡谌巳褐械陌l(fā)病率大約為百萬分之一?；颊咭蛉狈δ蚝谒嵫趸?，使得尿黑酸不能被氧化分解而導致尿液呈黑色。下圖是該遺傳病的某家系圖。下列說法正確的是（）

A.該實例說明基因通過控制蛋白質(zhì)的合成而直接控制性狀B.控制黑尿癥的基因為隱性基因，且位于X染色體上C.Ⅱ4和Ⅱ5婚配，所生男孩患黑尿癥的概率約為1/3003D.若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會出現(xiàn)雜交帶13、全球首個鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準臨床試驗，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應答和全身性免疫應答，從而發(fā)揮保護作用。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對流感病毒進行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優(yōu)點是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細胞中經(jīng)基因表達后才能發(fā)揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細胞，產(chǎn)生細胞免疫和體液免疫14、2019年，中國科學院神經(jīng)科學研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術(shù)，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術(shù)培育出5只克隆疾病猴。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物D.可以運用該基因編輯技術(shù)進行生殖性克隆人的研究評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)15、在課題1中，我們學習了稀釋涂布平板法。這一方法常用來統(tǒng)計樣品中_________________的數(shù)目。當樣品的稀釋度足夠高時，____________________。16、1.基因檢測引發(fā)的倫理問題。

（1）基因身份證：基因身份證指把個人的_____和_____檢測出來；記錄在磁卡上，而做成的個人基因身份證。

（2）基因檢測引發(fā)的爭論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項目。

反對。

支持。

技術(shù)方面。

目前人類對①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；通過基因檢測達到②的目的是很困難的；基因檢測結(jié)果會給受檢者帶來巨大的③。

通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取④；適時進行治療，達到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤；如個人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠，更明顯的是造成一支遺傳性失業(yè)大軍。

對于基因歧視現(xiàn)象；可以通過正確的科學知識傳播；⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設計試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項目。

設計試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術(shù)手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）進行遺傳學診斷這一環(huán)節(jié)。

②（填“需要”或‘不需要”）進行遺傳學診斷。

實踐應用。

用于白血??；貧血病等遺傳性疾病的預測。

解決不孕不育問題。

聯(lián)系。

二者都是③受精；體外進行早期胚胎發(fā)育，再進行胚胎移植，從生殖方式上都為④

17、___________（簡稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術(shù)，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個小時內(nèi)復制出上百萬份的DNA拷貝。18、基因工程取得了突飛猛進的發(fā)展。_____、_____等技術(shù)的應用不僅使生命科學的研究發(fā)生了前所未有的變化，而且在實際應用領(lǐng)域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的應用前景。抗蟲棉中的抗蟲基因來自_____，抗蟲基因作物的使用，不僅減少了_____，降低了____，而且還減少了_____。19、DNA粗提取與鑒定實驗中，二苯胺要___________。20、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過______，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

21、應用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。22、請回答有關(guān)植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經(jīng)過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到_________培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到__________的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。評卷人得分四、判斷題(共2題，共6分)23、通過體細胞核移植技術(shù)已經(jīng)獲得了多種克隆動物，該技術(shù)的成功率已經(jīng)很高。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯誤24、要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共12分)25、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費用低、體外受精、透明等優(yōu)點，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達。針對其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內(nèi)含子2的對應序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

為了驗證上述假說；研究人員進行了如下實驗：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實驗組和對照組的細胞中提取總RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結(jié)果為______（填字母）。A．實驗組有雜交帶B．實驗組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進行PCR時，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細胞作為初始材料進行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為______細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。26、酵母菌與人們的日常生活密切相關(guān)；也是現(xiàn)代生物技術(shù)研究常用的生物。

(1)利用酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精的過程中，要先充氣后閉氣，原因是_____。

(2)利用玉米秸稈生產(chǎn)酒精時，水解秸稈所用的纖維素酶可來自微生物，分離產(chǎn)生該酶的微生物時，所需要的培養(yǎng)基為_____（按功能分），培養(yǎng)基中的碳源為_____。

(3)雖然不同的生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同，但是培養(yǎng)這些微生物的培養(yǎng)基，一般都含有四大營養(yǎng)成分，即_____、_____、_____和碳源。培養(yǎng)基滅菌的常用方法為_____。

(4)接種微生物常用的兩種方法是_____、_____。實驗室接種微生物時，常在酒精燈火焰旁進行，這樣操作的目的是_____。27、柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞桿菌引起的；發(fā)生在柑橘的一種病害；植株受害后會發(fā)生落葉、落果，嚴重時葉片落光，整株枯死。利用基因工程將來自水稻的Xa27基因?qū)敫涕倏色@得抗柑橘潰瘍病的植株，利用植物組織離體培養(yǎng)技術(shù)則可培育無病毒植株?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為了獲得脫毒苗，通?？梢赃x取植株______附近的組織進行離體培養(yǎng)，選取該部位組織的原因是______。

(2)如圖1表示科研人員利用柑橘幼苗獲得抗病轉(zhuǎn)基因植株的過程：

①基因表達載體必需的結(jié)構(gòu)除復制原點、啟動子、終止子、目的基因外，還有______。

②共培養(yǎng)時，Ti質(zhì)粒的作用是______。

③共培養(yǎng)后，要利用選擇培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，目的是______。

④再分化過程中，誘導愈傷組織生根、生芽的先后順序為______。

⑤從個體生物學水平鑒定柑橘再生植株時可采用______（填具體操作）的方法。經(jīng)鑒定有幾棵植株沒有抗病的能力，分別提取這幾棵植株的DNA，依據(jù)______的特異性堿基序列設計引物，擴增后利用______進行檢測；結(jié)果如圖2。

據(jù)圖2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。28、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導致的遺傳病?？蒲腥藛T對此病的治療進行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細胞，并采用___________技術(shù)檢測導入基因的表達情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進行治療，檢測肝臟細胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分六、綜合題(共4題，共32分)29、新型冠狀病毒屬于RNA病毒；它可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。

I．單克隆抗體可阻斷病毒的黏附或入侵；故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。下圖為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。

II．各國在防止病毒傳播；擴散的同時；都在加快疫苗的研發(fā)進程，至今已有部分疫苗已通過臨床試驗并投入使用。

請回答下列問題：

（1）為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測病毒的核酸；采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測_____________。

（2）據(jù)圖所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射____________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得____________細胞；之后對上述細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，目的是___________________。

（3）復制缺陷型腺病毒對人體細胞具有侵染性，但不能在人體內(nèi)增殖。若在我國已有的腺病毒載體疫苗制備平臺的基礎(chǔ)上研發(fā)新冠病毒疫苗，首先應以新冠病毒的遺傳物質(zhì)RNA為模板經(jīng)_____________過程獲得編碼S蛋白的DNA片段；此外，需要___________________________酶參與，才能制備重組的腺病毒，該步驟是基因工程的核心步驟，其名稱是_______________________；之后再讓重組的復制缺陷型腺病毒侵染人體細胞，該重組腺病毒在人體細胞內(nèi)表達的S蛋白可作為疫苗發(fā)揮作用。該方法研制的疫苗主要優(yōu)點是_______________________________（寫出一點即可）。

（4）滅活新冠病毒疫苗是使用β—丙內(nèi)酯處理病毒，使其失去傳染性和致病性，但保留了病毒完整結(jié)構(gòu)，具有讓免疫系統(tǒng)識別的____________結(jié)構(gòu)。30、某病毒（甲）侵染機體會引起肺炎癥狀。利用雜交瘤技術(shù)所制備的該病毒的單克隆抗體在臨床上應用廣泛；包括臨床治療和快速檢測病毒?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題∶

（1）研究人員給小鼠注射該減毒疫苗（保留甲的抗原性，但失去侵染力），一段時間檢測小鼠是否產(chǎn)生抗體，檢測的具體方法是_____，預期的檢測結(jié)果是______。

（2）實驗發(fā)現(xiàn)，注射抗體后小鼠也能獲得免疫力，但維持的時間較短，而注射減毒疫苗的小鼠的免疫力可以維持較長時間，對該現(xiàn)象合理的解釋是_________。

（3）克隆抗體的制備過程中，可從免疫后小鼠的_____中獲得特定的B細胞，與小鼠的____細胞融合，經(jīng)過篩選、檢測可獲得所需的雜交瘤細胞，該胞具有的特點是______。31、為更好的利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米；科學家將基因編輯系統(tǒng)引入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒對其進行改造。

(1)Ti質(zhì)粒在基因工程中常作為_________。改造后的Ti質(zhì)粒的部分序列如圖1所示，轉(zhuǎn)入玉米細胞后，gRNA能夠與玉米細胞DNA特定位點結(jié)合，從而引導Cas9蛋白在此位點切斷_________鍵斷開DNA．HR1和HR2與玉米DNA切斷位點上下游序列同源，玉米細胞能以同源序列之間的序列為模板合成一段DNA，連接斷開的DNA分子，實現(xiàn)外源片段插入。圖1中插入玉米染色體的片段能穩(wěn)定表達和擴增，其他區(qū)域的基因只能瞬時表達且無法擴增。在轉(zhuǎn)化玉米的過程中，使用改造后的Tⅰ質(zhì)粒的優(yōu)點是_________。

注：HRA為抗除草劑基因：NPTⅡ為卡那霉素抗性基因。

(2)用上述改造后的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化玉米幼胚，在培養(yǎng)基中加入除草劑或_________均能篩選出已發(fā)生轉(zhuǎn)化的幼胚。對培養(yǎng)后的植株進行PCR（引物設計如圖2）；部分植株實驗結(jié)果如圖3。

電泳結(jié)果顯示_________號玉米中成功插入了外源基因，自交后_________（選填“會”或“不會”）發(fā)生性狀分離。

(3)標記基因插入轉(zhuǎn)基因作物染色體中往往會影響植物的生長發(fā)育；并帶來環(huán)境安全隱患。現(xiàn)要制備轉(zhuǎn)耐寒CXE-20基因的轉(zhuǎn)基因玉米，請利用該方法設計Ti質(zhì)粒相關(guān)序列，選擇相關(guān)基因的序號填入Ti質(zhì)粒部分序列示意圖。

①Cas9②gRNA③HRA④NPTⅡ⑤CXE-20⑥HR1⑦HR232、科學家將CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)導入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒并進行改造；通過同源重組實現(xiàn)目的基因的精確插入，利用該方法已培育出了耐寒的玉米新品種(轉(zhuǎn)入CXE-20耐寒基因)。下圖1表示構(gòu)建轉(zhuǎn)基因耐寒玉米重組質(zhì)粒的過程，其中Cas9-gRNA是CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)基因，HRA是抗除草劑基因，HR1和HR2是同源重組序列，圖2表示重組質(zhì)粒與受體細胞核DNA重組的過程。請回答問題：

(1)過程①的原料是_______，需要_______催化。

(2)限制酶BamHⅠ、SacⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ的識別序列分別是GGATCC、GAGC.AAGCTT、GAATTC，過程①所用引物如下，則過程②使用的限制酶是_______和_______。

5′-CGCGAGCTCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3′

5′-CGGAATTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3′

(3)如圖表示Cas9-gRNA復合體切割DNA的示意圖，其靶序列是5′-CGAAAGCGTATCAGTATGCGTACGT-3′，根據(jù)圖中靶序列設計的gRNA中相應序列是5′-_______-3′，Cas9-gRNA復合體切割DNA的_______鍵使其斷裂。

(4)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化玉米幼胚后，在培養(yǎng)基中加入_______篩選出導入目的基因幼胚。提取培養(yǎng)后的植株DNA，設計引物進行PCR、電泳，基因長度及結(jié)果如下圖。設計引物的依據(jù)是_______，其中_______號玉米中成功插入了外源基因，研究人員認為這些植株自交后會發(fā)生性狀分離，其判斷依據(jù)是_______。

參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、D【分析】【分析】

果酒與果醋制作的比較。

。

果酒制作。

果醋制作。

菌種。

酵母菌。

醋酸菌。

菌種來源。

附著在葡萄皮上的野生型酵母菌。

變酸酒表面的菌膜。

發(fā)酵過程。

有氧條件下，酵母菌通過有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O；

無氧條件下，酵母菌通過無氧呼吸產(chǎn)生酒精：C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2

氧氣、糖源充足時：C6H12O6＋2O2→2CH3COOH＋2CO2＋2H2O；

缺少糖源；氧氣充足時：

C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O

溫度。

一般酒精發(fā)酵18～25℃；繁殖最適為20℃左右。

最適為30～35℃

氣體。

前期：需氧；后期：無氧。

需要充足的氧氣。

時間。

10～12天。

7～8天。

【詳解】

A；酵母菌屬于兼性厭氧菌；醋酸菌屬于需氧菌，控制氧氣的進入，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響，A正確；B、果酒發(fā)酵初期通入氧氣，酵母菌進行有氧呼吸，可以提供較多能量，使酵母菌快速繁殖，中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸，B正確；

C；溫度影響酶活性；果醋的發(fā)酵周期與實驗設定的溫度密切相關(guān)，C正確；

D；氣體入口與氣體出口不能交換使用；否則會使發(fā)酵液溢出，D錯誤。

故選D。2、D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：（一）；右手持接種環(huán)；經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將以冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰丙塞上棉塞。（二）、左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。（三）、燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。（四）、將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】

A；步驟①倒平板操作時；倒好后應待平板冷卻凝固后再將平板倒過來放置，目的是防止冷凝水倒流污染培養(yǎng)基，A正確；

B；灼燒后的接種環(huán)需在火焰旁冷卻后再蘸取菌液進行平板劃線；防止將菌種燙死，B正確；

C；步驟③連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐漸稀釋；培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落，C正確；

D；連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐漸稀釋；故步驟④中可觀察到1至5區(qū)出現(xiàn)的單菌落數(shù)逐漸減少，且前幾次劃線因密度過大菌落可能會連成一片，D錯誤。

故選D。3、B【分析】1；植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。2、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術(shù)形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性。

【詳解】

A；PEG可以破環(huán)細胞間相互排斥的表面作用力；從而使相鄰細胞聚集而促進融合，故可用PEG誘導植物原生質(zhì)體融合，再生出細胞壁是融合成功的標志，A正確；

B；植物體細胞雜交技術(shù)去壁前；不能對兩種植物細胞進行滅菌處理，因為滅菌后植物細胞會死亡而不能得到雜種細胞，B錯誤；

C；植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑一般可以分為生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類；C正確；

D；獲取植物原生質(zhì)體時；除使用纖維素酶和果膠酶外，還需要在蔗糖濃度與細胞液濃度相當?shù)木彌_液中進行，以免細胞過度失水或吸水，此時原生質(zhì)體已無細胞壁，D正確。

故選B。4、D【分析】【分析】

谷氨酸棒狀桿菌是一種異養(yǎng)兼性厭氧細菌；谷氨酸棒狀桿菌在擴大培養(yǎng)時，碳氮比應為4：1，而在發(fā)酵獲得谷氨酸時碳氮比應為3：1。擴大培養(yǎng)應在有氧條件下進行，在無氧條件下，谷氨酸棒狀桿菌能將葡萄糖和含氮物質(zhì)（如尿素；硫酸銨、氨水）合成為谷氨酸．谷氨酸經(jīng)過人們的進一步加工，就成為谷氨酸鈉－味精。

【詳解】

A；發(fā)酵罐的監(jiān)測裝置；可以方便檢測培養(yǎng)液中的細菌數(shù)目、產(chǎn)物濃度、代謝產(chǎn)物類型等，以了解發(fā)酵進程，A正確；

B；在谷氨酸發(fā)酵過程中；隨著谷氨酸的不斷生成，發(fā)酵液的pH值不斷的減小，對谷氨酸產(chǎn)生抑制，為了維持發(fā)酵的最佳條件，要監(jiān)控pH并及時添加堿性物質(zhì)或氨水以維持pH穩(wěn)定，提高谷氨酸的產(chǎn)量，B正確；

C；谷氨酸發(fā)酵過程需要嚴格控制溫度、pH、溶氧、通氣量等；以免影響其代謝途徑和產(chǎn)量，例如溶氧不足，生成的代謝產(chǎn)物就會是乳酸或琥珀酸，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌是一種異養(yǎng)兼性厭氧細菌；擴大培養(yǎng)應在有氧條件下進行，有利于谷氨酸棒狀桿菌的生成，在無氧條件下，谷氨酸棒狀桿菌能將葡萄糖和含氮物質(zhì)(如尿素、硫酸銨、氨水)合成為谷氨酸，D錯誤。

故選D。5、D【分析】【分析】

1；關(guān)于限制酶；考生可以從以下幾方面把握：

（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來。

（2）特異性：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端．注意：用限制酶切割DNA時；每切開一個切口需要水解兩個磷酸二酯鍵。

2；DNA連接酶：

（1）根據(jù)酶的來源不同分為兩類：E.coliDNA連接酶、T4DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端；但連接平末端時的效率比較低。

（2）DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；E·coliDNA連接酶只可以連接黏性末端；A錯誤；

B；用限制酶切割獲得一個目的基因時得到兩個切口；有4個磷酸二酯鍵被斷開，B錯誤；

C；—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端不同；分別為—CATG和—GATC，因此不能用DNA連接酶連接，C錯誤；

D；限制酶切開磷酸二酯鍵、DNA連接酶和Taq酶形成磷酸二酯鍵；D正確。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)6、B:C【分析】【分析】

該題主要考察了細胞的分化；干細胞是一類仍然保留有分裂和分化能力的細胞，其可以分為全能干細胞；多能干細胞和專能干細胞，其中造血干細胞屬于多能干細胞。

【詳解】

造血干細胞屬于多能干細胞；其可以分化為血液中的多種細胞，例如紅細胞；血小板和白細胞，白細胞包括嗜中性粒細胞，B、C正確；骨骼肌細胞不是造血干細胞分化來的，神經(jīng)細胞是由神經(jīng)干細胞分化而來，A、D錯誤；

故選BC。7、A:C【分析】【分析】

當胚胎細胞數(shù)目達到32個左右時；胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，叫做桑椹胚；實驗證實，這一階段前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞，這些細胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細胞，A正確；

B；囊胚期細胞可分化內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細胞致密化程度相同，B錯誤；

C；胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進行；D錯誤。

故選AC。8、A:C:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原；從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞(體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng))，最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；重組大腸桿菌RecQ解旋酶相當于抗原；能刺激機體產(chǎn)生相應的體液免疫應答，則在人體內(nèi)可刺激B細胞增殖分化為漿細胞和記憶B細胞，A正確；

B；單克隆抗體的制備過程中需要進行2次篩選和1次抗原檢測；第一次是用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；第二次是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，進一步篩選出能產(chǎn)生人們所需要抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；

C；據(jù)圖1分析；染色體數(shù)目有為80-93的細胞，免疫小鼠中B淋巴細胞染色體數(shù)目為40，骨髓瘤細胞染色體數(shù)目為62-68，兩者之和大于80-93，故雜交瘤細胞在融合的過程中可能會發(fā)生染色體數(shù)目的丟失，C正確；

D、據(jù)圖2分析，單抗稀釋度為1/800時RecQ解旋酶結(jié)合DNA活性最低，可知mAb能特異性與RecQ解旋酶結(jié)合可顯著抑制RecQ解旋酶與DNA的結(jié)合；D正確。

故選ACD。9、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細胞進行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個體。通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因的個體或種群。

【詳解】

A；體細胞的分化程度比胚胎干細胞的分化程度高；與體細胞核移植技術(shù)相比，胚胎干細胞核移植技術(shù)更易成功，A錯誤；

B；在體細胞核移植過程中；用物理方法或化學方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白質(zhì)合成酶抑制劑等）激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程，B正確；

C；基因重組發(fā)生在有性生殖的生物進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中(狹義上的基因重組)以及基因工程技術(shù)中（包含在廣義的基因重組內(nèi)）；而細胞分裂、分化的過程一般不會發(fā)生基因重組，C錯誤；

D；體細胞核移植技術(shù)是無性繁殖；有望用于增加瀕危動物的種群數(shù)量，D正確。

故選BD。10、B:D【分析】【分析】

細菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復進行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較小；不能用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。11、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴重威脅。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細胞（簡稱ES細胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細胞移植到去核卵母細胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞（如神經(jīng)細胞、肌肉細胞和血細胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因要注意基因安全；對外源DNA要進行認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；

C；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克??；禁止進行克隆人的實驗，C錯誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。12、C:D【分析】【分析】

單基因遺傳病指的是受一對等位基因控制的遺傳?。豢捎肈NA分子雜交技術(shù)進行基因檢測進而鑒定某胚胎是否攜帶有某致病基因；DNA分子雜交技術(shù)利用放射性同位素（或熒光分子）標記的致病基因片段作為基因探針，通過堿基互補配對原則與待測分子進行配對，能配對的說明某胚胎攜帶某致病基因存在。

【詳解】

A；該實例中；患者因缺乏尿黑酸氧化酶，使得尿黑酸不能被氧化分解而導致尿液呈黑色，即基因通過控制酶的合成，進而控制代謝過程，從而間接控制生物的性狀，A錯誤；

B、遺傳家系譜圖中，不患黑尿癥的Ⅰ1與Ⅰ2生下了患黑尿癥的女兒Ⅱ3；確定黑尿癥屬于常染色體隱性遺傳，B錯誤；

C、假設控制該病的基因為Aa，該病在人群中的發(fā)病率約為1/1000000，即aa概率為1/1000000，則a占1/1000，A占999/1000，Aa的概率為2×1/1000×999/1000=1998/1000000，因此人群中正常人為雜合子Aa的概率為（2×1/1000×999/1000）÷（2×1/1000×999/1000+999/1000×999/1000）=2/1001，Ⅱ4的基因型為1/3AA或2/3Aa，Ⅱ5為正常人，為雜合子的概率為2/1001，Ⅱ4和Ⅱ5婚配；所生男孩患黑尿癥的概率約為2/3×2/1001×1/4=1/3003，C正確；

D、由前面的分析可知，Ⅰ1和Ⅰ2為雜合子，Ⅱ3為患者，均含有該致病基因，若用該致病基因制作的探針檢測，則Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定會出現(xiàn)雜交帶；D正確。

故選CD。

【點睛】13、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機體可以產(chǎn)生特異性免疫反應。特異性免疫包括體液免疫與細胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細胞內(nèi)經(jīng)表達產(chǎn)生蛋白質(zhì)后，才能發(fā)揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細胞中；使機體既能產(chǎn)生細胞免疫，又能產(chǎn)生體液免疫，D正確。

故選BCD。14、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術(shù)是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細胞通過克隆技術(shù)（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物；C正確；

D；不能利用該技術(shù)進行克隆人的研究；D錯誤。

故選BD。

【點睛】三、填空題(共8題，共16分)15、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌16、略

【分析】【分析】

1.基因檢測可以把人體內(nèi)的致病基因和易感基因檢測出來；通過采取一定的預防措施預防遺傳病的發(fā)生，但同時可能會帶來基因歧視等倫理道德方面的問題。

2.設計試管嬰兒不同于試管嬰兒；試管嬰兒是為了解決不孕不育的問題，而設計試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫(yī)療問題。

【詳解】

1.（1）基因身份證是指把每個人的致病基因和易感基因都檢測出來；并記錄在磁卡上，這樣到醫(yī)院看病時，只要帶上這種身份證，醫(yī)生就可以“對證”治療。

（2）反對基因檢測的人認為：目前人類對基因結(jié)構(gòu)及基因間相互作用尚缺乏足夠的認識；要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的；況且人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習慣有關(guān)，有某種致病基因的人不見得就會患病。但是，基因檢測結(jié)果本身就已經(jīng)足以給受檢者帶來巨大的心理壓力。個人基因資訊的泄露所造成的基因歧視，勢必造成奇特的失業(yè)大軍，即遺傳性失業(yè)大軍。個人基因資訊被暴露之后，還會造成個人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠等嚴重后果。支持基因檢測的人認為：通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取預防措施，適時進行治療，達到挽救患者生命的目的。對于基因歧視現(xiàn)象，可以通過正確的科學知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設計試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀；因此胚胎移植前需要進行遺傳學診斷這一環(huán)節(jié)，而試管嬰兒是為了解決不孕不育問題，不需要考慮嬰兒的性別等問題，不需要進行遺傳學診斷。二者的共同點是：兩者都是體外受精，并進行體外早期胚胎培養(yǎng)，都要經(jīng)過胚胎移植，都是有性生殖。

【點睛】

1.基因與疾病的關(guān)系：具有致病基因的個體不一定患遺傳??；因為生物的性狀還受到環(huán)境因素的影響；沒有致病基因也可能患病，因為基因表達的蛋白質(zhì)，在加工或修飾過程中出現(xiàn)錯誤，也會出現(xiàn)癥狀。

2.明確設計試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關(guān)鍵之一?！窘馕觥恐虏』蛞赘谢蚧蚪Y(jié)構(gòu)預防疾病心理壓力預防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈式反應體外擴增DNA片段18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因轉(zhuǎn)移基因擴增醫(yī)藥衛(wèi)生農(nóng)牧業(yè)、食品工業(yè)環(huán)境保護蘇云金桿菌農(nóng)藥的用量生產(chǎn)成本農(nóng)藥對環(huán)境的污染。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】現(xiàn)配現(xiàn)用20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）22、略

【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經(jīng)過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養(yǎng)中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養(yǎng)。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

（3）在植物組織培養(yǎng)過程中；由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記植物組織培養(yǎng)的過程、原理及條件，掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應用，能結(jié)合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查?！窘馕觥竣?激素②.特有的結(jié)構(gòu)和功能③.黑暗④.分化⑤.培養(yǎng)條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽四、判斷題(共2題，共6分)23、B【分析】【詳解】

目前；用體細胞核移植技術(shù)得到克隆動物的成功率還很低。

故錯誤。24、B【分析】【詳解】

要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質(zhì)的生物合成，故說法錯誤。五、實驗題(共4題，共12分)25、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達受阻，而使胰島素基因表達受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機理有兩種假說：可能是導致RNA前體上內(nèi)含子2的對應序列不能被剪切，也可能是導致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴增能得到內(nèi)含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導致RNA前體上內(nèi)含子2的對應序列不能被剪切，故實驗組中應含有內(nèi)含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進行PCR反應，其結(jié)果為實驗組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應序列同時被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內(nèi)細胞團；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細胞，然后對其進行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細胞作為飼養(yǎng)層細胞，以提高斑馬魚胚胎干細胞的數(shù)量。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達的相關(guān)知識點，明確基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進行答題?！窘馕觥?1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復制需要引物。（得分點：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內(nèi)細胞團原代飼養(yǎng)層26、略

【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基的種類及用途：（1）按物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基應用于工業(yè)或生活生產(chǎn)；固體培養(yǎng)基應用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。（2）按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

2；滅菌（1）滅菌是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物；包括芽孢和孢子。（2）滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌。①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱；③培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。

【詳解】

（1）利用酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生酒精的過程中；要先充氣后閉氣，原因是酵母菌是兼性厭氧菌，因此果酒發(fā)酵時先通氣使酵母菌大量繁殖，后閉氣使酵母菌進行酒精發(fā)酵。

（2）利用玉米秸稈生產(chǎn)酒精時，水解秸稈所用的纖維素酶可來自微生物，由于該培養(yǎng)基以秸稈（纖維素）為唯一碳源，原則上，只有能分解纖維素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生存，因此按功能分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（3）雖然不同的生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求不同；但是培養(yǎng)這些微生物的培養(yǎng)基，一般都含有水；無機鹽、碳源、氮源（基本成分）和生長因子等。培養(yǎng)基滅菌的常用方法為高壓蒸汽滅菌法。

（4）分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的菌落。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。實驗室接種微生物時，常在酒精燈火焰旁進行，這樣操作的目的是酒精燈火焰旁存在無菌區(qū)域，可以避免周圍環(huán)境中的微生物的污染?！窘馕觥?1)先充氣有利于酵母菌進行有氧呼吸大量繁殖；當酵母菌繁殖到一定數(shù)量后，需要閉氣造成無氧環(huán)境，讓酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒；

(2)選擇培養(yǎng)基纖維素。

(3)水無機鹽氮源高壓蒸汽滅菌法。

(4)平板劃線法稀釋涂布平板法避免周圍環(huán)境中的微生物的污染27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步驟：①目的基因的獲取和篩選；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與鑒定；

2；植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少；甚至無病毒，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。

【詳解】

（1）為了獲得脫毒苗；通常選取植株莖尖（或頂端分生區(qū)附近的組織）進行離體培養(yǎng)，選取該組織的原因是此處病毒極少甚至無病毒。

（2）①基因表達載體上除有復制原點；啟動子、終止子、目的基因外；還有標記基因（便于篩選目的基因）；

②農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段可以攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上；

③選擇培養(yǎng)的目的是篩選出含有目的基因的柑橘細胞；

④先誘導生芽有利于生根；故再分化階段，需要先誘導愈傷組織生芽，待長出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導生根的培養(yǎng)基上，進一步誘導形成試管苗；

⑤在個體生物學水平可用接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）的方法，觀察植株是否患有柑橘潰瘍病來直接鑒定再生植株；分析再生植株沒有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依據(jù)Xa27基因（目的基因）的特異性堿基序列設計引物，擴增后用（凝膠）電泳分離PCR產(chǎn)物進行檢測；植株B、C沒有出現(xiàn)條帶，則可能是因為沒有導入目的基因；植株A、E、F出現(xiàn)條帶但不具有抗病能力，則可能是因為導入植物細胞的目的基因不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后未翻譯或翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等?！窘馕觥?1)莖尖（或頂端分生區(qū)）此處病毒極少甚至無病毒。

(2)標記基因攜帶目的基因并整合至植物細胞的染色體DNA上篩選出含有目的基因的植物細胞先誘導生芽，再誘導生根接種地毯草黃單胞桿菌（或噴施地毯草黃單胞桿菌菌液）Xa27基因（凝膠）電泳導入植物細胞的目的基因不能表達（或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄后不能翻譯，翻譯出的蛋白質(zhì)沒有活性等，合理即可）沒有導入目的基因28、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細胞內(nèi)是否成功表達可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗目的是比較攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細胞中應該含有導入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進行檢測，即進行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細胞中表達的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進行通讀，進而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進行治療，與不進行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細胞內(nèi)都沒有相應mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復細胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異六、綜合題(共4題，共32分)29、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備時動物細胞融合技術(shù)的應用之一；此過程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細胞，再將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細胞，最后經(jīng)過體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強；靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點。

【詳解】

（1）臨床上為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者；采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測疑似患者的呼吸道是否有新冠病毒的核酸，采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測血清中是否產(chǎn)生抗新型冠狀病毒的抗體。

（2）制備抗新冠病毒的單克隆抗體；首先需要給小鼠注射滅活新冠病毒表面的刺突蛋白，以獲得可生產(chǎn)相應抗體的B淋巴細胞。用滅活的病毒誘導免疫的淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合后，在特定的HAT培養(yǎng)基把雜交瘤細胞選出來。之后對上述細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，獲得足夠數(shù)量；能分泌所需（或“抗S蛋白”或“抗刺突蛋白”）抗體的雜交瘤細胞。

（3）腺病毒載體疫苗首先應以新冠病毒的遺傳物質(zhì)RNA為模板經(jīng)反（逆）轉(zhuǎn)錄過程獲得編碼S蛋白的DNA片段；此外；需要限制酶和DNA連接酶參與，才能制備重組的腺病毒，基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟；之后再讓重組的復制缺陷型腺病毒侵染人體細胞，該重組腺病毒在人體細胞內(nèi)表達的S蛋白可作為疫苗發(fā)揮作用。該方法研制的疫苗主要優(yōu)點是既能使入體內(nèi)產(chǎn)生S蛋白發(fā)揮免疫作用，又不會受病毒感染；技術(shù)成熟；安全性好；免疫原性好。

（4）單滅活新冠病毒疫苗是使用β—丙內(nèi)酯處理病毒；使其失去傳染性和致病性，但保留了病毒完整結(jié)構(gòu)，具有讓免疫系統(tǒng)識別的抗原結(jié)構(gòu)，這樣可以引起機體產(chǎn)生免疫反應。

【點睛】

本題以單克隆抗體的制備圖解為載體，考查了多項