皮膚性病科實(shí)驗(yàn)室檢査技術(shù)操作規(guī)范2023版

皮膚性病科實(shí)驗(yàn)室檢查技術(shù)操作規(guī)范

第一節(jié)皮膚組織病理檢查

第二節(jié)皮膚免疫熒光檢查

一、皮膚直接免疫熒光檢查

二、皮膚間接免疫熒光檢查

三、補(bǔ)休結(jié)合法

第三節(jié)皮膚試驗(yàn)

一、斑貼試驗(yàn)

二、劃破試驗(yàn)

三、皮內(nèi)試驗(yàn).

四、揮發(fā)性變應(yīng)原（空氣播散）試驗(yàn)

五、變應(yīng)原檢測(cè)體外試驗(yàn)

第四節(jié)玻片壓診法

第五節(jié)皮膚劃痕試驗(yàn)

第六節(jié)皮膚紫外線最小紅斑量測(cè)定

第七節(jié)濾過(guò)紫外線檢查

第八節(jié)真菌檢杳

一、真菌直接鏡檢

二、真菌培養(yǎng)

第九節(jié)疥蛾檢查

第十節(jié)蠕形蜻檢查

第十一節(jié)陰虱檢查

第十二節(jié)麻風(fēng)桿菌及麻風(fēng)相關(guān)檢查

一、皮膚切刮涂片檢查

二、組胺試驗(yàn)

三、出汗試驗(yàn)

四、立毛肌試驗(yàn)

第十三節(jié)淋球菌檢查

第十四節(jié)衣原體檢查

第十五節(jié)解麻服原體檢查

第十六節(jié)梅毒螺旋體檢查

一、梅毒螺旋體檢查

二、梅毒血清學(xué)檢查

第十七節(jié)醋酸白（甲苯胺藍(lán)）試驗(yàn)

第十八節(jié)口卜咻檢杳

第十九節(jié)紅斑狼瘡細(xì)胞檢查

第一節(jié)皮膚組織病理檢查

皮膚組織病理學(xué)改變有時(shí)可以協(xié)助臨床確定診斷。由于皮膚位于體表，活檢

操作較為簡(jiǎn)單，皮膚組織病理學(xué)檢查可作為輔助診斷的重要手段。然而，有時(shí)組

織學(xué)改變呈非特異性，為明確診斷必須反復(fù)活檢進(jìn)行病理學(xué)檢杳。

【適應(yīng)證】

按皮膚病理診斷的價(jià)值依次為：

1.皮膚腫瘤、癌前期病變、病毒性皮膚病、角化性及萎縮性皮膚病、紅斑鱗

屑性皮膚病等有高度診斷價(jià)值。

2.大皰性皮膚病、肉芽腫性皮膚病、代謝性皮膚病、結(jié)締組織病、血管性皮

膚病、色素障礙性皮膚病、遺傳性皮膚病、黏膜疾病等有診斷價(jià)值.

3.某些深部真菌病、皮膚黑熱病、豬囊尾坳?。蚁x(chóng)?。┑雀腥拘云つw病可

找到病原體。

【禁忌證】

嚴(yán)重瘢痕體質(zhì)者（尤其是特殊部位）應(yīng)慎重，需要征求患者同意。

【操作方法及程序】

L活檢取材方法。

⑴常規(guī)消毒。

（2）局部麻醉。

（3用手術(shù)方法或鉆孔器取材

①刀切法：用手術(shù)刀可取較大較深組織，適用于各種皮膚病變，尤其是

結(jié)節(jié)、腫瘤等。

②鉆孔法：較方便，但應(yīng)用受一定限制。適用〒較小損需，或病變局限

于表淺處，或手術(shù)切除有困難者。

③削除法：用刀削除病變組織，適用于表淺增生組織，如疣狀物等。

2.將所取組織按常規(guī)固定、脫水、包埋、制片。必要時(shí)做組織化學(xué)、免疫組

織化學(xué)及電鏡等檢查。

【注意事項(xiàng)】

1.皮損選擇一般選擇充分發(fā)育的典型皮損，須取原發(fā)病變。水瘡、膿皰宜取

早期皮損。有多種病變同時(shí)存在時(shí)，應(yīng)分別取材。必要時(shí)從皮損邊緣取材，

半病損皮膚，一半正常皮膚，以便對(duì)比觀察、如考慮腫瘤和結(jié)節(jié)性皮膚病，取

材應(yīng)盡量包括皮下脂肪組織。

2.麻醉盡可能在病變周?chē)M(jìn)行，避免在擬取皮損內(nèi)直接注入麻醉藥。

3.取材取材要根據(jù)實(shí)際情況，寬、長(zhǎng)足夠，應(yīng)包括表皮、真皮及皮下組織。

皮下結(jié)節(jié)須包括皮膚及皮下組織。較小皮損沿其邊緣全部取下即可；較大斑塊、

環(huán)狀皮損應(yīng)取活動(dòng)性邊緣；潰瘍性病變應(yīng)取活動(dòng)性邊緣。色素痣切口應(yīng)稍寬，切

口至皮損邊緣的距離根據(jù)部位不同而定，最好在0.5cm以上。要防止水皰、

膿皰破損?；顧z組織應(yīng)避免擠壓。

4.固定一般用4%甲醛溶液（10%福爾馬林溶液）立即固定。固定液與組

織體積之比為5：1c

5.術(shù)后處理術(shù)后月無(wú)菌敷料包扎，保持創(chuàng)口清潔，選擇適當(dāng)時(shí)機(jī)拆線。

第二節(jié)皮膚免疫熒光檢查

該項(xiàng)檢查技術(shù)是根據(jù)抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)具有高度特異性的特點(diǎn)，采用熒

光染料（目前應(yīng)用較普遍的是異硫甄酸熒光素，其異硫毓基在水溶液中與免疫

球蛋白的自由氨基經(jīng)碳酰胺化而形成硫碳氨基鍵，成為標(biāo)記的免疫球蛋白，即

熒光素標(biāo)記抗體）標(biāo)記的已知抗原或抗體，通過(guò)熒光光源檢查，以發(fā)現(xiàn)未知

的抗體或抗原。免疫熒光檢查實(shí)際上是血清學(xué)方法與顯微示蹤技術(shù)相結(jié)合。根

據(jù)抗原抗體反應(yīng)的不同，分述如下免疫熒光檢查方法。

一、皮膚直接免疫熒光檢查

【適應(yīng)證】

1.非感染性大疤性皮膚病如各型天皰瘡、類(lèi)天皰瘡、皰疹樣皮炎、線狀I(lǐng)gA

大皰性皮膚病、獲得性大皰性表皮松解癥等。

2.結(jié)締組織病如紅斑狼瘡等。

3.各種血管炎

4.某些感染性皮膚病

5.皮膚腫瘤等

【禁忌證】

同本章第一節(jié)“皮膚組織病理檢查二

【操作方法及程序】

L從患者受累或可能受累的皮膚組織黏膜組織處切取活檢標(biāo)本，做冷凍切片,

或石蠟切片(特殊方法)。

2.將一定濃度的熒光素標(biāo)記特異性抗體與組織抗原共同孵育，設(shè)定適宜的孵

育溫度和時(shí)間，使組織抗原與抗體充分結(jié)合。

3.在熒光顯微鏡下觀察，如發(fā)現(xiàn)反應(yīng)部位顯示相應(yīng)熒光，即為陽(yáng)性反應(yīng)，

根據(jù)熒光分布和形態(tài)確定抗原部位和性質(zhì)。

【皮膚直接免疫熒光檢查的基本改變】

1.基底膜熒光

(1)系統(tǒng)性紅斑狼瘡、盤(pán)狀紅斑狼瘡、亞急性皮膚型紅斑狼瘡：基底膜

帶呈線狀、顆粒狀或團(tuán)塊狀熒光。

(2)皰疹樣皮炎：真皮乳頭內(nèi)基底膜帶顆粒狀I(lǐng)gA沉積。

(3)類(lèi)天皰瘡、獲得性大皰性表皮松解癥：線狀I(lǐng)gG及C3沉積。

⑷線狀I(lǐng)gA大皰性皮膚?。夯啄Ь€狀I(lǐng)gA沉積。

(5)扁平苔解：真皮乳頭層內(nèi)彌漫性或灶性、球狀I(lǐng)gM和C3沉積。

2.表皮細(xì)胞間熒光尋常型、紅斑型、落葉型、增殖型天皰瘡及皰疹樣天皰

瘡等,可見(jiàn)表皮細(xì)胞間IgG沉積。

3.血管壁熒光多種血管性皮膚病，如白細(xì)胞碎裂性血管炎、結(jié)節(jié)性多動(dòng)

脈炎等顯示管壁及管周熒光。

【注意事項(xiàng)】

1.原則上，每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)有陽(yáng)性和陰性對(duì)照。

2.取材部位：在水皰性皮膚病中，應(yīng)盡量取最早期水皰損害，保持皰的

完整性，或取初發(fā)的紅斑性損害；在紅斑狼瘡中，取充分發(fā)展的皮損處組織；

系統(tǒng)性紅斑狼瘡，亦可取未受累或避光處的皮膚組織，如果為陽(yáng)性則更有診斷

和鑒別診斷價(jià)值。

3.標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢查，并且應(yīng)避光保存，否則熒光會(huì)淬滅。

二、皮膚間接免疫熒光檢查

用以檢測(cè)患者血清中的某種特異抗體或自身抗體。反應(yīng)中有兩對(duì)抗原抗體

相繼發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，第一抗體與抗原是相對(duì)應(yīng)的特異結(jié)合，而第二抗體(卻熒

光素標(biāo)記抗體)則是針對(duì)第一抗體的抗抗體。

【適應(yīng)證】

1.血清中各種抗微生物抗體的測(cè)定，可用于感染性疾病的病原學(xué)診斷，如

梅毒螺旋體、支原體、衣原體、立克次體、皰疹病毒等。

2.血清中各種自身抗體的測(cè)定，可用于結(jié)締組織病、大庖性皮膚病和其他

自身免疫病的診斷。

(1)系統(tǒng)性/斑狼瘡、皮肌炎、硬皮病、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、混合結(jié)締組織病、

干燥綜合征等：有不同類(lèi)型的抗核抗體。

(2)大皰性皮膚?。喝缈固彀挴徔贵w等。⑶糖尿病：抗胰島細(xì)胞抗體等。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.抽取患者血液，分離出血清。

2.將該血清與含有相關(guān)抗原的標(biāo)本共同孵育，使第一抗體與抗原相結(jié)合。

3.加入熒光素標(biāo)記的第二抗體與抗自身抗體或抗病原體抗體結(jié)合，共同孵育。

4.在熒光顯微鏡下觀察標(biāo)本，如果出現(xiàn)熒光反應(yīng)即為陽(yáng)性。

【注意事項(xiàng)】

1.血清中抗體、第二抗體和抗原的濃度之比應(yīng)適宜，必要時(shí)予以適當(dāng)稀釋。

若采用組織抗原標(biāo)本，則應(yīng)盡可能暴露該抗原。

2.氽同直接免疫熒光檢查。

三、補(bǔ)體結(jié)合法

在間接法的基礎(chǔ)上發(fā)展而成，即在抗原抗體反應(yīng)時(shí)加入補(bǔ)體，再用熒光素標(biāo)

記的抗補(bǔ)體抗體進(jìn)行示蹤。檢查妊娠性皰疹患者的自身抗體時(shí)，須采用此法。

第三節(jié)皮膚試驗(yàn)

皮膚變應(yīng)原檢測(cè)是通過(guò)皮膚反應(yīng)來(lái)確定過(guò)敏性疾病患者的致敏物質(zhì)，有助于

指導(dǎo)患者預(yù)防和治療過(guò)敏性疾病，特別是對(duì)明確職業(yè)性皮膚病的致病原因具有重

要意義。常用的變應(yīng)原檢測(cè)方法包括：斑貼試驗(yàn)、劃破試驗(yàn)、皮內(nèi)試驗(yàn)和變應(yīng)原

檢測(cè)體外試驗(yàn)等。

一、斑貼試驗(yàn)

斑貼試驗(yàn)（patchtest）用于測(cè)定遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。

【適應(yīng)證】

1.接觸性皮炎。

，職業(yè)性皮膚病c

3.化妝品皮炎。

4.濕疹等。

【禁忌證】

1.皮炎急性期。

2.孕婦。

【操作方法及程序】

1.受試部位一般取上背部脊柱兩側(cè)的正常皮膚。若皮脂過(guò)多，可用75%乙

醇輕輕擦拭，然后用生理鹽水清洗待干。

2.去除斑試器的保護(hù)紙，將變應(yīng)原按順序置于惰性聚乙烯塑料或鋁制斑試器

內(nèi)。排列順序?yàn)樽陨现料拢宰笾劣?，并做?biāo)記。

3.將加有變應(yīng)原的斑試器膠帶自上至下貼敷在受試部位，并用手掌輕壓，以

排除空氣。

4.觀察結(jié)果。于48h去除斑試器，待30mm后觀察結(jié)果，貼敷后72h再次觀

察結(jié)果，必要時(shí)于貼敷后1周進(jìn)行第3次觀察。

【結(jié)果判定】

1.（一）陰性（無(wú)反應(yīng)）

2.(士〉可疑陽(yáng)性(僅有輕度紅斑)

3.(+)弱陽(yáng)性(紅斑、浸潤(rùn)、可有少量丘疹)

4.(++)中陽(yáng)性(紅斑、浸潤(rùn)、丘疹、水皰)

5.(+++)強(qiáng)陽(yáng)性(紅斑、浸潤(rùn)、丘疹、大皰)

【注意事項(xiàng)】

1.須囑受試者，如發(fā)生強(qiáng)烈剌激反應(yīng)，應(yīng)及時(shí)去除斑試器。

2.受試前2周和受試期間不要內(nèi)服皮質(zhì)類(lèi)固醇，受試前3d和受試期間應(yīng)停

用抗組胺類(lèi)藥物。

3.受試期間不宜洗澡、飲酒，避免搔抓斑試部位，盡量減少出汗，減少日光

照射。

4.應(yīng)保持斑試器在皮膚上48h,盡量不要過(guò)早去除斑試器。受試部位要有標(biāo)

記.貼敷牢固、緊密，避免出現(xiàn)假陰性C

5.應(yīng)對(duì)患者的實(shí)際接觸致敏物進(jìn)行斑貼試驗(yàn)。

6.如果在貼敷后72h至貼敷后1周內(nèi)斑試部位出現(xiàn)紅斑、瘙癢等情況，應(yīng)及

時(shí)來(lái)醫(yī)院檢查。

7.注意區(qū)分變態(tài)反應(yīng)與刺激反應(yīng)，排除假陽(yáng)性和假陰性。

二、劃破試驗(yàn)

劃破試驗(yàn)(scratchtest)用于測(cè)試速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。

【適應(yīng)證】

L各型琴麻疹

2.特應(yīng)性皮炎

3.藥疹

4.過(guò)敏性鼻炎

5.哮喘等

【禁忌證】

1.高敏體質(zhì)者

2.有過(guò)敏性休克史者

【操作方法及程序】

1.一般選擇前臂屈側(cè)為受試部位，局部清潔消毒。

2.用消毒的種痘刀或針尖，輕輕劃數(shù)條長(zhǎng)0.3-0.5cm的劃痕，兩個(gè)受試部位

間要有4-5cm距離，深度以無(wú)明顯出血為宜。

3.在劃痕上滴生理鹽水1滴，然后將受試物涂于劃痕上，混合均勻，留一劃

痕僅滴生理鹽水，作陰性對(duì)照。

4.20min后，用消毒蒸儲(chǔ)水洗凈劃痕上受試物，觀察反應(yīng)變化。

【結(jié)果判定】

1.（-）陰性（無(wú)變化，與陰性對(duì)照一致）

2.（士）可疑陽(yáng)性（紅斑或風(fēng)團(tuán)直徑V5rmn,與陰性對(duì)照稍有差別）

3.（+）弱陽(yáng)性（紅斑或風(fēng)團(tuán)直徑=5mm,與陰性對(duì)照有明顯差別）

4.（++）陽(yáng)性（紅斑或風(fēng)團(tuán)直徑5?10mm,并有明顯紅暈）

5.（+++）強(qiáng)陽(yáng)性（燈斑或風(fēng)團(tuán)直徑有明顯訂暈及偽足）

【注意事項(xiàng)】

L必須先測(cè)定受試者皮膚有無(wú)皮膚劃痕癥。

2.所用的受試物應(yīng)清潔、無(wú)刺激性。

3.結(jié)果為陰性時(shí)，應(yīng)繼續(xù)觀察3s4d。必要時(shí)，3s4周后重復(fù)試驗(yàn)。

4.應(yīng)排除由原發(fā)性刺激引起的假陽(yáng)性反應(yīng)。

5.應(yīng)準(zhǔn)備腎上腺素注射液，搶救可能發(fā)生的過(guò)敏性休克。

6.受試前2d應(yīng)停用抗組胺類(lèi)藥物。

三、皮內(nèi)試驗(yàn)

皮內(nèi)試驗(yàn)（intracutaneoustest）主要用于測(cè)試速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。原理同劃破

試驗(yàn)，反應(yīng)結(jié)果較劃破試驗(yàn)陽(yáng)性率高，較準(zhǔn)確，但偶可發(fā)生過(guò)敏性休克。

【適應(yīng)證】

1.各型尊麻疹。

2.特應(yīng)性皮炎。

3.藥疹。

4.過(guò)敏性鼻炎、哮喘等。

【禁忌證】

1.高敏體質(zhì)者。

2.有過(guò)敏性休克史者。

3.5歲以下兒童。

【操作方法及步驟】

1.一般選擇前臂屈側(cè)為受試部位，局部清潔消毒。

2.將欲試抗原以無(wú)菌生理鹽水適當(dāng)稀釋?zhuān)云ぴ囎⑸淦鞣謩e吸取0.1mL注

射于受試部位皮內(nèi)。同時(shí)注射多種抗原時(shí)，應(yīng)在注射部位做標(biāo)記。

3.另取一注射器吸取0.1ml無(wú)菌生理鹽水，注射于對(duì)側(cè)前臂屈側(cè)相應(yīng)注射部

位，或同臂原注射部位的下方4s5cm處，作為陰性對(duì)照。

4.注射后20-30min觀察速發(fā)型反應(yīng)24s48h后觀察遲發(fā)型反應(yīng)，必要時(shí)連

續(xù)觀察1周。

【結(jié)果判定】

1.速發(fā)型反應(yīng)注射后20s30min,局部出現(xiàn)直徑1~1.5cm的紅斑或風(fēng)團(tuán)為

陽(yáng)性。

2.遲發(fā)型反應(yīng)注射后開(kāi)始出現(xiàn)紅斑或鳳團(tuán)，至24h達(dá)最高峰，或24s48h

或更長(zhǎng)時(shí)間后開(kāi)始出現(xiàn)此種反應(yīng)。麻風(fēng)菌素的遲發(fā)反應(yīng)可達(dá)21do

3.陰性反應(yīng)局部無(wú)變化，與陰性對(duì)照一致。

【注意事項(xiàng)】

1.若出現(xiàn)過(guò)敏性休克，應(yīng)立即皮下注射0.1%腎上腺素0.5ml立即吸氧，靜

滴皮質(zhì)類(lèi)固醇，并根據(jù)情況采取其他急救措施。

2.陰性對(duì)照處應(yīng)無(wú)變化，否則應(yīng)重做。若結(jié)果為陰性而有可疑者，可增加欲

試抗原濃度，重復(fù)試驗(yàn)。

3.觀察結(jié)果時(shí)，應(yīng)注意假陽(yáng)性及假陰性反應(yīng)。

四、揮發(fā)性變應(yīng)原（空氣播散）試驗(yàn)

用于檢測(cè)揮發(fā)性變應(yīng)原。

【適應(yīng)證】

漆性皮炎等

【操作方法及步驟】

1.將受試物質(zhì)的原液或稀釋于不同濃度揮發(fā)性溶媒中的稀釋液，盛于小瓶或

試管中。

2.試驗(yàn)時(shí)用管口或瓶口接觸受試者皮膚，以膠布固定。

3.經(jīng)過(guò)10~20min去除小瓶或試管，觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】

1.陽(yáng)性反應(yīng)受試處皮膚有紅腫現(xiàn)象。

2.陰性反應(yīng)受試處皮膚無(wú)明顯變化。

【注意事項(xiàng)】

L避免受試液沾染皮膚。

2.觀察結(jié)果時(shí)，應(yīng)注意假陽(yáng)性及假陰性反應(yīng)。

3.應(yīng)注意由原發(fā)性刺激引起的假陽(yáng)性反應(yīng)。

五、變應(yīng)原檢測(cè)體外試驗(yàn)

于體外對(duì)人血清或血漿中的變應(yīng)原特異性IgE抗體進(jìn)行定性檢測(cè)，較上述在

體試驗(yàn)安全、痛苦小、特異性高、操作簡(jiǎn)便?？赏ㄟ^(guò)放射性免疫吸附法、酶免疫

分析法和金標(biāo)法檢測(cè)受試者血液中的特異性IgE抗體。

【適應(yīng)證】

L各型等麻疹。

2.特應(yīng)性皮炎。

3.藥疹。

4.過(guò)敏性鼻炎。

5.哮喘等。

【操作方法及步驟】

1.標(biāo)本的收集和預(yù)處理取靜脈血，分離血清或血漿。

2.嚴(yán)格按照所選用試劑盒說(shuō)明書(shū)的步驟進(jìn)行加樣、反應(yīng)和顯色。

3.根據(jù)顯色的速度和強(qiáng)度觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】

顏色從淺到深的變化速度與顏色的深度和患者血清標(biāo)本中IgE抗體或免疫球

蛋臼的滴度成比例。

1.強(qiáng)變態(tài)反應(yīng)在5min內(nèi)很快出現(xiàn)較深的顏色。

2.弱變態(tài)反應(yīng)出現(xiàn)顏色變化的時(shí)間＞5min。

3.陰性反應(yīng)顏色同陰性對(duì)照。

【注意事項(xiàng)】

1.不能使用大量溶血和嚴(yán)重高血脂的血液標(biāo)木。避免標(biāo)本中有顆粒性物質(zhì)。

2.不能憑任何單個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作出最終臨床診斷，只有臨床醫(yī)師在所有的臨床

特征和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上才能作出最后的診斷。

3.患者攝人膽固醇后可影響血清抗體的測(cè)定水平。

4.寄生蟲(chóng)病患者可產(chǎn)生IgE抗體，使血清中的滴度升高，出現(xiàn)假陽(yáng)性。

5.本試驗(yàn)為篩選試驗(yàn)，陰性結(jié)果并不能排除受試者對(duì)其他變應(yīng)原的敏感性。

第四節(jié)玻片壓診法

【適應(yīng)證】

1.區(qū)別毛細(xì)血管擴(kuò)張、炎性紅斑、血管瘤與皮下出血。尋常狼瘡。

3.區(qū)別色素脫失斑與貧血痣。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.將玻片用力壓在皮疹上10-20so

2.觀察受壓皮疹。

(1)毛細(xì)血管擴(kuò)張、炎性紅斑或血管瘤壓診后消失，而皮下出血不變。

(2)尋常狼瘡結(jié)節(jié)壓診后呈蘋(píng)果褥顏色。

(3)貧血痣壓診后白斑消失，而色素脫失斑不變。

第五節(jié)皮膚劃痕試驗(yàn)

【適應(yīng)證】

L尊麻疹。

2.皮膚劃痕癥。

3.癢疹等。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.用鈍器用力劃過(guò)皮膚。

2.觀察劃過(guò)處皮膚反應(yīng)，出現(xiàn)三聯(lián)反應(yīng)者為陽(yáng)性。

(1)第一反應(yīng)i劃后15s,劃過(guò)處產(chǎn)生紅色線條。

(2)第二反應(yīng)：劃后30s,紅色線條兩側(cè)發(fā)生紅斑。

(3)第三反應(yīng)：劃后劃過(guò)處發(fā)生隆起，蒼白色的條狀風(fēng)團(tuán)。

第六節(jié)皮膚紫外線最小紅斑量測(cè)定

最小紅斑量(minimalerythemaldose,MED)測(cè)定指能產(chǎn)生肉眼所見(jiàn)最弱紅斑

所需要的紫外線照射時(shí)間或劑量，它有助于了解皮膚對(duì)所接受的紫外線的敏感程

度。

【適應(yīng)證】

1.對(duì)紫外線敏感的皮膚病患者，如光敏性皮炎、多形性日光疹、慢性光化性

皮炎等。

2.了解皮膚對(duì)日光照曬的耐受程度，以選用合適的防曬護(hù)膚制劑，測(cè)定閂

光保護(hù)指數(shù)(SPF)值。

【禁忌證】

不合作或不能進(jìn)行者。

【操作方法及程序】

1.光砰高壓汞燈、金屬鹵素?zé)艉蜔晒鉄艄軣簟０l(fā)射光源應(yīng)以中波紫外線(290

~320nm)為主峰，功率500W。

2.照射部位應(yīng)在非曝光區(qū)域皮膚照射，如背部、前胸或前臂屈側(cè)，事先準(zhǔn)

備好一塊具有6個(gè)長(zhǎng)方形小孔格的布,孔格約0.8cmXl.5cm,間距約0.8cm0

3.照射方法燈源垂直于實(shí)驗(yàn)區(qū)皮膚，相距約25cm,把具有6個(gè)小孔格的布

平整鋪在照射部位皮膚上并固定好，按階梯式遞漕的時(shí)間或劑量照射各孔，照

射最短時(shí)間一般為15So

4.結(jié)果判斷照射后24h在充足的自然光線下觀察，以肉眼所見(jiàn)與孔格一致、

輪廓清楚、色澤均勻的最弱紅斑所需的照射時(shí)間或劑量為最小紅斑量。

【注意事項(xiàng)】

1.最小紅斑量隨個(gè)體差異、皮膚色澤、照射部位、試驗(yàn)季節(jié)及光源的光譜和

強(qiáng)度等不同有較多差異，臨床上應(yīng)以正常人數(shù)據(jù)為對(duì)照。

2.對(duì)紫外線敏感的程度差異較大，異常敏感者照射時(shí)間較長(zhǎng)皮膚上會(huì)出現(xiàn)紅

腫，甚至水皰，或可遺留色素沉著，經(jīng)處理后會(huì)逐漸恢復(fù)正常。

第七節(jié)濾過(guò)紫外線檢查

【適應(yīng)證】

1.頭癬。

2.花斑癬。

且細(xì)菌性皮膚病如纖癖等c

4.色素性皮膚病。

5.口卜咻類(lèi)物質(zhì)的檢查等。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.在紫外線燈上裝上一種含氧化鍥的紫色石英玻璃，獲得320A400nm的長(zhǎng)

波紫外線。

2.在暗室中用這種光線照射某些皮膚病患者的頭發(fā)、皮損等處，可以產(chǎn)生

特殊的熒光，有助于這些皮膚病的診斷和治療。

【結(jié)果判定】

1.頭癬的診斷與療效觀察黃癬呈暗綠色熒光，白癬呈亮綠色熒光，黑點(diǎn)癬無(wú)

熒光。治療后病發(fā)熒光消失。某些無(wú)癥狀頭癬患者可出現(xiàn)陽(yáng)性熒光反應(yīng)。

2.花斑癬的診斷呈黃棕色熒九。

3.細(xì)菌性皮膚病的診斷紅癬呈珊瑚紅色熒光；腋毛癬呈暗綠色熒光。

4.色素性皮膚病的診斷白癱風(fēng)邊界清楚，可與其他色素減退斑相區(qū)別。

5.嚇咻類(lèi)物質(zhì)的檢查嚇咻類(lèi)物質(zhì)可呈淡紅色、紅色或橙紅色熒光。

【注意事項(xiàng)】

1.避免用該燈照射患者眼部。

2.頭癬患者檢查前3d最好停用外用藥，以免誤診。

第八節(jié)真菌檢查

一、真菌直接鏡檢

是一種方便、準(zhǔn)確診斷真菌病的檢測(cè)方法。此法簡(jiǎn)便易行，陽(yáng)性可明確真菌

是否存在，結(jié)合臨床表現(xiàn)可確診皮膚真菌病，但一般不能確定致病菌種類(lèi)，而且

陰性不能完全排除真菌病診斷。

【適應(yīng)證】

各種淺部、深部真菌病。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.用鈍刀刮取皮損邊緣部的皮屑，或用小刀刮取變色松脆的甲屑，用拔毛鐐

拔取病發(fā)，置載玻片上，加1滴10%的KOH溶液，蓋上蓋玻片后在酒精燈上微

微加熱，待櫬本溶解，輕輕加壓蓋玻片使標(biāo)本透明，然后在顯微鏡下觀察。

2.檢查時(shí)應(yīng)遮去強(qiáng)光，先在低倍鏡下觀察有無(wú)真菌菌絲和抱子，然后用高倍

鏡觀察抱子和菌絲的形態(tài)、特征、位置、大小和排列等。

3.典型真菌鏡檢所見(jiàn)

(1)花斑癬：短粗、兩頭鈍圓、稍彎曲的菌絲，成堆的圓形或卵圓形厚壁泡

子，有時(shí)有芽胞。

(2)頭癬

①黃癬：黃癬痂，發(fā)內(nèi)抱子、鹿角狀菌絲，可見(jiàn)氣溝、氣泡。

②白癬：斷發(fā)外菌鞘由鑲嵌或成堆圓形抱子組成。

卷黑癬:發(fā)內(nèi)鏈狀池子。

(3)體股癬、手足癬：分支分隔的長(zhǎng)菌絲。

(4)甲癬：分支分隔的長(zhǎng)菌絲，常斷裂為關(guān)節(jié)他子樣。

(5)念珠菌病，假菌絲、圓形或橢圓形芽胞。

⑹隱球菌?。簣A形或橢圓形雙壁抱子，外隹有一層透光莢膜，在黑色背景

下極為明亮。

(7)著色芽生菌?。鹤厣珗A形厚壁分隔抱子。

⑻暗色絲抱霉病，棕色分支分隔菌絲或酵母樣細(xì)胞。

(9)鏈狀芽生菌?。烘湢畛鲅勘ё印?10〉毛霉?。簩挻缶z，不分隔。

【注意事項(xiàng)】

1.取材應(yīng)在損害活動(dòng)區(qū)，如環(huán)形損害的邊緣、水庖頂部，量要充足。

2,體液標(biāo)本應(yīng)離心后取沉渣鏡檢。有條件者應(yīng)同時(shí)進(jìn)行真菌培養(yǎng)。

3.取材前皮損部位應(yīng)盡量避免涂藥。

二、真菌培養(yǎng)

目的是進(jìn)一步提高病原體檢出的陽(yáng)性率，同時(shí)確定致病菌的種類(lèi)，一旦發(fā)現(xiàn)

肯定的致病菌如紅色毛癬菌或新型隱球菌時(shí)，診斷即可確立。但如果分離出條件

致病菌如白色念珠菌或煙曲霉時(shí)，應(yīng)結(jié)合臨龐進(jìn)行判斷C從無(wú)菌部位如血液或腦

脊液中分離出條件致病菌常提示肯定的感染，但對(duì)來(lái)自于膿、痰或尿的標(biāo)本則應(yīng)

謹(jǐn)慎解釋結(jié)果，單靠一次培養(yǎng)陽(yáng)性往往不能確定診斷、有時(shí)還須結(jié)合直接鏡檢的

結(jié)果，因此強(qiáng)調(diào)直接鏡檢與培養(yǎng)檢查相結(jié)合的重要性。

【適應(yīng)證】

1.疑似真菌感染的標(biāo)本。

2.進(jìn)一步確定感染真菌種類(lèi)。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.在無(wú)菌操作下，將標(biāo)本接種于沙氏葡萄糖瓊脂(SDA),置25s27攝氏度溫

箱內(nèi)培養(yǎng)4?6周。

2.如懷疑有深部真菌，應(yīng)同時(shí)在35s37攝氏度培養(yǎng)。

3.菌落出現(xiàn)后，應(yīng)定期觀察其生長(zhǎng)情況。

4.常規(guī)分離鑒定使用的培養(yǎng)基為SDA斜面培養(yǎng)基，加0.005%氯霉素，對(duì)皮

膚癬菌，還應(yīng)添加0.05%放線菌酮。

5.對(duì)分離到的真菌，應(yīng)結(jié)合菌落和顯微鏡下形態(tài)學(xué)特點(diǎn)將其鑒定到種。真菌

常用形態(tài)學(xué)鑒定，而酵母常以形態(tài)學(xué)和生理生化學(xué)方法結(jié)合進(jìn)行鑒定。

6.常見(jiàn)真菌培養(yǎng)所見(jiàn):

(1)念珠菌?。耗逃蜕湍笜泳?/p>

(2)隱球菌病：乳白色酵母樣菌落，而后為淺橘黃色，質(zhì)地呈黏液狀。

(3)抱子絲菌?。褐晟磷睾谏?。

(4)曲霉?。狐S綠色毛狀菌落。

(5)芽生菌?。赫婢酁榘咨藁泳洌湍赶酁槟逃蜕蜃厣?。

⑹暗色絲泡霉?。鹤睾谏洹?/p>

(7)諾卡菌?。洪冱S色或紅色菌落，有泥土氣味。

【注意事項(xiàng)】

1.應(yīng)與直接鏡檢結(jié)果綜合進(jìn)行判斷。

2.嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免污染。

3.提倡多管(點(diǎn)八多次培養(yǎng)，確保結(jié)果可信性。

第九節(jié)疥螭檢查

【適應(yīng)證】疥瘡。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

L隧道墨汁試驗(yàn)以藍(lán)墨水滴在可疑有隧道處，用棉簽輕揉30sslmin,

再用酒精棉球擦去表面墨跡，觀察是否有藍(lán)墨水滲人隧道的藍(lán)色痕跡，間接證明

疥蝴的存在。

2.針挑法此法常月。選取疥瘡疹或隧道末端(盲端)，用6號(hào)注射針頭，針口

斜面向上，從其側(cè)旁刺入，并從底部繞過(guò)蟲(chóng)體，將針口稍加轉(zhuǎn)動(dòng)，疥蟲(chóng)可落入針

口內(nèi)，之后輕輕挑破皮膚，出針檢查疥蟲(chóng)。

3.皮膚刮片法適用于新鮮的炎性丘疹。先在皮損上放置少量液狀石蠟(石蠟

油，也可在消毒的手術(shù)刀片上沾少許液狀石蠟)，用消毒手術(shù)刀片在丘疹上平刮6

一7下，刮取丘疹頂部的角層部分，直至有細(xì)小出血點(diǎn)為度，將刮取物移至載玻

片上，顯微鏡下可見(jiàn)疥蟲(chóng)、蟲(chóng)卵或蟲(chóng)屎。

【結(jié)果判定】

1.在良好的光線下，活疥蟲(chóng)用肉眼僅可見(jiàn)針頭大小的灰白色小點(diǎn)，能活動(dòng)。

2.將疥蟲(chóng)移至有油的載玻片上，低倍顯微鏡下即可見(jiàn)疥蟲(chóng)。

3.如蟲(chóng)體被挑破，可見(jiàn)其中一部分。有時(shí)見(jiàn)橢圓形蟲(chóng)卵或蟲(chóng)屎。

【注意事項(xiàng)】

L.查見(jiàn)疥蟲(chóng)是診斷疥瘡的有力證據(jù)，查見(jiàn)蟲(chóng)卵或蟲(chóng)屎也可作出診斷。一些時(shí)

間較長(zhǎng)的、繼發(fā)感染的或者濕疹化的疥瘡查不到疥蟲(chóng)，根據(jù)傳播和流行情況、接

觸史、典型的臨床癥狀也可作出疥瘡診斷。

2.檢查時(shí)應(yīng)注意選擇完整的未經(jīng)搔抓的早期新鮮的丘皰疹或隧道(末端)，陽(yáng)

性率較高。反復(fù)搔抓、擠壓、感染、腫脹、濕疹化等均可破壞蟲(chóng)體，影響檢查結(jié)

果。

3.陰性也不能完全排除疥瘡的診斷。

第十節(jié)蠕形蜻檢查

【適應(yīng)證】酒渣鼻等。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.擠刮法

(1)選取鼻溝、頰部及獺部等皮損區(qū)，用刮刀或手?jǐn)D壓。

(2)擠出物置于玻片上，加一滴生理鹽水或50%甘油，蓋上蓋玻片，并輕輕壓

平。

(3)鏡檢。

2.透明膠帶法

(1)取透明膠帶貼于鼻溝、頰部及頰部等皮損區(qū)。

(2)數(shù)小時(shí)或過(guò)夜后，取下膠帶貼「載玻片上，鏡檢。

【注意事項(xiàng)】

1.擠刮法應(yīng)避開(kāi)皮損合并嚴(yán)重感染灶處。

2.透明膠帶法對(duì)膠帶過(guò)敏者、面部有急性炎癥者等慎用。

第十一節(jié)陰虱檢查

【適應(yīng)證】陰虱病。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.用細(xì)密的篦子將陰毛上的陰虱梳下，或用小鏡子直接取下陰虱，或用眼科

剪剪下黏附有陰虱或陰虱卵的陰毛。

2.將上述標(biāo)本置于載玻片上，加一滴10%KOH,在酒精燈上微加熱后，于

顯微鏡下檢查，尋找快虱或陰虱卵。陰虱呈蟹形，有3對(duì)足，前足較小，中后組

足巨大，有粗大爪抓住陰毛。陰虱卵為鐵銹色或淡紅色楠圓形小粒，常斜向附貼

在陰毛上，在顯微鏡下可見(jiàn)到卵體。

【注意事項(xiàng)】

1.由于陰虱和陰虱卵常貼附于陰毛的近根部，因此在采集陰毛標(biāo)本時(shí)應(yīng)在毛

干根部采集，

2.陰性也不能完全排除陰乳病的診斷。

第十二節(jié)麻風(fēng)桿菌及麻風(fēng)相關(guān)檢查

一、皮膚切刮涂片檢查

【適應(yīng)證】麻風(fēng)病

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.皮膚取材法

(1)取材部位皮膚經(jīng)碘泗、75%乙醇或碘伏消毒后，左手捏緊皮膚，使之缺血，

右手持消毒的11號(hào)手術(shù)刀切長(zhǎng)約5rnrn,深2?切口。

(2)以刀尖來(lái)回3-4次刮取切口邊緣和底部組織液，在刀尖上見(jiàn)到少量組織液

時(shí)，立即涂抹在干凈載玻片上成直徑5s7mm圓形涂膜。

(3)面部切口創(chuàng)面僅用消毒棉球止血5min,肢體部位可加膠布固定或用創(chuàng)可

貼止血。

⑷皮膚取材部位一般取4―6處，常規(guī)部位為左右睢上、左右耳垂加兩處

皮損，皮損應(yīng)取病情最活動(dòng)處。

(5)取材完畢后，涂片在火焰上烘干固定，送實(shí)驗(yàn)室染色鏡檢。

2.染色方法染色時(shí)可用加溫法或不加溫法，加溫法用時(shí)較短。

(1)加溫法

①將已固定的載玻片放在染色架上，滴加苯酚復(fù)紅染液覆蓋整個(gè)涂膜，用酒

精燈在載玻片背面加溫15min,以染液勿沸騰為度，載玻片上染液干涸時(shí)要隨時(shí)

添加染液。

②傾去苯酚復(fù)紅染液，用自來(lái)水從載玻片的一端輕輕沖洗(勿直接沖洗涂膜),

再加1%鹽酸乙醇作用15—30S,輕輕晃動(dòng)載玻片使之脫色。如涂膜較厚，脫色

時(shí)間可稍延長(zhǎng)，待涂膜呈淡紅色為度。

③在玻片上加0.3%亞甲藍(lán)(美藍(lán))染液30-60S,用自來(lái)水從載玻片的一

端輕輕沖洗.待載玻片干后鏡檢.亞甲藍(lán)復(fù)染的時(shí)間應(yīng)視涂膜的厚薄而定°涂膜

厚時(shí)染色時(shí)間應(yīng)短，防止背景過(guò)深，鏡檢時(shí)視野透光不良，難以檢出紅染的抗酸

桿菌而影響鏡檢結(jié)果。應(yīng)使涂膜的背景為淺藍(lán)色為宜。

(2)不加溫法

①在室溫條件下，在第一步染色中，滴加苯酚復(fù)紅染液30min,無(wú)須加溫，

余染色步驟與加溫法同。

②不加溫法見(jiàn)色，染色條件和結(jié)果都比較穩(wěn)定，值得提倡。

理想的染片，應(yīng)該是背景淺藍(lán)色，在一個(gè)油鏡視野內(nèi)有數(shù)個(gè)炎癥細(xì)胞，提示

組織液取材符合真皮深度，抗酸桿菌呈現(xiàn)鮮紅色。

3.細(xì)菌密度標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算Ridley推薦的一種10倍分級(jí)法，可大體反映皮損內(nèi)

細(xì)菌密度，在現(xiàn)場(chǎng)防治和科研中被廣泛應(yīng)用。陰性：檢查100個(gè)以上油鏡視野未

查到菌。

1I-：平均100個(gè)視野查到1?10條菌。

2十：平均10個(gè)視野查到條菌。

3十：平均每個(gè)視野杳到條菌。

4十：平均每個(gè)視野查到10-100條菌。

5十：平均每個(gè)視野查到100~1000條菌。

6+：平均每個(gè)視野查到1000條以上菌。

4.細(xì)菌密度指數(shù)(BI)的計(jì)算

BI;各涂膜細(xì)菌密度(+)數(shù)的總和/涂膜數(shù)

【注意事項(xiàng)】

1.取材部位要選取活動(dòng)性皮損，如結(jié)節(jié)、斑塊、紅斑、彌漫性浸潤(rùn)等。

2.取材的深度一定要夠，一般為2s3mm,要捏緊皮損，防止出血，刀尖要

確認(rèn)刮到組織液后再涂片。因取材深度不夠而取組織液太少，不能形成符合規(guī)定

的涂膜是產(chǎn)生查菌假陰性的主要原因。

3.組織液取材勿含血液，否則會(huì)影響鏡檢結(jié)果，也是出現(xiàn)查菌假陰性的主要

原因。

4.抗酸染液一定要新鮮配制，一般勿超過(guò)1年。麻風(fēng)診斷中已經(jīng)有因染液過(guò)

期出現(xiàn)查菌假陰性而漏診的情況。

5.染色要按規(guī)定操作方法進(jìn)行，要根據(jù)涂膜的厚薄調(diào)整染色的時(shí)間.涂膜太

厚，亞甲藍(lán)染色時(shí)間太長(zhǎng)是涂片藍(lán)色背景太深而出現(xiàn)假陰性結(jié)果的常見(jiàn)原因。

6.完整菌指菌體完整、染色均勻的正常形、超過(guò)1/2的短桿形及延仲形細(xì)菌。

非完整菌為菌體斷裂、染色不均勻的顆粒形、小于1/2的斷裂形、雙球形、念珠

形等。

7.細(xì)菌形態(tài)對(duì)判斷麻風(fēng)早期療效和復(fù)發(fā)很有用，在疑似復(fù)發(fā)的患者的涂片

中見(jiàn)到較多的完整菌，則基本可確定麻風(fēng)復(fù)發(fā)。經(jīng)過(guò)有效治療的患者，麻風(fēng)菌均

呈現(xiàn)顆粒狀，無(wú)完整菌存在。

二、組胺試驗(yàn)

【適應(yīng)證】麻風(fēng)病。

【禁忌證】

對(duì)所試藥物高度過(guò)敏者。

【操作方法及程序】

1.用碘酒、75%乙醇或碘伏消毒后，在正常和麻風(fēng)皮損處分別皮內(nèi)注射1：

1000的磷酸組胺溶液各0.1mL

2.約30s后，于正常皮膚注射處周?chē)霈F(xiàn)第一個(gè)紅斑，直徑約10mm；再過(guò)

30s,在上述紅斑周?chē)霈F(xiàn)第二個(gè)紅斑，直徑30s40mm,邊緣彌漫；最后在紅

斑中央出現(xiàn)風(fēng)團(tuán)a此為完整的三聯(lián)反應(yīng)。表明受試皮膚的神經(jīng)功能正常。

3.三聯(lián)反應(yīng)的原理是最初出現(xiàn)的紅斑是皮膚毛細(xì)血管受組胺刺激而擴(kuò)張所

致，最后出現(xiàn)的風(fēng)團(tuán)是繼毛細(xì)血管擴(kuò)張后，血漿滲出引起的局部水腫。重要的是

第二個(gè)紅斑，是小動(dòng)脈擴(kuò)張所致。由于小動(dòng)脈擴(kuò)張的前提是支配其血管的末梢神

經(jīng)要正常，并能通過(guò)軸突反射而傳導(dǎo)沖動(dòng)才能完成，因此特別有意義。在神經(jīng)切

斷，或用普魯卡因封閉神經(jīng)后，就不會(huì)有第二個(gè)紅斑。麻風(fēng)患者由于皮損處末梢

神經(jīng)受到破壞，所支配的小動(dòng)脈不能擴(kuò)張，也不出現(xiàn)第二個(gè)紅斑，稱(chēng)三聯(lián)反應(yīng)不

完整。

【注意事項(xiàng)】

1.在炎性紅斑處不宜做此試驗(yàn)，以免判斷失誤。

2.組胺三聯(lián)反應(yīng)的不完整，不是麻風(fēng)病所特有的，許多周?chē)窠?jīng)病變都町出

現(xiàn).

3.皮損處的改變要與正常皮膚處對(duì)照觀察。

三、出汗試驗(yàn)

【適應(yīng)證】麻風(fēng)病。

【禁忌證】

對(duì)所試藥物高度過(guò)敏者。

【操作方法及程序】

L淀粉法

(1)在正常皮膚和皮損處用碘酒和75%乙醇消毒后，再各涂碘酒，待干后，分

別皮內(nèi)注射1：1000的毛果蕓香堿溶液各0.1ml,擦干針尖處滲液，立即撒上

薄層干燥淀粉。

(2)3?5rnin后，正常皮膚部位淀粉處出現(xiàn)藍(lán)色小點(diǎn)或小片，表示出汗正常。

(3)如果皮損處汗腺破壞或泌汗神經(jīng)破壞，泌汗功能障礙，則碘無(wú)法與淀粉

發(fā)生作用，不出現(xiàn)藍(lán)點(diǎn)或藍(lán)色小片。

2.試紙法

(1)皮內(nèi)注射毛果蕓香堿后，用棉球擦去針眼處滲液，2mm后，將溟酚藍(lán)紙

按在針眼處，輕輕加壓，15s后將紙取下，如有出汗則在浪酚藍(lán)紙上顯示針尖或

稍大的藍(lán)色小點(diǎn)。

(2)此法的試驗(yàn)結(jié)果比較精確

(3)浪酚藍(lán)紙的制備。取艱酚藍(lán)0.1g溶于95%乙醇溶液10ml內(nèi)配成

1%澳酚藍(lán)溶液；用滴管將1%浪酚藍(lán)溶液滴在濾紙上，待自然干燥后成黃

色的濾紙，剪成lcmXlcm大小備用。

【注意事項(xiàng)】

宜在對(duì)側(cè)相應(yīng)或鄰近的正常皮膚處作對(duì)照，皮損處的變化要與正常皮膚處仔

細(xì)觀察對(duì)比。

四、立毛肌試驗(yàn)

【適應(yīng)證】麻風(fēng)病。

【禁忌證】

對(duì)所試藥物高度過(guò)敏者。

【操作方法及程序】

1.在正常和皮損處先以碘酒和75%乙醇消毒后，分別于皮內(nèi)注射1：10萬(wàn)

的苦味酸煙堿溶液0.1mL

2.正常皮膚的末梢神經(jīng)未受損害，立毛肌會(huì)收縮，引起雞皮現(xiàn)象。

3.麻風(fēng)皮損因神經(jīng)末梢受到破壞向無(wú)此現(xiàn)象。

【注意事項(xiàng)】

1.立毛肌試驗(yàn)時(shí)沒(méi)有雞皮現(xiàn)象不是麻風(fēng)皮損所特有的，也見(jiàn)于所有末梢神經(jīng)

功能在受到阻斷或損傷的情況下。

2.宜在對(duì)側(cè)相應(yīng)或鄰近的正常皮膚處作對(duì)照，皮損處的變化要與正常皮，膚處

仔細(xì)觀察對(duì)比。

第十三節(jié)淋球菌檢查

【適應(yīng)證】淋病。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.分泌物的涂片檢查主要適用于男性。

(1)用滅菌生理鹽水洗凈尿道口。

⑵戴消毒手套后，用手指由陰莖根部向尿道口方向擠出膿液，用接種環(huán)

或棉拭子蘸取膿液，輕輕涂于載玻片上，待其自然干燥后加熱固定，做革蘭

染色，然后鏡檢。

(3)在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭陰性的腎形雙球菌時(shí)，可明確診斷。

2.淋球菌的分離培養(yǎng)

⑴取材。

①男性患者從尿道取材時(shí)，可用細(xì)小棉拭子伸人尿道2~4cm,輕輕

轉(zhuǎn)動(dòng)后取出分泌物(應(yīng)略帶黏膜。

②女性患者取材時(shí)，先用陰道窺器暴露宮頸口，用無(wú)菌棉拭子拭去宮頸

口表面的分泌物，另取一棉拭子插入宮頸口內(nèi)I-2cm,轉(zhuǎn)動(dòng)并停留20s取

出。

③直腸取材時(shí)，應(yīng)將棉拭子插入肛門(mén)。

④檢查淋球菌性咽炎時(shí)，應(yīng)從扁桃體及扁桃體窩取材。

⑤對(duì)青春期前女童可采集陰道處分泌物標(biāo)本。

(2)標(biāo)本取出后立即接種于培養(yǎng)基中，目前常用加入多黏菌素的血液瓊脂或

巧克力瓊脂培養(yǎng)基。

(3)初次分離應(yīng)使用5%~10%CO2燭缸，培養(yǎng)溫度以36c為宜，相對(duì)

濕度80%以上，培養(yǎng)24?48h看結(jié)果。

(4)淋球菌在多黏菌素B血液瓊脂上經(jīng)24~48h培養(yǎng)后，可形成圓形、

凸起、濕潤(rùn)、光滑、半透明或灰白色的菌落，邊緣呈花瓣?duì)?，直?.5-l.Ocm,

用接種環(huán)觸之有黏性，如繼續(xù)培養(yǎng)，菌落體積增大，表面粗糙，邊緣皺縮。

3.淋球菌的鑒定一氧化酶試驗(yàn)

(1)配制氧化酶試劑：0.5%~1%鹽酸二甲基對(duì)苯二胺水溶液。

(2)將溶液滴加于可疑菌落上，觀察顏色變化。也可先將試劑滴在一小張

濾紙片上，然后挑取可疑菌落與之接觸，觀察顏色變化。

(3)菌落在接觸氧化酶試劑15620s出現(xiàn)紅色，保持30s以上，然后

逐漸變成紫色，最后呈黑色，為氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性，證實(shí)為淋球菌。

【注意事項(xiàng)】

1.分泌物涂片時(shí)不要用力涂擦，以免細(xì)胞破裂和變形，涂片厚薄要合適。

2.女性宮頸分泌物、咽和直腸標(biāo)本在涂片中由于雜菌較多，故推薦用培養(yǎng)

法。

3,分離培養(yǎng)取材時(shí)拭子伸入尿道或?qū)m頸的深度一定要足夠。

4.培養(yǎng)淋球菌時(shí)，取材后應(yīng)立即接種，標(biāo)本離體的時(shí)間越短越好。

5.分高培養(yǎng)應(yīng)采用加抗生素的選擇性培養(yǎng)基。

6.氧化酶試劑應(yīng)為新鮮配制(現(xiàn)用現(xiàn)配)，在棕色瓶中避光保存。

7.氧化酶試劑遇鐵也會(huì)變紅，故接種環(huán)應(yīng)非鐵絲所制。

8.對(duì)癥狀不典型的男性患者取材，最好在其晨起排尿前或排尿4h以后。

第十四節(jié)衣原體檢查

【適應(yīng)證】

非淋球菌感染者。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

L直接涂片染色法

(1)采集標(biāo)本同淋球菌。

(2)標(biāo)本涂片，自然干燥后甲醛固定5min。

(3)當(dāng)日配制的姬姆薩溶液染色lho

(4)再用95%乙醇溶液淋洗涂片，干燥。

(5)油鏡下陽(yáng)性標(biāo)本中可在上皮細(xì)胞內(nèi)找到個(gè)或更多呈藍(lán)色、深藍(lán)色或

暗紫色的包涵體。

2.衣原體抗原檢測(cè)法

(1)采集標(biāo)本同淋球菌。

(2)用商品試劑盒檢測(cè)，檢測(cè)前先將試劑盒和測(cè)試卡等室溫下復(fù)溫30mino

(3)加試劑至塑料管刻度處(約0.6ml),將拭子標(biāo)本浸人管內(nèi)搖勻，置水浴，

10-20min取出，轉(zhuǎn)動(dòng)拭子并沿管壁擠壓，棄去拭子，提取液置室溫冷卻后蓋上

管蓋。

(4)將測(cè)試卡置臺(tái)面，加入5滴提取液于檢體窗，靜置30min后觀察結(jié)果。

(5)質(zhì)控窗和結(jié)果窗均顯示一條藍(lán)帶為陽(yáng)性，結(jié)果窗無(wú)變化為陰性。

3.免疫熒光法

(1)采集標(biāo)本同淋球菌檢查。

(2)將標(biāo)本涂于玻片凹孔中或IB圈中，自然干燥，丙酮或無(wú)水甲醛固定漂洗，

再干燥。

(3)加30ml熒光素標(biāo)記的沙眼衣原體單克隆抗體試劑覆蓋凹孔，玻片置濕

盒中或37攝氏度下作用15min,去掉多余試劑，用蒸儲(chǔ)水淋洗涂片，自然

干燥，加一滴封固液，蓋上蓋玻片，置熒光顯微鏡下檢查。

(4)陽(yáng)性標(biāo)本在高倍鏡下可見(jiàn)上皮細(xì)胞內(nèi)的衣原體顆粒，為單一、針尖大小、

明亮的綠色熒光，在油鏡下為熒光均勻、邊緣光滑的圓盤(pán)樣結(jié)構(gòu)，也可見(jiàn)網(wǎng)狀

體等其他形態(tài)的衣原體顆粒。

【注意事項(xiàng)】

同淋球菌檢查。

第十五節(jié)解胭胭原體檢查

【適應(yīng)證】

非淋球菌感染者。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.采集標(biāo)本同淋球菌檢查，也可用10ml中段尿離心(2000也min,lOmin),

取沉渣作接種物。

2.將標(biāo)本接種到液體培養(yǎng)基中置燭缸內(nèi)，在37c恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24-721】，每

口觀察顏色變化，如由黃色變?yōu)榉奂t色，可能有解胭服原體生長(zhǎng)。

3.取0.2ml培養(yǎng)物接種到固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48h后于低倍鏡下觀察，有典

型“油煎蛋”狀菌落者為陽(yáng)性。

【注意事項(xiàng)】同淋球菌檢查。

第十六節(jié)梅毒螺旋體檢查

一、梅毒螺旋體檢查

【適應(yīng)證】早期梅毒。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

1.暗視野顯微鏡檢查

(1)多取材于硬下疳潰瘍面、扁平濕疣及黏膜斑表面、淋巴結(jié)抽出液。

(2)先用無(wú)菌生理鹽水清洗皮損處，用鈍刀刮除皮損表面組織，擦凈，擠壓

周?chē)M織，使血清及組織液滲出，吸取液體涂片，在暗視野顯微鏡下檢查。

3)結(jié)果以查見(jiàn)梅毒螺旋體為陽(yáng)性c

2.免疫熒光染色檢杳

(1)上述取材后，用已知抗梅毒螺旋體抗血清，加非致病性螺旋體培養(yǎng)物進(jìn)

行吸收，再用異硫氟酸熒光素(FITC)標(biāo)記，文寸梅毒螺旋體染色。

(2)熒光顯微鏡下見(jiàn)到亮綠色螺旋體為陽(yáng)性。

3.組織切片染色月改良的萊瓦弟(Levoaditis)鍍銀染色，可顯示皮膚及內(nèi)臟器

官中梅毒螺旋體，呈黑褐色。

二、梅毒血清學(xué)檢查

(一)非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)

【適應(yīng)證】

1.臨床可疑人群常規(guī)檢查；大量人群篩選檢查。

2.定量指標(biāo)觀察療效，是否再發(fā)，是否再感染。

3.發(fā)現(xiàn)潛伏梅毒感染者。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【試驗(yàn)方法】

1.性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(venerealdiseaseresearchlaboratorytest,VDRL)

用心磷脂、磷脂酰膽堿(卵磷脂)及膽固醵為抗原，與機(jī)體產(chǎn)生的反應(yīng)素發(fā)生

顆粒凝集和沉淀反應(yīng)。可稀釋做定量反應(yīng)。

2.不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(unheatedserumreagintest?USR)用改良的VDRL抗

原，血清可不必加熱滅活，抗原不必每天配制。

3.快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(rapidplasmareagincirclecardtest,RP

R)基本原理與USR相同，但在抗原中加入藥用炭(活性炭)顆粒，判定結(jié)果

可在肉眼下進(jìn)行。也可稀釋做定量反應(yīng)。

【結(jié)果判定】

(++++)有大塊狀的顆粒和聚合團(tuán)塊

(+++)有中塊狀的顆粒和聚合團(tuán)塊

什+)有小塊狀的顆粒聚合物

(+-)有小塊聚合顆粒，均勻分布顆粒細(xì)小、混懸，無(wú)聚合現(xiàn)象

定量用生理鹽水按1：8、1：16、1：32……稀釋?zhuān)卸?yáng)性標(biāo)準(zhǔn)同

上。

(二)梅毒蝶旋體抗原試驗(yàn)

【適應(yīng)證】

診斷梅毒有高敏感性和高特異性，常被用作悔毒的確證試驗(yàn)。應(yīng)注意到：梅

毒患者該類(lèi)拭驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)后，約有95%的患者雖經(jīng)足量治療，其血清陽(yáng)性

反應(yīng)終生不變，因此不能作為療效觀察、復(fù)發(fā)或再感染的判定指征。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌。

【試驗(yàn)方法】

1.熒光密螺旋體抗體吸收試驗(yàn)用間接免疫熒光技術(shù)檢測(cè)血清中抗梅毒螺旋

體抗體。有高敏感性和高特異性。

2.梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)是以梅毒螺旋體為抗原的間接血球凝集試驗(yàn)，

是一種特異性和敏感性均較高而且操作較簡(jiǎn)單的方法。目前有兩種試驗(yàn)：一種即

TPHA,另一種為梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(treponemapallidumparticle

agglutinationtest,TP-PA）。兩種方法都用超聲波粉碎的NichoI株螺旋體懸

液為抗原，前者用甲醛處理的羊紅細(xì)胞作抗原載體，后者用純化的明膠顆粒作

抗原載體。

3.梅毒螺旋體停動(dòng)試驗(yàn)（treponemapallidumimmobilizationtest,TPI）

梅毒患者血清中含有一種在補(bǔ)體存在時(shí)能使螺旋體停動(dòng)的抗體。該試驗(yàn)陽(yáng)性

結(jié)果出現(xiàn)得早，但應(yīng)注意在一期梅毒的晚期、二期梅毒的早期和中期血清峰值

開(kāi)始下降。

【注意事項(xiàng)】

梅毒螺旋體檢查陽(yáng)性對(duì)梅毒的診斷提供了重要依據(jù)，但確診梅毒常需要接

觸史、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查綜合判定。梅毒血清試驗(yàn)可能出現(xiàn)技術(shù)性假陽(yáng)性和

生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，特別是非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)。

第十七節(jié)醋酸白（甲苯胺藍(lán)）試驗(yàn)

【適應(yīng)證】尖銳濕疣。

【禁忌證】無(wú)特殊禁忌。

【操作方法及程序】

暴露疣體或可疑皮損，用蘸有5%醋酸的棉拭子壓于可疑皮疹及附近狗皮

膚黏膜上，觀察3~5min（肛門(mén)皮疹須觀察lOmin左右）。

【結(jié)果判定】

作用部位呈均勻一致的變白區(qū)，邊緣清楚，為陽(yáng)性。

【注意事項(xiàng)】

1.敏感性較高、

2.有時(shí)在上皮增厚或有外傷擦破情況下有假陽(yáng)性反應(yīng)。

3.該試驗(yàn)診斷尖銳濕疣并非絕對(duì)特異反應(yīng)，應(yīng)作為臨床參考?？赡苡屑訇?yáng)

性或假陰性。

第十八節(jié)嚇咻檢查

口卜咻是體內(nèi)合成It紅蛋白等物質(zhì)的中間產(chǎn)物，包括嚇膽原，I、II型尿嚇

琳原和尿葉咻，I>II型糞葉咻原和糞口卜咻，常采用尿液、糞便和紅細(xì)胞的口卜

咻檢查法。

【適應(yīng)證】

各種原發(fā)性和繼發(fā)性咋咻病。

1.紅細(xì)胞生成性葉咻病包括先天性紅細(xì)胞生成性嚇咻病、紅細(xì)胞生成性原嚇

咻病、紅細(xì)胞生成性糞口卜咻病等。

2.肝性葉咻病包括遲發(fā)性皮膚嚇咻病、急性間歇性嚇咻病、混合性嚇咻病、

遺傳性糞葉咻病等。

【禁忌證】

無(wú)特殊禁忌

【操作方法及程序】

1.尿液尿葉淋檢查法

(1)取新鮮尿4ml于試管中，加10滴冰乙酸混合.

(2)加入1ml戊醇，并振搖試管數(shù)次，待分層。

(3)在暗室中，用濾過(guò)紫外線燈觀察戊醉層(上層)，灰藍(lán)色為陰性，粉紅

或紅色熒光為陽(yáng)性。

2.尿液糞嚇咻檢查》夬

(1)取新鮮尿液20ml放于試管中，加冰乙醇0.5ml和3%過(guò)氧化氫2

-3滴。

(2)再加入4ml乙醛，振搖試管數(shù)次，待分層。

(3)在暗室中，用濾過(guò)紫外線燈觀察乙醛層(上層)，灰白或