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第二章儀器檢測技術(shù)旋光度測定法五、旋光度測定法(一)概述1、旋光度測定法:利用測定藥物的旋光度進(jìn)行定性、雜質(zhì)檢查和定量的分析方法。2、旋光度:平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時,能引起旋光現(xiàn)象,使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)的度數(shù),稱為旋光度。3、比旋度:平面偏振光透過長1dm并每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液,在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度([α]Dt
)。100α
[α]Dt
=───LC式中[α]為比旋度;
D為鈉光譜的D線;
t為測定時的溫度;
L為測定管長度,dm;
α為測得的旋光度;
C為每100ml溶液中含有被測物質(zhì)的重量,g(按干燥品或無水物計算)。(二)影響旋光度測定的因素1、物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)有或無左或右2、溶液的濃度
C有α成線性關(guān)系3、溶劑影響旋光度的方向、大小4、光線通過液層的厚度
α=[α]Dt×L×C5、光的波長鈉光譜D線6、溫度藥典:20℃(三)使用方法1、檢查樣品室內(nèi)應(yīng)無異物;2、將電源插頭插入220V交流電源插座上,并接好地線,先開啟電源開關(guān),然后打開光源,經(jīng)15分鐘鈉光燈穩(wěn)定后測定。3、取出試樣管,用蒸餾水蕩洗三次,然后裝入蒸餾水至管頸上方,注意試樣管內(nèi)不得有氣泡。按下測量鍵,觀察旋光度讀數(shù)是否為零,否則按下清零鍵清零。4、倒出空白溶液,注入供試液少量,沖洗數(shù)次后裝滿溶液,按上述所述方法測出讀數(shù),按復(fù)測鍵測定3次,取3次平均值作為供試品的旋光度。5、清場。(四)注意事項1、每次測定前應(yīng)以溶劑作空白校正,測定后,再校正1次,以確定在測定時零點有無變動;如第2次校正時發(fā)現(xiàn)零點有變動,則應(yīng)重新測定旋光度。2、配制溶液及測定時,均應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至20±0.5℃(或各藥品項下規(guī)定的溫度)。3、供試的液體或固體物質(zhì)的溶液應(yīng)不顯渾濁或含有混懸的小粒。如有上述情形時,應(yīng)預(yù)先濾過,并棄去初濾液。4、測定結(jié)束后須將測定管洗凈晾干,不許將盛有供試品的測試管長時間置于儀器樣品室內(nèi);儀器不使用時樣品室可放硅膠吸潮。
(五)應(yīng)用1、定性特定的藥物在一定的溫度、波長、溶劑、濃度下有特定的比旋度。例:Vc0.1g/L水溶液+20.5-+21.502、雜質(zhì)檢查例:硫酸阿托品【檢查】項下:莨菪堿:取本品,按干燥品計算,加水制成每1ml中含50mg的溶液,依法測定,旋光度不得過-0.4003、含量測定例:葡萄糖注射液含量測定藥典:S(g)=2.0852×α精密量取本品適量(約相當(dāng)于葡萄糖10g),置100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,依旋光度測定法測定旋光度
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