青蒿琥酯抗腫瘤作用研究課件

青蒿琥酯抗腫瘤作用研究作者zcm青蒿琥酯抗腫瘤作用研究前言青蒿琥酯抗腫瘤作用研究1.青蒿類藥物簡(jiǎn)介青蒿素是1972年我國(guó)中醫(yī)研究院從青蒿中分離出的活性物質(zhì)以后我國(guó)科學(xué)家成功研制了比青蒿素抗瘧疾作用更強(qiáng)的雙氫青蒿素和青蒿琥酯等多種青蒿素類藥物。近年研究發(fā)現(xiàn)青蒿素類藥物具有抗腫瘤作用。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究青蒿素類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：含有過氧化物橋結(jié)構(gòu)(C-O-O-C)。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究Molt-4:人淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞株

青蒿琥酯抗腫瘤作用研究青蒿琥酯抗腫瘤作用研究我們?cè)O(shè)想：全鐵轉(zhuǎn)鐵運(yùn)蛋白+青蒿琥酯進(jìn)行抗腫瘤實(shí)驗(yàn)青蒿琥酯抗腫瘤作用研究實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白與青蒿琥酯聯(lián)合在體內(nèi)、體外的抗腫瘤作用。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究實(shí)驗(yàn)分為兩個(gè)部分：體外------細(xì)胞學(xué)體內(nèi)-------動(dòng)物學(xué)青蒿琥酯抗腫瘤作用研究細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)----材料腫瘤細(xì)胞株：HCT-8（人結(jié)腸癌細(xì)胞株）K-562（人紅白血病細(xì)胞株）MCF-7（人乳腺癌細(xì)胞株）試劑：

RPMI1640胰蛋白酶MTT（噻唑蘭）DMSO（二甲基亞砜）5-氟脲嘧啶（5-Fu）青蒿琥酯青蒿琥酯抗腫瘤作用研究細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)-技術(shù)路線培養(yǎng)HCT-8、K562、MCF-7腫瘤細(xì)胞株青蒿琥酯空白對(duì)照全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白計(jì)算生長(zhǎng)的抑制率全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白測(cè)定OD值加入DMSO加入MTT氟尿嘧啶青蒿琥酯青蒿琥酯抗腫瘤作用研究細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)---統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

IC50計(jì)算使用SPSS軟件包的概率單位法(Probit)

組間比較t檢驗(yàn)。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)青蒿琥酯抗腫瘤作用研究動(dòng)物實(shí)驗(yàn)---材料瘤株：小鼠肉瘤S-180。動(dòng)物：昆明種小鼠（BALB/c–nu裸小鼠）,體重18~22g,雌雄不限，在同一批試驗(yàn)中使用性別相同的小鼠。藥物：青蒿琥酯環(huán)磷酰胺(CTX)青蒿琥酯抗腫瘤作用研究動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)-技術(shù)路線給裸鼠接種S180瘤株空白對(duì)照靜脈注射全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白計(jì)算抑瘤率加剝離瘤塊，稱瘤重處死動(dòng)物CTX腹腔注射青蒿琥酯腹腔注射青蒿琥酯青蒿琥酯抗腫瘤作用研究動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)----統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)分析使用SPSSV10.0各實(shí)驗(yàn)組與陰性對(duì)照組及CTX組間比較采用成組t檢驗(yàn)。

青蒿琥酯抗腫瘤作用研究細(xì)胞學(xué)——

實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)論1

1mg/ml濃度全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白具有促進(jìn)HCT-8、K562及MCF-7細(xì)胞生長(zhǎng)的作用青蒿琥酯抗腫瘤作用研究統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性（P<0.05）。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究惡性腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖速度快，需要大量的Fe3+腫瘤細(xì)胞表面的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TFR）高表達(dá)。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究使用全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白可以提高細(xì)胞內(nèi)的含量，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)論2

青蒿琥酯在體外對(duì)HCT-8、K562及MCF-7細(xì)胞有明顯的殺傷作用青蒿琥酯抗腫瘤作用研究IC50=1.99±0.66ug/ml青蒿琥酯抗腫瘤作用研究IC50=1.62±0.76ug/mlIC50=10.54±1.25ug/ml上述結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)論3

全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白不能明顯增強(qiáng)青蒿琥酯對(duì)HCT-8、K562及MCF-7的殺傷作用青蒿琥酯抗腫瘤作用研究P>0.05P<0.05青蒿琥酯抗腫瘤作用研究各劑量組間t檢驗(yàn)：P>0.05青蒿琥酯抗腫瘤作用研究各劑量組間t檢驗(yàn)：P>0.05青蒿琥酯抗腫瘤作用研究與Henry等的研究結(jié)果不一致與Henry等的研究的相似點(diǎn)：藥物類似：化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗瘧疾作用、毒副作用以及抗腫瘤作用細(xì)胞株：同為人惡性腫瘤細(xì)胞株使用的培養(yǎng)液相同：RPMI1640加入的全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度相同---1ug/ml=12.6uM結(jié)果不同，Why？青蒿琥酯抗腫瘤作用研究我們的分析青蒿琥酯的抗腫瘤作用機(jī)制可能不是鐵離子介導(dǎo)的過氧基斷裂產(chǎn)生大量的氧自由基而殺死腫瘤細(xì)胞，而可能是其他機(jī)制。

全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白為腫瘤細(xì)胞提供了生長(zhǎng)繁殖所需的Fe2+----促進(jìn)生長(zhǎng)

青蒿琥酯殺傷腫瘤細(xì)胞----抑制生長(zhǎng)聯(lián)合使用----作用相互抵消青蒿琥酯抗腫瘤作用研究理由一人骨髓中的造血細(xì)胞、粘膜上皮細(xì)胞均生長(zhǎng)快、代謝旺盛，其細(xì)胞內(nèi)Fe2+的含量高。而動(dòng)物學(xué)研究及臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)青蒿素類藥物很安全，沒有發(fā)現(xiàn)有明顯的骨髓抑制和粘膜損傷。說明青蒿素類藥物不是直接與Fe2+發(fā)生反應(yīng)而釋放出大量氧自由基。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究理由二至今只有兩篇報(bào)道全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白顯著增強(qiáng)雙氫青蒿素對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用的文獻(xiàn)，分別是：

1、1995年HenryLai和NarendraP.Singh的Selectivecancercellcytotoxicityfromexposuretodihydroartemisininandholotransferrin.2、2001年NarendraP.Singh和HenryLai的Selectivetoxicityofdihydroartemisininandholotransferrintowardhumanbreastcancercells.而上述2篇文獻(xiàn)的作者均相同。近10年未再見有類似報(bào)道。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)論4

青蒿琥酯在體內(nèi)對(duì)S180肉瘤有明顯的抗腫瘤作用青蒿琥酯抗腫瘤作用研究與陰性對(duì)照組比較P>0.05P<0.05P<0.01青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道一致青蒿琥酯抗腫瘤作用研究結(jié)論

1濃度為1mg/ml的全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白有促進(jìn)HCT-8、K562和MCF-7腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。

2青蒿琥酯對(duì)人腫瘤細(xì)胞株HCT-8、K562和MCF-7具有一定的體外抑瘤作用，IC50值為1.99~10.54μg/ml。3我們發(fā)現(xiàn)加用濃度為1mg/ml的全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白不能增強(qiáng)青蒿琥酯對(duì)HCT-8、K562和MCF-7瘤株的生長(zhǎng)抑制作用。4腹腔注射青蒿琥酯對(duì)小鼠S180肉瘤具有一定的抑制作用。青蒿琥酯抗腫瘤作用研究致謝感謝xxxxxxxx青蒿琥酯抗腫瘤作用研究謝謝！青蒿琥酯抗腫瘤作用研究細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)-技術(shù)路線培養(yǎng)HCT-8、K562、MCF-7腫瘤細(xì)胞株青蒿琥酯空白對(duì)照全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白計(jì)算生長(zhǎng)的抑制率全鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白測(cè)定OD值加入DMSO加入MMT氟尿嘧啶青蒿琥酯只有細(xì)胞沒有藥物本底孔測(cè)試孔OD需減去本底OD4h，使用96孔板培養(yǎng)3h終濃度1mg/ml終濃度1mg/ml培養(yǎng)96h培養(yǎng)4h5mg/ml的MTT10ul1