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PAGEPAGE1試驗2分別以尿素為氮源的微生物一、選擇題eq\a\vs4\al(1.)土壤中有些微生物能利用尿素是因為()A.其體內(nèi)含有脲酶B.其體內(nèi)含有氨(NH3)酶C.它能將CO2合成為有機物D.它們不須要氮源解析:選A。能利用尿素的微生物就是因為體內(nèi)含有脲酶,可降解尿素為其生長繁殖供應(yīng)氮源。eq\a\vs4\al(2.)從土壤中分別以尿素為氮源的微生物時,所用的LB培育基由以下哪一組成分構(gòu)成()A.蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂B.蛋白胨、NaCl、水、瓊脂糖C.蛋白胨、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂糖D.葡萄糖、NaCl、水、酵母提取物、瓊脂解析:選C。LB培育基必需含五大養(yǎng)分元素:碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子。由于是固體培育基還必需有凝固劑,為與尿素培育基作對比,所用凝固劑不能帶來氮源干擾,因此只能選擇相對更為純凈的瓊脂糖了。eq\a\vs4\al(3.)用10-4稀釋度的細(xì)菌懸液分別涂布于LB、尿素培育基上,培育后的結(jié)果,以下敘述正確的是()A.LB培育基上未出現(xiàn)任何菌落B.尿素培育基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都多于LB培育基上的C.尿素培育基上出現(xiàn)的菌落數(shù)量和種類都少于LB培育基上的D.尿素培育基上是不行能出現(xiàn)菌落的解析:選C。LB培育基為完全培育基,會出現(xiàn)大量菌落。尿素培育基上只有能以尿素做氮源的微生物能存活,因此其上的菌落數(shù)量和種類都將會削減。尿素培育基上出現(xiàn)的菌落就是能利用尿素的那些微生物菌落。eq\a\vs4\al(4.)在做分別分解尿素的細(xì)菌試驗時,A同學(xué)從對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培育基上篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。A同學(xué)的結(jié)果產(chǎn)生緣由可能有()①由于土樣不同②由于培育基污染③由于操作失誤④沒有設(shè)置比照A.①②③ B.②③④C.①③④ D.①②④解析:選A。該同學(xué)可能取的土樣不同,可取其他同學(xué)的土樣進行培育,同時將未接種的培育基同時培育,假如結(jié)果不是大約50個菌落,可能是培育基污染或操作有誤;假如結(jié)果和其他同學(xué)數(shù)據(jù)相同,且未接種的培育基沒有菌落生成,說明是土樣不同。eq\a\vs4\al(5.)能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分別是()A.二氧化碳和氮氣 B.葡萄糖和氨C.二氧化碳和尿素 D.葡萄糖和尿素解析:選D。能合成脲酶的微生物主要是分解尿素的細(xì)菌,其碳源為葡萄糖,氮源為尿素。eq\a\vs4\al(6.)某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培育基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234,那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)()A.2.34×108 B.2.34×109C.234 D.23.4解析:選B。每克樣品中的菌落數(shù)=(C÷V)×M=(234÷0.1)×106=2.34×109。eq\a\vs4\al(7.)可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是()A.以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培育基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培育基中加入蘇丹Ⅲ試劑D.以尿素為唯一氮源的培育基中加入雙縮脲試劑解析:選A。酚紅指示劑是靈敏性高的堿性指示劑,分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨,使pH上升,使酚紅指示劑變紅。eq\a\vs4\al(8.)進行系列稀釋時,按怎樣的依次進行()A.稀釋倍數(shù)遞增 B.稀釋倍數(shù)遞減C.不論稀釋度大小 D.A、B兩者都可解析:選A。將菌液進行系列梯度稀釋,在稀釋倍數(shù)足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培育基表面形成單個菌落。eq\a\vs4\al(9.)有關(guān)倒平板的操作錯誤的是()A.將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B.使打開的錐形瓶瓶口快速通過火焰C.將培育皿打開,培育皿蓋倒放在桌子上D.等待平板冷卻凝固后須要倒過來放置解析:選C。在倒平板時,左手將皿蓋打開一條縫隙,不能將培育皿完全打開,以免雜菌污染。eq\a\vs4\al(10.)將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是()A.對比視察培育基有沒有被微生物利用B.對比分析培育基上是否生有雜菌C.沒必要放入未接種的培育基D.為了下次接種時再運用解析:選B。將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37℃恒溫箱的目的是檢測培育基是否被雜菌污染,即制備是否合格。eq\a\vs4\al(11.)如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和計數(shù)”試驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是()A.3號試管的稀釋倍數(shù)為103倍B.4號試管中稀釋液進行平板培育得到的菌落平均數(shù)恰好為5號試管的10倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個D.該試驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高答案:Ceq\a\vs4\al(12.)統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法是()①涂布平板法②重量法③干脆計數(shù)法④比濁法⑤生理指標(biāo)法⑥膜過濾法A.①②③⑥ B.③④⑤⑥C.②③④⑥ D.①③④⑥解析:選D。微生物計數(shù)法主要有顯微鏡干脆計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法、光電比濁法、最大可能數(shù)(MPN)法、膜過濾法等。eq\a\vs4\al(13.)分別以尿素為氮源的細(xì)菌和分別大腸桿菌都運用了LB培育基,其成分()A.前者含瓊脂,后者不含瓊脂和瓊脂糖B.兩者都含有瓊脂C.前者含有瓊脂糖,后者不含瓊脂糖但含瓊脂D.兩者都不含瓊脂和瓊脂糖解析:選C。瓊脂和瓊脂糖都起凝固劑的作用,用于制備固體培育基。但瓊脂為混合物,含少量含氮化合物,瓊脂加以純化,去除含氮化合物就成為瓊脂糖。分別大腸桿菌和含脲酶的細(xì)菌用的都是固體培育基,因此都必需含有凝固劑:瓊脂或瓊脂糖。但是,由于瓊脂為混合物,其中含肯定量的含氮化合物,因此不能用于分別以尿素為氮源的細(xì)菌。瓊脂糖為瓊脂的純化物,不含含氮化合物,可用于分別以尿素為氮源的細(xì)菌。eq\a\vs4\al(14.)下列說法不正確的是()A.科學(xué)家從70~80℃熱泉中分別得到耐高溫的TaqDNA聚合酶B.統(tǒng)計某一稀釋度的5個平板的菌落數(shù)依次為M1、M2、M3、M4、M5,以M3作為該樣品菌落數(shù)的估計值C.設(shè)置比照試驗的主要目的是解除試驗組中非測試因素對試驗結(jié)果的影響,提高試驗結(jié)果的可信度D.同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物數(shù)量最大,種類最多解析:選B。統(tǒng)計菌落數(shù)應(yīng)留意選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),且至少涂布3個平板作為重復(fù)組,重復(fù)組的結(jié)果不能相差太多,然后取平均值進行計算。eq\a\vs4\al(15.)通過選擇培育基可以從混雜的微生物群體中分別出所需的微生物。在缺乏氮源的培育基上大部分微生物無法生長;在培育基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌;在培育基中加入10%的酚類可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法不能從混雜的微生物群體中分別出()A.大腸桿菌 B.霉菌C.放線菌 D.固氮細(xì)菌解析:選A。缺乏氮源的培育基可以選擇出固氮細(xì)菌;在培育基中加入青霉素,可以選擇出霉菌;在培育基中加入10%的酚類可以選擇出放線菌。eq\a\vs4\al(16.)在農(nóng)田土壤的表層自生固氮菌較多。將用表層土制成的稀泥漿接種到特制的培育基上培育,可將自生固氮菌與其他細(xì)菌分開,對培育基的要求是()①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒溫箱中培育⑧28~30℃溫度下培育A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧C.②④⑤⑧ D.①④⑥⑦解析:選C。自生固氮菌生長繁殖的相宜溫度是28~30℃,能夠?qū)o機氮源合成有機氮,不須要加氮源。細(xì)菌對抗生素敏感。固氮菌是異養(yǎng)生物,須要加葡萄糖。eq\a\vs4\al(17.)能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A.稀釋涂布平板法 B.干脆計數(shù)法C.重量法 D.比濁法解析:選A。利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的狀況下將細(xì)菌個體從固體培育基上分別出來,并可以繁殖形成菌落,可依據(jù)菌落數(shù)測定出樣品活菌數(shù)。eq\a\vs4\al(18.)在做土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)試驗時,甲組試驗用氮源只含尿素的培育基,乙組試驗用氮源除尿素外還含硝酸鹽的培育基,其他成分都相同,在相同條件下操作,培育與視察,則乙組試驗屬于()A.空白比照 B.標(biāo)準(zhǔn)比照C.相互比照 D.條件比照解析:選D。乙組和甲組試驗僅是培育條件不同,所以為條件比照。eq\a\vs4\al(19.)下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗操作的敘述,其中錯誤的是()A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將試驗組和比照組平板倒置,37℃恒溫培育24~48小時D.確定比照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的試驗組平板進行計數(shù)解析:選D。選擇菌落數(shù)在30~300的一組平板為代表進行計數(shù),所以D不對。eq\a\vs4\al(20.)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培育基中,得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果,正確的是()A.涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B.涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、240和250,取平均值163D.涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和250,取平均值233解析:選D。在設(shè)計試驗時,肯定要涂布至少3個平板,作為重復(fù)組,才能增加試驗的勸服力與精確性,所以A、B不正確。C項雖涂布了3個平板,但是,其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn),說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤,因此,不能簡潔地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。二、非選擇題eq\a\vs4\al(21.)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。回答下列問題:(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,緣由是前者能產(chǎn)生__________________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。但可用葡萄糖作為碳源,進入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________________________________________________________(答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培育基時,應(yīng)選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有________________________________________________________________________(答出兩點即可)。解析:(1)土壤中的某些細(xì)菌之所以能夠分解尿素,是因為它們能產(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物,必需利用現(xiàn)成的有機物(如葡萄糖)作為碳源;葡萄糖通過呼吸作用被分解時,能為細(xì)胞生命活動供應(yīng)能量,同時,葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某些氨基酸等物質(zhì),所以進入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機物的合成供應(yīng)原料。(2)選擇培育基是只允許特定種類的微生物(目的微生物)生長,同時抑制或阻擋其他種類微生物生長的培育基。本試驗的目的菌是可分解尿素的細(xì)菌,因此,配制的培育基應(yīng)只允許尿素分解菌生長,NH4NO3可以作為全部細(xì)菌的氮源,培育基中如含有NH4NO3,將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細(xì)菌生長供應(yīng)鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽,而H2POeq\o\al(-,4)/HPOeq\o\al(2-,4)可以使培育基中pH保持相對穩(wěn)定。答案:(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細(xì)胞生命活動供應(yīng)能量,為其他有機物的合成供應(yīng)原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長供應(yīng)無機養(yǎng)分,作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定eq\a\vs4\al(22.)某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難于降解的有機化合物A。探討人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培育基,勝利地篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌)。試驗的主要步驟如圖所示。請分析回答問題:(1)培育基中加入化合物A的目的是篩選________,這種培育基屬于________培育基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培育基中的________,試驗須要振蕩培育,由此推想“目的菌”的代謝類型是________。(3)培育若干天后,應(yīng)選擇培育瓶中化合物A含量________的培育液,接入新的培育液中連續(xù)培育,使“目的菌”的數(shù)量________。(4)轉(zhuǎn)為固體培育時,常采納________的方法接種,獲得單菌落后接著篩選。(5)若探討“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培育,可采納________的方法進行計數(shù),以時間為橫坐標(biāo),以________為縱坐標(biāo),繪制生長曲線。(6)試驗結(jié)束后,運用過的培育基應(yīng)當(dāng)進行________處理后,才能倒掉。解析:加入化合物A的培育基屬于選擇培育基,選擇培育目的菌。由于化合物A為有機物,且要振蕩,說明目的菌為異養(yǎng)需氧型。“目的菌”生長繁殖過程中要不斷消耗養(yǎng)分物質(zhì),培育若干天后,應(yīng)選擇培育瓶中化合物A含量削減的培育液,接入新的培育液中連續(xù)培育,使“目的菌”的數(shù)量增加。轉(zhuǎn)為固體培育時,常采納劃線的方法接種,獲得單菌落后接著篩選。若探討“目的菌”的生長規(guī)律,將單個菌落進行液體培育,可采納定期取樣的方法進行計數(shù),繪制生長曲線應(yīng)以時間為橫坐標(biāo),以細(xì)菌數(shù)目的對數(shù)為縱坐標(biāo)。試驗結(jié)束后要對培育基進行滅菌,以免污染環(huán)境。答案:(1)目的菌選擇(2)化合物A異養(yǎng)需氧型(3)削減增加(4)劃線(5)定期取樣細(xì)菌數(shù)目的對數(shù)(6)滅菌eq\a\vs4\al(23.)土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下試驗,并勝利篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培育基成分如表所示,試驗步驟如圖所示。請分析回答:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂糖15g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL(1)培育基中加入尿素的目的是篩選________,這種培育基屬于________培育基。(2)“目的菌”生長所需的氮源和碳源分別來自培育基中的________和________,試驗須要振蕩培育,緣由是_____________________________________________________。(3)圖中將細(xì)菌轉(zhuǎn)到固體培育基上時,常采納________的方法接種,獲得單菌落后接著篩選。(4)下列材料或用具:①培育細(xì)菌用的培育基與培育皿,②玻棒、試管、錐形瓶和吸管,③試驗操作者的雙手。其中須要滅菌的是:________;須要消毒的是:________。(填序號)解析:培育基中添加尿素為氮源,目的是篩選分解尿素的微生物,這種培育基從功能上來說,屬于選擇培育基;該培育基的氮源為尿素,碳源為葡萄糖。培育過程中震蕩的目的是增加培育液中的氧氣,說明尿素分解菌為需氧型微生物;將菌液接種到固體培育基上培育,一般要采納稀釋涂布平板法或平板劃線法;培育細(xì)菌用的培育基與培育皿要進行高壓蒸汽滅菌,玻棒、試管、錐形瓶和吸管要用干熱滅菌,試驗操作者的雙手用酒精消毒。答案:(1)目的菌選擇(2)尿素葡萄糖為目的菌供應(yīng)氧氣(3)涂布平板(劃線)(4)①②③eq\a\vs4\al(24.)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,進行分別培育。試驗基本步驟如下:eq\x(配制培育基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(X)→eq\x(培育)→eq\x(視察)請回答下列問題:(1)在配制培育基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因為Hp含有________,它能以尿素作為氮源;若有Hp,則菌落四周會出現(xiàn)________色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進行滅菌的最適方法是________滅菌。A.高壓蒸汽B.紫外燈照耀C.70%酒精浸泡D.過濾(3)步驟X表示________。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液________到培育基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得________菌落。(4)在培育時,需將培育皿倒置并放在________________中。若不倒置培育,將導(dǎo)致________________。(5)臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的________分解為NH3和14CO2。解析:(1)幽門螺桿菌(Hp)含有脲酶,能以尿素為氮源,在加入尿素和酚紅指示劑的培育基中培育Hp,由于尿素經(jīng)脲酶的降解可產(chǎn)生堿性的NH3,NH3能使培育基中的酚紅指示劑變成紅色,故菌落四周出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)由于尿素加熱會分解,對尿素溶液進行滅菌最好用G6玻璃砂漏斗過濾。(3)微生物的分別和培育步驟是:配制培育基→滅菌、倒平板→接種→培育。為獲得單菌落,接種操作前應(yīng)先將菌液稀釋,然后將菌液涂布到培育基平面上即可。(4)微生物培育時需將培育皿倒置并放在恒溫培育箱中,若不倒置培育,則無法形成單菌落。(5)幽門螺桿菌能將14C標(biāo)記的尿素分解為NH3和14CO2,故臨床上常用14C呼氣試驗檢測人體內(nèi)幽門螺桿菌的存在。答案:(1)脲酶紅(2)D(3)接種涂布單(4)恒溫培育箱無法形成單菌落(5)尿素eq\a\vs4\al(25.)臨床運用抗生素前,有時須要做細(xì)菌耐藥試驗,試驗時,首先要
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