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園藝植物生物技術(shù)復(fù)習(xí)題類型名詞解釋(每小題2分,10小題,共20分)轉(zhuǎn)基因技術(shù):經(jīng)過基因工程技術(shù)對生物進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移,使生物體取得新優(yōu)良品性,稱之為轉(zhuǎn)基因技術(shù)。愈傷組織:愈傷組織是一團(tuán)不定形疏松排列薄壁組織。細(xì)胞懸浮培養(yǎng):對于要保持良好分散狀態(tài)植物細(xì)胞或小細(xì)胞聚集體,可根據(jù)一定細(xì)胞密度,懸浮在液體中進(jìn)行培養(yǎng),這種方法稱為細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。雙極分化:愈傷組織中伴隨細(xì)胞分裂出現(xiàn)兩個(gè)或兩個(gè)以上分生中心,其中有分化芽,有分化根,根芽之間并無輸導(dǎo)等組織溝通,在培養(yǎng)瓶內(nèi)靠愈傷組織提供養(yǎng)料,這種以愈傷組織隔離著芽和根苗,常常不能移栽成活。分批培養(yǎng):是指細(xì)胞在一定容積培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),目是建立單細(xì)胞培養(yǎng)物。在培養(yǎng)過程中,除了氣體和揮發(fā)性代謝產(chǎn)物能夠同外界空氣交換外,一切都是密閉。當(dāng)培養(yǎng)基中關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)耗盡時(shí),細(xì)胞分裂和生長即行停止。細(xì)胞全能性:植物體細(xì)胞或性細(xì)胞,在人為控制培養(yǎng)條件下都含有再生成新個(gè)體潛能,所以在適宜條件下能夠被誘導(dǎo)生長分化形成完整植株。胚性愈傷組織:愈傷組織在長久培養(yǎng)中能夠形成份生組織區(qū)、管胞和色素細(xì)胞,或者形成體細(xì)胞胚。這種能夠形成體細(xì)胞胚愈傷組織叫做胚性愈傷組織。條件培養(yǎng)基:是把單個(gè)細(xì)胞置于一塊活躍生長愈傷組織(也稱看護(hù)愈傷組織)上培養(yǎng),在愈傷組織和培養(yǎng)細(xì)胞之間,用一片濾紙相隔。植板效率=(每個(gè)平板上形成細(xì)胞團(tuán)數(shù)/每個(gè)平板上接種細(xì)胞總數(shù))×100%?;ǚ叟囵B(yǎng):是指把花粉從花藥中分離出來,以單個(gè)花粉粒作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)技術(shù)。基因工程:經(jīng)過體外DNA重組發(fā)明新生物并給予特殊功效技術(shù)稱為基因工程,也稱DNA重組技術(shù)。脫分化:使已分化體細(xì)胞回復(fù)到未分化原始狀態(tài)并含有細(xì)胞全能性表示潛力過程,叫做脫分化。胚性愈傷組織:愈傷組織在長久培養(yǎng)中能夠形成份生組織區(qū)、管胞和色素細(xì)胞,或者形成體細(xì)胞胚。這種能夠形成體細(xì)胞胚愈傷組織叫做胚性愈傷組織。植物生物技術(shù):是指對植物品質(zhì)和性狀進(jìn)行改造生物技術(shù),包含植物組織培養(yǎng)技術(shù)、人工種子、細(xì)胞工程、基因工程等多個(gè)生物技術(shù),關(guān)鍵是指植物基因工程和與之相關(guān)植物組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、分子標(biāo)識育種技術(shù)等。單極分化:愈傷組織中分生中心在刺激物質(zhì)影響下向著一極分化,形成有根無芽或者有芽無根現(xiàn)象。無性系變異:愈傷組織長久繼代培養(yǎng)會引發(fā)其細(xì)胞內(nèi)染色體發(fā)生改變,也可發(fā)生基因突變。這種體外培養(yǎng)組織或細(xì)胞發(fā)生遺傳改變稱為無性系變異。分子雜交:當(dāng)復(fù)性DNA分子由不一樣兩單鏈分子形成時(shí),稱為分子雜交。連接酶:用于將兩段乃至數(shù)段DNA片段拼接起來酶稱為連接酶。穿梭質(zhì)粒:含有兩個(gè)不一樣復(fù)制子,能在兩種不一樣受體細(xì)胞中復(fù)制。連續(xù)培養(yǎng):是利用尤其培養(yǎng)容器進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)一個(gè)培養(yǎng)方法。連續(xù)培養(yǎng)過程中,不停注入新鮮培養(yǎng)液,排掉等體積用過培養(yǎng)液,培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)得到不停補(bǔ)充,因?yàn)樽⑷胄迈r培養(yǎng)液容積與流出原有培養(yǎng)液相等,可調(diào)整流入與流出速度。再分化:離體培養(yǎng)植物組織和細(xì)胞形成處于脫分化狀態(tài)愈傷組織,仍能夠再度分化成另一個(gè)或多個(gè)類型細(xì)胞、組織、器官,甚至最終再生成完整植株。這一過程稱為再分化。單極分化:愈傷組織中分生中心在刺激物質(zhì)影響下向著一極分化,形成有根無芽或者有芽無根現(xiàn)象。無性系變異:愈傷組織長久繼代培養(yǎng)會引發(fā)其細(xì)胞內(nèi)染色體發(fā)生改變,也可發(fā)生基因突變。這種體外培養(yǎng)組織或細(xì)胞發(fā)生遺傳改變稱為無性系變異。細(xì)胞工程:是指以細(xì)胞為基礎(chǔ)單位,在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖;或人為地使細(xì)胞一些生物學(xué)特征按大家意愿發(fā)生改變,從而達(dá)成改良生物品種和發(fā)明新品種;或加速繁育動(dòng)、植物個(gè)體;或取得某種有用物質(zhì)過程。判定正誤(每小題1分,10小題,共10分)在植物組織細(xì)胞離體培養(yǎng)中,光照作用并不是僅僅提供光合作用能源。(√)人工種子不屬于植物生物技術(shù)。(×)單倍體在植物育種中能夠使后代快速純合。(√)植物組織培養(yǎng)中常見碳源是葡萄糖。(×)培養(yǎng)個(gè)體遺傳基礎(chǔ),決定了離體培養(yǎng)反應(yīng)能力。(√)第Ⅱ類限制性酶能識別一段特異DNA序列,正確地酶切雙鏈DNA特異序列。(√)生長素類用于誘導(dǎo)細(xì)胞分裂和根分化。(√)狹義遺傳工程即是通常講基因工程。(√)在愈傷組織分化培養(yǎng)中,提升生長素與細(xì)胞激動(dòng)素配比,有利于芽分化。(×)人工種子不屬于植物生物技術(shù)。(×)填空(每空1分,共10個(gè)空,10分)植物組織培養(yǎng)最少需要三間試驗(yàn)室,分別是準(zhǔn)備室、接種室和培養(yǎng)室。酶解法分離細(xì)胞是用果膠酶、纖維素酶處理,分離出含有代謝活性細(xì)胞。PCR含義是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。植物遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)可分為兩大類:載體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)和直接基因轉(zhuǎn)移技術(shù)。形成愈傷組織時(shí)改變,不僅是DNA含量增加,而且RNA和蛋白質(zhì)含量均表現(xiàn)顯著增加。植物離體培養(yǎng)關(guān)鍵是無菌操作。簡答題(每小題5分,4小題,共20分)1.植物組織培養(yǎng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基關(guān)鍵有哪多個(gè)組成部分?(5分)答:無機(jī)營養(yǎng)成份、有機(jī)營養(yǎng)成份、碳源、激素、瓊脂、水。(1分)其中無機(jī)營養(yǎng)包含大量元素、微量元素。(1分)有機(jī)營養(yǎng)包含氨基酸和維生素。(1分)碳源有蔗糖、葡萄糖、果糖,以蔗糖為主。(1分)激素包含生長素和細(xì)胞激動(dòng)素。(1分)2.生命科學(xué)在理論上三大發(fā)覺和技術(shù)上三大發(fā)明是什么?(5分)答:理論上三大發(fā)覺①生物遺傳物質(zhì)是DNA(1分)②DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機(jī)制(1分)③確定了遺傳信息傳輸方法:遺傳信息是以密碼子方法傳輸,三個(gè)核苷酸組成一個(gè)密碼子,編碼一個(gè)氨基酸。(1分)技術(shù)上三大發(fā)明①限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶發(fā)明(1分)②基因工程載體發(fā)明(0.5分)③逆轉(zhuǎn)錄酶發(fā)明(0.5分)3.原生質(zhì)體純化兩種方法是什么?(5分)答:上浮法:是將酶解原生質(zhì)體與蔗糖溶液(23%左右)混合。(1分)下沉法:是先將原生質(zhì)體與13%甘露醇混合,(1分)然后加到23%蔗糖溶液頂部,形成一個(gè)界面。(1分)兩種方法中,均在1000g下離心5-10分鐘,會在蔗糖溶液頂部形成一條原生質(zhì)體帶。(1分)用吸管將帶輕輕地吸出來,用培養(yǎng)基懸浮離心,然后稀釋到104-l05個(gè)/ml,用于培養(yǎng)。(1分)4.DNA作為遺傳物質(zhì)優(yōu)點(diǎn)是什么?(5分)答:信息量大,能夠微縮。(1分)表面互補(bǔ),電荷互補(bǔ)。(1分)雙螺旋結(jié)構(gòu)說明了正確復(fù)制機(jī)理。(1分)核糖2位脫氧,在水溶液中穩(wěn)定性好。(1分)能夠突變,以求進(jìn)化。(1分)五、敘述題(每題10分,4小題,共40分,)1.莖尖培養(yǎng)脫毒原理是什么?培養(yǎng)無毒苗有何意義?(10分)答:①植物莖尖分生組織中胞間連絲發(fā)育不完全或太細(xì),(1分)使病毒在細(xì)胞之間擴(kuò)散作用受到抑制。(1分)②莖尖不含維管束,病毒只能經(jīng)過胞間連絲運(yùn)輸。(1分)③病毒復(fù)制、運(yùn)輸速度與莖尖細(xì)胞生長速度不一樣,(1分)病毒向上運(yùn)輸速度慢,而分生組織細(xì)胞繁殖快,結(jié)果使莖尖區(qū)域部分細(xì)胞沒有病毒。(1分)
④植物生長點(diǎn)細(xì)胞中缺乏病毒增殖感受點(diǎn),所以復(fù)制過程不能進(jìn)行。(1分)
⑤莖尖等分生組織中存在抑制、鈍化病毒物質(zhì)。(1分)
⑥莖尖或其她組織在培養(yǎng)過程中病毒被鈍化和抑制。(1分)意義:①增產(chǎn),(1分)②提升作物品質(zhì)。(1分)2.分離花粉三種方法是什么?分別敘述。(10分)答:自然釋放法、研磨過濾搜集法、剖裂釋放法。(1分)自然釋放法:有些物種花蕾消毒后,在無菌條件下取出花藥,放在液體或固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),花藥會自然開裂,將花粉散落在培養(yǎng)基上,然后將花藥壁去除,進(jìn)行花粉培養(yǎng)。(3分)研磨過濾搜集法:這種方法只在茄科和油菜里有成功地應(yīng)用。將花蕾消毒后,放入含培養(yǎng)基或分離液無菌研磨器中研磨,使花粉(小孢子)釋放出來,然后經(jīng)過一定孔徑網(wǎng)篩過濾,離心搜集花粉并用培養(yǎng)基或分離液洗滌,然后用培養(yǎng)基將花粉調(diào)整到理想培養(yǎng)密度,移入培養(yǎng)皿培養(yǎng)。(3分)剖裂釋放法:這一技術(shù)需要借助一定工具剖裂藥壁,使花粉或愈傷組織,或胚釋放出來,而不是自然釋放。顯然,這種方法比自然釋放法費(fèi)時(shí)。(3分)3.質(zhì)粒載體人工構(gòu)建目是什么?(10分)答:天然質(zhì)粒往往存在著這么或那樣缺點(diǎn),所以不適適用作基因工程載體必需對之進(jìn)行改造構(gòu)建。(2分)(1)加入適宜選擇標(biāo)識基因,如兩個(gè)以上,易于用作選擇。(2分)(2)增加或降低適宜酶切位點(diǎn),便于重組。(2分)(3)縮短長度,切去無須要片段,提升導(dǎo)入效率,增加裝載量。(2分)(4)改變復(fù)制子,變嚴(yán)緊為松弛,變少拷貝為多拷貝,人工構(gòu)建方法就是重組,拼拼接接。(2分)4.試述植物離體操作對試驗(yàn)室基礎(chǔ)要求及各室關(guān)鍵功效。(10分)答:(1)植物組織培養(yǎng)試驗(yàn)室設(shè)置一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)植物組織培養(yǎng)試驗(yàn)室必需含有下列必需設(shè)施:(1分)①清洗和儲存玻璃器皿、塑料器皿和其她試驗(yàn)器皿;(1分)②培養(yǎng)基配制、滅菌
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