重組DNA技術(shù)的基本工具（第二課時）高二生物課件（人教版2019選擇性必修3）

第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具（第2課時）DNA的粗提取與鑒定探究·實踐DNA、RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在差異，可以利用這些差異，選用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)方法對它們進(jìn)行提取提取DNA分子的基本思路是什么？1.DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精。利用這一原理，可以初步分離DNA與蛋白質(zhì)。DNA粗提取與鑒定的實驗原理2.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/LNaCl溶液。3.一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑00.14NaCI濃度（mol/L）DNA溶解度目的要求1.了解DNA的物理和化學(xué)性質(zhì)，理解DNA粗提取和鑒定的原理。2.學(xué)會DNA粗提取的方法以及用二苯胺試劑對DNA進(jìn)行鑒定。材料新鮮洋蔥（也可選用香蕉、菠菜、菜花和豬肝等，提取DNA的方法可能稍有不同）、研磨液、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精、

2mol/L的NaCl溶液、二苯胺試劑和蒸餾水等。哺乳動物的血液可以作為提取DNA的材料嗎？思考不可以。因為哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和線粒體等。選用DNA含量相對較高的生物組織。燒杯、量筒、玻璃棒、研缽、紗布、漏斗、試管、試管架、試管夾、酒精燈、石棉網(wǎng)、三腳架、火柴、刀片和天平等。用具方法步驟1.研磨洋蔥

稱取約30g洋蔥切碎，放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨。2.過濾或者離心獲取含DNA的上清液

在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過濾到燒杯中，在4℃冰箱中放置幾分鐘后，再取上清液。

也可直接將研磨液倒入塑料離心管中，1500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，再取上清液放入燒杯中。3.冷酒精析出DNA或離心沉淀析出DNA在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%)，靜置2~3min，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分；或?qū)⑷芤旱谷胨芰想x心管中，在10000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，棄上清液，將管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干。4.DNA的鑒定取兩支20mL的試管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCI溶液中。然后，向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min。待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。1號試管2號試管加入2mol/LNaCl溶液5mL5mL絲狀物(DNA)不加用玻璃棒攪拌無變化加入二苯胺試劑4mL4mL沸水浴5min5min觀察現(xiàn)象不變藍(lán)變藍(lán)加入絲狀物溶解鑒定結(jié)果思考原因結(jié)果充分研磨用紗布不用濾紙

95%預(yù)冷酒精沿一個方向攪拌使細(xì)胞核充分破碎，釋放出DNADNA會吸附在濾紙上，用紗布減少DNA的損失①可抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA的

降解；②抑制分子運動，使DNA易形成沉淀析出；③低溫有利于增加DNA分子的柔韌性，減少其

斷裂防止將絲狀DNA攪碎，不利于DNA絮狀物的挑出下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定的敘述，不正確的是()A.DNA析出過程中，玻璃棒沿一個方向攪拌防止DNA斷裂B.