微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)課件高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱，包括細(xì)菌、真菌、病毒及一些原生生物等。衣藻本章中提及的微生物主要指用于發(fā)酵的細(xì)菌和真菌。微生物：大腸桿菌酵母菌毛霉草履蟲新冠病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞真核細(xì)胞病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌體等DNA病毒微生物的類群細(xì)菌：藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、乳酸菌等；放線菌：鏈霉菌等真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履蟲、變形蟲等課本P9傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)以混合菌種進(jìn)行發(fā)酵制作食品，并且利用的菌種很多是原材料中天然存在的微生物。

向經(jīng)過殺菌處理的牛奶中添加某些對(duì)人體有益的細(xì)菌，再經(jīng)過發(fā)酵就可以制成酸奶。由于制作工藝并不復(fù)雜，一些人會(huì)在家里自制酸奶。自制酸奶雖然方便，但是食用自制酸奶導(dǎo)致腸胃不適的事例屢見不鮮，主要原因是在制作過程中有雜菌混入。那么，怎樣才能保證無處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？應(yīng)該先對(duì)制作用具和原料進(jìn)行滅菌處理，再接種純的菌種，并控制發(fā)酵條件，避免雜菌進(jìn)入。防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物需要遵循下列要求：培養(yǎng)基的配制無菌技術(shù)微生物的純培養(yǎng)為人們需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件；要確保其他微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來。課本P9知識(shí)瀏覽1.培養(yǎng)基的概念、作用與基本類型。重要程度：難度：學(xué)習(xí)方法：理解誦背3.無菌技術(shù)——消毒與滅菌的區(qū)別以及各類型的適用范圍。重要程度：難度：學(xué)習(xí)方法：背誦2.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成與四個(gè)特殊實(shí)例。重要程度：難度：學(xué)習(xí)方法：理解誦背

培養(yǎng)基的配制一課本P91.培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2.培養(yǎng)基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代謝物。培養(yǎng)分離鑒定保存積累加凝固劑（瓊脂）3.培養(yǎng)基的類型：液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基特點(diǎn)不含凝固劑（如瓊脂）呈液體狀態(tài)呈固體狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室常用用途擴(kuò)大培養(yǎng)、常用于工業(yè)生產(chǎn)常用于分離、計(jì)數(shù)、鑒定等

培養(yǎng)基的配制一課本P91.培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2.培養(yǎng)基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代謝物。培養(yǎng)分離鑒定保存積累3.培養(yǎng)基的類型：a.液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的

是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基之一。b.微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的

。瓊脂固體培養(yǎng)基菌落菌落：

培養(yǎng)基的配制一課本P91.培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。2.培養(yǎng)基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代謝物。培養(yǎng)分離鑒定保存積累3.培養(yǎng)基的類型：a.液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的

是實(shí)驗(yàn)室最常用的培養(yǎng)基之一。b.微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的

。瓊脂固體培養(yǎng)基菌落菌落：2.特征：不同菌落的形狀、大小、顏色等不同。3.功能：菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。一個(gè)菌落就是一個(gè)種群1.概念：?jiǎn)蝹€(gè)或少數(shù)同種菌體在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部大量繁殖，形成肉眼可見的子細(xì)胞群體。A：支原體的菌落

B：酵母菌的菌落

C：細(xì)菌的菌落

D：細(xì)菌和霉菌混雜的菌落

E：放線菌的菌落

F：霉菌的菌落劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)化學(xué)成分用途不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基常見培養(yǎng)基類型

培養(yǎng)基的配制一課本P10（4）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基組成含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源和維生素等NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成牛肉膏和蛋白胨來源于動(dòng)物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)。一、培養(yǎng)基的配制組分含量提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g碳源、氮源和維生素等NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000mL水▼1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)稱取去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛，用紗布過濾。向?yàn)V液中加入20g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15~20g瓊脂，用蒸餾水定容至1000mL。▼

馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基的配方注：牛肉膏和蛋白胨來源于動(dòng)物，含有糖、維生素和有機(jī)氮等營養(yǎng)物質(zhì)。100g馬鈴薯中含有：水75-80g，蛋白質(zhì)約2g，碳水化合物17-20g、

維生素、無機(jī)鹽等上述兩種培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成有哪些相同點(diǎn)？又有哪些不同？都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和維生素等，其中馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基中主要由糖類提供碳源，蛋白質(zhì)提供氮源；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。

培養(yǎng)基的配制一課本P10一、培養(yǎng)基的配制4.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基的配方不同，但①一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。碳源氮源水無機(jī)鹽無機(jī)碳源--CO2、CO32-、HCO3-有機(jī)碳源--葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物無機(jī)氮源--N2、NH4＋、NO3-、NH3等（有機(jī)碳既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)。）有機(jī)氮源--蛋白胨、尿素、氨基酸等含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源。--微生物生長(zhǎng)和代謝必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)。--提供無機(jī)營養(yǎng)、調(diào)節(jié)酸堿平衡、

維持滲透壓。

培養(yǎng)基的配制一課本P10可以為硝化細(xì)菌提供能量不提供能量固氮微生物一、培養(yǎng)基的配制（1）為什么培養(yǎng)基需要氮源？思考：氮是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的。（2）培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基中是否必須有碳源和氮源？不一定。例如，培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物時(shí)，一般不需要添加碳源，微生物可以利用空氣中的二氧化碳；培養(yǎng)固氮微生物時(shí)，一般不需要添加氮源，微生物可以利用空氣中的氮?dú)狻Ｎ⑸锾荚吹茨茉此{(lán)細(xì)菌CO2NH4＋、NO3-等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物

培養(yǎng)基的配制一課本P10（4）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：①概念：（1）碳源②種類：凡是能提供碳元素的物質(zhì)，統(tǒng)稱為碳源。無機(jī)碳源：有機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-等含碳無機(jī)物。糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等含碳有機(jī)物，常用：糖類，尤其是葡萄糖。③功能：主要用于構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；有機(jī)碳既是碳源又是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)。自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物

培養(yǎng)基的配制一課本P10（4）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：【說明】含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。①概念：（2）氮源②種類：③功能：凡是能提供氮元素的物質(zhì)，統(tǒng)稱為氮源。主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝產(chǎn)物等NH4＋、NO3-、NH3等牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等無機(jī)氮源：有機(jī)氮源：

培養(yǎng)基的配制一課本P10（4）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：（3）水（4）無機(jī)鹽①良好的溶劑；②維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。①提供無機(jī)營養(yǎng)；②調(diào)節(jié)pH；③維持滲透壓。微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2NH4＋、NO3-等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機(jī)物N2有機(jī)物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物蛋白質(zhì)等有機(jī)物幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源分析用無碳培養(yǎng)基可以篩選培養(yǎng)什么微生物？

用無氮培養(yǎng)基可以篩選培養(yǎng)什么微生物？

自養(yǎng)微生物固氮微生物

培養(yǎng)基的配制一課本P10

培養(yǎng)基的配制一課本P104.培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：①各種培養(yǎng)基一般都含有

、

、

和

等營養(yǎng)物質(zhì)。水碳源氮源無機(jī)鹽②培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)

、

以及

的需求。pH特殊營養(yǎng)物質(zhì)O2培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加

；培養(yǎng)霉菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至

；培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供

的條件。維生素酸性中性或弱堿性無氧主要指生長(zhǎng)因子：維生素、氨基酸、堿基等（4）培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：

培養(yǎng)基的配制一課本P10例題：根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列問題:1.自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基的主要差別在于

；自養(yǎng)型微生物所需的碳源來自

碳源，異養(yǎng)型微生物所需的碳源來自

碳源2.無機(jī)氮源不但能給自養(yǎng)型微生物提供

，也能作為

，例如NH3既作為硝化細(xì)菌的氮源，也作為能源（NH3氧化釋放的化學(xué)能）；3.含有C、H、O、N的有機(jī)物可作為

微生物的碳源、氮源、能源。碳源無機(jī)有機(jī)氮源能源物質(zhì)異養(yǎng)型具體處理原理目的選擇培養(yǎng)基加入青霉素青霉素能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，對(duì)真菌無作用不加氮源固氮微生物能利用空氣中的氮?dú)獠患佑袡C(jī)碳源自養(yǎng)型微生物能利用無機(jī)碳源鑒別培養(yǎng)基加入酚紅培養(yǎng)基尿素被分解產(chǎn)生氨，培養(yǎng)基呈堿性，酚紅指示劑變紅。加入剛果紅剛果紅與纖維素能形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈。分離酵母菌、霉菌等真菌分離固氮菌分離自養(yǎng)微生物鑒別分解尿素的細(xì)菌鑒別纖維素分解菌

對(duì)培養(yǎng)基的成分進(jìn)行控制可以起到不同的作用：微生物種類繁多，培養(yǎng)條件也各不相同。下列關(guān)于微生物培養(yǎng)基的描述正確的是(

)A．同一物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量，氮源有些也能提供能量C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是培養(yǎng)細(xì)菌、病毒等常用的培養(yǎng)基D．培養(yǎng)硝化細(xì)菌，可用無機(jī)碳源的培養(yǎng)基D該表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述錯(cuò)誤的是()成分NaNO3KH2PO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸餾水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1萬單位A．根據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B．根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C．根據(jù)培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型D．固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基D無菌技術(shù)septictechnique獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10無菌技術(shù)除用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？無菌技術(shù)還能有效避免操作者被微生物感染。獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌消毒獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌烤箱火力全開烘烤幾小時(shí)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開，主要包括消毒和滅菌。防止雜菌污染

無菌技術(shù)二課本P10消毒滅菌使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（芽孢—休眠體、孢子—繁殖體，都具有很高的抗性）1.對(duì)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒；2.將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。

無菌技術(shù)二課本P10芽孢：有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫作芽孢。

芽孢壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。孢子：細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。能直接長(zhǎng)成新個(gè)體。知識(shí)拓展

無菌技術(shù)二課本P10-11項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍消毒

例如對(duì)家庭餐具等生活用品的消毒。例如牛奶?？梢詺⑺琅Ｄ讨械慕^大多數(shù)微生物，并且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分?；瘜W(xué)藥劑消毒法：用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。紫外線消毒法：接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前可用紫外線照射30min，以殺死物體表面或空氣中的微生物。損傷細(xì)菌的DNA生物消毒法：指利用生物或其代謝物除去環(huán)境中的部分微生物的方法。例1：有的微生物能夠寄生于多種細(xì)菌體內(nèi)，是細(xì)菌裂解，因此可以用他們來凈化污水、污泥。例2：利用嗜熱細(xì)菌繁殖時(shí)產(chǎn)生的熱量來殺滅病原微生物。嗜熱菌能夠在高溫下生長(zhǎng)，例如在堆肥過程中，嗜熱菌的發(fā)育會(huì)使溫度升高，從而殺滅大多數(shù)病毒和除芽胞以外的病原菌。缺點(diǎn)：過程較緩慢，對(duì)某些微生物的殺滅效果不完全可靠，尤其對(duì)細(xì)菌芽孢通常無殺滅作用。課本P10

無菌技術(shù)二課本P11項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍消毒

巴氏消毒法

℃消毒30min或

℃處理15s或

℃處理10～15s

、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體煮沸消毒法100℃煮沸

min家庭餐具等生活用品紫外線消毒30W紫外燈照射

min(損傷細(xì)菌的DNA)化學(xué)藥物消毒

擦拭實(shí)驗(yàn)者雙手水源牛奶63～6572～76

5～630體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的酒精氯氣接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)80～85

項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍滅菌

無菌技術(shù)二課本P11濕熱滅菌法干熱滅菌法灼燒滅菌法高壓蒸汽滅菌鍋干熱滅菌箱接種環(huán)灼燒滅菌利用沸水、流通蒸汽、高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。高壓蒸汽滅菌效果最好：160~170℃的熱空氣中，1~2h進(jìn)行滅菌的方法耐高溫和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（如吸管、培養(yǎng)皿等）、金屬用具等。充分燃燒層（外焰）接種工具（接種環(huán)、涂布器等）、其他金屬工具及接種過程實(shí)驗(yàn)室常用的高壓蒸汽滅菌鍋就是以水蒸氣為介質(zhì)，在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min來滅菌的。項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍滅菌灼燒滅菌直接在酒精燈火焰的

層灼燒干熱滅菌干熱滅菌箱中，

℃的熱空氣中維持

。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)充分燃燒接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具、試管口或瓶口等160～170

1～2h100kPa、121℃的條件下，維持15～30min培養(yǎng)基等耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等

無菌技術(shù)二課本P11

思考1、培養(yǎng)基滅菌為什么采用高壓蒸汽滅菌而不采用干熱滅菌？

分析：干熱滅菌箱內(nèi)的高溫會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的_________喪失，而高壓蒸汽鍋內(nèi)的_________較大，不會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基的_________散失。思考2、如何制備一瓶無菌水？

分析：對(duì)一瓶有菌水進(jìn)行___________________處理。

思考3、某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是？

分析：_____________________。思考4、某同學(xué)從高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)拿出培養(yǎng)基后發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基已經(jīng)濺滿了錐形瓶的瓶壁，最可能的原因是？

分析：___________________________________________，就提前打開了高壓蒸汽鍋。思考5：用紫外線可以給接種室消毒，其原理是紫外線能___________________。在照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等_________，可以加強(qiáng)消毒效果。水分濕度水分高壓蒸汽滅菌未將鍋內(nèi)冷空氣排盡高壓蒸汽鍋的壓力表讀數(shù)還未降至零損傷細(xì)菌的DNA消毒液隨堂訓(xùn)練1.無菌技術(shù)的具體內(nèi)容（1）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和_______。（2）將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行________。（3）實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與______________接觸。（4）為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在_______________并在

_______________附近進(jìn)行。消毒滅菌周圍的物品酒精燈火焰超凈工作臺(tái)上2.以下物品所采用的滅菌或消毒方法依次是：

培養(yǎng)基:

培養(yǎng)皿:

接種環(huán):實(shí)驗(yàn)操作者的雙手:

實(shí)驗(yàn)室:牛奶:

濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）干熱滅菌灼燒滅菌化學(xué)藥劑消毒（酒精）紫外線消毒巴氏消毒法課本P10(1)生物消毒法是指利用生物或其代謝物去除環(huán)境中的部分微生物的方法(

)(2)與消毒相比，滅菌對(duì)微生物的殺滅更徹底(

)(3)無菌操作的對(duì)象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)，都可采用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌(

)√√×培養(yǎng)基的滅菌一般采用濕熱滅菌法。1.關(guān)于消毒、滅菌的方法，下列描述錯(cuò)誤的是（

）A.接種用的無菌操作臺(tái)要進(jìn)行滅菌處理B.用巴氏消毒法處理牛奶是因?yàn)楦邷匾灼茐呐Ｄ痰臓I養(yǎng)成分C.煮沸半小時(shí)后的涼開水中可能仍含有部分芽孢和孢子D.先噴灑消毒液，再用紫外線照射可增強(qiáng)消毒效果B2.生產(chǎn)、生活和科研實(shí)驗(yàn)中常用到無菌技術(shù)。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.腌制泡菜時(shí)，泡菜壇內(nèi)缺氧、呈酸性的環(huán)境不利于雜菌生長(zhǎng)B.實(shí)驗(yàn)室中的玻璃涂布器、吸管、培養(yǎng)基等均可以用干熱滅菌法處理C.生活中用巴氏消毒法處理牛奶既可消毒，又基本不會(huì)破壞牛奶中的營養(yǎng)成分D.濕熱滅菌是一種利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法B√教材P10〔相關(guān)信息〕生物消毒法是指利用生物或其代謝物除去環(huán)境中的部分微生物的方法。例如，有的微生物能夠寄生于多種細(xì)菌體內(nèi)，使細(xì)菌裂解，因此可以用它們來凈化污水、污泥。3.(2023·山西陽泉高二期中)無菌技術(shù)圍繞著如何避免雜菌的污染展開。下列說法正確的是A.在100℃條件下煮沸5～6min屬于滅菌方法B.對(duì)接種室、涂布器、操作者的衣著和雙手只需要進(jìn)行消毒處理C.培養(yǎng)基可借助高壓蒸汽滅菌鍋或干熱滅菌箱進(jìn)行滅菌D.利用某些寄生于細(xì)菌體內(nèi)的微生物裂解細(xì)菌來凈化污水屬于生物消毒法微生物的純培養(yǎng)Purecultivationofmicroorganisms

微生物的純培養(yǎng)三課本P11純培養(yǎng)物培養(yǎng)物純培養(yǎng)在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物獲得純培養(yǎng)物的過程由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)

微生物的純培養(yǎng)三課本P12平板劃線法、稀釋涂布平板法(1)原理：微生物群分散或稀釋單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落繁殖(2)獲得單菌落的方法：酵母菌的純培養(yǎng)(3)材料用具：酵母菌培養(yǎng)液提供接種用的酵母菌配制酵母菌固體培養(yǎng)基馬鈴薯葡萄糖（或蔗糖）蒸餾水瓊脂

微生物的純培養(yǎng)三課本P12(4)方法步驟：第

1步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。去皮切塊加水(1000mL)加熱煮沸軟爛馬鈴薯紗布過濾加瓊脂（15～20g）酵母菌培養(yǎng)基加水定容(1000mL)馬鈴薯塊濾液加葡萄糖/蔗糖（20g）調(diào)pH

微生物的純培養(yǎng)三課本P12(4)方法步驟：a.培養(yǎng)基——高壓蒸汽滅菌轉(zhuǎn)移滅菌15~30min皮筋勒緊包牛皮紙放入高壓蒸汽滅菌鍋中（100kPa、121℃）酵母菌培養(yǎng)基錐形瓶加棉塞①避免因水蒸氣凝結(jié)而浸濕棉塞②避免再次污染第

1步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。

微生物的純培養(yǎng)三課本P12(4)方法步驟：b.培養(yǎng)皿——干熱滅菌滅菌2h幾層牛皮紙包緊放入干熱滅菌箱（160～170℃）5～8套培養(yǎng)皿干熱滅菌箱第

1步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。(4)方法步驟：

微生物的純培養(yǎng)三課本P12第

1步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。(4)方法步驟：培養(yǎng)基冷卻到50℃左右，在酒精燈火焰附近倒平板。1拔出錐形瓶的棉塞。2將瓶口迅速通過火焰。3用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿（10～20mL），立即蓋上皿蓋。4等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來放置。①防止培養(yǎng)基水分過快蒸發(fā)。②防止皿蓋上冷凝水滴落，造成污染。通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。不能完全打開，以免雜菌污染培養(yǎng)基。溫度過高會(huì)燙手，溫度過低培養(yǎng)基會(huì)凝固。思考：⑤在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？不能。因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。第

1步：制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：分離的方法平板劃線法

通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到單菌落。連續(xù)劃線法分區(qū)劃線法第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：第

2步：接種和分離酵母菌平板劃線法的具體操作1將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅。2在火焰旁冷卻接種環(huán)。同時(shí)，拔出裝有酵母菌培養(yǎng)液的試管的棉塞。將試管口通過火焰。34在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液。防止溫度太高殺死菌種。避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：平板劃線法的具體操作5將試管口通過火焰，并塞上棉塞。在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。6

灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。7注意：劃線時(shí)不能劃破培養(yǎng)基表面第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：平板劃線法的具體操作5將試管口通過火焰，并塞上棉塞。在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。6

灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。712345第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：平板劃線法的具體操作5將試管口通過火焰，并塞上棉塞。在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。6

灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。712345第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：平板劃線法的具體操作5將試管口通過火焰，并塞上棉塞。在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。6

灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。7第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：平板劃線法的具體操作5將試管口通過火焰，并塞上棉塞。在火焰附近將皿蓋打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。6

灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。7使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。最后一次劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個(gè)的細(xì)胞，如果與第一次劃線相連，則增加了細(xì)菌的數(shù)目，達(dá)不到純化的效果。第

2步：接種和分離酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13灼燒時(shí)期目的取菌種前每次劃線前接種結(jié)束后【問題探究】為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端殺死接種環(huán)上原有微生物，防止外來雜菌污染培養(yǎng)基接種環(huán)共需灼燒幾次？6次

微生物的純培養(yǎng)三課本P13(4)方法步驟：

完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右（培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異）的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h。在實(shí)驗(yàn)室中，切不可吃東西、喝水，離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。警示對(duì)照：說明培養(yǎng)基是否被雜菌污染。第

3步：培養(yǎng)酵母菌

微生物的純培養(yǎng)三課本P13①在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)？如果有，說明了什么？②在接種酵母菌的培養(yǎng)基上，如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是由哪些原因引起的？如果有，說明培養(yǎng)基被雜菌污染。如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無菌操作不規(guī)范等原因引起的。（5）結(jié)果分析與評(píng)價(jià)：評(píng)估論點(diǎn)的可信程度

所謂“酵素”，就是“酶”的另一種說法。“酵素”制作就是利用微生物進(jìn)行無氧呼吸的原理，進(jìn)行像制作泡菜一樣的發(fā)酵。這樣制作的“酵素”中可能有糖類(包括一些簡(jiǎn)單的糖和膳食纖維等)、蛋白質(zhì)(包括多種酶)、有機(jī)酸等成分，不存在它獨(dú)有的、特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，其中甚至可能含有微生物發(fā)酵產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，食用后可能會(huì)危害人體健康。因此，“吃水果酵素可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力”的論點(diǎn)值得懷疑。有一段時(shí)間，水果“酵素”風(fēng)靡各地，水果“酵素”制作的大致過程是：將洗凈、切成塊狀的水果，放入潔凈的容器，再加入糖和水，密封，置于陰涼處發(fā)酵一至兩周。有人說，吃水果“酵素”可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力。請(qǐng)?jiān)u估這一論點(diǎn)是否可信。1.微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基，又要防止雜菌污染。判斷下列相關(guān)表述是否正確。（1）培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的生長(zhǎng)越有利。（）

（2）消毒和滅菌的殺菌程度存在差異。（）（3）微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物。（）

×√×一、概念檢測(cè)練習(xí)與應(yīng)用2.日常生活中保存食品的方法有哪些？這些方法是如何阻止或抑制微生物生長(zhǎng)的？

日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低溫儲(chǔ)存等。干制可以降低食品的水分含量；腌制可以通過食鹽、糖等制造高滲環(huán)境，從而抑制微生物的生長(zhǎng)和繁殖；低溫則是通過降低微生物的代謝速率來抑制微生物的生長(zhǎng)和繁殖。一、概念檢測(cè)練習(xí)與應(yīng)用1.某同學(xué)將5個(gè)手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的培養(yǎng)基上輕輕按一下。然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個(gè)指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個(gè)培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。請(qǐng)分析回答下列問題。(1)這個(gè)實(shí)驗(yàn)中需要進(jìn)行滅菌處理的材料用具有？培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基(2)“將指尖在培養(yǎng)基上輕輕按一下”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)中的哪一步操作？接種二、拓展應(yīng)用練習(xí)與應(yīng)用1.某同學(xué)將5個(gè)手指尖在貼有“洗手前”標(biāo)簽的培養(yǎng)基上輕輕按一下。然后用肥皂將該手洗干凈，再將5個(gè)指尖在貼有“洗手后”標(biāo)簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個(gè)培養(yǎng)皿放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標(biāo)簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。請(qǐng)分析回答下列問題。二、拓展應(yīng)用練習(xí)與應(yīng)用(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看,洗手后我們就能進(jìn)行無菌操作了嗎？操作時(shí)，我們可以采用什么方法來避免手上微生物的污染？通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看到，洗手后手上還有一些微生物，不能直接進(jìn)行無菌操作?？梢酝ㄟ^用酒精棉球擦拭雙手，或戴消過毒的手套等方法來避免手上微生物的污染。二、拓展應(yīng)用練習(xí)與應(yīng)用2.某生物興趣小組將從葡萄皮上成功分離來的野生酵母菌分別接種于3個(gè)盛有等量同種液體培養(yǎng)基的錐形瓶中，并放置在搖床上培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速分別為210r/min，230r/min和250r/min。培養(yǎng)時(shí)間與酵母菌種群密度的關(guān)系如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問題。(1)搖床轉(zhuǎn)速不同,意味著培養(yǎng)條件有什么不同？意味著培養(yǎng)液中02含量不同。搖床轉(zhuǎn)速越高，培養(yǎng)液中的溶氧量越多，促進(jìn)酵母菌的有氧呼吸，還能增加酵母菌獲得營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)會(huì)，有利于其生長(zhǎng)繁殖。二、拓展應(yīng)用練習(xí)與應(yīng)用2.某生物興趣小組將從葡萄皮上成功分離來的野生酵母菌分別接種于3個(gè)盛有等量同種液體培養(yǎng)基的錐形瓶中，并放置在搖床上培養(yǎng)，搖床轉(zhuǎn)速分別為210r/min，230r/min和250r/min。培養(yǎng)時(shí)間與酵母菌種群密度的關(guān)系如下圖所示。請(qǐng)分析回答下列問題。(2)從圖中數(shù)據(jù)你可以得出什么結(jié)論?其原因是什么？培養(yǎng)液中02含量越高,酵母菌種群密度越大。(3)為什么培養(yǎng)8h后，其中2個(gè)錐形瓶中酵母菌的種群密度基本達(dá)到穩(wěn)定?這時(shí)候已經(jīng)達(dá)到了環(huán)境容納量（K值）。培養(yǎng)液中的溶氧量和營養(yǎng)物質(zhì)都有限(1)只有平板劃線法接種培養(yǎng)后可獲得單菌落(

)×獲得單菌落的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)每次劃線都要從上一次劃線的起始端開始(

)×在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線。(3)經(jīng)培養(yǎng)后，只有在最后一次劃線上才會(huì)出現(xiàn)單菌落(

)×經(jīng)培養(yǎng)后，在稀釋度高的區(qū)域都會(huì)出現(xiàn)單菌落，不一定只有在最后一次劃線上才會(huì)出現(xiàn)單菌落。跟蹤訓(xùn)練5.(2023·海南三沙高二期末)下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基C.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿的皿蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D.檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒

溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)√倒平板時(shí)用食指和拇指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋，C錯(cuò)誤。跟蹤訓(xùn)練6.在分離、純化細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結(jié)果(乙)如圖，a、b、c、d是劃線的四個(gè)區(qū)域。下列敘述錯(cuò)誤的是