廣西《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》編制說明

廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》（征求意見稿）編制說明一、任務(wù)來源根據(jù)《廣西壯族自治區(qū)市場監(jiān)督管理局關(guān)于下達2022年廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目計劃的通知》(桂市監(jiān)函〔2022〕1903號)文件精神，由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院起草的廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》獲批準(zhǔn)立項為廣西地方標(biāo)準(zhǔn)，項目編號為2022-1174。二、主要起草單位、起草人以及標(biāo)準(zhǔn)編制任務(wù)分工廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》項目任務(wù)下達后，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開展標(biāo)準(zhǔn)研制工作，具體標(biāo)準(zhǔn)編制工作分工如表1所示。表1標(biāo)準(zhǔn)編制人員分工表姓名職稱專業(yè)工作單位主要負責(zé)工作滑金鋒副研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所項目總體方案設(shè)計、試驗實施、數(shù)據(jù)匯總分析、總結(jié)及標(biāo)準(zhǔn)的撰寫等工作黃詠梅副研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：調(diào)查氣候帶劃分李彥青副研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：區(qū)內(nèi)調(diào)查點布置和維護李慧峰副研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：性信息素誘集調(diào)查陳天淵研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：調(diào)查數(shù)據(jù)分析銀捷高級農(nóng)藝師甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：甘薯種植廖金秀助理研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容的編寫和論證：實驗室管理張世剛助理研究員甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計梁耀文中級農(nóng)藝師甘薯育種與病蟲害防控廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究所昆蟲飼養(yǎng)三、制定標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義（一）必要性近年來，隨著氣候變化、耕作栽培方式改變和農(nóng)作物復(fù)種指數(shù)提高，農(nóng)作物病蟲害呈多發(fā)、頻發(fā)態(tài)勢，重大農(nóng)作物病蟲害時有發(fā)生，如甘薯小象甲逐漸向高緯度遷移，嚴重危害甘薯的產(chǎn)量和質(zhì)量。為規(guī)范農(nóng)作物病蟲害監(jiān)測預(yù)報、防治規(guī)程和防治方式，鼓勵專業(yè)化、綠色防控，保障國家糧食安全和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，保護生態(tài)環(huán)境，促進農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，國家2020年5月發(fā)布并施行了《農(nóng)作物病蟲害防治條例》(國令第725號)政策。監(jiān)測預(yù)報是做好農(nóng)作物病蟲害預(yù)防控制的前提和基礎(chǔ)，《條例》總結(jié)實踐經(jīng)驗，完善了監(jiān)測預(yù)報制度。甘薯小象甲（Cylasformicarius）屬鞘翅目（Coleoptera）三錐象科，主要分布在非洲、亞洲東南部、美洲等熱帶、亞熱帶地區(qū)，是甘薯生長期和貯藏期的最重要的害蟲之一，在我南部薯區(qū)包括廣西、廣東、海南、臺灣、浙江、江西、湖南、福建、貴州、四川、云南等省區(qū)均發(fā)生嚴重為害。甘薯小象甲成蟲咬食薯藤、葉、幼芽及薯塊外，而幼蟲蛀食粗蔓和薯塊，在薯塊內(nèi)部形成隧道，隧道部位被誘導(dǎo)產(chǎn)生萜類和酚類等物質(zhì)，使甘薯味道苦臭、品質(zhì)下降，不能食用或飼用。大多數(shù)疫區(qū)，一般因甘薯小象甲為害薯區(qū)產(chǎn)量損失在10％-20％，為害嚴重薯區(qū)產(chǎn)量損失30％-50％，甚至絕收。針對目前廣西甘薯小象甲為害嚴重、發(fā)生時期和危害程度不清楚等問題，開展全區(qū)甘薯小象甲動態(tài)發(fā)生布點調(diào)查，根據(jù)害蟲發(fā)生發(fā)展規(guī)律以及作物的物候、氣象等資料建立有效的預(yù)測預(yù)報等關(guān)鍵技術(shù)研究，做出甘薯小象甲未來的發(fā)生期、發(fā)生量、危害程度等估計，預(yù)測害蟲未來的發(fā)生動態(tài)。深度闡明甘薯小象甲發(fā)生規(guī)律及機理，為甘薯小象甲防治技術(shù)提出新理論、新方法、新技術(shù)和新策略。建立適合于廣西甘薯小象甲性信息素誘集測報的技術(shù)體系，使害蟲防治工作有計劃有重點的進行，解決我區(qū)甘薯小象甲防控中的瓶頸問題，從而達到蟲口奪糧，保證農(nóng)業(yè)收入，促進廣西甘薯產(chǎn)業(yè)的可持性發(fā)展。（二）技術(shù)依據(jù)Coffelt等（1978）從甘薯小象甲雌蟲腹部和雌蟲爬過的濾紙上初步提取一種性信息素，生物學(xué)鑒定結(jié)果表明，甘薯小象甲雄蟲對其有很強的行為反應(yīng)和電生理反應(yīng)。Heath等（1986）采用液相色譜和氣相色譜法從甘薯小象甲雌蟲的揮發(fā)物中分離得到一種性信息素，鑒定為(順)-3-十二烯-1-醇-(反)-2-丁烯酯（(Z)-3-dodecen1-ol(E)-2-butenoate），并且首次在室內(nèi)進行了人工合成。室內(nèi)和田間生物測定結(jié)果表明，該人工合成材料的生物活性與雌蟲分泌的性信息素?zé)o明顯差別。國內(nèi)廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)院劉建峰等（1999）對性信息素誘捕進行了田間試驗，并發(fā)現(xiàn)性誘劑誘捕區(qū)防治效果可達84％，并對性信息素誘捕條件進行了探索。劉瑾和李真（2001）也對甘薯小象甲性信息素進行了人工合成，并且在廣東農(nóng)科院對其進行了生物活性測定，結(jié)果顯示人工合成的甘薯小象甲性誘劑有很高的誘蟲活性。陳福如等（2001）利用甘薯小象甲性信息素誘捕調(diào)查了福建薯區(qū)內(nèi)小象甲年發(fā)生規(guī)律，并且對引誘的活性、作用范圍以及誘捕條件進行了研究。發(fā)現(xiàn)性誘劑的引誘活性長達110d，作用范圍達15m，誘捕器大小中等（1.25L）、橡皮塞誘芯以及內(nèi)部裝有2％洗衣粉液誘捕效果可達72.6％。隨后，有大量研究報道利用合成的性信息素在大田進行了誘捕實驗。例如：Reddy等（2014）對信息素誘捕甘薯小象甲的條件進行了探索。誘捕器在10-100m，隨著間隔距離的增大，誘捕甘薯小象甲的量呈下降趨勢。信息素誘捕捕獲標(biāo)記成蟲的有效距離為60m，最大覆蓋半徑80m。當(dāng)性信息素濃度為100mM時，對甘薯小象甲的引誘率為60.88％。含有性信息素的橡膠頭在0-14d和15-28d時間內(nèi)每周捕獲的雄蟲量最高，并且信息素誘捕器能夠有效減少小象甲對甘薯的危害程度。盡管目前仍在使用信息素誘捕器，但對小象甲仍未取得有效的控制，因此Nirupa和Reddy（2014）對不同顏色的誘捕器誘捕效果進行了研究，發(fā)現(xiàn)在8種顏色（紅色、灰色、綠色、棕色、藍色、白色、黃色和黑色）的誘捕器中，綠色誘捕器的誘捕效果最佳，幾乎是對照的2倍。同時McQuate（2014）研究結(jié)果表明，在誘捕器中加入綠色光源，捕獲甘薯小象甲的雄性數(shù)量增加了近5倍。嗅覺和夜間可見的視覺信號的結(jié)合顯著提高了這種夜間活動昆蟲的誘捕效果。這些結(jié)果為進一步提高甘薯小象甲的預(yù)測和預(yù)報提供了依據(jù)。馬來西亞Dilipkumar等（2019）也對甘薯小象甲信息素誘捕器進行了優(yōu)化研究，用于提高信息素誘捕器在甘薯小象甲種群監(jiān)測或大規(guī)模誘捕工作中的性能。研究結(jié)果表明誘捕器窗數(shù)、性誘劑劑量和誘捕器高度對甘薯小象甲誘捕量有顯著影響，但誘捕器大小和顏色對誘捕量無顯著影響。以誘捕器有四個窗口、內(nèi)部裝有洗滌劑溶液以及誘捕器高度在甘薯冠層0-40cm較好。（三）可行性分析本標(biāo)準(zhǔn)編制工作組長期從事甘薯小象甲防治方面的研究，共開展了與小象甲相關(guān)的國家自然基金項目《甘薯小象甲性信息素結(jié)合蛋白的功能研究》、廣西自然基金《甘薯小象甲氣味結(jié)合蛋白的鑒定》《甘薯小象甲ORs基因的鑒定和分布機理研究》和廣西農(nóng)科院科技發(fā)展基金《甘薯小象甲化學(xué)感受蛋白的鑒定》、《廣西甘薯品種小象甲抗性鑒定》、《廣西農(nóng)科院拔尖人才項目》和江蘇省研究生科研與實踐創(chuàng)新計劃項目《甘薯小象甲OBPs分子機制的研究》7項。甘薯小象甲室內(nèi)飼養(yǎng)、廣西區(qū)內(nèi)布點調(diào)查、性信息素識別分子機制等方面做了大量的前期工作，提高了甘薯小象甲防控效率，目前已經(jīng)取得了較大的進展，起草單位掌握了甘薯小象甲在區(qū)內(nèi)的布點和動態(tài)調(diào)查技術(shù)。為確保標(biāo)準(zhǔn)編寫工作正常進行，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院建立標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組，廣泛爭取了徐州市農(nóng)業(yè)科學(xué)院/國家甘薯研究中心、江蘇師范大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所、桂林市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究中心和玉林市香啦啦綠色農(nóng)業(yè)有限責(zé)任公司等單位的支持和協(xié)作，為標(biāo)準(zhǔn)編寫提供技術(shù)支持。（四）目的和意義通過制定廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》，規(guī)范甘薯小象甲誘集測報技術(shù)的甘薯小象甲成蟲、幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查、發(fā)生危害及甘薯受害率（程度）調(diào)查、發(fā)生程度及分級指標(biāo)、預(yù)測方法等技術(shù)、對提高甘薯小象甲動態(tài)發(fā)生的預(yù)測預(yù)報，提高甘薯小象甲的防控效率，促進甘薯產(chǎn)業(yè)的綠色發(fā)展具有重大意義，為我區(qū)糧食安全和農(nóng)民增收提供保障。四、主要起草過程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》項目任務(wù)下達后，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院成立了標(biāo)準(zhǔn)編制工作組，制定了標(biāo)準(zhǔn)編寫方案，明確任務(wù)職責(zé)，確定工作技術(shù)路線，開展標(biāo)準(zhǔn)研制工作，具體標(biāo)準(zhǔn)編制工作分配見表1。（二）收集整理文獻資料標(biāo)準(zhǔn)編制工作組收集國內(nèi)有關(guān)甘薯小象甲性信息素誘集測報相關(guān)文獻資料，主要有：——T/GDP041-2021《甘薯小象甲綜合防控技術(shù)規(guī)程》——DB36/T1230-2020《甘薯主要病蟲害綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB41/T905-2014《甘薯有害生物綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB3210/T1087-2021《稻縱卷葉螟性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》——DB32/T3863-2020《甘薯抗莖線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程》——DB51/T2328-2017《紫甘薯主要病蟲害防治技術(shù)規(guī)程》——DB52/T857-2013《甘薯主要地下害蟲綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB13/T838-2007《甘薯主要病蟲害測報技術(shù)規(guī)范》（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組對甘薯小象甲相關(guān)的7個研究項目數(shù)據(jù)整理、分析，召開標(biāo)準(zhǔn)編制工作會議，對標(biāo)準(zhǔn)的整體框架結(jié)構(gòu)進行了研究，并對標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)鍵性內(nèi)容進行了初步探討。經(jīng)過研究，標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容確定為術(shù)語和定義、成蟲調(diào)查、幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查、發(fā)生危害和薯皮受害率（程度）調(diào)查、發(fā)生程度及分級指標(biāo)、預(yù)測方法、數(shù)據(jù)記錄。（四）形成征求意見稿1、編制標(biāo)準(zhǔn)草案。2021年6月-2022年7月，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組進行了廣泛實地調(diào)研工作，查閱了大量的國內(nèi)外文獻資料，對甘薯小象甲性信息素誘集測報的技術(shù)研究成果進行系統(tǒng)總結(jié)。形成了標(biāo)準(zhǔn)的基本構(gòu)架，對主要內(nèi)容進行了討論并對項目的工作進行了部署和安排。在前期研究工作的基礎(chǔ)之上，已有的參考資料中有關(guān)甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)要求，并結(jié)合廣西甘薯小象甲性信息素誘集測報實際要求的基礎(chǔ)上，編制完成廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》(草案)。2、編制標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。2022年7月-10月，向廣西區(qū)內(nèi)涉及領(lǐng)域的部門及相關(guān)專家征求廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》(草案)意見。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要點框架技術(shù)內(nèi)容，再次修改標(biāo)準(zhǔn)草案，形成廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》(征求意見稿)及(征求意見稿)編制說明(第一次)。3、標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)參數(shù)試驗、推廣驗證階段。2022年10月-2023年3月，標(biāo)準(zhǔn)編制工作小組開展試驗及推廣應(yīng)用驗證，收集整理驗證數(shù)據(jù)工作，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組結(jié)合試驗驗證及收集到的最新甘薯小象甲性信息素誘集測報數(shù)據(jù)資料對廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》(征求意見稿)進行修改，標(biāo)準(zhǔn)編制工作組討論解決，最終形成廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》(征求意見稿)及(征求意見稿)編制說明(第二次)。五、制定標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況（一）制定原則本標(biāo)準(zhǔn)的編制遵循國家、行業(yè)和廣西壯族自治區(qū)現(xiàn)行有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。標(biāo)準(zhǔn)編制工作組充分調(diào)研了國內(nèi)及廣西地區(qū)目前甘薯小象甲性信息素誘集測報的實際案例、數(shù)據(jù)資料及研究成果，研究和分析了國內(nèi)及廣西地區(qū)甘薯小象甲性信息素誘集測報的現(xiàn)狀，以及國內(nèi)甘薯小象甲性信息素誘集測報的發(fā)展趨勢和新技術(shù)的應(yīng)用狀況。經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)編制工作組成員討論，確定標(biāo)準(zhǔn)編制遵循以下基本原則：1、科學(xué)性原則本標(biāo)準(zhǔn)分析了國內(nèi)關(guān)于甘薯小象甲性信息素誘集測報標(biāo)準(zhǔn)的建設(shè)現(xiàn)狀和特點，結(jié)合國內(nèi)及廣西地區(qū)甘薯小象甲性信息素誘集測報的現(xiàn)狀，在此基礎(chǔ)上對甘薯小象甲性信息素誘集測報數(shù)據(jù)進行整理、歸納和分類，建立了科學(xué)、實用、合理的廣西地區(qū)甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。2、承接性原則本標(biāo)準(zhǔn)術(shù)語、符號、條文盡量與相應(yīng)國家、國際、行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定內(nèi)容相一致，條文未出現(xiàn)自相矛盾的地方。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容與國家、國際、行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)兼容，未出現(xiàn)沖突，保證了一致性。標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)內(nèi)容中引用其他標(biāo)準(zhǔn)時，已明確指出所引用標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容或名稱，增強了標(biāo)準(zhǔn)的可讀性和可操作性。3、可操作性原則本標(biāo)準(zhǔn)的起草充分調(diào)研了國內(nèi)、廣西壯族自治區(qū)甘薯小象甲性信息素誘集測報的應(yīng)用現(xiàn)狀，編寫組在7個與甘薯小象甲相關(guān)的研究項目基礎(chǔ)上進過反復(fù)討論和修改，編制此標(biāo)準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容針對性強，可操作性高，易于推廣。（二）與現(xiàn)行法律、法規(guī)的關(guān)系，與有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)情況經(jīng)查閱，與“甘薯小象甲”、“甘薯病蟲害測報”等相關(guān)的國家、行業(yè)和地方標(biāo)準(zhǔn)有：——T/GDP041-2021《甘薯小象甲綜合防控技術(shù)規(guī)程》——DB36/T1230-2020《甘薯主要病蟲害綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB41/T905-2014《甘薯有害生物綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB32/T3863-2020《甘薯抗莖線蟲病鑒定技術(shù)規(guī)程》——DB51/T2328-2017《紫甘薯主要病蟲害防治技術(shù)規(guī)程》——DB52/T857-2013《甘薯主要地下害蟲綜合防治技術(shù)規(guī)程》——DB13/T838-2007《甘薯主要病蟲害測報技術(shù)規(guī)范》上述標(biāo)準(zhǔn)均不能有效指導(dǎo)甘薯小象甲發(fā)生預(yù)測預(yù)報，廣西也未制定有《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》相關(guān)地方標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)詳細、嚴密，技術(shù)體系完備，實用性強。標(biāo)準(zhǔn)編制工作組承諾，本標(biāo)準(zhǔn)的各項指標(biāo)不低于國家強制性標(biāo)準(zhǔn)和國家推薦性標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)容與現(xiàn)行的法律、法規(guī)及強制性標(biāo)準(zhǔn)無沖突。標(biāo)準(zhǔn)的編寫符合GB/T1.1—2020的要求。六、主要條款的說明，主要技術(shù)指標(biāo)、參數(shù)、試驗驗證的論述廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)規(guī)程》主要章節(jié)內(nèi)容包括：術(shù)語和定義、成蟲調(diào)查、幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查、發(fā)生危害調(diào)查、測報資料收集、發(fā)生期預(yù)測預(yù)報方法、發(fā)生程度預(yù)測、數(shù)據(jù)記錄。（一）本標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容試驗論證及相關(guān)研究項目標(biāo)準(zhǔn)起草單位廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院近年主持了7個與甘薯小象甲相關(guān)的研究項目，掌握了甘薯小象甲飼養(yǎng)技術(shù)，室內(nèi)建立了甘薯小象甲的飼養(yǎng)體系。分析了不同甘薯基因型品種對小象甲的抗性，探索了抗小象甲甘薯的檢測技術(shù)，獲得了相關(guān)國家發(fā)明專利。對甘薯小象甲基因組和轉(zhuǎn)錄組進行了測序，為甘薯小象甲功能基因組學(xué)研究搭建了良好的平臺，挖掘了嗅覺和味覺識別的相關(guān)基因。近幾年已經(jīng)克隆和驗證了參與嗅覺和味覺相關(guān)的基因10余個，并明確了其調(diào)控的分子機制。特別是自2015年以來一直從事甘薯小象甲在廣西全區(qū)的動態(tài)調(diào)查工作。建立了廣西全區(qū)甘薯小象甲調(diào)查體系。調(diào)查了甘薯小象甲在廣西的發(fā)生規(guī)律和為害情況，為本項目的順利開展提供了充足的原材料和理論基礎(chǔ)。1、甘薯小象甲室內(nèi)飼養(yǎng)本標(biāo)準(zhǔn)編制小組前期已經(jīng)在廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米研究昆蟲實驗室建立了完備的小象甲飼養(yǎng)體系，并且研發(fā)了小象甲的人工飼料，申請了相關(guān)發(fā)明專利，可常年不間斷供應(yīng)試驗所需的甘薯小象甲。探索了甘薯小象甲在不同溫度條件下發(fā)育歷期（表2），闡明了甘薯小象甲發(fā)育起點溫度和有效積溫（表3）。表2甘薯小象甲不同溫度下的發(fā)育歷期蟲態(tài)發(fā)育歷期/d31℃28℃25℃23℃20℃卵6.44±0.51d6.56±0.34d8.78±0.63c10.50±0.50b13.49±0.43a一齡幼蟲3.33±0.29c3.61±0.10c4.44±0.10b4.72±0.25b11.72±0.25a二齡幼蟲3.17±0.29c3.56±0.19c4.81±0.12b5.42±0.65b6.85±0.13a三齡幼蟲6.63±0.14d7.11±0.19d9.00±0.60c10.67±0.14b13.60±0.2a蛹6.33±0.29c6.28±0.25c6.56±0.10c9.53±0.23b13.75±0.25a成蟲產(chǎn)卵前期6.00±0d6.00±0d9.83±0.29c16.17±0.29b20.33±0.29a全生育期31.90±0.37d33.10±0.52d43.36±0.29c57.01±0.31b79.75±0.20a注：表中數(shù)字為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，數(shù)據(jù)后不同字母表示方差分析在P<0.05水平上差異顯著。表3甘薯小象甲發(fā)育起點溫度和有效積溫蟲態(tài)發(fā)育起點溫度（℃）有效積溫（日·度）回歸方程r卵11.44118.07T=11.50+118.07V0.9748幼蟲12.37233.42T=12.37+233.42V0.9872蛹14.4278.41T=14.42+78.41V0.9519成蟲產(chǎn)卵前期17.4472.87T=17.44+72.87V0.9530全生育期13.58515.77T=13.58+515.77V0.9762、甘薯小象甲動態(tài)監(jiān)測本標(biāo)準(zhǔn)編制小組在廣西對小象甲的進行發(fā)生布點全區(qū)，探索了行之有效的監(jiān)測方法。我們發(fā)明了甘薯小象甲誘捕裝置，對誘捕器的放置密度、高度、調(diào)查的頻率及誘心的有效時間都進行了前期試驗（圖1）；2015年至今，項目建議團隊對甘薯小象甲在廣西全區(qū)的發(fā)生進行長期的性信息素誘集調(diào)查，積累了大量的實驗經(jīng)驗和甘薯小象甲發(fā)生數(shù)據(jù)（圖2），制定了甘薯小象甲發(fā)生程度分級指標(biāo)（表4）。圖1廣西地區(qū)甘薯小象甲布點調(diào)查圖22015-2020年廣西地區(qū)甘薯小象甲分布及調(diào)查表4甘薯小象甲發(fā)生程度分級指標(biāo)級別1級2級3級4級5級發(fā)生程度輕發(fā)生偏輕發(fā)生中等發(fā)生偏重發(fā)生大發(fā)生幼蟲蟲口密度（頭/m2）<0.50.6～1.01.1～1.51.6～2.0>2.1薯塊受害率（％）<2.52.6～55.1～7.57.6～10>10.1受害株率（％）<1010.1～2020.1～3030.1～40>40.13、甘薯品種抗小象甲特征、特性研究經(jīng)過對“廣西甘薯品種小象甲抗性的鑒定”項目的實施，通過制定不同的抗性指標(biāo)，在單因素變量的條件下，分別進行網(wǎng)室和實驗室試驗，對泉薯17、榕薯819、福薯604、廣薯214和普薯32號5個不同甘薯品種小象甲危害情況進行調(diào)查與分析，檢測不同甘薯品種對小象甲的抗性。結(jié)果明確了莖葉和薯塊危害減退率相關(guān)抗性指標(biāo)，制定了高感、感、抗、中抗、高抗5個抗性級別。甘薯品種的莖葉比薯塊危害指數(shù)較輕，差異不顯著。除泉薯17和廣薯214外，其余品種之間危害指數(shù)差異顯著。兩年的危害減退率差異不大，普薯32號平均為21.17、泉薯17為38.78、廣薯214為48.00、福薯604為70.91。本研究發(fā)表相關(guān)研究論文1篇，抗小象甲甘薯的檢測方法已經(jīng)申請并獲得國家發(fā)明專利。4、甘薯小象甲基因組精細圖譜及嗅覺相關(guān)基因的注釋通過Illumina和PacBio測序，獲得一個高質(zhì)量的甘薯小象甲基因組?；蚪M大小為338.84Mb，ContigN50和ScaffoldN50分別為14.97Mb和34.23Mb。共有337.06Mb序列長度的基因組序列被定位到11條染色體上，占比99.42％，其中能夠確定順序和方向的序列長度為333.79Mb，占定位染色體序列總長度的99.03%（圖3）。圖3甘薯象甲11條染色體全基因組交互熱圖共預(yù)測了11907個蛋白質(zhì)編碼基因，在編碼蛋白的基因中有11469個基因可以注釋到NR、GO等數(shù)據(jù)庫。同時還預(yù)測了157.51Mb重復(fù)序列、165個tRNA、102個rRNA和40個miRNA。物種間進化關(guān)系分析表明，甘薯小象甲和中歐山松大小蠹（Dendroctonusponderosae）親緣關(guān)系較近，約1.38億年前從中歐山松大小蠹分化而來（圖4）。圖4甘薯小象甲與15種昆蟲的系統(tǒng)進化樹及基因同源性分析利用CAFE對基因家族收縮和擴張分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)31個基因家族在甘薯小象甲基因組中得到了擴張，特別是參與化學(xué)通訊系統(tǒng)的ORs基因家族。我們通過同源序列比對等方式手工注釋了36個OBPs基因，154個ORs基因，46個GRs基因，39個IRs基因，13個CSPs基因，4個SNMPs基因（表5）。表5不同鞘翅目昆蟲化學(xué)通訊相關(guān)基因家族的比較SpeciesORGRIROBPCSPSNMPT.castaneum2702197150206C.formicarius1541873936134A.planipennis46303012144D.ponderosae79595536114A.glabripennis12119063601745、甘薯小象甲嗅覺分子機制的研究通過國家自然基金和廣西自然基金的研究，本申請項目組已經(jīng)完成了甘薯小象甲雌雄蟲觸角的轉(zhuǎn)錄組測序工作，鑒定了26個氣味結(jié)合蛋白（Odorantbindingprotein,OBPs），12個化學(xué)感受蛋白（Chemosensoryproteins,CSPs），4個感覺神經(jīng)膜蛋白（Sensoryneuronmembraneproteins,SNMPs），15個離子型受體（IonotropicReceptors,IRs），11個味覺受體（GustatoryReceptors,GRs）和54個嗅覺受體（Olfactoryreceptors,ORs）。課題組綜合運用生物信息學(xué)和分子生物學(xué)相關(guān)實驗方法得到如下結(jié)果：1)從小象甲雌雄蟲觸角轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中克隆了26個OBPs，并對這些基因進行了序列分析和進化關(guān)系構(gòu)建；2)半定量RT-PCR和熒光定量qPCR結(jié)果顯示OBP1-3特異性在雄蟲觸角中表達；3)熒光競爭性結(jié)合結(jié)果顯示OBP1-3對(Z)-3-dodecen-l-01(E)-2-butenoate都表現(xiàn)很強的結(jié)合能力，結(jié)合常數(shù)分別為：1.564±0.229μM,1.064±0.221μMand1.351±0.093μM；4）RNAi和行為學(xué)觀察結(jié)果顯示OBP1基因沉默前后，性信息素對小象甲雄蟲的引誘率沒有顯著變化，而OBP2-3處理后性信息素對雄蟲的相對引誘率下降到26.67%和23.33%；除性信息素之外，OBP1-3基因沉默前后，分別有5、3和1種氣味揮發(fā)物對甘薯小象甲引誘率發(fā)生顯著性差異（圖5）。本項目的完成有利于闡明昆蟲性信息素結(jié)合蛋白的分子識別機制。更重要的是，可以為我們提供新的方法如通過RNAi干擾靶標(biāo)害蟲性信息素識別進而達到有效防治的目的。圖5甘薯小象甲嗅覺分子機制（二）本標(biāo)準(zhǔn)主要條款的說明1、范圍本文件規(guī)定甘薯小象甲性信息素誘集測報技術(shù)的術(shù)語和定義、成蟲調(diào)查、幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查、發(fā)生危害調(diào)查、測報資料收集、發(fā)生期預(yù)測預(yù)報方法、發(fā)生程度預(yù)測、數(shù)據(jù)記錄的要求。本文件適用于廣西壯族自治區(qū)行政區(qū)域內(nèi)甘薯小象甲性信息素誘集測報。2、術(shù)語和定義本文件對甘薯小象甲、甘薯小象甲性信息素、蟲口密度、受害株率、薯塊受害率等進行定義。3、成蟲調(diào)查本章主要對成蟲調(diào)查的布置時間和方法、調(diào)查時間、調(diào)查方法作出規(guī)定。3.1、布置時間和方法。本標(biāo)準(zhǔn)編制小組在廣西對小象甲的進行發(fā)生布點全區(qū)，探索了行之有效的監(jiān)測方法，發(fā)明了甘薯小象甲誘捕裝置，對誘捕器的放置密度、高度、調(diào)查的頻率及誘心的有效時間都進行了前期試驗。成蟲調(diào)查最佳時間為甘薯小象甲發(fā)生前或者甘薯育苗期（桂北在4月底至5月初，桂中和桂南在2月底至3月初），選取主栽甘薯田3～4塊，設(shè)置調(diào)查點。每個調(diào)查點將3個誘捕器按照三點式布置到田間，誘捕器內(nèi)加入1-3％的洗衣粉水。誘捕器之間的距離大于18m。誘捕器上端高于甘薯株頂部5cm～10cm。根據(jù)性誘劑產(chǎn)品要求定期更換誘芯。3.2、調(diào)查方法。需每7天到10天定期檢查一次，并且更換洗衣粉水，記錄誘集的甘薯小象甲數(shù)量，調(diào)查數(shù)據(jù)計入附錄B中的表B.1。4、幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查本章主要對幼蟲量及發(fā)育進度調(diào)查的時間和方法作出規(guī)定。4.1、調(diào)查時間。第1代甘薯小象甲2～3齡幼蟲的始盛期開始