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1、第四節(jié) 氧化磷酸化作用oxidation phosphorylation氧化磷酸化定義:是指在ATP合酶的催化下,利用電子傳遞過程中釋放的自由能, 由ADP 和Pi生成ATP的過程。(底物水平磷酸化,光合磷酸化)外膜:內(nèi)膜: 嵴膜間隙基質(zhì)可透性不透性線粒體的結(jié)構(gòu)一、氧化磷酸化與電子傳遞相偶聯(lián)(一)電子傳遞和氧化磷酸化依賴于底物氧化1 琥珀酸 (FADH2)1 蘋果酸 (NADH)2 ATP3 ATP呼吸鏈每消耗一個(gè)氧原子由ADP生成ATP的分子數(shù),叫磷氧比(P/O)P/O可以反映呼吸效率。(二) 氧化磷酸化必須以電子傳遞為前提(三)氧化磷酸化推動電子傳遞結(jié)論?二 、 電 子 傳 遞 和 磷 酸
2、 化 的 解 偶 聯(lián)(uncoupling)解偶聯(lián)劑(uncoupler)2,4-二硝基苯酚(2,4-dinitrophenol, DNP)作用實(shí)質(zhì):DNP為疏水性弱酸,易通過膜轉(zhuǎn)移質(zhì)子,消除跨膜質(zhì)子梯度。(DNP)體內(nèi)存在氧化磷酸化解偶聯(lián)生物學(xué)意義:產(chǎn)生熱量保持體溫(新生少毛動物、冬眠動物 ) 由解偶聯(lián)蛋白完成。(產(chǎn)熱素:thermogenin, dimer, 64-kd)形成通道,允許質(zhì)子從胞質(zhì)流進(jìn)線粒體基質(zhì)。三、氧化磷酸化的能量偶聯(lián)機(jī)理(一)化學(xué)偶聯(lián)假說1953Slater提出。高能中間物(二)構(gòu)象偶聯(lián)假說1964 Boyer 提出。高能構(gòu)象狀態(tài)( chemiosmotic(三)化學(xué) 滲
3、透假說hypothesis)1961Mitchell提出( 1978年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))。質(zhì)子電化學(xué)勢化學(xué)滲透假說電子沿呼吸鏈傳遞伴隨著H+從線粒體內(nèi)膜基質(zhì)“泵”到內(nèi)膜外側(cè),從而在內(nèi)膜兩側(cè)形成了跨膜的pH梯度(DpH)和電位梯度(Dy) ,二者合稱為質(zhì)子驅(qū)動力(proton-motive force, pmf),該驅(qū)動力使ADP和Pi形成ATP。支持化學(xué)滲透學(xué)說證據(jù):*線粒體內(nèi)膜對H+、OH-、K+、Cl-等離子都是不通透性的;*電子傳遞中產(chǎn)生了跨線粒體內(nèi)膜的質(zhì)子梯度;*人為創(chuàng)造線粒體內(nèi)外質(zhì)子梯度,在沒有氧化底物時(shí)也能合成ATP;*只有完整的線粒體內(nèi)膜,才能進(jìn)行ATP的合成;*破壞跨線粒體內(nèi)膜的質(zhì)子梯度和電位差, 必然破壞氧化磷酸化進(jìn)行。四、F0F1-ATP合酶(一)亞線粒體內(nèi)膜重組實(shí)驗(yàn)F1在體外具有ATPase活性;在體內(nèi), F0F1具有ATP合成酶活性。ATP synthase(F0F1-合酶)合酶:具有裂解作用,但不是裂解酶, 因?yàn)樗芗訌?qiáng)同一反應(yīng)的合成方向合成酶(synthetase):一種連接酶,所催化的反應(yīng)需要核苷三磷酸。(二)F0F1 - ATP合酶的分子結(jié)構(gòu)F1(a3b3gde)球形頭部伸向基質(zhì);F0 ( ab2c12 )跨膜蛋白F0 F1
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