臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)CLSIEP文件.ppt

臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià),郭健衛(wèi)生部臨檢中心,方法評(píng)價(jià),方法選擇,常規(guī)分析前準(zhǔn)備,常規(guī)分析,樣品,統(tǒng)計(jì)質(zhì)控,報(bào)告結(jié)果,預(yù)防措施,方法發(fā)展,分析方法分級(jí),決定性方法（definitivemethod）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的方法。參考方法（referencemethod）：經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法。常規(guī)方法（routingmethod）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。,常規(guī)方法,參考方法,決定性方法,準(zhǔn)確度增加,應(yīng)用范圍增加,不同方法的關(guān)系,標(biāo)準(zhǔn)品（referencematerial）：充分均勻并具有一個(gè)或多個(gè)良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來校準(zhǔn)儀器設(shè)備、評(píng)估測(cè)定方法或給其它物質(zhì)賦值。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（原級(jí)參考物）：穩(wěn)定、均一，由高度準(zhǔn)確的若干方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定值。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品：用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，參考方法定值。校準(zhǔn)品：用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，擬被用于校準(zhǔn)的常規(guī)方法定值。用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn)。,標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí),參考方法,決定性方法,廠家方法,常規(guī)分析,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,校準(zhǔn)品,準(zhǔn)確度的傳遞,溯源,校準(zhǔn),儀器參數(shù)試劑,人血清無機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09135血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09138,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090001膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090004純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090011,評(píng)價(jià)內(nèi)容：初步評(píng)價(jià)（NCCLSEP10）精密度（NCCLSEP5）對(duì)比及偏差（NCCLSEP9）線性（NCCLSEP6）抗干擾能力（NCCLSEP7）基質(zhì)效應(yīng)（NCCLSEP14）臨床準(zhǔn)確度（敏感性和特異性）（NCCLSGP10，ROC曲線）,方法的評(píng)價(jià),NCCLS文件EP9-A,用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比及偏差評(píng)估,批準(zhǔn)指南,2019年12月,評(píng)價(jià)兩種分析方法（同一分析項(xiàng)目）的偏差。,評(píng)價(jià)要求：,熟悉儀器操作熟悉評(píng)價(jià)方案質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù)（最少5個(gè)工作日，40個(gè)樣本）,用途：,目的：引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方法時(shí)進(jìn)行偏差分析。,實(shí)驗(yàn)樣本：來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存。,對(duì)比方法：廠家要求的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法或公認(rèn)的參考方法。具有好的精密度沒有已知的干擾物相同單位相對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差是已知的,測(cè)定范圍：醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)（均勻分布）樣本數(shù)：至少40例，增加可提高可信性。測(cè)定方法：兩種方法分別做雙份測(cè)定。測(cè)定順序：每天：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1,測(cè)定次數(shù)：每天分別用兩種方法進(jìn)行測(cè)定，至少測(cè)定5天，共40個(gè)樣本數(shù)據(jù)監(jiān)督：系統(tǒng)誤差、人為誤差質(zhì)控：常規(guī)質(zhì)控,熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點(diǎn)界限：（雙份測(cè)定）相對(duì)差值均值的4倍,實(shí)驗(yàn)步驟,繪圖,均值散點(diǎn)圖（X，Y）所有值散點(diǎn)圖（Yij，Xi）偏差圖散點(diǎn)圖（Yij-Xij），Xi）,均值散點(diǎn)圖（X，Y）,偏差圖：每次測(cè)定的Y均值與X均值之差-相應(yīng)X均值圖,線性相關(guān)目測(cè)檢查兩種方法間離群值目測(cè)檢查界限：4倍兩種方法間絕對(duì)偏差的均值絕對(duì)差值允許范圍:相對(duì)差值允許范圍:,適合范圍計(jì)算r，r2=0.95范圍適合r20.95擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍線性回歸計(jì)算均勻離散度的直觀檢查,預(yù)期偏差及可信范圍線性回歸方程計(jì)算偏差（高、中、低3組）解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較,定量分析方法的線性評(píng)價(jià),EvaluationofTheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethodsEP6-P,目的,為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀器或方法是否滿足廠家線性指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。,定義,AssayRange（LinearRange)Therangeofconcentrationoractivityinwhichthefinaloutputvalueofasystemisproportionaltotheanalyteconcentrationoractivitywithinastatedtolerance.,定義,Linearity:Themeasureofthedegreetowhichacurveapproximatesastraightline.Itreferstooverallsystemresponse(i.e.,thefinalanalyticalanswerratherthantheinstrumentoutput),ScopeandLimitations,線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn)確性和精密度。線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣本。線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反應(yīng)，包括校準(zhǔn)、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。,使用者的需求,用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍。在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息（方法線性）。進(jìn)行線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。,儀器的熟悉過程,執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀器操作和維護(hù)程序、樣本準(zhǔn)備方法和校準(zhǔn)。對(duì)較簡(jiǎn)單的設(shè)備需要5天或更少時(shí)間。對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要5天或更長(zhǎng)時(shí)間。,實(shí)驗(yàn)周期,在完成儀器熟悉過程后開始實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù)。全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。,線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn),樣本要求：最少4個(gè)濃度水平，推薦5個(gè)水平?；|(zhì)效應(yīng)：應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型。,可以使用的樣本,病人混合血清理想的樣本基質(zhì)高值樣本：高于上限30%低值樣本：線性低限或更低。,可以使用的樣本,Patient-SamplePoolSpikedwithAnalyte加入品在沒有干擾物存在時(shí)不需高純度。PoolDilutedwithTreatedPoolMaterial用于降低分析物濃度，如：透析、熱處理、層析。,可以使用的樣本,PoolDilutedwithSaline。在線性實(shí)驗(yàn)中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。CommercialControl/CalibratorMaterial此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實(shí)際的線性結(jié)果。,可以使用的樣本,Underdiluted/OverdilutedCommercialControlMaterialAqueousSolutions（一般無基質(zhì)效應(yīng)）SolutioninOtherSolvents（基質(zhì)效應(yīng)與有機(jī)溶劑相似）,推薦的樣本添加材料,ALB：白蛋白干粉、humanfractionV.乙醇：無水乙醇ALP：純酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL：膽紅素純品Ca:CaCO3Cl:NaCl,推薦的樣本添加材料,CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品CO2：CaCO3CREA：標(biāo)準(zhǔn)液或高值血清-ALT：純酶GLU：右旋糖AST：純酶ALT：純酶,推薦的樣本添加材料,HBD：純酶LDH：純酶Lipase：胰腺提取物Mg：MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP：白蛋白干粉、人或牛的成份VUA：在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿酸。BUN：在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿素。,樣本分析順序,分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列。有顯著攜帶污染時(shí)，應(yīng)用空白隔開樣本。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析4個(gè)（最好是5個(gè)）不同濃度水平的樣本。,樣本濃度范圍,應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上、下限。評(píng)價(jià)結(jié)果不滿意時(shí)應(yīng)重新設(shè)定濃度。線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有4個(gè)濃度。,樣本的準(zhǔn)備,足量的混合血清。低濃度混合血清（No1）；高濃度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1”+1份“No5”血清（No3）：2份“No1”+2份“No5”血清（No4）：1份“No1”+3份“No5”,樣本濃度計(jì)算,C1V1+C5V5濃度=-V1+V5,數(shù)據(jù)收集,x1y1-1y1-2y1-3y1-4x2y2-1y2-2y2-3y2-4x3y3-1y3-2y3-3y3-4x4y4-1y4-2y4-3y4-4x5y5-1y5-2y5-3y5-4,數(shù)據(jù)評(píng)價(jià),觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。若有明顯異常時(shí)應(yīng)判斷是否為離群點(diǎn)。如離群點(diǎn)超出2點(diǎn)，則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實(shí)驗(yàn)。,離群點(diǎn)檢查,用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。將4個(gè)重復(fù)值從大到小排列（Y1到Y(jié)4）。計(jì)算：D=Y1-Y4若Y1可能是離群點(diǎn)，計(jì)算：D1=（Y1-Y2）/D若Y4可能是離群點(diǎn)，計(jì)算：D4=（Y3-Y4）/D,離群點(diǎn)判斷,判斷值（Criticalvalue)(0.05)0.765(0.01)0.889,繪圖和評(píng)價(jià),線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸。目測(cè)離群值。(Y=aX+b)目測(cè)線性判斷是否符合要求。進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià)。,注意：,統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同。慎用方法學(xué)線性范圍從0開始。有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中：最小的線性濃度醫(yī)學(xué)決定水平最大的線性濃度,參考文獻(xiàn),DixonW.J.andMasseyF.J.introductiontostatisticalanalysis,3rdedition,McGraw-HillBookCo.,NewYork,1969,pp308-310,500,536-537.WeissbergA.andBeattyG.H.Tablesoftolerance-limitfactorsfornormaldistributions,Technometrics2:4,1960Graybill,FranklinA.Anintroductiontolinearstatisticalmodels,volumeI,McGraw-HillBookCompany,1961,p191.,臨床化學(xué)設(shè)備的精密度評(píng)價(jià),EvaluationofPr