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第4講實驗六葉綠體中色素的提取和分離 提取 葉綠體中的色素溶于 而不溶于水 可用 等有機(jī)溶劑提取色素 分離 各種色素在 中溶解度不同 的隨 在濾紙上擴(kuò)散得快 反之則慢 從而使各種色素相互分離 有機(jī)溶劑丙酮 丙酮 層析液 溶解度高 層析液 1 實驗中幾種化學(xué)試劑的作用 提取 分離 研磨 色素 2 替代材料可用其他綠色葉片代替菠菜葉 但不能用大白菜等含葉綠素較少的材料 3 替代實驗品 1 提取液 提取液可用丙酮 2 二氧化硅 用純凈的細(xì)河沙代替 使研磨更加迅速充分 3 碳酸鈣 用碳酸鈉代替碳酸鈣 由于碳酸鈣不溶于水 使濾液有許多泡沫 而碳酸鈉易溶于水 使濾液泡沫大大減少 氧化硅 碳酸鈣 5ml丙銅 一端兩個角 用鉛筆畫線 二 黃綠色 葉黃素 葉綠素a 葉綠素b 橙黃色 1 為什么要在濾紙條一端剪去兩角 提示 防止層析液在濾紙條的邊緣擴(kuò)散過快而形成弧形色素帶 2 試分析分離色素時色素帶顏色過淺的原因 提示 1 葉片顏色太淺 2 葉片放置時間太久 3 研磨不充分 4 未加caco3粉末 5 加入提取液量太多 3 實驗中的注意事項及操作目的歸納 技巧點(diǎn)撥臺 1 從色素帶的寬度可推知色素含量的多少 從色素帶的位置可推知色素在層析液中溶解度大小 2 在濾紙條上 相鄰兩條色素帶間距離最寬的是胡蘿卜素和葉黃素 相鄰兩條色素帶間距離最窄的是葉綠素a和葉綠素b 實驗方法實驗材料的常用處理方法和技術(shù) 理論指導(dǎo) 熟悉常用的實驗材料處理方法和技術(shù) 理解每種方法和技術(shù)的適用情況并熟練掌握其操作技能 可以在設(shè)計實驗時進(jìn)行遷移和利用 常用處理方法主要包括以下幾個方面 1 研磨 過濾 適用于從生物組織中提取物質(zhì) 如酶 色素等 研磨時要先將生物材料切碎 然后加入摩擦劑 常用二氧化硅 提取液及其必要物質(zhì) 充分研磨之后 往往要進(jìn)行過濾 以除去渣滓 所用過濾器具則根據(jù)需要或根據(jù)試題中提供的器材加以選用 如可用濾紙 紗布 脫脂棉 尼龍布等 教材中涉及到研磨和過濾的實驗是 葉綠體中色素的提取和分離 2 紙層析技術(shù) 紙層析法是利用物質(zhì)隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散速度不同的原理 達(dá)到將物質(zhì)分離的目的 適用于溶液中物質(zhì)的分離 主要步驟包括制樣 制備濾紙條 畫濾液細(xì)線和層析分離 3 解離技術(shù) 用于破壞細(xì)胞壁 分散植物細(xì)胞 制作臨時裝片 教材上涉及實驗是 觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂 4 恒溫技術(shù) 適用于有酶參與的生化反應(yīng) 一般用水浴或恒溫箱 5 同位素示蹤技術(shù) 同位素示蹤技術(shù)可用于物質(zhì)代謝以及其他實驗中以了解物質(zhì)來源或去向 或者區(qū)分事情結(jié)果是由于此還是彼的緣故 如光合作用光反應(yīng)產(chǎn)物 氧氣中氧的來源 二氧化碳形成葡萄糖的途徑 確定誰是遺傳物質(zhì)的噬菌體侵染細(xì)菌的實驗等 典例分析 某同學(xué)在做 綠葉中色素的提取和分離 實驗時 在實驗報告中寫的原理是 綠葉中色素的提取 紙層析法 葉綠體中色素的分離 丙酮提取法 該同學(xué)在做綠葉中色素的提取時 改用下列處理方法 綠葉放在盛有清水的燒杯中靜置2h 綠葉放在盛水的燒杯中 煮沸3min后取出 放入盛丙酮的燒杯中 隔水加熱 綠葉放在盛丙酮的燒杯中 隔水加熱 綠葉放在盛水的燒杯中 煮沸10min 綠葉放在研缽中研磨 然后放在盛丙酮的燒杯中 請分析該實驗的原理是否正確 改變處理方法后哪些溶液會變綠 分析 1 綠葉中色素的提取 丙酮提取法 綠葉中色素的分離 紙層析法 2 色素是有機(jī)物 在水中不溶解 綠葉中的色素能溶解在丙酮等有機(jī)溶劑中 當(dāng)綠葉放在盛水的燒杯中 煮沸后 由于細(xì)胞膜和葉綠體膜變成了全透性 葉綠素會擴(kuò)散進(jìn)入水中 綠葉放在研缽中研磨時會破壞細(xì)胞膜和葉綠體膜 葉綠體色素溶解在丙酮中 拓展 1 若 中都變綠 顏色的深淺一樣嗎 提示 不一樣 由于受加熱條件的影響 溶解量不等 所以燒杯中的顏色深淺不同 2 在檢測綠葉進(jìn)行光合作用產(chǎn)生淀粉時為什么要將綠葉放在盛丙酮的燒杯中隔水加熱 提示 放在丙酮中是為了脫去色素 避免對實驗現(xiàn)象的干擾 因為淀粉的檢測是利用淀粉與碘反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色的原理 隔水加熱是為了受熱均勻和安全 因為酒精易燃 1 2011 江蘇高考 某研究組獲得了水稻的葉黃素缺失突變體 將其葉片進(jìn)行了紅光照射光吸收測定和色素層析條帶分析 從上至下 與正常葉片相比 實驗結(jié)果是 a 光吸收差異顯著 色素帶缺第2條b 光吸收差異不顯著 色素帶缺第2條c 光吸收差異顯著 色素帶缺第3條d 光吸收差異不顯著 色素帶缺第3條 解析 選b 因為題干中水稻為葉黃素缺失突變體 對其葉片進(jìn)行實驗后 色素層析帶一定缺第2條 即葉黃素 但光吸收差異不顯著 因為葉黃素主要吸收藍(lán)紫光 紅光被葉綠素a和葉綠素b吸收 2 在做 綠葉中色素的提取和分離 實驗時 甲 乙 丙 丁四位同學(xué)對相關(guān)試劑 藥品的使用情況如下表所示 表示使用 表示未使用 其余操作均正常 他們所得的實驗結(jié)果依次應(yīng)為 a b c d 解析 選b 本題綜合考查 綠葉中色素的提取和分離 實驗中各種試劑 藥品的作用 丙酮用于溶解綠葉中的色素 甲同學(xué)未加丙酮 其濾紙條上應(yīng)無色素帶 caco3能夠防止研磨時色素被破壞 丙同學(xué)未加caco3 其濾紙條上的色素帶葉綠素a 葉綠素b應(yīng)較窄 sio2能夠使研磨更充分 丁同學(xué)未加sio2 其濾紙條上的四種色素帶均應(yīng)較窄 乙同學(xué)操作正確 其濾紙條上的色素帶應(yīng)為正常的 分布 3 2012 梧州模擬 某同學(xué)在做提取葉綠體中色素的實驗時 收集到的色素提取液為淡綠色 分析產(chǎn)生該結(jié)果的可能原因是 研磨不充分 色素未能充分提取出來 丙酮加入量太多 稀釋了色素提取液 丙酮加入量太少 色素未提取出來 未加碳酸鈣粉末 葉綠素分子已被破壞a b c d 解析 選b 提取葉綠體中色素時 收集到的提取液呈淡綠色 其原因可能有以下幾種 一是選取的葉片含色素少 二是研磨不充分 色素未能充分提取出來 三是提取液太多 使色素濃度較低 四是未加碳酸鈣 造成研磨過程中色素分子被破壞 本題中 的表述是正確的 4 如圖表示某同學(xué)做 綠葉中色素的提取和分離 實驗的改進(jìn)裝置 下列與之有關(guān)的敘述中 錯誤的是 a 應(yīng)向培養(yǎng)皿中倒入層析液b 應(yīng)將濾液滴在b處 而不能滴在a處c 實驗結(jié)果應(yīng)是得到四個不同顏色的同心圓d 實驗得到的若干個同心圓中 最大的一個圓呈橙黃色 解析 選b a處應(yīng)滴加濾液 加入培養(yǎng)皿中的層析液沿?zé)粜鞠蛏蠑U(kuò)散 到達(dá)a點(diǎn)后沿圓形濾紙擴(kuò)散 得到四個不同顏色的同心圓 由內(nèi)向外依次是葉綠素b 葉綠素a 葉黃素 胡蘿卜素 5 如圖表示葉綠體中色素提取和分離實驗的部分材料和用具 據(jù)圖回答 1 圖 加入研缽內(nèi)的物質(zhì) a 5ml 作用是 b 少許 作用是研磨得充分 c 少許 作用是 2 將研磨液倒入 的漏斗內(nèi) 漏斗內(nèi)基部塞有 3 剪去兩角的作用是 劃濾液細(xì)線的要求是 4 層析操作過程應(yīng)注意 層析原理是 加蓋的目的是 色素帶最寬的是 擴(kuò)散最快的是 解析 1 研磨綠葉時需要加入3種物質(zhì) 5ml丙酮 作用是溶解色素 少許二氧化硅 作用是增大摩擦力 使細(xì)胞和葉綠體破碎 研磨更充分 少許碳酸鈣 主要是為了中和細(xì)胞研磨破碎后溢出的有機(jī)酸 防止葉綠素中的鎂被氫取代 破壞葉綠素 2 過濾研磨液時 漏斗基部不能用濾紙 因為色素可吸附在濾紙上 一般用一塊單層尼龍布過濾 3 在實驗過程中 濾紙條剪去兩角的作用是防止兩邊色素層析時擴(kuò)散過快 劃濾液細(xì)線的要求是細(xì) 齊 直 4 層析時的關(guān)鍵是不能讓層析液沒及濾液 細(xì)線 否則 濾液細(xì)線中的色素會被層析液溶解 不能分離 四種色素溶于層析液中 因溶解度的差異 造成在濾紙條上擴(kuò)散速度的不同 其中擴(kuò)散速度最快的是胡蘿卜
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