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生理學實驗設計(第二組)腎上腺素和去甲腎上腺素對心臟和血管作用的比較第二小組成員: 梁懷彬(20115610113)蘇百晗(20115610120)劉鶴飛(20115610114) 李 麗(20115610109) 雷 冰(20115610107) 李春玲(20115610108) 第一實驗室周六上午劉少云(20115610115) 指導老師:周偉民李曼曼(20115610110) 完成時間:2012年5月5日 腎上腺素和去甲腎上腺素對心臟和血管作用的比較1、 實驗目的: 本實驗的目的是以心搏能力和動脈血壓為指標來對照觀察腎上腺素和去甲腎上腺素分別對于心臟和血管的作用以及對二者影響的異同。進一步深刻體會體液調節(jié)對于心血管的作用機理。二、實驗的基本原理: 腎上腺素對與受體都有激動作用,其與心肌細胞膜上相應受體結合后,使心率加快,心肌收縮力增強,心輸出量增多,臨床上常作為強心急救藥;它對血管的影響要看所作用的血管壁上哪一類受體占優(yōu)勢,一般來說,在整體情況下,小劑量(或正常生理濃度下)腎上腺素是主要引起體內血液重新分配,對總外周阻力影響不大;而大劑量時使得外周阻力明顯升高。 腎上腺素對血管的具體作用機理是:小劑量時主要結合受體,大劑量時主要結合受體。小劑量時,腎上腺素與血管平滑肌細胞膜上相應受體結合后,使得以受體占優(yōu)勢的皮膚、腎、胃腸等的血管收縮,但對于以受體占優(yōu)勢的骨骼肌和肝血管卻起著舒張作用即表現(xiàn)為血液的重新分配,對總外周阻力影響較??;大劑量時,結合骨骼肌和肝血管平滑肌細胞膜上的受體,使其收縮。故大劑量時使得外周阻力明顯升高。 去甲腎上腺素主要激活受體,所以其主要作用是使除冠狀動脈以外的小動脈強烈收縮,以引起外周血管廣泛收縮,外周阻力明顯增大而最終使得血壓升高,故臨床常將其作為升壓藥;但對心臟的直接作用較小,而且在外源性給予時,常因明顯升壓作用而通過竇弓反射引起反射性心率變慢,從而掩蓋了去甲腎上腺素對心的直接作用。三、實驗材料與試劑實驗(1)家兔, 20%氨基甲酸乙酯溶液(5ml/kg),0.5%肝素,生理鹽水,5:100000腎上腺素溶液,1:10000去甲腎上腺素溶液實驗(2)蟾蜍 任氏液 5:100000腎上腺素溶液,1;10000去甲腎上腺素溶液四、實驗儀器與設備實驗(1)哺乳動物手術器械一套。生物信號采集處理系統(tǒng),兔手術臺,動脈夾,動脈導管,張力換能器,鐵支架,絲線,注射器。實驗(2) 蛙類手術器械一套。生物信號采集處理系統(tǒng),張力換能器,鐵支架,雙凹夾,試管夾,蛙心插管,蛙心夾,滴管,絲線。五、實驗方法:實驗(1)1試劑的配置:20%氨基甲酸乙酯 0.5%肝素 生理鹽水 5:100000腎上腺素溶液 1:10000去甲腎上腺素溶液 2動物的分組與處理:取6只身體狀況(體重、大小、健康狀況等)基本相同的家兔,隨機等分為兩組,一組為在體實驗組,另一組為在體對照組。3指標的觀察:以動脈血壓為指標,分析腎上腺素和去甲腎上腺素對血管活動的調節(jié)。實驗(2)1試劑的配置:任氏液 5:100000腎上腺素溶液,1:10000去甲腎上腺素溶液2動物的分組與處理:取6只身體狀況(體重、大小、健康狀況等)基本相同的蟾蜍,隨機等分為兩組,一組為離體實驗組,另一組為離體對照組。3指標的觀察:以心率、心肌收縮力為指標,分析腎上腺素和去甲腎上腺素對心臟活動的調節(jié)。六、技術路線:實驗(1)1、儀器裝置 將動脈導管與壓力換能器相連,通過三通開關用生理鹽水充灌壓力換能器和動脈導管,排盡壓力換能器和動脈導管中的氣泡,然后關閉三通開關備用。2、手術1)麻醉固定 家兔稱重后從耳緣靜脈緩慢注射20%氨基甲酸乙酯溶液(5ml/kg)。待兔麻醉后,仰臥固定在兔手術臺上。2)手術操作 減去頸前部兔毛,沿正中線切開皮膚5-7cm,用止血鉗縱向分離皮下組織于正中線分開頸部肌肉,暴露氣管。在氣管下方穿一根線備用,在甲狀軟骨下約1cm處剪一倒“T”型切口,插入氣管插管,用備用線結扎并固定。在氣管兩側找到并辨認迷走神經,交感神經,減壓神經(即家兔的主動脈神經)以及頸總動脈。用玻璃分針先仔細分離右側減壓神經,然后分離右側迷走神經、交感神經和頸總動脈。分別在各神經、血管下穿一根不同顏色的絲線備用。3)動脈插管 分離左側頸總動脈2-3cm(盡可能向頭端游離),遠心端穿線并結扎,近心端用動脈夾夾閉,在血管下穿線備用。在耳緣靜脈注射0.5%肝素生理鹽水2ml,并在動脈導管尖端注入0.5%肝素生理鹽水0.1ml。用眼科剪在結扎線的近端動脈上剪一斜切口,向心臟方向插入已準備好的動脈導管(注意管內不應有氣泡),結扎固定。壓力換能器與動物心臟應保持在同一水平。3、儀器連接與調試 1)儀器連接將壓力換能器與生物信號采集處理系統(tǒng)相連。 2)調零、壓力定標和制壓 實驗前,一般已調整好測量系統(tǒng),實驗過程中,勿輕易改動。4、觀察項目1)記錄正常血壓放開動脈夾,記錄靜息狀態(tài)下家兔動脈血壓曲線,觀察正常血壓波動曲線?!緞用}血壓隨心室的收縮和舒張而變化。心室收縮時血壓上升,心室舒張時血壓下降,這種血壓隨心動周期的波動成為“一級波”(心搏波),其頻率與心率一致。動脈血壓亦隨呼吸變化,吸氣時血壓先是下降,繼而上升,呼氣時血壓先是上升,繼而下降。這種波動叫“二級波”(呼吸波),頻率與呼吸頻率一致。】2)靜脈注射小劑量腎上腺素 耳緣靜脈注射腎上腺素溶液0.2-0.3ml,觀察血壓的變化。3)靜脈注射大劑量腎上腺素待動脈血壓曲線恢復正常后,耳緣靜脈注射腎上腺素溶液0.5-0.8ml,觀察血壓的變化。4)靜脈注射去甲腎上腺素耳緣靜脈注射1:10000去甲腎上腺素溶液0.2-0.3ml,觀察血壓的變化。實驗流程:儀器裝置麻醉固定手術操作動脈插管儀器連接與調試觀察項目實驗(2)1、取蟾蜍一只,用探針搗毀腦和脊髓,將其仰臥固定在蛙板上。用鑷子夾起皮膚,然后將胸部軟骨下方的皮膚剪出一個“V”字形切口,暴露出劍突。用鑷子夾住劍突下端,在肌肉層上剪出“V”字形切口。再用粗剪刀沿正中線剪開胸骨,并把左右兩側胸骨完全剪掉,眼科剪仔細剪開心包膜,暴露心臟。2 結扎血管:在左右主動脈下穿一根線,用玻璃分針將心尖向上翻至背面,結扎靜脈竇遠心端(注意勿結扎住靜脈竇),將心臟回復至原位。3 蛙心插管: 在左主動脈下穿兩根線。用一根線結扎住左主動脈遠心端,另一線備用。提起左主動脈遠端縛線,用眼科剪在左主動脈上靠近動脈圓錐處剪一“V”形切口,將盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主動脈,插至動脈圓錐時,略向后退,在心室收縮時,沿心室后壁向下插,經主動脈瓣插入心室腔內(不可插入過深,以免心室壁堵住插管下口)。若插管成功進入心室,管內液體會隨著心室搏動而上下移動。用左主動脈近心端的備用線結扎插管,并將結扎線固定于插管側面的小突起上。4游離心臟:提起插管,在結扎線遠端分別剪斷主動脈左右分支;剪斷左右肺動脈和前后腔靜脈,將心臟離體。用滴管吸進插管內的余血,加入新鮮任氏液反復沖洗數(shù)次,直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定(1-2cm),即可進行實驗。5 儀器連接:用試管夾將制備好的離體蛙心固定于支架上,在心臟舒張期用蛙心夾夾住心尖部,并連接到張力換能器上(勿讓心臟受到過度牽拉)。將張力換能器的輸出線與生物信號采集處理系統(tǒng)相連。6 觀察項目 1)描記正常蛙心收縮曲線 幅度:代表心臟搏動的強弱 疏密:代表心率 規(guī)律性:代表心臟搏動的節(jié)律性 頂點水平:代表心室收縮的程度 基線:代表心室舒張的程度 2)腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴5:100000腎上腺素溶液,觀察曲線的變化。出現(xiàn)效應后,用新鮮任氏液換洗,直至心跳曲線恢復正常。 3)去甲腎上腺素的影響 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲腎上腺素溶液,

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