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實(shí)驗(yàn) 血糖測(cè)定(葡萄糖氧化酶法)【目的】 體外測(cè)定血清或血漿中葡萄糖含量?!九R床意義】葡萄糖的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)于診斷高血糖癥是十分重要的。通常在查找這些病癥的起因時(shí),還將各種耐量試驗(yàn)和抑制試驗(yàn)與葡萄糖測(cè)定一同進(jìn)行。葡萄糖含量增高見于:糖尿病、葡萄糖攝入過量、柯興氏綜合癥、腦血管意外。葡萄糖含量減少見于:胰島瘤、胰島素過量、先天性碳水化合物代謝障礙。【原理】樣本中的葡萄糖經(jīng)葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和過氧化氫,后者在過氧化物酶的作用下,將還原性4-氨基安替比林與酚偶聯(lián)縮合成可被分光光度計(jì)測(cè)定的醌類化合物。【器材】紫外分光光度計(jì),恒溫水浴箱,移液器(槍),槍頭,試管【藥品】葡萄糖測(cè)定試劑盒,試劑盒主要成分與濃度:試劑主要成分實(shí)驗(yàn)濃度R1葡萄糖氧化酶(GOD)過氧化物酶(POD)13000U/L900U/LR2磷酸緩沖液(pH7.0)酚4-氨基安替吡啉100mmol/L11mmol/L0.77mmol/L葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 5.55mmol/L(100mg/dl)【樣本】新鮮無溶血血清?!静襟E】將10ml R1與90ml R2混合均勻,即為工作液。空白管校準(zhǔn)管樣品管工作液1.50 ml1.50 ml1.50 ml蒸餾水0.01 ml校準(zhǔn)液0.01 ml樣品0.01 ml分別混合均勻,37水浴1015分鐘(避免太陽(yáng)光直射),用波長(zhǎng)505nm、比色杯光徑1.0cm,用空白管調(diào)“零”點(diǎn)測(cè)定各管的吸光度(A)值?!居?jì)算】【參考值】血清/血漿:3.896.11 mmol/L (70110 mg/dl)。此范圍僅供參考,各實(shí)驗(yàn)室須建立本室的參考值范圍?!緟⒖嘉墨I(xiàn)】1全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第二版),主編:葉應(yīng)嫵,王敏三,1997,P616.2Trinder P. Ann Clin Biochem,1969,6: 24-27.血糖測(cè)定實(shí)驗(yàn)所需器材:1. 紫外分光光度計(jì)(比色杯光徑1.0cm),2. 恒溫水浴箱(能調(diào)溫度的,37),3. 移液器(槍)(規(guī)格1.0ml 6個(gè),20l 6個(gè)),槍頭各100個(gè)4. 試管50支,6個(gè)試
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