TB工藝規(guī)程.doc

文件類型工藝規(guī)程版 本 號V3.0文件名稱結(jié)核抗原（TB）制備工藝規(guī)程文件編號KY-STP-005編 寫 人審 核 人批 準 人起草日期審核日期批準日期頒發(fā)部門質(zhì)量管理部文件生效日期分發(fā)部門科研部頒發(fā)份數(shù)1份受控編號目 錄1名稱、組成及用途2生產(chǎn)工藝流程圖3液體配制4本產(chǎn)品工藝過程中所需的SOP名稱及要求5抗原原料的質(zhì)量標準和檢驗方法及貯存注意事項6設(shè)備一覽表 7綜合利用和三廢處理結(jié)核抗原（TB）生產(chǎn)工藝規(guī)程 1產(chǎn)品名稱、組成及用途 名稱：結(jié)核抗原生產(chǎn)工藝規(guī)程 組成及用途： 結(jié)核P38蛋白，作為膠體金生產(chǎn)的原料。2生產(chǎn)工藝流程圖制備工藝流程圖化學(xué)試劑稱 量LB液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，誘導(dǎo)接種超聲，破碎純化3.液體配制3.1 LB液體培養(yǎng)基的配制：3.1.1標準配方： 胰化蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化鈉 10g 純化水定容至1000.0ml3.1.2配制方法： 按照標準配方內(nèi)容準確稱取胰化蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉并加純化水800.00ml，攪拌使充分溶解后，使用純化水定容至1000.00ml，混合均勻高壓滅菌后，室溫保存?zhèn)溆谩?.2 Tris緩沖液的配制：3.2.1標準配方：TRIS堿 6.05 g濃鹽酸 適量純化水定容至1000.00ml3.2.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容準確稱取TRIS堿6.05 g，加純化水800.00ml，攪拌使充分溶解后，加入濃鹽酸適量，攪拌均勻，使用數(shù)顯酸度計測量液體的PH值為8.0左右，使用純化水定容至1000.00ml，室溫保存?zhèn)溆谩?.3尿素的配制3.3.1標準配方： 尿素 480gTRIS堿 5g濃鹽酸 適量純化水定容至1000.00ml3.3.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容依次準確稱取尿素、TRIS堿，加純化水200.00ml，攪拌使充分溶解后，加入濃鹽酸適量，攪拌均勻，使用數(shù)顯酸度計測量液體的批PH值為8.0左右，使用純化水定容至1000.00ml，過濾后液體室溫保存?zhèn)溆谩?.4碳酸緩沖液的配制：3.4.1標準配方： 碳酸鈉 1.59g碳酸氫鈉 2.93g純化水 800.00ml純化水定容至1000.00ml3.4.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容準確稱取各試劑組分，加純化水800.00ml，攪拌使充分溶解后，使用數(shù)顯酸度計測量液體的批PH值為9.49.5，定容至1000.00ml，室溫保存?zhèn)溆谩?.5 硫酸卡那霉素的配制：3.5.1標準配方：硫酸卡那霉素 1g 純化水定容至100.00ml3.5.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容準確稱取硫酸卡那霉素，加入純化水100.00ml攪拌充分溶解后，用0.22um的濾器過濾除菌，-20保存?zhèn)溆谩?.6 磷酸緩沖液的配制：3.6.1標準配方： 氯化鈉 80g氯化鉀 2 gNa2HPO412H2O 29 gK2HPO4 2 g純化水定容至1000.00ml3.6.2配制方法：準確稱取各組分，加入純化水900.00ml，攪拌充分溶解后定容至1000ml，測定溶液的PH應(yīng)為6.97.0，室溫保存?zhèn)溆谩?.7 IPTG的配制：3.7.1標準配方：IPTG 2.383 g純化水定容至100.00ml3.7.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容準確稱取IPTG，加入純化水100.00ml攪拌充分溶解后，用0.22um的濾器過濾除菌，-20保存?zhèn)溆谩?.8 咪唑的配制：3.8.1標準配方：咪唑 2.72g純化水定容至 200.00ml3.8.2配制方法：按照標準配方內(nèi)容準確稱取咪唑，加入純化水150.00ml攪拌充分溶解后，用純化水定容至200.00ml，室溫保存?zhèn)溆谩?本產(chǎn)品工藝過程中所需的SOP名稱名 稱名稱LB液體培養(yǎng)基配制的標準操作規(guī)程BS210S型電子分析天平儀的標準操作規(guī)程硫酸卡那霉素溶液配制的標準操作規(guī)程81-2型電子恒溫磁力攪拌器的標準操作規(guī)程100mmol/L IPTG溶液配制的標準操作規(guī)程HC-TP11B-5型托盤天平的標準操作規(guī)程0.05mol/l Tris-HCl緩沖液配制的標準操作規(guī)程RC5C型高速離心機的標準操作規(guī)程8mol/l尿素溶液配制的標準操作規(guī)程GL20A型大容量離心機的標準操作規(guī)程0.2 mol/L咪唑溶液配制的標準操作規(guī)程JY92II型超聲波細胞粉碎機的標準操作規(guī)程0.05mol/l碳酸緩沖液配制的標準操作規(guī)程TZ-2EH臺式恒溫振蕩培養(yǎng)箱的標準操作規(guī)程0.01 mol/l 磷酸緩沖液配制的標準操作規(guī)程JJT-7B型潔凈工作臺的操作規(guī)程結(jié)核（TB）抗原制備的標準操作規(guī)程DYY-5型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀的標準操作規(guī)程8823A型紫外檢測儀的標準操作規(guī)程5抗原原料的質(zhì)量標準和檢驗方法及貯存注意事項 5. 1 原輔料質(zhì)量標準和檢驗方法原輔料質(zhì)量標準和檢驗方法如下列文件： 名 稱結(jié)核P38質(zhì)量標準 5.2產(chǎn)品貯存方法及有效期產(chǎn)品的儲存條件：-20。5.3主要化學(xué)試劑 液體名稱物料名稱來源規(guī)格或純度LB培養(yǎng)基（1000ml）胰化蛋白胨OXOID LTD500g/瓶AR酵母提取物OXOID LTD500g/瓶AR氯化鈉北京精求化工有限責任公司500g/瓶ARTris緩沖液（1000ml）TRIS堿北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限責任公司5kg/瓶AR濃鹽酸北京化學(xué)試劑公司500 ml /瓶AR8M尿素（1000ml）尿素北京劉李店化工廠500g/瓶 ARTris北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限責任公司500ml/瓶 AR濃鹽酸北京化學(xué)試劑公司500 ml /瓶AR碳酸緩沖液(1000ml)碳酸鈉國藥集團化學(xué)試劑有限公司500g/瓶AR碳酸氫鈉國藥集團化學(xué)試劑有限公司500ml/瓶 AR硫酸卡那霉素(100ml)硫酸卡那霉素北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限責任公司25g/瓶AR磷酸緩沖液(1000ml)氯化鈉北京精求化工有限責任公司500g/瓶AR氯化鉀北京精求化工有限責任公司500g/瓶AR十二水磷酸氫二鈉北京化學(xué)試劑公司500g/瓶AR磷酸二氫鉀北京化學(xué)試劑公司500g/瓶ARIPTG(100ml)IPTG北京欣經(jīng)科生物技術(shù)有限責任公司10g/瓶AR咪唑(200ml)咪唑北京市昌平石鷹化工廠100g/瓶AR6 設(shè)備一覽表： 設(shè)備名稱型號規(guī)格潔凈工作臺JJT-7B型臺式恒溫振蕩培養(yǎng)箱TZ-2EH型 大容量離心機GL20A型高速離心機RC5C型超聲波細胞粉碎機JY92II型電子分析天平儀BS210S型電子恒溫磁力攪拌器81-2型托盤天平HC-TP11B-5型紫外檢測儀8823A型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀DYY-5型7技術(shù)安全及勞動保護 7.1 技術(shù)安全7.1.2 各工序在操作前應(yīng)檢查電源、機器部件，加油潤滑，試運轉(zhuǎn)，正常后方能使用。如發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)停止操作。7.1.3 操作設(shè)備必須嚴格遵守該設(shè)備的操作規(guī)程。7.1.4 機械電器設(shè)備均應(yīng)根據(jù)不