第37講 細胞工程

基礎知識鞏固考點互動探究考例考法直擊教師備用習題,第37講細胞工程,考試說明,1植物的組織培養(yǎng)()。2動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆()。3細胞融合與單克隆抗體()。,一、細胞工程概述二、植物細胞工程1植物細胞的全能性(1)概念：具有某種生物_的任何一個細胞，都具有發(fā)育成完整生物體的_，也就是說，每個生物細胞都具有_的特點。,(2)原因：細胞內(nèi)含有本物種的_。(3)表現(xiàn)條件：具有完整的細胞結構，處于_狀態(tài)，提供一定的_和其他適宜的外界條件。2植物組織培養(yǎng)(1)原理：植物細胞的_。(2)條件：_和人工控制、人工配制的_、適宜的_。,鏈接教材,分子生物學,2.制作流程,細胞器水平,細胞內(nèi)的遺傳物質,細胞產(chǎn)品,植物,動物,全部遺傳信息,潛能,全能性,全部遺傳信息,離體,營養(yǎng)、激素,全能性,無菌,培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件,(3)過程圖123713植物體細胞雜交技術(1)概念：將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成_，并把雜種細胞培養(yǎng)成新的_的技術。,鏈接教材,(2)技術流程圖12372過程a是_，其目的是_。用到的酶是_。過程b是_，其原理是_。,離體,脫分化,激素,再分化,無菌,雜種細胞,植物體,去除細胞壁,獲得具有活力的原生質體,纖維素酶和果膠酶,原生質體的融合,細胞膜具有一定的流動性,鏈接教材,過程b常用方法：物理法包括_等；化學法一般用_作為誘導劑。過程c是原生質體融合后再生出_。過程d是_技術，其原理是_。(3)意義：_。4植物細胞工程的應用(1)微型繁殖,概念：指用于快速繁殖優(yōu)良品種的_技術，又叫快速繁殖技術。特點：保持優(yōu)良品種的_；高效快速地實現(xiàn)種苗_。實例：利用_技術來培育蘭花。(2)作物脫毒材料：植物的_(如_)。分生區(qū)附近的病毒極少，甚至_。脫毒苗：切取莖尖進行組織培養(yǎng)獲得。優(yōu)點：使農(nóng)作物_。,離心、振動、電激,聚乙二醇(PEG),細胞壁,植物組織培養(yǎng),植物細胞的全能性,克服了遠緣雜交不親和的障礙,植物組織培養(yǎng),遺傳特性,大量繁殖,組織培養(yǎng),分生區(qū),莖尖,無病毒,增產(chǎn),鏈接教材,(3)人工種子概念：以植物組織培養(yǎng)得到的_、_、頂芽和_等為材料，經(jīng)過人工_包裝得到的種子。特點：后代無_；不受_、_和_限制。,(4)單倍體育種過程：_離體培養(yǎng)_植株正常植株優(yōu)點：得到純合子，能_；明顯_育種年限。(5)突變體的利用突變體：在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細胞一直處于不斷的_，因此容易受到_和_的影響而發(fā)生突變，由此發(fā)育而成的個體稱為突變體。,胚狀體,不定芽,腋芽,薄膜,性狀分離,氣候,季節(jié),地域,花藥,單倍體,穩(wěn)定遺傳,縮短,分生狀態(tài),培養(yǎng)條件,外界壓力,三、動物細胞培養(yǎng)1動物細胞工程常用的技術手段：_、_、_、_等，其中_技術是其他工程技術的基礎。2動物細胞培養(yǎng)(1)原理：_。(2)過程圖12373,鏈接教材,利用：從突變體中篩選出對_，進而培育成新品種，即突變體育種。(6)細胞產(chǎn)物的工業(yè)化生產(chǎn)細胞產(chǎn)物：_、脂肪、糖類、_、香料等。技術：_技術。,人們有利的突變體,蛋白質,藥物,植物組織培養(yǎng),動物細胞培養(yǎng),動物細胞核移植,動物細胞融合,生產(chǎn)單克隆抗體,動物細胞培養(yǎng),細胞增殖,胰蛋白酶,原代,傳代,溫度和pH：哺乳動物適宜溫度為_0.5，pH為_。氣體環(huán)境：_加_的混合氣體。CO2的主要作用是_。(4)應用生產(chǎn)_，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。應用于_。檢測_，判斷某種物質的毒性；用于_等方面的研究。,鏈接教材,(3)條件無菌、無毒的環(huán)境：對_和_進行_處理。通常在細胞培養(yǎng)液中還要添加一定量的_，其目的是_。此外，應定期更換培養(yǎng)液，目的是_。營養(yǎng)：_培養(yǎng)基中有糖、_、_、無機鹽、微量元素等，需加_、_等一些天然成分。,培養(yǎng)液,所有培養(yǎng)用具,無菌,抗生素,防止培養(yǎng)過程中的污染,防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成傷害,合成,氨基酸,促生長因子,血清,血漿,36.5,7.27.4,95%的空氣,5%的CO2,維持培養(yǎng)液的pH,生物制品,基因工程,有毒物質,生理、病理、藥理,3過程圖123744應用(1)加速家畜_，促進_。(2)保護_物種。(3)生產(chǎn)_。,鏈接教材,四、動物體細胞核移植技術和克隆動物1理論基礎：動物_。2概念：將動物的一個細胞的_，移入一個已經(jīng)去掉_的_中，使其重組并發(fā)育成一個新的_，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為_。,細胞核的全能性,細胞核,細胞核,卵母細胞,胚胎,克隆動物,體細胞,體細胞細胞核,去核卵母細胞,細胞融合,胚胎移植,遺傳改良進程,優(yōu)良畜群繁育,瀕危,醫(yī)用蛋白,五、動物細胞融合和單克隆抗體1動物細胞融合圖12375,鏈接教材,(4)作為異種移植的_。(5)用于組織器的_。5存在問題(1)克隆動物存在_、_、生理缺陷。(2)克隆動物食品的_也有爭議。,供體,移植,健康問題,遺傳缺陷,安全性問題,滅活的病毒,流動性,有性雜交,(2)單克隆抗體的優(yōu)點：_、_，并可大量制備。(3)單克隆抗體的應用：作為診斷試劑，具有準確、_、簡易、_的優(yōu)點；用于治療疾病和_。,2單克隆抗體的制備(1)過程圖12376,鏈接教材,骨髓瘤,體外,體內(nèi),特異性強,靈敏度高,高效,快速,運載藥物,考點一植物細胞工程,植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交,2植物體細胞雜交的三個誤區(qū)誤區(qū)1：植物體細胞雜交的結果只是形成雜種細胞。正確理解：植物體細胞雜交的結果最終要經(jīng)過組織培養(yǎng)形成雜種植株。誤區(qū)2：植物體細胞雜交屬于有性生殖。植物體細胞雜交過程中沒有有性生殖細胞的結合，因此不屬于有性生殖，應為無性生殖。誤區(qū)3：雜種植株的變異類型屬于基因重組。正確理解：雜種植株的變異類型屬于染色體變異，雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細胞染色體數(shù)目之和，雜種植株屬于異源多倍體。,12016湖北黃岡中學模擬圖12377所示為植株繁殖的四種人工方式示意圖。請據(jù)圖回答：圖12377,典例追蹤,典例追蹤,(1)圖中單倍體植株通常的獲取方式是_。若圖中單倍體細胞含2個染色體組，A過程獲得植株有4個染色體組，則過程所用化學試劑的作用是_。(2)若想在C過程中獲得突變體，進而培育成新品種植株，應用物理誘變或化學誘變的方法處理_。若要獲得水稻的“人工種子”，則應選用圖中的_結構，該結構與正常受精卵形成的_有類似的結構和發(fā)育過程。(3)若D為胡蘿卜羊角芹，過程最常用的誘導劑是_，融合依據(jù)的原理是_。在融合細胞的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的成分通常包括瓊脂、無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)和_等。,答案(1)花藥離體培養(yǎng)抑制細胞有絲分裂過程中紡錘體的形成(2)愈傷組織胚狀體胚(3)聚乙二醇(PEG)細胞膜具有一定的流動性植物激素,解析(1)圖中A過程表示單倍體育種，獲取單倍體時常用花藥離體培養(yǎng)的方法；若要使單倍體的染色體加倍，則需要在過程中用秋水仙素處理幼苗，以抑制紡錘體的形成。(2)在組織培養(yǎng)過程中獲得突變體，一般用物理誘變或化學誘變的方法處理愈傷組織，再由愈傷組織經(jīng)再分化形成突變植株；若要獲得水稻的人工種子，則應選用圖中的胚狀體結構，該結構與正常受精卵形成的胚有類似的結構和發(fā)育過程。(3)聚乙二醇(PEG)可作為動物細胞融合的誘導劑，融合依據(jù)的原理是細胞膜具有一定的流動性，在融合細胞的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的成分通常包括瓊脂、無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)和植物激素等。,22016河南洛陽一模馬鈴薯是一種重要的經(jīng)濟作物，傳統(tǒng)的繁殖方式感染病毒嚴重，導致產(chǎn)量大大降低?？蒲腥藛T利用種苗脫毒技術可有效解決這個問題，基本操作流程如下：配制培養(yǎng)基外植體的取材和消毒剝離和接種培養(yǎng)和移栽結果檢測請回答問題：(1)該技術稱為_，其理論基礎是_。(2)配制培養(yǎng)基，應加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機鹽、維生素、有機添加物等營養(yǎng)物質。蔗糖除作為碳源外，還具有_的功能。,典例追蹤,(3)利用種苗脫毒技術培育馬鈴薯，常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生芽培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)墓的主要差異是_。(4)在培育過程中，選取的外植體是_，原因是_。(5)進行培養(yǎng)時需將外植體置于25、無菌和_條件下培養(yǎng)，當試管苗長到34片葉時即可移栽。,解析(1)題中應用的是植物組織培養(yǎng)技術，其理論基礎是植物細胞具有全能性。(2)蔗糖在培養(yǎng)基中，作為碳源，并為植物生長提供營養(yǎng)和維持一定的滲透壓。(3)植物組織培養(yǎng)中需要添加生長素和細胞分裂素；不同植物激素的比例影響植物細胞發(fā)育方向，生長素與細胞分裂素的比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成，比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成，故三種不同培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的用量比例不同。(4)在培育過程中，由于莖(芽)尖分生區(qū)無病毒或低毒，因此常被選為外植體。(5)植物生長需要進行光合作用，因此，外植體置于25、無菌和光照條件下培養(yǎng)，當試管苗長到34片葉時即可移栽。,答案(1)植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性(2)提供能量和維持滲透壓(3)生長素和細胞分裂素的用量比例不同(4)莖(芽)尖莖(芽)尖分生區(qū)無病毒或低毒(5)光照,考點二動物細胞培養(yǎng)及體細胞克隆,1動物細胞培養(yǎng)中兩組概念的辨析(1)細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。(2)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)：細胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細胞核型正常。傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細胞生長、繁殖一定時間后，由于空間不足或細胞密度過大導致營養(yǎng)枯竭，影響細胞的生長，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進行分瓶擴大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。一般情況下，細胞傳至1050代后，出現(xiàn)核型異常，細胞增殖會明顯減緩，甚至完全死亡。,關于核移植的四點提醒(1)選M中期卵母細胞作為受體細胞的原因：此類細胞體積大，易于操作；卵黃多，營養(yǎng)物質豐富，可為發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；卵母細胞的細胞質中存在激發(fā)細胞核全能性表達的物質。(2)克隆動物是由重組的細胞經(jīng)培養(yǎng)而來的，該重組細胞的細胞質基因來源于受體細胞，細胞核基因來源于提供細胞核的親本，其遺傳物質來自兩個親本。(3)核移植中供體動物、提供卵母細胞的動物、代孕動物和克隆動物之間的關系：克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細胞的動物相同，與代孕動物的性狀無遺傳關系。(4)動物體細胞核移植技術(克隆)從生殖方式的角度看屬無性生殖，重組細胞相當于受精卵，需要動物細胞培養(yǎng)和胚胎工程技術的支持。,典例追蹤,12016山東泰安一模美國科學家已經(jīng)在實驗室中成功培育出膀胱，并順利移植到7名患者體內(nèi)。這種技術為那些急需器官移植的患者帶來福音。回答下列問題：(1)科學家從患者的膀胱上取下一小塊活細胞樣本，將其中的肌肉細胞和膀胱上皮細胞分別置于不同的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。在培養(yǎng)之前，需用_處理以分散細胞，細胞在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)過程屬于_代培養(yǎng)。與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，其培養(yǎng)基的主要不同點是含有_。(2)約一周后將培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞放在由膠原質制成的“支架”上繼續(xù)培養(yǎng)，再過7周左右，原先的數(shù)萬個細胞已經(jīng)繁殖到15億個左右，布滿“支架”，膀胱上皮在內(nèi)，肌肉在外，形成“新膀胱”。細胞數(shù)目大量增加，其增殖方式是_；由這些細胞再形成肌肉和膀胱上皮的過程中要經(jīng)過_。,(3)醫(yī)生將“新膀胱”移植到患者膀胱的上面，這樣新器官會繼續(xù)生長并與老器官“重組”取代老器官中喪失功能的部分。新器官與老器官的“重組”_(填“是”或“不是”)基因重組；“新膀胱”移植后，_(填“會”或“不會”)引起免疫排斥反應。(4)除上述方法外，還可將患者的體細胞核移入去核的_中，利用體細胞_技術，形成相應組織、器官用于疾病的治療。,典例追蹤,解析(1)在動物細胞培養(yǎng)之前，需用胰蛋白酶(膠原蛋白酶)處理以分散細胞，使細胞變成單層，細胞在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)過程屬于原代培養(yǎng)；與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，其培養(yǎng)基的主要不同點是含有動物血清等。(2)細胞數(shù)目大量增加，其增殖方式是有絲分裂；由這些細胞再形成肌肉和膀胱上皮的過程中要經(jīng)過細胞分化。(3)基因重組是指在生物體進行有性生殖的過程中，控制不同性狀的非等位基因重新組合，故新器官與老器官的“重組”不是基因重組；“新膀胱”是由患者自身細胞分化形成，移植后，不會引起免疫排斥反應。(4)可將患者的體細胞核移入去核的卵母細胞中，利用體細胞核移植技術，形成相應組織、器官用于疾病的治療。,答案(1)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)原動物血清等(2)有絲分裂細胞分化(3)不是不會(4)卵母細胞核移植,22016甘肅隴南模擬現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細胞組成可表示為A細胞核、A細胞質，B品種牛則為B細胞核、B細胞質。請回答：(1)如果要獲得一頭克隆牛，使其細胞由A細胞核和B細胞質組成，基本步驟是從A品種牛體內(nèi)取出體細胞的_，進行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細胞中取出注入B品種牛的_卵母細胞，經(jīng)過某種刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為_，將該胚胎移入代孕母牛的_中，通過培育可達到目的。,典例追蹤,(2)一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細胞的數(shù)量_，為解決這一問題，可以用_激素處理B品種母牛。(3)克隆牛的產(chǎn)生說明_具有全能性。克隆牛的性狀主要表現(xiàn)_品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細胞核的遺傳物質來自_個親本，細胞質來自_性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質組成_(填“相同”或“不同”)。,解析(1)利用核移植技術制備克隆牛的基本步驟是對A品種牛的體細胞進行培養(yǎng)，取出細胞核注入B品種牛的去核卵母細胞，經(jīng)過刺激和培養(yǎng)后獲得重組胚胎，移入代孕母牛的子宮中，通過培育可達到目的。(2)一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細胞的數(shù)量不足，為解決這一問題，可以用促性腺激素處理B品種母牛，使其超數(shù)排卵。(3)克隆牛的產(chǎn)生說明動物體細胞核具有全能性；由于克隆牛的細胞核來自于A品種牛，因此其性狀主要表現(xiàn)A品種牛的特征；由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛是通過精子和卵細胞受精后發(fā)育而來，因此細胞核的遺傳物質來自兩個親本，細胞質來自雌性親本，因此克隆牛和雜交牛的遺傳物質組成不同。,答案(1)細胞核去核重組胚胎子宮(2)不足促性腺(3)動物體細胞核A兩雌不同,考點三動物細胞融合及單克隆抗體,1動物細胞培養(yǎng)中兩組概念的辨析,2單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的,12016廣東佛山二模癌胚抗原(CEA)是某些癌細胞表面產(chǎn)生的一種糖蛋白，臨床上通過制備CEA的單克隆抗體來診斷癌癥?；卮鹣铝袉栴}：(1)制備CEA的單克隆抗體時，首先將_注入小鼠體內(nèi)，使小鼠產(chǎn)生免疫反應。然后從產(chǎn)生免疫反應小鼠脾臟中獲取_細胞，將其與骨髓瘤細胞融合，該融合過程所利用的基本原理是_，因為融合率不是100%，且融合過程具有_性，所以要對融合后的細胞進行篩選，篩選出的雜交瘤細胞還要經(jīng)過多次篩選，最終獲得_(答兩個特點)的雜交瘤細胞。(2)獲得雜交瘤細胞后，將其注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，之后從中提取大量CEA抗體。CEA單克隆抗體具有的三個主要優(yōu)點是_。(3)CEA單克隆抗體與抗癌藥物偶聯(lián)后，可以使抗癌藥物定向作用于癌細胞，該過程所利用的免疫學原理為_。,典例追蹤,解析(1)制備CEA的單克隆抗體時，首先將癌胚抗原(CEA)注入小鼠體內(nèi)，使小鼠產(chǎn)生免疫反應；然后從產(chǎn)生免疫反應小鼠脾臟中獲取B淋巴細胞(或漿細胞)，將其與骨髓瘤細胞融合，該融合過程依賴于細胞膜的流動性，因為融合率不是100%，且融合過程具有隨機性，所以要對融合后的細胞進行篩選，篩選出的雜交瘤細胞還要經(jīng)過多次篩選，最終獲得的雜交瘤細胞既能產(chǎn)生CEA抗體，又能無限增殖。(2)獲得雜交瘤細胞后，將其注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，之后從中提取大量CEA抗體；CEA單克隆抗體具有的三個主要優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量生產(chǎn)。(3)CEA單克隆抗體與抗癌藥物偶聯(lián)后，可以使抗癌藥物定向作用于癌細胞，該過程所利用的免疫學原理為抗原和抗體的特異性結合。,答案(1)癌胚抗原(CEA)B淋巴(或漿細胞)細胞膜的流動性隨機既能產(chǎn)生CEA抗體，又能無限增殖(2)特異性強、靈敏度高、可大量生產(chǎn)(3)抗原和抗體的特異性結合,典例追蹤,22016河南頂級名校二模圖12378為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖問答：圖12378(1)植物細胞工程常用的技術手段有_。動物細胞工程的各技術手段中的基礎是_。(2)若圖中A、B是植物細胞，在細胞融合之前應用_處理，除去_；A、B到細胞C的過程中，常用的化學方法是_；融合完成的標志是_。,典例追蹤,(3)與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導融合的方法是用_處理。(4)若利用動物細胞融合技術來生產(chǎn)單克隆抗體，應采用_和_兩種細胞進行融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用_進行，第二次篩選需對細胞進行反復的_，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。(5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點是_。,答案(1)植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交動物細胞培養(yǎng)(2)纖維素酶、果膠酶細胞壁PEG誘導再生出細胞壁(3)滅活的病毒(4)經(jīng)免疫的B細胞骨髓瘤細胞選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗(5)節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等,解析(1)植物細胞工程常用的技術手段有植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交；動物細胞工程的各技術手段中的基礎是動物細胞培養(yǎng)。(2)植物體細胞雜交前，先采用酶解法去除細胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細胞壁；誘導細胞融合常用的化學方法是PEG誘導；原生質體融合完成的標志是再生出細胞壁。(3)誘導原生質體融合的方法有物理法(離心、振動、電激等)、化學法(聚乙二醇)，誘導動物細胞融合的方法有物理法(離心、振動、電激等)、化學法(聚乙二醇)和生物法(滅活的病毒)，故與植物細胞相比，動物細胞融合特有的誘導融合的方法是用滅活的病毒處理。,(4)若利用動物細胞融合技術來生產(chǎn)單克隆抗體，應將經(jīng)免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到能產(chǎn)生特異抗體的雜交瘤細胞，第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進行，第二次篩選需對細胞進行反復的克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗，以篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。(5)少量生產(chǎn)單克隆抗體時，可將篩選得到的雜交瘤細胞注入小鼠腹腔內(nèi)繁殖，該方法的優(yōu)點是節(jié)約培養(yǎng)基(成本)，易于控制培養(yǎng)條件等。,12016全國卷圖12379表示通過核移植等技術獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程。圖12379回答下列問題：(1)圖中A表示正常細胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為_。過程表示去除細胞核，該過程一般要在卵母,細胞培養(yǎng)至適當時期再進行，去核時常采用_的方法。代表的過程是_。(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細胞中_的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須關注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質的角度分析其原因是_。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了_。,答案(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(3)卵母細胞的細胞質中的遺傳物質會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響(4)動物已分化體細胞的細胞核具有全能性,解析(1)二倍體哺乳動物的性別決定方式為XY型，A的性別未知，其性染色體組成可能為XX，也可能為XY。核移植時，要通過顯微操作去除卵母細胞中的核。早期胚胎可通過胚胎移植移入受體子宮中。(2)一般來說，細胞傳代培養(yǎng)至1050代左右時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的細胞核型可能會發(fā)生變化。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內(nèi)，以保持細胞正常的二倍體核型。(3)克隆動物的遺傳物質主要來自于供體核，但卵母細胞的線粒體中也含有一部分遺傳物質。(4)克隆動物的成功獲得證明動物已分化體細胞的細胞核具有全能性。,22014新課標全國卷某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價(能檢測出抗原抗體反應的血清最大稀釋倍數(shù))，結果如圖123710所示。圖123710若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞(染色體數(shù)目60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙,二醇誘導細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞。回答下列問題：(1)制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過_次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是_小鼠，理由是_。(2)細胞融合實驗完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有_，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是_。(3)雜交瘤細胞中有_個細胞核，染色體數(shù)目最多是_條。(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是_。,答案(1)四YY小鼠的血清抗體效價最高(2)B淋巴細胞相互融合形成的細胞、骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%(3)1100(4)不能無限增殖,解析(1)據(jù)圖分析，第四次免疫后小鼠Y的血清抗體效價達到16000以上。達到要求后的X、Y、Z這3只小鼠中，小鼠Y的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體效價最高，最適合用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細胞和雜交瘤細胞之外，還有骨髓瘤細胞和B淋巴細胞的自身融合產(chǎn)物，由于細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，故體系中會出現(xiàn)多種類型的細胞。(3)雜交瘤細胞形成后，由于核膜具有流動性，故小鼠的免疫B淋巴細胞細胞核與其骨髓瘤細胞細胞核會融合形成一個雜交的細胞核，因此染色體數(shù)目最多是100條。(4)未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然是不能無限增殖的細胞，同時B淋巴細胞不可能渡過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)過程中的兩次“危機”而達到細胞系水平。,32013新課標全國卷甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用_酶和_酶去除細胞壁，獲得具有活力的_，再用化學誘導劑誘導二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成_組織，然后經(jīng)過_形成完整的雜種植株。這種培育技術稱為_。,(2)上述雜種植株屬于多倍體，多倍體是指_。假設甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是_。(3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的_等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。,答案(1)纖維素果膠原生質體愈傷再分化(或分化)植物體細胞雜交技術(2)體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會異常，而后者染色體聯(lián)會正常(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽,解析本題考查的是植物組織培養(yǎng)技術和植物體細胞雜交技術的相關知識。(1)若培育同時含有A和B的新型植物，可以選用植物體細胞雜交技術。由于細胞壁阻礙不同種細胞間的雜交，而其主要成分是纖維素和果膠，因此先用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除，得到的結構稱作原生質體。誘導融合成功后，在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可形成愈傷組織，之后進行再分化(或分化)培養(yǎng)，可再生出小植株，即可獲得雜種植株。(2)多倍體的細胞中含有三個或三個以上的染色體組，此雜種植株有來自甲和乙的全部染色體，甲、乙均為二倍體，因此雜種植株共四個染色體組，是多倍體植物。雜種植株具有甲、乙兩種植株的全部染色體，其中有來自甲的同源染色體和來自乙的同源染色體，減數(shù)分裂時可發(fā)生聯(lián)會，因此可育，而二者有性雜交的后代只含有甲的一組染色體和乙的一組染色體，互不相同，沒有同源染色體，減數(shù)分裂中聯(lián)會異常，因此不育。(3)人工種子是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料經(jīng)人工薄膜包裝得到的。,1科學家利用植物體細胞雜交技術成功獲得了番茄馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細胞的篩選和鑒定，科學家利用紅色熒光和綠色熒光分別標記番茄和馬鈴薯的原生質體膜上的蛋白質，其培育過程如圖所示：(1)植物體細胞雜交依據(jù)的生物學原理有_。,(2)過程常用的酶是_，細胞融合完成的標志是_。(3)植物原生質體融合過程常利用化學試劑_誘導融合，在鑒定雜種原生質體時可用顯微鏡觀察，根據(jù)細胞膜表面熒光的不同可觀察到_種不同的原生質體，當觀察到_時可判斷該原生質體是由番茄原生質體和馬鈴薯原生質體融合而成的。(4)過程和過程依次為_，過程的培養(yǎng)基中常添加的植物激素是_。(5)若番茄細胞內(nèi)有m條染色體，馬鈴薯細胞中含n條染色體，則“番茄馬鈴薯”細胞在有絲分裂后期含_條染色體。若雜種細胞培育成的“番茄馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培育得到的植株屬于_植株。,答案(1)細胞膜的流動性、植物細胞的全能性(2)纖維素酶和果膠酶形成了新的細胞壁(3)聚乙二醇(或PEG)3原生質體表面既有紅色熒光又有綠色熒光(4)脫分化和再分化生長素和細胞分裂素