儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法

1、儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法一、外標(biāo)一點(diǎn)法【含量測(cè)定】芍藥苷照高效液相色譜法 (附錄d)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ;以甲醇 -0、05moll 磷酸二氫鉀溶液 (40:65)為流動(dòng)相 ;檢測(cè)波長(zhǎng)為 230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000。對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)五氧化二磷減壓干燥器中干燥 36小時(shí)的芍藥苷對(duì)照品適量 ,精密稱(chēng)定 ,加甲醇制成每 1ml 含 0、5mg 的溶液 ,即得。供試品溶液的制備 取本品粗粉約 0、5g,精密稱(chēng)定 ,置具塞錐形瓶中 ,精密加入甲醇 25ml,稱(chēng)定重量 ,浸泡 4 小時(shí) ,超聲處理 20 分鐘 ,放冷 ,再稱(chēng)定重

2、量 ,用甲醇補(bǔ)足減失的重量 ,搖勻 ,濾過(guò) ,取續(xù)濾液 ,即得。測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 10l,注入液相色譜儀 ,測(cè)定 ,即得。本品含芍藥苷 (c23h28o11)不得少于 1、8。解 :設(shè)測(cè)得對(duì)照品溶液與供試品溶液峰面積為 a 對(duì)=550000 a 樣 =7800已知對(duì)照品溶液濃度c 對(duì)=0、5mg/mlc樣a樣 (c對(duì) )7800 （0.5mg / ml） 0.0071mg / mla對(duì)550000m 樣25ml1000c 樣 v 樣 0.0071 mg / ml 10 l177 .5mg10l供試品中芍藥苷的含量177 .5 mgx%=100 % 35 .5%0 .

3、5 g 1000藥典規(guī)定藥材含芍藥苷 (c23h28o11)不得少于 1、8,供試品中芍藥苷的含量為 35、5%,故供試品藥材合格。二、外標(biāo)兩點(diǎn)法儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法【含量測(cè)定】黃芪甲苷照高效液相色譜法 (附錄 d)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈 -水 (32:68)為流動(dòng)相 ;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 4000。對(duì)照品溶液的制備取黃芪甲苷對(duì)照品適量 ,精密稱(chēng)定 ,加甲醇制成每 1ml 含0、5mg 的溶液 ,即得。供試品溶液的制備 取本品中粉約 4g,精密稱(chēng)定 ,置索氏提取器中 ,加甲醇40ml,冷浸過(guò)夜 ,再加甲醇適

4、量 ,加熱回流 4 小時(shí) ,提取液回收溶劑并濃縮至干 ,殘?jiān)铀?10ml,微熱使溶解 ,用水飽與的正丁醇振搖提取 4 次,每次 40ml,合并正丁醇液 , 用氨試液充分洗滌 2 次,每次 40ml,棄去氨液 ,正丁醇液蒸干 ,殘?jiān)铀?5ml 使溶解 , 放冷 ,通過(guò) d101 型大孔吸附樹(shù)脂柱 (內(nèi)徑為 1、5cm,柱高為 12cm),以水 50ml 洗脫 , 棄去水液 ,再用 40乙醇 30ml 洗脫 ,棄去洗脫液 ,繼用 70乙醇 80ml 洗脫 ,收集洗脫液 ,蒸干 ,殘?jiān)蛹状既芙?,轉(zhuǎn)移至 5ml 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,搖勻 ,即得。測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液 10l、2

5、0l,供試品溶液 20l,注入液相色譜儀 ,測(cè)定 ,用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算 ,即得。本品按干燥品計(jì)算 ,含黃芪甲苷 (c41h68o14)不得少于 0、040。解 :設(shè)測(cè)得對(duì)照品溶液色譜峰面積分別為 a 1=259457 a 2=523039,測(cè)得供試品溶液色譜峰面積 a 3=2983。已知對(duì)照品濃度c 對(duì) =0、5mg/ml,對(duì)照品進(jìn)樣量m10.5mg / ml10l0.005mg5gm 20.5mg / ml20l0.01mg10g根據(jù)對(duì)照品峰面積與進(jìn)樣量可得如下圖所示方程即y=2、 6e+5x-4125,得 a=2、6e-4125,b=5儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法60000050000

6、0y = 2.6e+5x-4125.0積 400000進(jìn)樣量面 300000峰面積峰 200000線性 ( 峰面積)100000000.511.522.5進(jìn)樣量供試品溶液峰面積 a 3=2983、帶入方程 ,得到供試品溶液進(jìn)樣量 m3=1420g=0、 00142g供試品中黃芪甲苷含量為5ml10000.00142 gl20x %100% 8.875%4g藥典中規(guī)定藥材干燥品種含黃芪甲苷(c41h68o14)不得少于0、040 ,供試品中黃芪甲苷含量為 8、875%。故供試品藥材合格。三、內(nèi)標(biāo)法【含量測(cè)定】照氣相色譜法 ( 附錄 e) 測(cè)定。色譜條件與系 統(tǒng)適用性試驗(yàn) 聚乙二醇 20000(p

7、eg-20m)毛細(xì)管柱 ( 柱長(zhǎng)為30m,內(nèi)徑為 0、53mm,膜厚度為 1、0m), 柱溫為 160。理論板數(shù)按樟腦峰計(jì)算應(yīng)不低于 20 000 。校正因子的測(cè)定取萘適量 , 精密稱(chēng)定 , 加無(wú)水乙醇制成每作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取樟腦對(duì)照品、薄荷腦對(duì)照品、冰片對(duì)照品各1ml 含 4mg的溶液 ,30mg、 10mg、20mg,精密稱(chēng)定 , 置同一 50ml 量瓶中 , 精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5ml, 加無(wú)水乙醇稀釋至刻度 , 搖勻 , 吸取 l l, 注入氣相色譜儀, 計(jì)算校正因子。測(cè)定法精密量取本品1ml, 置 50ml 量瓶中 , 精密加入內(nèi)標(biāo)溶液 5ml, 加無(wú)水乙醇稀釋至刻度 , 搖勻 , 吸取

8、 1l, 注入氣相色譜儀 , 測(cè)定 , 冰片以龍腦峰、異龍腦峰面積之與計(jì)算 , 即得。本品每 1ml 中含樟腦 (c10h16o)應(yīng)為 25、534、5mg;含薄荷腦 (c10h20o)應(yīng)為 8、511、5mg,含冰片 (c10h18o)應(yīng)為 17、 0 23、0mg。儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法解 : ( 1) 校正因子的測(cè)定設(shè)測(cè)得萘及樟腦、薄荷腦、冰片對(duì)照品溶液的峰面積分別為 a 萘=180000,a 樟腦 =450000,a 薄荷腦 =500000,a 冰片 =520000。由題已知萘及各對(duì)照品溶液濃度分別為 c 萘 =4mg/ml,c 樟腦 =0、6mg/ml,c 薄荷腦 =0、2mg/

9、mlc冰片 =0、 4mg/ml。a內(nèi)據(jù)公式 fc內(nèi)可得a對(duì) c對(duì)a萘c萘180000f樟腦4mg / ml0.17a樟腦樟腦450000c0.6mg / mla萘180000f薄荷腦c萘4mg / ml0.45a薄荷腦薄荷腦500000c0.2mg / mla萘c萘180000f冰片4mg / ml0.22a冰片冰片520000c0.4mg / ml(2) 含量測(cè)定 已知 c萘=4mg/l,f 樟腦 =0、17,f 薄荷腦 =0、45,f 冰片 =0、22。設(shè)測(cè)得各物質(zhì)的峰面積及萘的峰面積分別為a 萘 =180000,a 樟腦 =135980,a 薄荷腦=20780,a 冰片 =99870據(jù)公式 c樣f ?a樣可得a內(nèi)c內(nèi)c 樟腦a樟腦135980f 樟腦 ?0.17 ?50 25.69 mg / mla萘萘180000c4mg / mlc 薄荷腦f薄荷腦 ?a薄荷腦0.45 ?2078050 10 .39 mg / mla萘萘180000c4mg / ml儀器分析作業(yè)題外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法c 冰片a冰片0.22 ?99870f冰片 ?18 .86 mg / mla萘萘180000c4