毛細(xì)管等速電泳

1、等速電泳所要求的條件:1.特殊的電解質(zhì)系統(tǒng):在毛細(xì)管等速電泳中，用有效淌度比樣品中任何離子的 有效淌度都大，并具有一定緩沖能力的離子作為it旻電 解質(zhì)(leading electrolyte ),加入到末端(檢測(cè)端)電解 槽和毛細(xì)管中，用有效淌度比樣品中任何離子的有效淌 度都小，并具有一定緩沖能力的離子作為尾隨電解質(zhì) (terminating electrolyte )加入起始端電解槽中.樣品加 在前導(dǎo)電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)之間.系統(tǒng)中要加入對(duì)離子, 以滿(mǎn)足電中性的要求.區(qū)帶電泳和等速電泳使用的電解質(zhì)溶液的不同在區(qū)帶電泳中，整個(gè)系統(tǒng)都用同一種電解質(zhì)充 滿(mǎn)，這種電解質(zhì)被稱(chēng)為背景電解質(zhì)或支持電解 質(zhì)。

2、它運(yùn)載電流并有一定的緩沖能力。在等速電泳中，不加入這樣的背景電解質(zhì)。2. 背景電流要小到足以克服區(qū)帶電泳效應(yīng)在毛細(xì)管等速電泳中，由于沒(méi)有一個(gè)背景電解質(zhì)支持電流（毛細(xì)管等速電泳要求溶劑的自身電導(dǎo)可以忽略不計(jì)） 相連接.，各區(qū)帶互Inject sample and bufferssCathodeBCathodeSolute MixtureTerminatingBufferTermin atingBufferLeadingBuffer田AnodeApply electric field.Anodel_ Separated r Sblutes 毛細(xì)管等速電泳一般用恒流操作模式.分離開(kāi)始后，在電壓的作用

3、下，各組分由于淌度的 不同被分離.系統(tǒng)通電后，樣品中遷移速度最大的離子運(yùn)動(dòng)最快，但慢于前導(dǎo) 電解質(zhì).遷移速度最小的離子運(yùn)動(dòng)最慢,但快于尾隨電解質(zhì), 具有不同淌度的離子得到分離。恒穩(wěn)態(tài)時(shí)所有區(qū)帶具有相同的移動(dòng)速度瞬聰B cr則各rL=FA=FB=FC=rT或：ll =如耳= Abb=Acc = Att式中，“，有效淌度，Ef電場(chǎng)強(qiáng)度/zll = Zzaa = Abb = Acc = Zztt由于l“abc“T， 所以有：El巧叭 t 需鶴噩鞋不同。前導(dǎo)電解質(zhì)區(qū)毛細(xì)管等速電泳的特點(diǎn)1自銳化效應(yīng):若某一區(qū)帶的離子進(jìn)入前一區(qū)帶，由于JIJIJ電場(chǎng)強(qiáng)度變小而減速，由若進(jìn)入到下區(qū)帶，由于電場(chǎng)強(qiáng)度變大而加速

4、,都退回到原區(qū)帶，結(jié)果導(dǎo)致各區(qū)帶形成鮮明的界JIJIJ面.2.濃度特征對(duì)于含有陰離子Al的區(qū)帶和含有陰離子B2防I護(hù)g窺和 二 Cq,2在等速電泳中，/=相同值（電流值在各處相同），而兩區(qū)帶速度相等：勺二#2或，Aa1=AB2可變?yōu)椋篍JEig根據(jù)歐姆定律，i = e1=e2a2（2為電導(dǎo)），電導(dǎo)取決與溶質(zhì)有效淌度和濃度:心（C出+ CpPp）F式中，2電導(dǎo)；F-法拉第常數(shù)；G和Cp分別為樣品和對(duì)離子濃度;“和竹分別為樣品和對(duì)離子淌度.Ca,i 與 Cq,i 相等，5每個(gè)區(qū)帶的電導(dǎo)可寫(xiě)為:A= Ca, 1 aF + Cq, i q F 兄2=。B, 2 血尸 + Cq, 2 “Q 尸Z與Cq,

5、 2相等=Ca,洱（a+ 氏），=C B, 2尸（曲 + “Q），在等速電泳中，z =常數(shù)（不同區(qū)帶電流相同），/ = EZ/所以CA / (“a+ “Q)= E c B, 2尸(“B + “Q)將上式變化，得到:Ecb,2 = ca七2(“a+“q)(Ab+Aq)因?yàn)?，EJE亍氏I %,所以,r_廠 “E (Aa+Aq)S,2 _ 匕 A,1； C“a(“e+“q)_廠址儀a+他）C B,2 - C A,1；C厶（處+他）任意區(qū)帶的組分濃度Cj與前導(dǎo)離子濃度Cl和有關(guān) 離子的有效淌度有關(guān).對(duì)特定分析，各區(qū)帶濃度為一 定值，并和前導(dǎo)離子的濃度有關(guān)，與樣品原始濃度無(wú) 關(guān).區(qū)帶長(zhǎng)度反映了進(jìn)樣量的大

6、小，構(gòu)成定量的根據(jù).電導(dǎo)取決與有效淌度和濃度：九= (C./. + Cp/p)F品和對(duì)離子濃度;“和竹分別為樣品和對(duì)離子淌度.式中，九電導(dǎo)率；F-法拉第常數(shù)；q和Cp分別為樣由于各區(qū)帶濃度基本相同，而離子淌度依次遞減，所以電導(dǎo)呈階梯遞減，電阻 呈階梯上升.電場(chǎng)強(qiáng)度和溫度與區(qū)帶電阻成正比:ExIR，TccI2R,在恒電流操作的毛細(xì)管等速電泳中，電阻呈階梯上升E，T也呈階梯上升.由于等速電泳具有濃縮痕量組分的作用，常 和區(qū)帶電泳耦合，用于區(qū)帶電泳的濃縮進(jìn)樣1. 對(duì)接式耦合2. 套接式耦合3. 單毛細(xì)管ITP - CZE對(duì)接式耦合A BT!l5二2_11TPZE對(duì)接式胎住鋪及工作魄示酬 A進(jìn)行ITP分離（在ITP勸B. 除去琳戍分血C.