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文檔簡介

1、1.生物產(chǎn)品的分離包括 不溶物的去除,產(chǎn)物分離,純化和精制。 2.發(fā)酵液常用的固液分離方法有 離心 和 過濾 等。3.離心設(shè)備從形式上可分為 管式,套筒式,碟片式 等型式。4.膜分離過程中所使用的膜,依據(jù)其膜特性(孔徑)不同可分為 微濾膜,超濾膜,納濾膜 和 反滲透膜;5.多糖基離子交換劑包括 葡聚糖離子交換劑 和 離子交換纖維素 兩大類。6.工業(yè)上常用的超濾裝置有 板式,管式,螺旋卷式 和 中空纖維式7.影響吸附的主要因素有 吸附劑的性質(zhì),吸附質(zhì)的性質(zhì),溫度,溶液pH值,鹽濃度 ,吸附物濃度 和 吸附劑用量8.離子交換樹脂由 載體,活性基團(tuán) 和 可交換離子 組成。9.電泳用凝膠制備時,過硫酸

2、銨的作用是 引發(fā)劑;甲叉雙丙烯酰胺的作用是 交聯(lián)劑;TEMED的作用是 增速劑;10.影響鹽析的因素有 溶質(zhì)種類,溶質(zhì)濃度,pH值 和 溫度;11.在結(jié)晶操作中,工業(yè)上常用的起晶方法有 自然起晶法,刺激起晶法 和 晶種起晶法;12.簡單地說,離子交換過程實際上只有 外部擴散,內(nèi)部擴散 和 化學(xué)交換反應(yīng) 三個步驟;13.在生物制品進(jìn)行吸附或離子交換分離時,通常遵循Langmuir吸附方程,其形式為Qq0C/(k+C)14.反相高效液相色譜的固定相是 非極性 的,而流動相是 極性 的;常用的固定相有 C18 和 C8;常用的流動相有 甲醇 和 乙睛;15.超臨界流體的特點是與氣體有相似的 粘度(擴

3、散系數(shù)) ,與液體有相似的 密度; 16.離子交換樹脂的合成方法有 共聚(加聚) 和 均聚(縮聚)兩大類; 17.常用的化學(xué)細(xì)胞破碎方法有 滲透壓沖擊,增溶法,脂溶法,酶消化法 和 堿處理法;18.等電聚焦電泳法分離不同蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)其等 電點(pI)的不同;19.離子交換分離操作中,常用的洗脫方法有 pH梯度 和 離子強度(鹽)梯度;20.晶體質(zhì)量主要指 晶體大小,晶體性狀 和 晶體純度 三個方面;4. 親和吸附原理包括 吸附介質(zhì)的制備,吸附 和 洗脫 三步。11.根據(jù)分離機理的不同,色譜法可分為 吸附色譜,分配色譜,離子交換色譜 和 凝膠色譜。12.鹽析實驗中用于關(guān)聯(lián)溶質(zhì)溶解度與鹽濃度

4、的Cohn方程為 lgSKsI;當(dāng) 保持體系溫度、pH值不變,僅改變?nèi)芤弘x子強度進(jìn)行的鹽析操作 稱為Ks鹽析法;當(dāng) 保持離子強度不變,改變溫度、pH值進(jìn)行的鹽析操作 稱為鹽析法。13.過飽和溶液的形成方式有:熱飽和溶液冷卻,蒸發(fā)溶劑,真空蒸發(fā)冷卻,化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶 和 鹽析。14. 蛋白質(zhì)分離常用的色譜法有 金屬螯合色譜 ,共價色譜 , 離子交換色譜 和 疏水作用色譜。17. SDS PAGE電泳制膠時,加入十二烷基磺酸鈉(SDS)的目的是消除各種待分離蛋白的 電荷 和 分子形狀 差異,而將 分子量 作為分離的依據(jù)。19.高效液相色譜分離方法中,液-液色譜是以 液體 作為流動相;以 固定在固相載體

5、表面的液體 作為固定相。20. 常用的蛋白質(zhì)沉析方法有 鹽析,等電點沉析 和 有機溶劑沉析。1.在細(xì)胞分離中,細(xì)胞的密度S越大,細(xì)胞培養(yǎng)液的密度L越小,則細(xì)胞沉降速率越大。2.表示離心機分離能力大小的重要指標(biāo)是C。A.離心沉降速度B.轉(zhuǎn)數(shù)C.分離因數(shù)D.離心力3.過濾中推動力要克服的阻力有介質(zhì)阻力和濾餅阻力,其中濾餅占主導(dǎo)作用。4.簡答:對微生物懸浮液的分離(過濾分離),為什么要緩慢增加操作壓力?5.判斷并改錯:在恒壓過濾中,過濾速率會保持恒定。()改:不斷下降。6.簡答:提高過濾效率的手段有哪些?7.判斷并改錯:生長速率高的細(xì)胞比生長速率低的細(xì)胞更難破碎。()改:更易破碎。8.簡答:采用哪種

6、方法破碎酵母能達(dá)到較高的破碎率?9.簡答:蛋白質(zhì)復(fù)性收率低的主要原因是什么?10.簡答:常用的包含體分離和蛋白質(zhì)復(fù)性的工藝路線之一。11.B可以提高總回收率。A.增加操作步驟B.減少操作步驟C.縮短操作時間D.降低每一步的收率12.重力沉降過程中,固體顆粒不受C的作用。A.重力B.摩擦力C.靜電力D.浮力13.過濾的透過推動力是D。A.滲透壓B.電位差C.自由擴散D.壓力差14.在錯流過濾中,流動的剪切作用可以B。A.減輕濃度極化,但增加凝膠層的厚度B.減輕濃度極化,但降低凝膠層的厚度C.加重濃度極化,但增加凝膠層的厚度D.加重濃度極化,但降低凝膠層的厚度15.目前認(rèn)為包含體的形成是部分折疊的

7、中間態(tài)之間A相互作用的結(jié)果。A.疏水性B.親水性C.氫鍵D.靜電16.判斷并改錯:原料目標(biāo)產(chǎn)物的濃度越高,所需的能耗越高,回收成本越大。()改:原料目標(biāo)產(chǎn)物的濃度越低。17.菌體和動植物細(xì)胞的重力沉降操作,采用D手段,可以提高沉降速度。A.調(diào)整pHB.加熱C.降溫D.加鹽或絮狀劑18.撞擊破碎適用于D的回收。A.蛋白質(zhì)B.核酸C.細(xì)胞壁D.細(xì)胞器19.重力沉降過程中,固體顆粒受到重力,浮力,摩擦阻力的作用,當(dāng)固體勻速下降時,三個力的關(guān)系重力=浮力+摩擦阻力。20.為了提高最終產(chǎn)品的回收率:一是提高每一級的回收率,二是減少操作步驟。21.評價一個分離過程效率的三個主要標(biāo)準(zhǔn)是:濃縮程度分離純化程度

8、回收率。22.區(qū)帶離心包括差速區(qū)帶離心和平衡區(qū)帶離心。23.差速區(qū)帶離心的密度梯度中最大密度B待分離的目標(biāo)產(chǎn)物的密度。A.大于B.小于C.等于D.大于或等于24.簡答:管式和碟片式離心機各自的優(yōu)缺點。25.單從細(xì)胞直徑的角度,細(xì)胞越小,所需的壓力或剪切力越大,細(xì)胞越難破碎。 1.防止蛋白質(zhì)沉淀的屏障有 蛋白質(zhì)周圍的水化層 和 雙電層 。 2.判斷:當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)周圍雙電層的點位足夠大時,靜電排斥作用抵御蛋白質(zhì)分子之間的分子間力,使蛋白質(zhì)溶液處于穩(wěn)定狀態(tài)而難以沉淀。() 3.降低蛋白質(zhì)周圍的 水化層 和 雙電層 厚度,可以破壞蛋白質(zhì)溶液的穩(wěn)定性,實現(xiàn)蛋白質(zhì)沉淀。 3 4.常用的蛋白質(zhì)沉淀方法有: 鹽析

9、 沉淀, 等電點 沉淀, 有機溶劑 沉淀。 5.判斷并改錯:蛋白質(zhì)水溶液中離子強度在生理離子強度(0.150.2molkg-1)之外,蛋白質(zhì)的溶解度降低而發(fā)生沉淀的現(xiàn)象稱為鹽析。()改:離子強度處于高離子強度時。 6.在Cohn方程中,logS=-KsI中,鹽析常數(shù)Ks反映 C 對蛋白質(zhì)溶解度的影響。 A.操作溫度 B.pH值 C.鹽的種類 D.離子強度 7.在Cohn方程中,logS=-KsI中,常數(shù)反映 B 對蛋白質(zhì)溶解度的影響。 A.無機鹽的種類 B.pH值和溫度 C.pH值和鹽的種類 D.溫度和離子強度 8.Cohn方程中,Ks越 大 ,值越 小 ,鹽析效果越好。 9.蛋白質(zhì)溶液的pH

10、接近其等電點時,蛋白質(zhì)的溶解度 B 。 A.最大 B.最小 C.恒定 D.零 10.蛋白質(zhì)溶液的pH在其等電點時,蛋白質(zhì)的靜電荷數(shù) 為0 。 11.判斷并改錯: 在高離子強度時,升溫會使蛋白質(zhì)的溶解度下降,有利于鹽析沉淀,因此常采用較高的操作溫度。()改:只在離子強度較高時才出現(xiàn)。 12.判斷并改錯: 利用在其等電點的溶液中蛋白質(zhì)的溶解度最低的原理進(jìn)行分離,稱為等電點沉淀,而不必考慮溶液的離子濃度的大小。()改:在低離子強度條件下。 13.等電點沉淀的操作條件是 低離子強度 和 pH=pI 。 14.判斷并改錯: 無論是親水性強,還是疏水性強的蛋白質(zhì)均可采用等電點沉淀。()改:適用于疏水性強的蛋白質(zhì)(酪蛋白)。 15.有機溶劑沉淀時,蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量越 大 ,則有機溶劑用量越 少 ;在溶液等電點附近,則溶劑用量越 少 。 16.變性活化能 A 的蛋白質(zhì)可利用熱沉淀法分離。 A.相差較大 B.相差較小 C.相同 D.相反 17.在相同的離子強度下,不同種類的鹽對蛋白質(zhì)鹽析的效果不同,一般離子半徑 A 效果好。 4 A.小且?guī)щ姾奢^

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