專題22動(dòng)物細(xì)胞工程

1、專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程,2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖,原理：細(xì)胞增殖,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官,細(xì)胞懸浮液,10代細(xì)胞,50代細(xì)胞,傳代培養(yǎng),無限傳代,單個(gè)細(xì)胞,加培養(yǎng)液,分解彈性纖維,過程,動(dòng)物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官,接觸抑制,細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至10代左右細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到4050代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分

2、細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng),解答概念,原代培養(yǎng)：將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)：用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制的貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來，制成細(xì)胞懸液，分裝到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，這個(gè)過程叫傳代培養(yǎng),上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到接觸抑制就是原代培養(yǎng)，之后轉(zhuǎn)移到其它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng),細(xì)胞接觸抑制,細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個(gè)單層，此時(shí)細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長(zhǎng)停止，數(shù)量不再增加,1、無菌、

3、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液） 2、營(yíng)養(yǎng) （葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、微量元素、動(dòng)物血清、血漿等、維生素。） 3、溫度和PH 36.5 +0.5度 ；PH為7.2-7.4。 4、氣體環(huán)境： O2和CO2（95%空氣和5% CO2,補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件,1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 （2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。 （3）用于檢測(cè)有毒物質(zhì) （4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù),動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,2、為什么選用動(dòng)物胚胎或幼齡個(gè)體的器官或組織做動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料,1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要

4、成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨(dú)特之處,3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個(gè)體,主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。 獨(dú)特之處有：1、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動(dòng)物血清等,因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng),成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng),不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體,練一練,4、細(xì)胞膜的主要成份是什么,5、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎,6、既然胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉，那將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問題呢,蛋白質(zhì)和磷脂,能,注意時(shí)間的控制,思考題,3

5、、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份,胰蛋白酶水解蛋白質(zhì),細(xì)胞間的成份是蛋白質(zhì),細(xì)胞的全能性,細(xì)胞株、細(xì)胞系,植物體或組織,培養(yǎng)結(jié)果,快速繁殖、培育無病毒植株等,培養(yǎng)目的,葡萄糖、動(dòng)物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基性質(zhì),細(xì)胞增殖,原理,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項(xiàng)目,試一試,動(dòng)物核移植,將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體,用核移植的方法得到的動(dòng)物,克隆動(dòng)物,記一記,類型：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,供體細(xì)胞培養(yǎng),M卵母細(xì)胞,減數(shù)第二次分裂中期,去核的卵母細(xì)胞,供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞,受體細(xì)胞激活，完成減數(shù)分裂、發(fā)育,胚胎移植,體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景 畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用前景,1加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育 2保護(hù)瀕危物種，增加動(dòng)物 的存活數(shù)量 3可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白，克隆動(dòng)物細(xì)胞、組織、器官可作為移植的供體，了解胚胎發(fā)育及衰老