實(shí)驗(yàn)一-常用單細(xì)胞藻類的形態(tài)觀察

1、實(shí)驗(yàn)一 常用單細(xì)胞藻類的形態(tài)觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河^察并識(shí)別作為餌料生物的代表性單細(xì)胞藻類的種類，為后繼單細(xì)胞藻類的分離和培養(yǎng)做準(zhǔn)備。二、實(shí)驗(yàn)器材：1、藻種綠藻門：Chlorophyta小球藻 Chlorella sp.鹽藻 Dunaliella sp.青島大扁藻Platymonas helgolandica var. tsingtaoensis亞心形扁藻 Platymonas subcodiformis微綠球藻 Nannochloropsis oculata硅藻門：Bacillariophyta三角褐指藻 Phaeodactylum tricornutum小新月菱形藻 Nitzschia clo

2、sterium f. minutissima 中肋骨條藻 Skeletonema costatum 牟氏角毛藻 Chaetoceros muelleri金藻門：Chrysophyta Pavlova viridis球等鞭金藻 Isochrysis galbana 湛江等鞭金藻 Isochrysis zhanjiangensis 藍(lán)藻門：Cyanophyta 鈍頂螺旋藻 Spirulina platensis 黃藻門：Xanthophyta 異膠藻 Heterogloea sp.2、實(shí)驗(yàn)器材光學(xué)顯微鏡，載玻片，蓋玻片，膠頭滴管，魯哥氏碘液，甲醛溶液，滴瓶，無菌水，擦鏡紙，吸水紙三、操作步驟及要求

3、：用膠頭滴管吸取液體培養(yǎng)的各種藻類樣品，滴到載玻片上（若藻種濃度大用無菌水稀釋），用顯微鏡（低倍和高倍）觀察細(xì)胞的形態(tài)大小，色素分布，運(yùn)動(dòng)方式，然后用碘液或甲醛固定樣品，觀察細(xì)胞的鞭毛著生情況（長度、數(shù)量），細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)等。四、結(jié)果與討論：1、描繪5種藻類形態(tài)、構(gòu)造圖，描述各種藻類的特征顏色。運(yùn)動(dòng)性的藻類，描述其細(xì)胞游動(dòng)方式。2、用甲醛固定樣品與用碘液固定樣品，在觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)上有何不同的效果？如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇碘液或甲醛作為固定劑？實(shí)驗(yàn)二 餌料生物個(gè)體及篩網(wǎng)孔徑大小的測量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)會(huì)并掌握使用目測微尺和臺(tái)測微尺在顯微鏡下測量物體大小。2、對各種生物餌料和篩網(wǎng)孔徑大小有直觀認(rèn)識(shí)。二

4、、實(shí)驗(yàn)器材：1、器材光學(xué)顯微鏡，目測微尺，臺(tái)測微尺，載玻片，蓋玻片，膠頭滴管，魯哥氏碘液，擦鏡紙，水，吸水紙2、樣品各種規(guī)格的篩網(wǎng)小片，扁藻，三角褐指藻，小球藻，鹵蟲休眠卵，褶皺臂尾輪蟲三、方法與步驟：（一）、目測微尺的校正目測微尺也稱目微尺，為一圓形光學(xué)玻璃片，可被安裝到光學(xué)顯微鏡的目鏡中。玻片中央刻有一條線段，此線段被等分成共100格。由于顯微鏡物鏡下的物體經(jīng)過放大，而目鏡中的目測微尺沒有被放大，因此，當(dāng)以目測微尺為參照物，目測微尺的每一格刻度線的測量長度因顯微鏡物鏡的放大倍數(shù)的不同而不同。故必須用臺(tái)測微尺進(jìn)行校正，以求得在特定的放大倍數(shù)下，目測微尺每一格線所代表的真實(shí)長度。臺(tái)測微尺也稱臺(tái)

5、微尺，是一片中央部分刻有精確等分線的載玻片，一般為1mm等份成100格，每一格的實(shí)際長度為1/100mm，即10.0微米。當(dāng)要校正目測微尺時(shí)，先將顯微鏡的目鏡取下，旋開目鏡，將目測微尺裝入目鏡鏡筒內(nèi)的擱板上，然后旋緊目鏡。注意，目測微尺的有刻度面應(yīng)朝上。將帶有目測微尺的目鏡重新裝好，此時(shí)觀察目鏡可見視野中央有一刻度尺。確認(rèn)目測微尺的刻度線清晰，明了。若刻度線不清楚，則需將目測微尺重新取出，用擦鏡紙小心擦拭后重新安裝。將臺(tái)測微尺置于顯微鏡的載物臺(tái)上，先用低倍鏡觀察，調(diào)節(jié)調(diào)焦旋鈕和光柵，直至看清楚臺(tái)測微尺的刻度線。旋轉(zhuǎn)目鏡，使目測微尺與臺(tái)測微尺平行。移動(dòng)載物臺(tái)的推進(jìn)器，先使兩尺重疊，再使兩尺在視野

6、的左方某一刻度完全重合。然后從左到右尋找第二個(gè)完全重合的刻度。并計(jì)數(shù)兩重合線段之間目測微尺和臺(tái)測微尺的格數(shù)。由于臺(tái)測微尺的刻度是鏡臺(tái)上的實(shí)際長度（10微米），故可通過下列公式計(jì)算出當(dāng)前放大倍數(shù)下目測微尺每格的測量長度：目測微尺每格長度（微米）=兩重疊刻度之間臺(tái)測微尺的格數(shù)*10/兩重疊刻度之間目測微尺的格數(shù)同樣，將物鏡轉(zhuǎn)換成高倍物鏡，再次校正在高倍鏡下目測微尺每格的測量長度。校正完畢，將臺(tái)測微尺擦拭干凈后小心放好。（二）測量：取一干凈的載片。用吸管吸一滴微藻樣品。小心地加好蓋片后在顯微鏡下觀察。調(diào)好焦距。轉(zhuǎn)動(dòng)目微尺測出其長、寬各等于目微尺多少格。再由已經(jīng)計(jì)算出的相應(yīng)的放大倍數(shù)下目微尺每格的長度

7、（u）。算出餌料個(gè)體的長，寬的實(shí)際長度。將輪蟲用魯哥氏碘液固定后，在低倍鏡下測量輪蟲兜甲的長寬。其他餌料樣品依次同樣進(jìn)行測量。在測定篩網(wǎng)孔徑大小時(shí)，先在載玻片上滴加一滴水，將一小片篩網(wǎng)放在水滴上，然后在其上加蓋蓋玻片，測量其孔徑（內(nèi)徑）的長寬。四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告：1.寫明你所用的顯微鏡號(hào)碼，高，低倍鏡的放大倍數(shù)及在高、低倍鏡下目測微尺每格長度的計(jì)算。2 量出4種生物餌料樣品的長，寬，每種測量3個(gè)細(xì)胞。3.測量200目、120目、100目和80目四種篩網(wǎng)的孔徑大小。4.討論：1）測量篩網(wǎng)孔徑時(shí)滴水的目的。2）如何使測量結(jié)果更準(zhǔn)確。實(shí)驗(yàn)三 單細(xì)胞藻類濃度的測定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、熟悉餌料微生物的定量方法。

8、2、掌握血球計(jì)數(shù)板的使用，學(xué)會(huì)正確定量餌料微生物的濃度。二、血球計(jì)數(shù)板的原理和構(gòu)造：血球計(jì)數(shù)板由一塊特殊規(guī)格的載玻片特制而成。板的中央透明區(qū)一般由一H形溝分成兩塊。每一塊即是一計(jì)數(shù)池。每個(gè)計(jì)數(shù)池上分別刻有準(zhǔn)確面積的大、中、小方格。一般每個(gè)計(jì)數(shù)池被分成九個(gè)大方格。每個(gè)大方格的面積為1平方毫米。計(jì)數(shù)池兩側(cè)的凸起部分與計(jì)數(shù)池之間有0.1毫米的高程差。因此，當(dāng)在計(jì)數(shù)池上方加蓋蓋玻片時(shí)，蓋玻片下每個(gè)大方格區(qū)域內(nèi)的體積為0.1立方毫米。計(jì)數(shù)池中央的大格又被雙線劃分成25個(gè)中格，其中的每個(gè)中格又被單線劃分成16個(gè)小格（也有一類計(jì)數(shù)板的每一個(gè)中央大格先分成16個(gè)中格，每個(gè)中格分成25個(gè)小格）。因此，在中央大格

9、內(nèi)，1平方毫米被均勻分成16*25（即400）等份。計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品用細(xì)口滴管滴加到計(jì)數(shù)池后，通常計(jì)數(shù)中央大格的五個(gè)中格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，即可推算出整個(gè)中央大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，即0.1立方毫米的細(xì)胞數(shù)。由此可推算每毫升內(nèi)餌料生物的濃度。三、實(shí)驗(yàn)器材：1、器材光學(xué)顯微鏡，血球計(jì)數(shù)板，蓋玻片，計(jì)數(shù)器，5毫升量筒，1毫升移液管，細(xì)口膠頭吸管，擦鏡紙，吸水紙，消毒海水，魯哥氏碘液，紗布。2、樣品小球藻，湛江等鞭金藻四、方法與步驟：1、將蓋玻片和計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦拭干凈，將蓋有蓋玻片的計(jì)數(shù)板放在顯微鏡的載物臺(tái)上，調(diào)焦，用低倍鏡仔細(xì)觀察計(jì)數(shù)池的結(jié)構(gòu)。2、將計(jì)數(shù)板連同蓋玻片一起取下，用細(xì)口膠頭滴管吸取搖勻的藻液，迅速將吸

10、管尖靠在計(jì)數(shù)池上蓋玻片的邊緣，略擠膠頭滴管使藻液進(jìn)入蓋玻片下，直至充滿整個(gè)空間，多余的藻液會(huì)流入H形的凹溝中。注意，當(dāng)藻液濃度高時(shí)，為了便于計(jì)數(shù)，可將藻液稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。在計(jì)數(shù)有鞭毛或有運(yùn)動(dòng)性的藻類時(shí)，可先吸取定量的藻液，滴加魯哥氏碘液進(jìn)行固定，然后添加消毒海水稀釋后計(jì)數(shù)。3、樣品添加到計(jì)數(shù)池后，靜置片刻。在顯微鏡下仔細(xì)調(diào)焦，同時(shí)調(diào)節(jié)光柵，必要時(shí)調(diào)節(jié)光源和反光鏡角度，直至細(xì)胞和縱橫格線都清楚。4、統(tǒng)計(jì)計(jì)數(shù)池中央大方格內(nèi)四角及中央中格內(nèi)的餌料生物的數(shù)量。并記錄。計(jì)數(shù)時(shí)，小心移動(dòng)載物臺(tái)，從上到下，由左及右又由右及左依次計(jì)數(shù)各小格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)。凡壓方格的上線和左線的細(xì)胞，統(tǒng)一算此方格內(nèi)的細(xì)胞，而壓方格

11、的下線和右線的細(xì)胞，統(tǒng)一不算此方格內(nèi)的細(xì)胞。5、將計(jì)數(shù)板及蓋玻片用流水沖洗，擦干，重復(fù)上述步驟，對同一樣品再技術(shù)2-3次。6、將同一樣品的計(jì)數(shù)結(jié)果，取平均值。代如下式，求算單胞藻的密度： 單胞藻密度（個(gè)/ml）=平均每小格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)*16*25*10000*稀釋倍數(shù)7、計(jì)數(shù)完畢，將血球計(jì)數(shù)板沖洗干凈，用紗布吸干水分，用擦鏡紙包裝后連同蓋玻片一起放入原盒子內(nèi)。1 3 5 7 9 2 4 6 8五、報(bào)告與數(shù)據(jù)處理：1、 將原始記錄連同計(jì)數(shù)結(jié)果，填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。2、 樣品滴加到計(jì)數(shù)池后，為什么要靜置片刻后才計(jì)數(shù)？實(shí)驗(yàn)四 單細(xì)胞藻類的分離（一）微吸管分離法一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模涸孱愒谧匀唤缰信c其他生物雜居在一起

12、，在研究工作中。常常需要把它們和其他生物，特別是其他藻類分開，進(jìn)行單種或純種培養(yǎng)，這叫分離。本實(shí)驗(yàn)的目的是使學(xué)生熟悉單細(xì)胞藻類的微吸管法分離技術(shù)。二 實(shí)驗(yàn)器材：解剖鏡，顯微鏡，凹玻片，載玻片，大蓋片，噴燈，砂輪，細(xì)玻管，橡皮頭，培養(yǎng)皿，無菌培養(yǎng)液，待分離藻種。三、方法與步驟：1、拉制微吸管：用砂輪將孔徑34mm玻璃管載成3540mm的段。浸入濃HCL（或HNO3）溶液中洗去污物。先用自來水，后用蒸餾水洗凈烘干。然后點(diǎn)燃噴燈，兩臂加緊，手持玻璃管在火焰上燒灼其中部一面燒一面轉(zhuǎn)一面。使其受熱均勻。待玻璃管燒紅軟化后稍向上提，兩手均勻用力。向相反方向拉引。將中段拉長約610cm。使這段孔徑約為0 .

13、5mm。冷卻后從中間拉斷。尾部在噴燈上燒紅迅速壓在玻璃板或石棉網(wǎng)上，使成擴(kuò)張狀。使用前將吸管在酒精燈上加熱，用鑷子夾住細(xì)頭部拉成孔徑約0.1mm的微吸管，尾部套上橡皮頭或孔膠管備用，如進(jìn)行純種（無菌）培養(yǎng)，微吸管需經(jīng)滅菌。為了防止擦傷藻體，微吸管頭部可在酒精燈上燒灼圓滑。2、分離：首先鏡檢待分離藻液，如濃度過大應(yīng)予以稀釋，一般以每小滴藻液中含510個(gè)藻細(xì)胞為宜。在一已滅菌后的清潔載片上滴加9滴消毒培養(yǎng)液，方法如上圖。另取一載玻片滴一滴稀釋的待分離藻液，在解剖鏡（或顯微鏡）下用微吸管吸取其中所需的藻體（最好是1個(gè)，也可以是多個(gè)25個(gè)）放入第一滴水中，用一干燥的吸管洗（從一邊吹水滴，使藻體在水中旋

14、轉(zhuǎn)，均勻）。然后換一干凈的微吸管從第一滴水中吸一個(gè)（或數(shù)個(gè)）藻細(xì)胞，放入第二滴水中，清洗，依次而下，直至水滴中含一個(gè)藻細(xì)胞。（清洗是為了洗去藻體上附有的細(xì)菌，進(jìn)行無菌培養(yǎng)）。用微吸管將此單個(gè)藻細(xì)胞轉(zhuǎn)移到滴有培養(yǎng)液的蓋玻片上，將蓋玻片在凹玻面上進(jìn)行懸滴培養(yǎng)。每天數(shù)次觀察藻體分裂情況。如繁殖良好，可以擴(kuò)大培養(yǎng)成純（單）種。擴(kuò)大后的培養(yǎng)液鏡檢為單種時(shí)，分離成功。注意：1、培養(yǎng)液配方根據(jù)待分離藻種的不同選擇，一般用F/2配方。2、此微吸管所形成的小滴以顯微鏡低倍鏡一個(gè)視野能全看到為宜。但又不能太小，以免很快干掉。四、報(bào)告與討論：1、在分離中需要注意哪些問題？2、怎樣才能熟練掌握分離技術(shù)？實(shí)驗(yàn)五 單細(xì)胞

15、藻的分離（二）平板分離純化技術(shù)一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕緦?shí)驗(yàn)的目的是使學(xué)生熟悉并掌握利用平板分離單細(xì)胞藻類的技術(shù)。二、 分離原理：用平板分離純化藻種，一般可分為劃線，噴霧和傾注平板等方法。其共同點(diǎn)是分離用水樣首先經(jīng)過適當(dāng)稀釋，再使水樣分散到固體平板培養(yǎng)基上。等藻類在平板上成藻團(tuán)時(shí)進(jìn)一步分離，直至成單種。三、 實(shí)驗(yàn)器材：中試管，大試管，培養(yǎng)皿，移液管，燒杯，分裝漏斗，血球計(jì)數(shù)板，計(jì)數(shù)器，接種針，噴霧器，營養(yǎng)鹽成分，待分離單胞藻等。四、 方法和步驟：1、培養(yǎng)基的制備配方如下：1000ml培養(yǎng)基中的加入量100ml培養(yǎng)基中的加入量N4（F/2）N1 ml（相當(dāng)于4mlF/2N）8滴*(F/2N)P4（F/2

16、）P1 ml相當(dāng)于4mlF/2F）8滴EDTA-Na21 ml（4*36.3um儲(chǔ)液）2滴檸檬酸鐵0.5ml(1%儲(chǔ)液)1滴Soil extract（濃)1ml2滴Agar12g1.2gSea Water1000ml100ml*每ml約等于20滴（1）將試管、培養(yǎng)皿、移液管等玻璃工具在烘箱中消毒。（2）在燒杯中加入100ml海水，水位標(biāo)號(hào)。稱取1.2g瓊脂，撕碎加入海水中，在電爐上加熱，不斷攪拌至瓊脂完全溶化。損失的水分用蒸餾水調(diào)整。（3）按配方比例加入各營養(yǎng)成分、攪勻。（4）分裝試管：每組分裝中試管12支（5ml/支），大試管4支（20 ml/支），無菌海水3支（9 ml/支），標(biāo)明班組。（

17、5）高壓滅菌：15磅/時(shí)2、121、20分鐘。稍冷卻后在超凈工作臺(tái)內(nèi)分裝試管，完成后置斜面，在培養(yǎng)皿中倒平板。2、分離：（1） 分離前的水樣先用血球計(jì)數(shù)板濃度，一般以每毫升10005000個(gè)為宜，太濃時(shí)應(yīng)先進(jìn)行稀釋。用滅過菌的1ml移液管吸取1 ml水樣加入9ml無菌海水中，換一移液管進(jìn)行第二次，第三次稀釋，稀釋水樣標(biāo)號(hào)。（2）噴霧法：將稀釋好的水樣（10-2、10-3）裝進(jìn)滅好菌的噴霧器中，對準(zhǔn)事先做好的平板進(jìn)行噴霧，然后蓋好，放入光亮處培養(yǎng)。（3）傾注法：用滅過菌的移液管吸取1ml稀釋過的水樣（10-1、10-2）加入事先先滅過菌的培養(yǎng)皿中，接著倒入45的培養(yǎng)基（保存在恒溫水浴中）輕輕搖動(dòng)

18、一下使水樣和培養(yǎng)基混合均勻，放在光亮處培養(yǎng)。（4）固體斜面大接種：等藻團(tuán)長出后，鏡檢是否為單種，如不是單種，進(jìn)一步進(jìn)行平板劃線分離，至單種時(shí)，用接種環(huán)挑取藻體在斜面上劃線。1、結(jié)果與記錄幾天后觀察藻類生長情況并進(jìn)行記錄，描述（包括培養(yǎng)條件）將結(jié)果寫進(jìn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告，交實(shí)物和報(bào)告。注意：1、用于傾注法的水樣應(yīng)比噴霧法濃一個(gè)數(shù)量級，因?yàn)槎鄶?shù)海水藻類的最適溫度為25左右。加入45培養(yǎng)基時(shí)必有一部分藻類被燙死不能生長繁殖。2、培養(yǎng)條件非常重要，要求一定的溫度（25左右。根據(jù)藻種不同而異）和一定光照。否則藻類不能生長而細(xì)菌則大量繁殖，導(dǎo)致分離失敗。實(shí)驗(yàn)六 藻類培養(yǎng)和中繼培養(yǎng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕緦?shí)驗(yàn)要求學(xué)生掌握培養(yǎng)

19、基成份計(jì)算，配制培養(yǎng)基，消毒、接種、測定等有關(guān)培養(yǎng)的基本操作與管理，鞏固課堂講授知識(shí)從而有可能做到有計(jì)劃地為使用培養(yǎng)提供足夠數(shù)量的符合質(zhì)量的藻種，二、實(shí)驗(yàn)器材：1、配方：F/2配方NaNO3 0.88ml NaH2PO4H2O 36.3ulT6m貯液 1ml Vitamin貯液 1mlNa2SiO3 0.054ml(硅藻才加) 自然海水 1000ml1、藻種： 扁藻固體試管斜面單鐘 單鞭金藻液體單種1、器材：公用器材：電爐、鋁鍋、燒杯、海水比重計(jì)、量筒（250ml）、溫度計(jì)、塑料盒、扎瓶口的牛皮紙，橡皮圈，長鑷子，剪刀，過濾海水，固定液，基礎(chǔ)配方貯液。小組用器材：顯微鏡，血球計(jì)數(shù)板，計(jì)數(shù)器，量

20、筒，長滴管，微吸管，滅菌燒杯，紗布，蓋玻片，載玻片，擦鏡紙，吸水紙，酒精燈，火柴，標(biāo)簽紙，1000毫升燒瓶。三、方法與步驟：1、各種玻璃器皿用洗潔凈刷洗干凈，放入100度烘箱烘干。2、取2只500毫升的三角燒瓶，加入100毫升的自來水，擦干瓶外水滴，瓶上安裝漏斗，將其加熱煮沸，利用瓶中水產(chǎn)生的蒸汽消毒5分鐘，然后將水倒掉。3、用量筒量取100毫升過濾海水，加入三角燒瓶，同時(shí)加入配方的營養(yǎng)鹽母液各0.1毫升。4、將海水消毒，（同2），當(dāng)開始冒泡時(shí)將其取下。瓶口立即用消毒后的牛皮紙及橡皮圈消毒。培養(yǎng)液自然冷卻到室溫。震蕩燒瓶，恢復(fù)原海水中氣體溶解量。5、將消毒冷卻好的培養(yǎng)液倒入消毒小燒杯中，按無菌

21、操作的要求，將培養(yǎng)溶液倒入藻種的固體藻種培養(yǎng)基試管內(nèi)，將藻種洗下來。6、接種液體藻種，將其添加到消毒培養(yǎng)液中。7、強(qiáng)烈震蕩三角燒瓶，用消毒滴管取樣1毫升，加固定液（運(yùn)動(dòng)藻類）1滴，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。8、將培養(yǎng)瓶置于一定的光照和溫度下進(jìn)行培養(yǎng)管理，并做好記錄，一周左右，再次用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)培養(yǎng)密度，視情況按一定比例擴(kuò)種。四、報(bào)告與討論：培養(yǎng)結(jié)束后提交培養(yǎng)報(bào)告，并討論以下問題：1、試述配方中N、P貯液各配置1升需多少硝酸鈉和磷酸二氫鈉，配方中的N/P比是多少？2、本實(shí)驗(yàn)適于保種級培養(yǎng)，采用海水和營養(yǎng)鹽混合在一起進(jìn)行煮沸消毒，并非唯一方法，因地制宜采用不同方法，試舉例。實(shí)驗(yàn)七 輪蟲的培養(yǎng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

22、：輪蟲是多種水產(chǎn)動(dòng)物苗種培養(yǎng)過程中的理想餌料。本實(shí)驗(yàn)的目的是了解并熟悉輪蟲培養(yǎng)過程中的管理工作。二、實(shí)驗(yàn)器材：100毫升三角燒瓶，解剖鏡，細(xì)吸管，小燒杯，浮游動(dòng)物技術(shù)框，量筒，種輪蟲。三、方法與步驟：1.器皿洗凈，烘干。每只三角燒瓶中分別加入50ml培養(yǎng)好的小球藻，扁藻，單鞭金藻，每種藻兩瓶，貼好標(biāo)簽。注明種名，接種日期，接種量。2.在解剖鏡下用吸管吸取輪蟲（大小，帶卵情況一致），每只三角燒瓶內(nèi)放10只，分好瓶口，置于有光處2025培養(yǎng)。3.每天搖動(dòng)三角燒瓶，觀察輪蟲生長情況。4.當(dāng)藻液變清，肉眼可見輪蟲時(shí)，計(jì)數(shù)輪蟲密度，比較幾種藻液的培養(yǎng)情況四、結(jié)果與報(bào)告： 記錄培養(yǎng)條件與輪蟲采收時(shí)的密度、

23、抱卵量、休眠卵密度，比較不同餌料對輪蟲種群增長的影響。實(shí)驗(yàn)八 鹵蟲卵的去殼一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?鹵蟲（Artimia satina L）是海水養(yǎng)殖中的一種重要的活餌料，主要用其初孵幼體。由于沒有找到十分有效的分離方法。在使用時(shí)，大量卵殼和未孵化卵隨幼體一起投喂到培養(yǎng)池中，不但影響水質(zhì)，而且造成養(yǎng)殖對象吞食卵殼和未孵化卵后腸梗塞而死亡。因此，鹵蟲卵的去殼十分重要。本實(shí)驗(yàn)旨在讓同學(xué)掌握鹵蟲卵去殼技術(shù)及去殼過程中鹵蟲卵的變化。二、實(shí)驗(yàn)原理： 鹵蟲卵殼的外層主要成分是脂蛋白和正鐵血紅素。這些物質(zhì)在強(qiáng)堿性條件下可以被一定濃度的次氯酸氧化除去。只剩下一層透明的卵膜。胚的活力不受影響。 去殼液由次氯酸鹽，海水和p

24、H穩(wěn)定劑配置而成，已有經(jīng)驗(yàn)表明：次氯酸鹽中的每克有效氯可氧化22.5克鹵蟲卵的卵殼，去殼液的總體積按13 ml/g卵比例計(jì)算，并加入pH穩(wěn)定劑0.13克NaOH/g卵或Na2CO3 /g卵。三、實(shí)驗(yàn)器材： 天平1臺(tái)，燒杯（500ml，100ml）各2只，量筒（200ml，100ml）各1個(gè)。NaClO，NaOH，海水，Na2S2O3溶液。KI溶液，溫度計(jì)，凹玻片，解剖針，解剖鏡，膠頭滴管四、方法與步驟：1.去殼液的配置： 例：用濃度為10%的次氯酸鈉溶液作為去殼原料配置卵的去殼液，計(jì)算程序如下：1） 10克卵所需的去殼液的總體積為13ml/1克卵*10克卵=130ml。2） 按2 克卵/1克有效氯計(jì)算。10克卵